Способ диагностики экзогенного аллергического альвеолита

 

Изобретение относится к медицине , может быть применено в клинической иммунологии при диагностике болезни птицеводов. Цель изобретения повьппение точности диагностики. Для этого проводят иммунодиагностическое обследование сыворотки крови пациентов . Куриную сыворотку (тест-антиген) диализуют сутки физиологическим раствором NaCl, разводят ее этим раствором в соотношении 1:2-1:5. Агрегируют сыворотку добавлением 2,5% глютаральдегида при t , затем добавляют агрегированную сыворотку к осадку отмытых эритроцитов, инкубируют (сенсибилизируют ) при t 37-53°С в течение 1,4 ч. Отмывают приготовленный эритроцитарный диагностикум 4 раза физиологическим раствором от несвязавюегося белка. Готовят его 0,8%-ную рабочую взвесь. Готовят последовас тельные разведения сыворотки. Титр антител к куриной сыворотке (антиге (Л ну) равен разведению исследуемой сыворотки 1:256 и выше.

СООЗ СОВЕТСНИХ

РЕСПУБЛИК (5D 4 G 0l iV 33 48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPblTH4 (21) 3789501/28-14 (22) .12.09.84 (46) 23, 11,86, Бюл. N 43 (71) Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза (72) А.Г. Хоменко, M.M.Авербах, И.Н. Ильина и Т.А. Киреева (53) 615.373(088.8) (56) Erkrank Z. Atm. Вг8 ° 1977, )SO, 43-50. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ЭКЗОГЕННОГО

АЛЛЕРГИЧЕСКОГО АЛЬВЕОЛИТА (57) Изобретение относится к медицине, может быть применено в клинической иммунологии при диагностике болезни птицеводов. Цель изобретения— повышение точности диагностики. Для этого проводят иммунодиагностическое

„„SU„„1272249 А 1 обследование сыворотки крови пациентов, Куриную сыворотку (тест-антиген) диализуют сутки физиологическим раствором NaC1, разводят ее этим раствором в соотношении 1:2-1:5. Агрегируют сыворотку добавлением 2,57. глютаральдегида при t 37 С, затем добавляют агрегированную сыворотку к осадку отмытых эритроцитов, HHKóáèðóþò (сенсибилизируют) при t 37-53 С в течение 1,4 ч. Отмывают приготовленный эритроцнтарный диагностикум 4 раза физиологическим раствором от несвязавшегося белка, Готовят его 0,87-ную рабочую взвесь. Готовят последова. тельные разведения сыворотки. Титр антител к куриной сыворотке (антигену) равен разведению исследуемой сыворотки 1:256 и выше.

1272249

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано при диагностике болезни птицеводов, Цель изобретения — повышение точ- 5 ности диагностики °

Пример I. Больная К-а, 46 лет; работает в течение 30 лет птичницей, имеет постоянный и массивный контакт с курами. В течение последних 3 лет отмечает резкую слабость, вечерние о подъемы температуры до 39, выраженную одышку, В последние несколько лет до 3 раз в год страдает пневмониями с выраженным геморрагическим компонентом, При исследовании сыворотки крови контриммуноэлектрофорезом (известный способ) специфические антитела выявлены не были. Было проведено также иммунодиагностическое исследование сыворотки этой больной предлагаемым способом. Куринная сыворотка (тестантиген), предварительно диализованная в течение 24 ч физиологическим раствором хлористого натрия и хранящаяся до дальнейшего ее использования в замороженном состоянии, была разморожена и разведена физиологическим раствором в соотношении 1:4

30 (к 0,25 мл куриной сыворотки добавили 0,75 мл 0,97-ного физиологического раствора), Подготовленную таким образом куриную сыворотку затем аг 3 регировали добавлением 0,05 мл

2,57.-ного глютаральдегида в течение о

1 ч при 37 С, после чего добавили

I мл агрегированной сыворотки к осадку из 1 мл отмытых эритроцитов (предварительно приготовленных обработкой глютаральдегидом и храняющихся в холодильнике), инкубировали (сенсибилизировали) при 52 С в водяной бане в течение 1,5 ч, Затем отмыли приготовленный эритроцитарный диагностикум 4 раза физиологическим раствором от несвязавшегося белка, приготовили его 0,87-ную рабочую взвесь, После адсорбции исследуемой сыворотки больной К, эритроцитами человека для удаления гетерогемаглютининов готовили последовательные разведения этой сыворотки в диапазоне 1:16-1:2048 в объеме 0 05 мл и добавляли к каждому разведению 0,25 мл эритроцитарного диагностикума, Выраженная агглютинация эритроцитов наблюдалась до разведения исследуемой сыворотки (титра) 1:2048. Контроли сыворотки и антигена были отрицательны, контроль реакции положителен, При клиническом дообследовании, проведенном в стационаре ЦНИИТ МЗСССР в 1982 г., на основании клиникорентгенологических данных, функциональных показателей легких, показателей внутрилегочной биопсии, факта обнаружения специфических антител был установлен диагноз: экзогенный аллергический альвеолит, вызванный контактом с курами, По рекомендации

ЦНИИТ МЗ СССР администрацией птицефабрики больная была переведена на работу в теплицы птицефабрики, контакт с курами был практически исключен, Проведенное через 1,5 года контрольное обследование выявило стойкую ремиссию заболевания, подтвержденную положительной динамикой рентгенологических и функциональных показателей, Повторное иммунологическое исследование выявило антитела предлагаемым способом в меньшем, но, тем не менее, в высоком титре — 1:512, Результаты согласно известному способу были по-прежнему отрицательными.

Пример 2, Больная Ф. 56 лет, сельская жительница. Постоянно в те" чение многих лет в домашнем хозяйстве держит 200 кур. С ноября 1981 года беспокоит нарастающая одышка, кашель со слизисто-гнойной мокротой.

Лечение по месту жительства по поводу острых респираторных заболеваний, хронической пневмонии было неэффективным, Рентгенологически в октябре 1982 г выявлена мелкоочаговая диссеминация на фоне выраженных интерстициальных изменений. При функциональном исследовании легких обнаружены рестриктивные и обструктивные нарушения вентиляции. При уточ" ненни анамнеза выявлен контакт с курами. Заподозрен экзогенный аллергический альвеолит. Для уточнения диагноза больная поступила в ЦНИИТ МЗ

СССР в мае 1983 r.

Известным способом антитела к куриной сыворотке обнаружены не были.

В.предлагаемом способе, техническое воспроизведение которого осуществлялось по примеру I были получены положительные результаты, титр антител к куриной сыворотке (антигену) бып!

272249 равен разведению исследуемой сыворотки ):512.

Учитывая данные анамнеза, а также результаты комплексного стационарного обследования, в этом случае также был установлен диагноз экзогенного аллергического альвеолита, протекающего по типу фиброэирующего альвеолита, При этом только иммунологическое исследование позволило on — 10 ределить этиологический фактор заболевания.

Результаты рентгенологического исследования лишь уточнило характер и стадию заболевания. Вместе с тем, !5 поздняя верификация диагноза при выраженных фиброэных изменениях и значительных нарушениях функции легких потребовало проведения гормональной терапии в течение 1,5 мес ° Состояние 20 больной улучшилось, наблюдалась также стабилизация рентгенологической картины, Больной было рекомендовано исключить контакт с курами, продолжить 25 гормональную терапию с постепенным снижением дозы преднизолона, она находится на диспансерном наблюдении в диагностическом отделении ЦНИИТ

М3 СССР ° 30

Приведенные примеры свидетельст вуют о диагностической эффективности предлагаемого способа в тех случаях, когда с помощью именно этого способа был идентифицирован этиологический фактор заболевания, в то время как результаты известного способа были отри .ательными.

Наиболее прогностически ценной является диагностика заболевания на 40

его ранних стадиях, Это возможно осуществлять лишь с помощью способов, отличающихся высокой чувствительностью, в частности, используя предлагаемый способ при массовых обследованиях 4$ больших контингентов, имеющих профессионально обусловленный контакт с этиологическими факторами экзогенных аллергических альвеолитов (работников птицефабрик). Воэможность прове- $0 дения таких массовых иммунологических обследований предлагаемым способом обеспечивается также, помимо высокой чувствительности, значительной его производительностью (80-!00 àíà- $$ лизав исследуемых сывороток за рабочий день) и минимальным количеством исследуемой сыворотки (0,1-0,2 мл) для «нализа ° что позволяРТ исключить внутривенное взятие крови.

Устранение или даже хронические контакты с этиологическим фактором на ранних стадиях заболевания экэогенным аллергическим альвеолитом, приводит к стойкой клинической ремиссии заболевания, регрессированию рентгенофункциональных изменений легочных нарушений беэ медикаментоэного лечения (пример 1), Однако и на поздних стадиях заболевания при выраженных фибриоэных иэменениях и значительном ограничении легочной функции идентификация этиологического фактора также необходима, так как устранение его в сочетании с медикаментоэными мероприятиями позволяет достигнуть определенной стабилизации легочного процесса (пример 2).

Предлагаемый способ может быть также использован для длительного динамического наблюдения за больными экэогенным аллергическим альвеолитом, так как он остается положительным и при значительном ограничении контакта с этиологическим фактором заболевания и свидетельствует о сохранении специфической сенсибилиэации (пример 1), Проведение специфического иммунологического контроля в таких случаях необходимо для предупреждения рацидивов заболевания.

Было проведено клинико-иммунологическое обследование работников птицефабрики (308 человек), у 34 из них был установлен диагноз экзогенного аллергического альвеолита, Предлагаемый способ дал положительные результаты у 29 больных (из 34) с верифицированным диагнозом, причем антитела были выявлены в высоких титрах исследуемых сывороток (I 256-1:8!92).

Известным способом (контриммуноэлектрофорезом) антитела были обнаружены лишь у 15 больных и даже при положительных результатах титры антител были низкими — не более 1:4-!:8, Формула изобретения

Способ диагностики экзогенного аллергического альвеолита путем выявления в исследуемых сыворотках антител к сыворотке кур, о т л и ч а ющ и Й с я тем -что1 с целью повы шения точности диагностики, антитела выявляют путем разведения исследуемых

1272249 Ь физиологическом растворе сывороткой кур, раэведенной в соотношении 1:21:5 и агрегированной при помощи глутаральдегида.

S сывороток 1:25Ь и вьппе и добавления к ним сенсибилиэированных при 37о, 53 С эритроцитов, при этом эритроци ты сенсибилиэируют диализованной в !

Составитель П, Бонарцев

Техред М.Ходанич Корректор В.Бутяга

Редактор А. Коэориз

Заказ 6334/44 Тираж 778 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4