Способ диагностики бактериальной дизентерии

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИ ТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 040280 (21) 2923158/28-13 с присоединением заявки Нов (23) Приоритет

Опубликовано 2М1.81.Бюллетень М 43

Дата опубликования описания 231181

<>882526 (51)М. Кл

A 61 К 39/00

Государственный коиктет

СССР по делам нзобретеиий я открытн1 (5З) УДК и 616-07 (088.8) А.Ф. Блюгер, Х.М. Векслер, P.Г. Чарная и И.Н. Новицкий (72) Авторы изобретения

Рижский медицинский институт (71) Заявитель (54 ) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БАКТЕРИАЛЬНОЙ ЩЗЗЕНТЕРИИ

Изобретение относится к области медицины и касается диагностики дизентерии .

Известен способ диагностики бактериальной дизентерии путем определения

5 в сыворотке крови специфических антител к дизентерийному возбудителю (13 .

Однако известный способ недостаточ-1О но чувствителен и в 20"30% случаев дает ложноположительные результаты.

Цель изобретения — повьааение чувствительности способа.

Поставленная цель достигается тем, что способ осуществляют путем исследования крови, нз которой готовят монослой 10%-ной взвеси эритроцктов больного и добавляют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибнлизированные О«антигеном шнгелл Флекснера, и комплемент, затем после инкубирования их 2-2,5 ч при 37 С и 17 18 ч при 4 С подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 10% по сравнению с контролем диагностируют дизентерию.

Способ осуществляют следующим образом.

Берут 10 мл крови в пробирку, содержащую 20 ед. кристаллического гепарина, и разделяют на фракции лимфоцитов и эритроцитов путем центрифугирования при 1000 об/мин в течение 15 мин в градиенте плотности фиколл-верографина.

В пробирках готовят два образца, содержащих мойослой 10%-ной взвеси зритроцитов больного, трижды отьытых фосфатным буфером, в один из которых (контроль) добавляют равные объемы взвеси аутологнчных лимфоцитов в концентрации 2 ° 10 .мл, и комплемент в виде свежей сыворотки крови белой ььыи в разведении 1:5. В другой образец (опытj добавляют также равные объемы взвеси аутологичных лимфоцитов, сенсибилиэированных предварительно с равным объемом липополисахаридного О-антигена шигелл при

37 С в течение 30 мин в концентрации 2 10 мп, и комплемента мяши в разведении 1 .5, и запускают в камеру Горяева, помещенную в увлажненную чашку Петри. Затем контрольную и опытную смеси запускают в камеру Горяева, которую предварительно помещают в чашку. Петри, содержащую увлажненную фильтровальную бумагу.

882526

Формула изобретения

Составитель Т. Крюкова

Редактор Г. Кацалап ТехредМ.Рейвес Корректор М. Демчик

Заказ 10028/5 Тираж 690 Подписное

БНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 филиал ППП "Патент", r. ужгород, ул. Проектная, 4

Оба образца смеси выдерживают в течение 2 ч в термостате при 37 С, а затем 18 ч в холодильнике при 4ОC.

Подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов, площадь которых не менее 5 клеток, и при повышении их количества в опыте на 10% и больше по сравнению с контролем диагностируют дизентерию.

Пример 1. Больной И.Г., 23 лет поступил в стационар без жалоб на нарушения желудочно-кишечного тракта и. других систем организма) в связи со случайным обнаружением в кале шигелл

Зонне, с подозрением на дизентерию.

Реакция пассивной гемагглютинации с эритроцитарным антигеном шигелл !5

Зонне была отрицательна.

С помощью предлагаемого способа был выставлен диагноз дизентерии: показатель контроля 4%, а при стимуляции этой реакции 0-антигеном ши- 2О гелл равен 15%.

Следовательно, реакция пассивной гемагглютинации была ложноотрицательна.

П p H м е р 2. Больная К.С.М., 14 лет, поступила в стационар с проявлениями гемоколита (боли в животе преимущественно слева, спазм сигмы, стул 5-8 раз в день со слизью и кровью) . Предварительный диагноз дизертерия.

При использовании контрольного диагностического препарата - "дизентерии" показатель реакции был равен

69Ъ, т.е. почти в 9 раз превышая показатель контроля, что также свиде- З5 тельствовало о диагнозе — дизентерия.

При использовании предлагаемого способа был получен отрицательный результат - при добавлении 0-антигена шигелл Флекснера Количество лизиро- 4р ванных эритроцитов в виде овальных участков просветления монослоя величиной в 5 клеток и более было равно

7%, а в контроле — 8%. B дальнейшем правильность этого ответа была подтверждена высевом из кала салмонелл энтеридес. Исходя из этого, окончательный диагноз был исправлен на салмонеллез.

Пример 3. Больная К.С.Л., 23 лет, госпитализирована с неясными признаками, присущими дизентерии и пищевым инфекциям (водянистый понос, нормальная копрограмма); С помощью предлагаемого способа был выставлен правильный диагноз дизентерии, так как результаты способа были следующие с показатель контроля

9%, показатель стимуляии реакции препаратом 0-антигена шигелл — 193.

Использование предлагаемого способа позволяет повысить достовер. ность диагностики бактериальной дизентерии до 92-94%.

Способ диагностики бактериальной дизентерии путем исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, готовят монослой 10%-ной взвеси эритроцитов больного и добав;ляют аутологичные лимфоциты, предварительно сенсибилизированные 0-антигеном иигелл Флекснера и компле мент, затем после инкубирования их

2-2,5 ч при 37 С и 17-18 ч при 4 С, подсчитывают количество участков лизированных эритроцитов и при повышении их числа на 103 по сравнению с контролем диагностируют дизентерию.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Покровский В.И. и др. Дизентерия. М., Медгиз, 1979, с. 209.