Штамм а /ленинград/289/83 н3 n2 вируса гриппа, используемый для приготовления гриппозного диагностикума

 

Штамм А/Ленинград/289/83 ИЗ N 2 вируса гриппа, ГКВ № 1886 (Государственная коллекция вирусов при Институте вирусологии им. П.И.Ивановского), используемьш для приготовления гриппозного диагностикума. (Л гриппа. Он обладал низкими показателями репродукционной активности в развивающихся куриных эмбрионах, титр гемагглютининов 1:64; инфекционная активность 6,7 Ig ЭИД5о/ 2 t и был чувствителен к ингибиторам нормальных сывороток лошадей (1:320)о Для получения диагностического штамма вирус пассировали 1 раз в присутствии прогревающейся при 80 С в течение 1 ч сыворотки лошади в разведении 1:50 и 1 раз со смесью сыворотки лошади и морской свинки,разведенных в 10 раз и прогретых при . ISD Ч 05

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

80„„1277 0

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

И д BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 3888560/28-14 (22) 02.04.85 (46) 15.11.89. Бюл. Р 42 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт гриппа и Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских,и биологических препаратов им. Л,A.ÒàðàñåBH÷à (72) A A,Соминина, Т.Я.Лузянина, Е.Б.Гринбаум, С.Г.Коваль, Е,В,Кузнецова., А.Б.Свердлов, Е,В,Олейникова, Н.И.Лонская и Л,В,Агафонова (53) 576.858 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

11 1 040788, кл. С 12 N 7/00, 1982 °

Слепушкин А.Н. и др. Иммуноструктура населения Москвы и циркулировавшим в 1977 штаммам вирусов гриппа

A/H3N2/, N/Hl N 1/ и В. Вопросы вирусологии, 1979, У 2, с. 175 — 180, Изобретение относится к области вирусологии и может быть использовано для получения гриппозного днагностикума типа А/Н3 N 2/ °

Целью изобретения является создание антигенно актуального штамма вируса гриппа А/НЗ N 2/, обладающего ингибиторорезистентностью и авидностью по отношению к антителам человеческих сывороток, Исходный вирус, используемый для получения диагностического штамма, :выделен от больного ребенка 4 лет во время эмидемической вспышки (50 4 С 12 N 7/00 А 61 К 39/145

2 (54) ШТАММ А/ЛЕНИНГРАД/289/83 Н 3

И 2 ВИРУСА ГРИППА, ИСПОЛЬЗУЕМЬЙ ДПЯ

ПРИГОТОВЛЕНИЯ ГРИППОЗНОГО ДИАГНОСТИКУМА (57) Штамм А/Ленинград/289/83 НЗ N 2 вируса гриппа, ГКВ Ф 1886 (Государственная коллекция вирусов при Институте вирусологии им. Д,И.Ивановского); используемый для приготовления гриппозного диагностикума. гриппа. Он обладал низкими показателями репродукционной активности в развивающихся куриных эмбрионах титр гемаг глютинино в 1: 64; инфек ционная активность 6,7 1g ЭИД O/0,2 мл и был чувствителен к ингибиторам нормальных сывороток лошадей (1:320).

Для получения диагностического штамма вирус пассировали 1 раз в присуто ствии прогревающейся при 80 С в течение 1 ч сыворотки лошади в разведении 1:50 и 1 раз со смесью сыворотки лошади и морской свинки,разведенных в 10 раэ и прогретых при 80 С °

1277607

Для выделения генетически однородной субпопуляции с высокой репродукционной активностью проведено получение высокоурожайного клона вируса путем разделения популяции по скоростям репродукции в клеточной культуре МДСК и последующее 6-кратное клонирование предельными разведениями на куриных эмбрионах с отбором и контролем клонов по гемагглютинирующей и инфекционной активности,резистентности к неспецифическим ингибиторам сывороток и авидности к специфическим антителам сывОроток людей.

Общее число пассажей на куриных эмбрионах 9, на клетках МДСК 1, Штамм вируса гриппа А/Ленинград/289/

/83, используемый для приготовления гриппозного диагностикума,депонирован в Государственной коллекции вирусов при Институте вирусологии им, Д,И.Ивановского АМН СССР за ив ГКВ

1886 и характеризуется следующими признаками. 25

Физические свойства. Коэффициент седиментации 750 8, плавучая плотНОсть 1, 2) Г/см в

Репродукционная активность, Титр

:гемагглютининов 1:256 в 0,2 мл с

1%-ным эритроцитами кур, инфекционный титр 9 lg ЗИД /О, 2 млв

Стабильность биологических свойств штамма А/Ленинград/?89/83 доказана при 12-кратном пассировании.

Морфологические признаки, Нолиморфная структура, типичная для вирусов гриппа, Ингибиторорезистентный штамм вируса гриппа А/Ленинград/289/83 в перекрестный РТГА реагирует с антисы40 вороткой к вирусу А/Филиппины/2/82 до полного "-è ò"ðà, с антисывороткой к вирусу А/Бангкок/1/79 — до 1/2 гомологичного титра, с антисывороткой

Разница

Число ис- Сравниваемые вирусы

Частота достоверных серо-. конверсий.

Х следуемых парных сывороток, шт

14с7А/Ленинград/289/83

А/Филиппины/2/82

5,7

l Дети с ОРЗ PTIA

A/Ëåíèíãðàä/289/83

А/Техас 1777

A/ËåHHíãðàä/289/83

А/Техас 1/77

1,3

386

2 Дети с ОР3 РТГА

3 Дети с ОР3 РТГА

22 3

l70

l2 3

Опыт Контингент Реакция обследонания к вирусам А/H3N2/, выделенными в

1983 г в Ленинграде, Ф 156, 279 и

293 до полного титра.

Анализ диагностической активности вирусов гриппа А/Ленинград/289/83 и известноro вируса А/Филиппины/2/82 выполнены на материале обследования сывороток детей и взрослых, переболевших ОР8, в РТГА и реакции радиального гемолиза (РРГ) при использовании диагностикумов, приготовленных из указанных штаммов, Диагностическая активность (% сероконверсий) в

РТГА выше у штамма У 1886 по сравнению с прототипом на 5,7% (14,7 и 9% соответственно), в РРà — на 4,8% (?3,8 и 19% соответственно). По сравнению с другими штаммами вируса гриппа A/H3 N 2/ в повторных опытах диагностическая активность штамма выше в обеих реакциях на 2,3-10% (в среднем на 5,5 %).

Использование штамма А/Ленинград/

/289/83/ в сравнении с вирусом

A/Áàíãêoê/7/79/ при оценке иммуногенности филиппиноподобных вакцинных штаммов для детей и взрослых показало, что при использовании в РТГА штамма II 1886 определяемые показатели иммуногенности живых гриппозных вакцин выше, чем со штаммом А/Бангкок/1/79, на 6-10%.

Диагностикум представляет собой прозрачную желтовато-оранжевую жидкость. Титр гемагглютининов составляет от 1:128 до 1:256 (в реакциях гемагглютинации и торможения гемагглютинации).

Эффективность серодиагностики гриппа при использовании вируса А/Ленинград/289/83 и других антигенных . вариантов вируса грипппа А/H3N2/ в

РТГА и РРГ приведена в таблице, 1277607

Продолжение таблицы

Контингент Реакция обследоваОпыт

Сравниваемые вирусы

Разница

Частота достоверных серо-. конверсий. ння

4 Взрослые .доноры (после OP3) РТ ГА

5 Взрослые н дети с ОРЗ

РРГ

Составитель Г,Смирнова

Редактор С.Рекова ТехредЛ,Сердюкова Кор рек то р Т. Малец

Заказ 8035 Тираж 501 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,)03

125 А/Ленинград/289/83

А/Техас /1/77

А/Бангкок/1/79

А/Ленинград/167/83

А/Ленинград/289/83

А/Техас/1/77

A/ÔèëèïnèHû/2/82

20,0

18,6

15,2

23,8

19

6,4

4 8

4,8

4,8