Вакцинный штамм virus enteritis lutreo larum р-1631

 

(19)RU(11)871371(13)C(51)  МПК ⁵    _{A61K39/23, C12N7/00C12N7/00, C12R1:91}Статус: по данным на 17.12.2012 - прекратил действиеПошлина:

(54) ВАКЦИННЫЙ ШТАММ VIRUS ENTERITIS LUTREO LARUM Р-1631

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и представляет собой новый штамм вируса энтерита, используемый для приготовления вакцины против вирусного энтерита норок. Впервые СССР вирус энтерита был выделен в 1967 г от заболевших норок на Сахалине. Этот вирус был использован для приготовления формолтканевой вакцины, которая однако не нашла широкого применения из-за содержания в ней большого количества белковых балластных веществ, вызывающих при инъекциях отеки и абсцессы, из-за сложности технологии изготовления и высокой стоимости вакцины. Кроме того, выделенный вирус не обладал достаточной вирулентностью и не вызывал гибель животных в 100% случаев [1]. В дальнейшем была предпринята попытка адаптации вируса энтерита, выделенного в 1967 г к культуре клеток почки котенка норок с целью создания культуральной вакцины. Однако вирус по мере увеличения числа пассажей в культуре клеток терял вирулентные свойства для норок и снижал титр. В настоящее время СССР импортируется вакцина для профилактики вирусного энтерита норок, производимая в США. Однако на приобретение данной вакцины государство затрачивает большие валютные средства. Штамм, из которого продуцируется вакцина, неизвестен [2]. Целью изобретения является штамм вируса энтерита норок, отвечающий всем требованиям для приготовления вакцины, т.к. обдадающий высокими иммуногенными свойствами и способностью активно размножаться на культуре клеток почки кошки, норки и африканского хорька. Выделенный штамм Р-1631 отличается высокоиммуногенными свойствами и в настоящее время используется как продуцент для приготовления отечественной вакцины для профилактики вирусного энтерита норок. При вакцинации зверей создается напряженный иммунитет в течение 15 месяцев. Выделенный штамм Р-1631 прошел более 15 последовательных пассажей путем перезаражения норок. Он обладает высокой вирулентностью, вызывая 100%-ную гибель норок на 6 - 8 день после заражения их per os, внутримышечно и внутрибрюшинно. Животные погибают с характерными для данного заболевания клиническими и патоморфологическими признаками. Штамм Р-1631 выделен в зверосовхозе "Забайкальский" Бурятской АССР в 1976 г из кишечника, селезенки, мезентериальных лимфатических узлов и слизистой трубки норок, больных вирусным энтеритом. Морфологические признаки. Вирус отнесен к группе парвовирусов и содержит однонитчатую ДНК. Размножается в пассажах на тканевой культуре почки кошек, норок и африканских хорьков с цитопатогенным эффектом на 7 - 8 сутки. Титр вируса 10^-6 - 10^-7 ЦПД₅₀ в 1 мл. Патогенен для норок. Не вызывает заболевания у кошек, кроликов, лошадей, хорьков, морских свинок, крыс, белых мышей и человека. Не размножается в куриных эмбрионах. Не обладает гемагглютинирующей способностью. Содержит преципитирующий и комплементсвязывающий (фиксирующий) антиген. Физиологические признаки. Устойчив к действию желчи, эфира, хлороформа, трипсина, карболовой кислоты, лизола и антибиотиков (пенициллин, стрептомицин, колимицин, мономицин, полимиксин, левомицетин, нистатин и других). Оптимальный рН 6,0 - 8,0. Устойчив к кислой и щелочной средам (рН 3,0 - 9,0). Сохраняется при -20^оС со дня выделения по настоящее время (3 г), не теряя своих вирулентных свойств; в глицерине - в течение 1 года в высушенном состоянии 2,5 года (срок наблюдения). При нагревании до 52^оС погибает в течение 2 ч, до 100 С - моментально. Формалин убивает вирус через 3 ч, щелочи - через сутки. Иммуногенные и вирулентные свойства. При заражении норок peros, внутрибрюшинно и внутримышечно штамм Р-1631 вызывает 100%-ную гибель зверей на 6-8 день после его введения. Животные погибают с характерными клиническими и патоморфологическими признаками. Изготовленная на базе штамма Р-1631 вакцина против вирусного энтерита норок создает у животных напряженный иммунитет сроком до 15 мес. П р и м е р. Предлагаемый штамм Р-1631 выделен в 1976 г в зверосовхозе "Забайкальский" Бурятской АССР от норок в период острой энзоотии вирусного энтерита. Через 24 ч после проявления клинических признаков заболевания животных убивали и брали от них кишечник, селезенку и брыжеечные лимфатические узлы. Кроме того, у норок брали пробы кала и слизистой трубки. Полученный патматериал и пробы кала замораживали при минус 20^оС, затем оттаивали и готовили 10%-ную суспензию на растворе Эрла, которую центрифугировали в течение 30 мин при 2000 об/мин. Надосадочную жидкость сливали во флаконы, добавляли антибиотики - пенициллин и стрептомицин по 1000 ед., неомицин и колимицин по 200 ед. и нистатин по 100 ед. Осадок уничтожали. Через 1 ч полученную надосадочную жидкость проверяли на бактериально-грибковую загрязненность путем высева на питательные среды (мясопептонный бульон, мясопептонный агар, мясопептонно-печеночный бульон и агар Сабуро). Вируссодержащей суспензией, свободной от бактерий и грибков, заражали норок, кошек, кроликов, морских свинок, белых мышей и культуры клеток почек этих животных и, кроме того, африканского хорька, собаки, зеленой мартышки. Из числа зараженных животных вирусным энтеритом заболели только норки. Размножение вируса было зарегистрировано в культуре клеток почки кошки, норки и африканского хорька. В дальнейшем на норках было проведено 15 последовательных пассажей для усиления вирулентных свойств вируса и 100%-ной гибели животных. В культуре клеток почки котенка проводили 30 последовательных пассажей, в культуре клеток почки норки 10 пассажей, в культуре клеток почки африканского хорька 3 пассажа. Выделенный и адаптированный к норкам и культуре клеток почки котенка, норки и африканского хорька штамм вируса энтерита норок был назван "Родники" и передан в лиофизированном состоянии для хранения в Государственную коллекцию института вирусологии им.Д.И.Ивановского АМН СССР под регистрационным N 1631.

Формула изобретения

ВАКЦИННЫЙ ШТАММ VIRUS ENTERITIS LUTREO LARUM Р-1631, предназначенный для приготовления вакцины против вирусного энтерита норок. Хранится в Государственной коллекции Института вирусологии им. Д.И. Ивановского Академии МН СССР с номером депонирования 1631.

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 29-2002

Извещение опубликовано: 20.10.2002        

---