Способ получения антител

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗЬВРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советсимк

Соцмапмстмчвскмк

Республик iii833257 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 30.11.79 (21) 2844578/28-13 (5l) М.К .

А61 К39/00 с присоединением заявки №вЂ”

Гееударстеелны11 кемитет

СССР

IIo делам взееретелрй я еткрытал (23) Приоритет—

Опубликовано 30.05.81. Бюллетень ¹20 (53) УДК 576.8. .097.3 (088.8) Дата опубликования описания 31.05.81 (72) Авторы изобретения

В. М. Минаева, Б. А. Старкова и И. И. Райхер г

Пермский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский институт вакцин и сывороток (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕ.Л

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в медицине при получении гомологичных препаратов антител или иммуноглобулина.

Известен способ получения антител путем спиртового фракционирования сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка (1).

Однако известный способ не обеспечивает высокого выхода целевого продукта.

Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта.

Указанная цель достигается тем, что способ получения антител осуществляют путем спиртового фракционировання сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка, осадок после отделения целевого продукта подвергают элюции дистиллированной водой при рН 11,0 — 11,1 в соотношении осадка и воды 1:4 с дальнейшей концентрацией, раствора методом" воздушного диализа при

6 — 8 С до содержания белка 5 — 7%.

Пример 1. При спиртовом фракционировании 2 л сыворотки к вирусу клещевого энцефалита на стадии обработки хлороформом получают 150,0 г осадка. Осадок эмульги»

2 руют в 600,0 мл дистиллированной воды, добавляют 1 н раствор NaOH до рН 11,0—

11,1, встряхивают 30 мин, центрифуги руют при 16000 об/мин 10 мин при 4 — 6 С. Добавляют l н раствор НС! до рН 7,0. Повторно цеитрифугируют при 16000 об/мин

10мин при 4 — 6 С. Центрифугат сливают в вискозный мешок и подвергают воздушному диализу при 6 — 8 С-в течение 48ч. Полученный препарат профильтровывают через стерилизующую пластину EKS — 2,0. Объем о стерильного препарата составляет 36,0мл, концентрация белка 6,77%. В препарат добавляют сахарозу из расчета 0,5 г на 1,0г белка. Раствор антител разливают в ампулы в объеме 2,7 мл и лиофилизируют. Растворение сухого препарата осуществляют в

1,5 мл дистиллированной воды.

Содержание белка в готовом препарате 10%

Чистота по данным электрофореза на

1 бумаге 97 — 98 /о гамма-и бета-глобулино:,вые фракции.

Специфическая активность в реакции торможения гемагглютинацин (РТГА) 1: .:160, в реакции биологической нейтрализа833257 .

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Редактор Л. Филь Техред А. Бойкас Корректор С. Щомак

Заказ 3845/4 Тираж 687 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1 I 3035, Москва, Ж вЂ” Зо, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патенте, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 ции на белых мышах 3,0 логарифма индекса нейтрализации.

Пример 2. При использовании хлороформенного осадка, полученного в процессе производства противогриппозного иммуноглобулина при условиях, указанных в при мере 1, концентрация белка в готовом образце достигает 9,5о/о.

Чистота по данным электрофореза на бумаге 97 — 98 /0 гамма-и бета-глобулиновые фракции.

IO

Специфическая активность bio данным реакции торможения гемагглютинации к вирусу гриппа тип Ле I:160, тнп В I :160.

Пример 3. При использовании хлороформенного осадка, полученного в процессе производства противостолбнячного иммуно- 1s глобулина из донорской сыворотки при условиях, указанных в примере I, концентрациЯ белка в готовом обРазце достигает 10о/о.

Чистота по данным электрофореза на бумаге 98 /> гамма-и бета-глобулиновые фракции.

Специфическая активность !00 МЕ/мл.

Использование предлагаемого способа получеHHB антител обеспечивает дополнительный выход иммунного белка за счет использования отходов производства в количестве

1,63г на 100,0г осадка, что позволяет получить дополнительно 12,0 мл 0 /о-ного раствора иммуноглобулина из Ь |иммунной сыворотки, Способ получения антител путем спиртового фракционирования сыворотки с последующей обработкой хлороформом и отделением целевого продукта от осадка,отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, осадок после отделения целевого продукта подвергают элюции дистиллированной водой при рН 11,0—

11,1 в соотношении осадка и . воды 1:4 с дальнейшеи концентрацией раствора методом воздушного диализа при 6 — 8 С до содержания белка 5 — 7о/о.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Патент ЧССР № 88563, кл 30h 2/04, 1958,