Способ получения симметричных пирофосфатов

 

(ю) SÖ (п) S88502 А1 (я) сет м оо

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ РЕСПУЩИК

ГОСУДАРСТВЕЙНОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕЙТ СССР)

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

{21) 2905539/23

{2ф 04.04.80

{46)45Л133 Бал. N3L41-42 . {73) Ие:тйтуГ бйоофганичаской химии AH БССР

p2) Маккене МВ; Михайлопуло ИА: КваОок Е.И;

Ахрам АА

{54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СИММЕТРИЧНЫХ

ПИРОФОСФАТОВ

{37) 888502

Предлагается усбвершенствованный способ получения симметричных пирофосфатов общей формулы 1

9 9 йо-Р-O-Р-Оа

t но но г

NH 2 йА, К, гДЕ .- -CH2 P g СН О

) или (g,), НО (б) которые могут найти применение в экспериментальных исследованиях и для лечения аденовирусных и герпетических инфекций.

Известен способ получения симметричных пи2)офосфатов формулы 1 конденсацией О., 2 -циклоцитидин-5 -монофосфата или пиридиниевой соли 2,3,N4-триацетиларабинофуранозилцитозин-5 -монофосфата в безводном пиридине в присутствии дициклогексилкарбодимида с последующим выделением целевого продукта известными методами. Выход целевого продукта P, Pди-(0,2 -циклоцитидин-5 )пирофосфата со° ставляет 39 .

Недостатками cnocoba являются труднодоступность исходных продуктов и низкий выход целевого продукта.

Целью изобретения является повышение выхода и упрощение процесса получения целевых симметричных пирофосфатов.

Поставленная цель достигается описываемым способом получения симметричных пирофосфатов общей формулы 1, который заключается во взаимодействии цитидин5 "фосфата с хлорангидридом ацетилсалициловой кислоты при комнатной температуре s среде инертного органического растворителя и последующей кислотной обработке реакционной смеси; полученный P, P -ди-(О, 2 -циклоцитидин-5 )пирофосфат при необходимости превращают в Р, Р -ди-(арабинофуранозилцитозин-5 )пирофосфат щелочным гидролизом, Процесс идет по следующей схеме HO-Р-OR - RO""Р-О-Р-OR+ HO-Р-OR

HO H0 HO НО (2) (1а,б) (За) где ин

ИН2

5,, 0 и =-CH2 0 Ц=-СН2 (2) 2

ОД )

=-сн, о но ((5) (1а) Существенным отличием данного способа является использование новых, доступных исходных реагентов.

Сопутствующим продуктом в данном способе является 0; 2 -циклоцитидин-5 фосфат (За), проявляющий противовирусную и противоопухолев ю активность, Il р и м е р 1. Р, Р -Ди-(0,2 -циклоци20 тидин-5 )пирофосфат.

0,5 г (1,55 ммоль) цитидин-5 -фосфата в

3 мл диметилформамида обраба ывают

0,70 мл (4,57 ммоль) хлорангидрида ацетилсалициловой кислоты и перемешивают при

25 комнатной температуре до получения прозрачного раствора. Реакционную смесь обрабатывают эфиром, полученный осадок промывают эфиром, приливают 10 мл 0.35 М соляной кислоты и термостатируют при

30 50 С 4 ч. К водному раствору приливают 0,7 л ацетона, полученный осадок растворяют в воде, наносят на колонку с ДЕАЕ-целлюлозой ДЕ-32 (Ас0, 2,3 х 37 см) и элюируют водой, Получают 0,312 r (0,53 ммоль) Р, Р235 ди-(0, 2 -циклоцитидин-5 )пирофосфата, выход 68)ь, Rg 0.14 (цитидин-5 -фосфат Rr

0,24, хроматография на бумаге в системе н-бутиловый спирт: уксусная кислота: вода -5:2:3

Ч/1/).

40 УФ, макс 2, нм (8 10 ): 232.6 (13,8);

263,9 (15,5).

Пример 2. Р1, Р -ди-(0,2 -циклоцитидин-5 )пирофосфат.

К 0,5 r (1,55 ммоль) цитидин-5 -фосфата в 3 мл ацетонитрила приливают 0.83 мл (5,45 ммоль) хлорангидрида ацетилсалициловой кислоты и выдерживают при комнатной температуре до получения прозрачного раствора. Упаривают растворитель при пониженном давлении, приливают 25 мл воды и термостатируют раствор при 60 С 5 ч. Охлажденный водный раствор отфильтровывают и к фильтрату приливают ацетон.

Полученный осадок растворяют в воде, наносят на колонку со смолой Дауэкс 1х2 (Ac0) и элюир) ют водо Получают 0,28 г (0,47 ммоль) Р, Р -ди-(0, 2 -циклоцитидин-5 )пирофосфата, выход 60,9ф,. Вг 0,14. УФ.

888502 (56) Авторское свидетельство СССР

М 689202, кл. С 07 Н 21/00, 1978.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СИММЕТРИЧНЫХ ПИРОФОСФАТОВ общей формулы

0 О

И II

M - I - 0 - В - ОР

1 1

IIO БО

35 щей кислотной обработкой реакционной смеси и при необходимости полученный

40 P, P -ди.ф, 2 -циклоцитидин-5 )пирофосфат подвергают щелочному гидролиэу.

e4OI

Составитель

Редактор М.Кузнецова Техред M.Ìîðãåíòaë Корректор M.Максимишинец

Заказ 3239

Подписное

Роспатента

Тираж

НПО "Поиск"

113035. Москва, Ж 35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент". r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Д,„,„ р, нм, (е 10э): 232,6 (13,8); 263,9 (15,5).

П риме р 3. Р, P -ди-(арабинофуранозилцитоэин-5 )пирофосфат.

0,5 г (0,84 r ммоль) Р, Р -ди-(Q, 2 -цик- 5 лопитидин-5 )пирофосфата, полученного согласно примеру 1 или 2, обрабатывают водным аммиаком (рН > 10) и выдерживают при комнатной температуре 2 ч. Раствор упаривают досуха, остаток растворяют в во- 10 де и обрабатывают избыток смолы КУ 2х8 (Н . Смолу отфильтровывают, фильтрат упаривают. Получают 0,403 г (0,64 ммоль) Р1, Р -ди-(арабинофуранозилцитоэин-5 ) пирофосфата, выхосЦ6, Вг 0,10. 15

УФ, А макс, нм (е 10 э): 213,5.(14,8);

281 (18,0).

Наличие пирофосфатной связи подтверждено с помощью органической пирофосфатазы, выделенной из картофеля.. 20

Данный способ позволяет повысить выход симмстричных пирофосфатов до 68$ и существенно упростить процесс получения.

Упрощение процесса происходит эа счет использования в качестве исходного материа- 25 ла цитидин-5 -фосфата, в то время как в известном способе используются О . 2 -циклоцитидин-5 -монофосфат и 2,3 N -трацетиларабинофураноэилцитозин-5 -фосфат, получение которых является трудоемким и многостадийным процессом. что удорожает стоимость как самих исходных, так и конечных продуктов. В способе-прототипе также используется в качестве конденсирующего реагента дициклогексилкарбодиимид, применение которого требует длительного времени реакции (не менее.10 суток).

К числу недостатков относятся также аллергенная активность дициклогексилкарбодиимида (что делает нежелательным присутствие даже следовых количеств em в конечных продуктах, которые проявляют высокую противовирусную активность и могут быть использованы в медицине) и трудность удаления избытка этого реагента и образующейся из него дициклогексилмочевины. В предлагаемом способе в качестве реагента используется хлорангидрид ацетилсалициловой кислоты, отличающийся простотой и Оешевиэной получения, удобством в применении. отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и упрощения процесса, цитидин-5 -фосфат

1 подвергают взаимодействию с хлорангидридом ацетилсалициловой кислоты при комнатной температуре в среде инертного органического растворителя с последую