Способ очистки l-пролина

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Севетсник

Соцналнстическик

Рес уб (»)960163 (61) Дополнительное к авт. сеид-ву— (22) Заявлено 28. 07. 80(21) 2964795/23-04 (31)М Кл з с присоединением заявки ¹â€” С 07 С 99/12

РА 61 К 31/185

Государственный комитет

СССР но делам изобретений н открытий (23) Приоритет

Опубликовано 2309.82. Бюллетень ¹ 35

Дата опубликования описания 230982

РЗ) УДК 547. 466. .07(088.8) ЗСЕСОЮЗН;

ИАТЕНТНОТЕХНИЧИСКЛ.

БИБЛИОТЕК/ (72) Авторы изобретения

И.К. Калнинь и Л.Я. Крауя (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОЧИСТКИ L-ПРОЛИНД

84,5-36,0

Изобретение относится к новому способу очистки Ь-пролина, который широко применяется в органической химии, молекулярной биологии, экспериментальной медицине и пищевой промышленности.

Известен способ очистки L-пролина от сопутствующих аминокислот селективным осаждением пролина в виде рейнеката, пикрата, роданилата с последующим расщеплением образовавшихся солей и перекристаллизацией

L-пролина из спиртовоэфирного раствора. Выходы составляют 1-9,5В в пересчете на исходное количество 15 желатина (1).

Известен также способ выделения, Ь-пролина из смеси с другими аминокислотами путем последующего дезами. нирования, восстановительного расщепления, обессоливания на катионите и кристаллизации из этанола. Выход

60-70.% хроматографически однородного

i-пролина. Способ предназначен для выделения L-пролина из культураль- 25 .ной жидкости бактериального синтеза Г21.

Недостатками обоих способов является сложность проведения процесса и невысокий выход целевых продуктов.

Наиболее близким к предложенному является способ очистки L-пролина, пригодного для применения в качестве пищевой добавки. Очистка пролина осуществляется в многостадийном процессе при помощи хлорэндоновой кислоты - 1,4,5,6,7,7-гексахлорбицик« ло-(2,2,1)-5-гептен-2,3-дикарбоновой кислоты. Хлорэндоновая кислота образует с пролином нераствОримую в воде соль, что дает возможность отделить

L-пролин от сопутствующих органических соединений, в том числе и от других аминокислот. Полученную соль разлагают и выделяют целевой продукт перекристаллизацией из спирта. Выход - 76-82% (3).

1.-пролин (фирма А3 inodloto) вы" пускается со следующими показателями качества, Фт

Основное вещество 98- 100

Удельное вуащение (*)Añ

4, Н О

Хлориды и аммиак О, 02

Свинец и железо 0tt001

9601.63

Однако известный способ не обес" почивает достаточную чистоту конечного продукта, продукт загрязнен хлоридными ионами, так как в процессе применяется соляная кислота.

Недостатками являются также 5 многостаднйность технологического процесса (5 стадий) и использование агрессивных и ядовитых реагентов: соляной кислоты, пиридина, хлорэндоновой кислоты.

Цель изобретения - упрощение процесса, повышение степени чистоты и выхода целевого продукта.

Указанная цель достигается тем, что согласно способу очистки Ь-пролина, 1.-прол .н растворяют в смеси воды и этилового спирта при весовых соотношениях L-пролин:вода:этиловый спирт 1:(0,2-1,7 :3-7), добавляют активированный уголь и выделяют L-пролин добавлением ацетона при весовом соотношении водно-спиртового раствора L-пролина и ацетона 1:(0,6-1,5) при температуре

18-20 С с последующим охлаждением.

Положительный эффект предложенного способа очистки L-пролина заключается в упрощении процесса (2 стадии вместо 5-ти) и повышении степени чистоты (меньшее содержание хлоридов и аммиака) и выхода (89Ъ и

76-82% соответственно) целевого про . дукта.

20 мин. Добавляют 380 мл ацетона и выдерживают При 4оС 20 ч. Выход L»

-пролина - 89,5 г (89,5%).

Чистотаг содержание осноВНого вещества - 99,0%. Хроматографически однородный продукт. Удельное вращение(сф9 (с=2,5 1н. НС1) - 51. Содержание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железа, свинца, аммиачных солей) — 0.01-0,0005%.

Пример 3. В 100 мп растворителя, содержащего 17,3 мл води и 82,7 ьл этилового спирта, подогретого до 50 С, при перемешивании растворяют 20 г 1,-пролина, содержащего органические и неорганические примеси (2-8%)..После растворения L-пролина добавляют 0,5 г активированного угля и выдерживают 10 мин при температуре не более 50 С. Горячий раствор фильтруют, охлаждают 1Ч мин до -18 С и добавляют 100 мл ацетона.

Выдерживают смесь прн 4 С 10 ч. Осацок отфильтровывают. Выход — 17,3 r (89%).

Чистота:содержание основного вещества 99,7%. Хроматографически однородный продукт. Удельное вращение(ц )(с=2,5 1 н.HCl) - 52,4. Содержайие неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железа, свинца, солей аммония ) - 0,01—

0,0005% °

l, Технико-экономический эффект, предложенного способа заключается в получении L-пролина высокой. степени чистоты (содержание основного вещества — 99,5-100%, удельное вра- щение(а) c=2,5 1н.HCl) — 49,5-52,5, содержайие неорганических солей (хлоридов, сульфатов, железо, свинец, аммиачных солей) — 0,010,0005%,. хроматографически однородный продукт, с выходом 89% при значительном упрощении процесса.

Формула изобретения

Способ очистки L-пролина, содержащего органические и неорганические примеси, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью упрощения процесса и повышения степени чистоты. и выхода целевого продукта, L-пролин растворяют в смеси воды и этилового спирта при весовых соотношениях

Ь-пролина, воды и этилового спирта

1:(0,2-1,7):(3-7), добавляют активированный уголь и выделяют Ь-пролин добавлением ацетона при весовом соотношении водно-спиртового раство ра Ь-пролина и ацетона 1:(0,6-1,5) при температуре 18-20©С с последующим охлаждением.

Пример 1. В 350 мл растворителя, состоящего из 21 мл воды и 39

329 мл этилового спирта, предварительно подогретого до 45 С, растворяют при перемешиванин 100 г L-пролина (содержащего 2-6% органических и неорганических примесей). После растворения L-пролина добавляют 8 r активнрованного угля и выдерживают

10 мин при 45 С. Горячий раствор фильтруют, фнльтрат охлаждают до

18-20 С 20-30 мин, после чего добавляют 20 мп ацетона, и выдерживают при 4 С 6 ч. Выпавший осадок отфильтровывают и получают 89,7 r (89,7%) L-пролина.

Чистота: содержание основного продукта — 99,5Ъ. Хроматографически однородный продукт. Удельное вращение (g) «(с=2,5 1 н. НС1) — 51,5.

Содержание неорганических солей (хлоридов, сульфатов, желез а, сви нца, аммиачных солей) - 0,01-0,0005%„

Пример 2. B 400мпрастворителя, состоящего из 24 мл воды н

376 мл этилового спирта, подогретого до 40 С, растворяют 100 r L-пролина, содержащего 2- 4% органических Я) и неорганических примесей. После растворения L-пролина добавляют 10 r активированного угля и выдерживают

5 мин при 40 С. Осветленный раствор отфильтровывают н охлаждают до 1ВВ" С

960163

Составитель Ю.Хропов

Редактор П.Коссей Техред.M.Òåïåð . КорректоР Ю.Макаренко (Заказ 7137/26- Тираж 445 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раумская наб., д.4/5

Филиал ППП "Патент". г.ужгород, ул.Проектная,4

Источники инФормации, принятые во. внимание при экспертизе

1. Gajewska И. Review and evaluation of the most important methods of >

isolating proline and hydroxyyroline

from protein hydrolysates. - "Farmacjа Polska", (1970), 8,647.

2. Авторское свидетельство СССР

В 639862, кл. С 07 С 99/02, .30.12.78.

3. Патент США 9 359883&, кл.260-326. 3, 1971 (прототип).