Способ получения монометилового эфира протопорфирина 1х

 

Изобретение касается производных протопорфиринов IX,в частности их монометиловых эфиров (МЭИ), которые могут быть использованы в биологии , фотохимии и медицине. Цель - создание нового способа, позволяющего получать из диметилового эфира . гематопорфирина (ГМП) индивидуальньш 6- или 7-МЭП, который нельзя получить известными методами. МЭП получают из ГМП, который частично гцдролизуют смесью 4-6 н.НСЕ и диоксана, взятых в массовом соотношении, равном 1:1. Далее полученную смесь разделяют на силикагеле с использованием элюента - смеси CHCF и (40:1) :С последующим превращением 6- или 7-ГМП в целевой МЭП нагреванием в диметилформамиде в присутствии бензоилхлорида при 100°С в течение 3 ч. Вь1ход б-илн 7-МЭП 95%,Rf 0,38 кизельгель - (СНС1з: 15 :1) . Суммарный выход МЭП 49,5%. с Ф ю со $ 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

„„SU„„>294807

А1

П11 4 С 07 0 487/22

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н Д ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3883017/31-04 (22) 28.02.85 (46) 07.03.87.Бюл. ¹ 9 (71) Московский институт тонкой химической технологии им.М.В.Ломоно-, сова (72) В.А.Макаров,Е.И.Филиппович и P.Ï.Åscòèãíååâà (53) 547.979,733.07 (088.8} (56) Asakura Т., Tonetani Т.

Study an су осйтome е pегоxidase, XVIII.Recombination of apoenzyme

with protoporphyrin and protoheme

monomethyI esters, — J.Biol.Chem., 1972,. v.247, № 8, р.2278. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МОНОМЕТИЛОВОГО

ЭФИРА ПРОТОПОРФИРИНА ХХ (57) Изобретение касается производных протопорфиринов IXis частности их монометилоных эфиров (МЭП), которые могут быть использованы в биологии, фотохимии и медицине. Цель создание нового способа, позволяющего получать из диметилового эфира гематопорфирина (ГМП) индивидуальный 6- или 7 — МЭП, который нельзя получить известными методами. МЭП получают из ГМП, который частично гидролизуют смесью 4-6 H.HCE и диоксана, взятых в массовом соотношении, равном 1:1. Далее полученную смесь разделяют на силикагеле с использованием элюента — смеси СНСР и СНзОН (40:1) .с последующим превращением 6- или

7-ГМП в целевой МЭП нагреванием в диметилформамиде в присутствии бензоилхлорида при 100 С в течение 3 ч °

Выход 6-или 7-МЭП 95K,Ry = 0,38 1 кизельгель — (СНС1з. СНдОН = 15:1)j .

Суммарный выход МЭП 49,5Х.

2 нротопорфирина 1Х! 294807 лового эФира, формулы и!!и

Ne тэ

Изобретение относится к новому способу получения монометикоторый может найти применение в биологии, фотохимии и медицине.

Целью изобретения является создание нового способа, позволяющего получать из диметилового.эфира гематопорфирина IX индивидуальйый 6- или

7-монометиловый эфир протопорфирина IX, которые невозможно синтезировать известными способами.

Поставленная цель достигается 25 тем, что диметиловый эфир гаматопорфирина IX подвергают частичному кислотному гидролизу, образующуюся смесь монометиловых эфиров гематопорфирина

1Х разделяют хроматографически с 30 последующим превращением б- или

7-,монометилового эфира гематопорфирина IX в б- или 7-монометиловый эфир протопорфирина IX.

Пример. а) 6-Монометиловый эфир гематопорфирина IX (6-ГМП) и

7-монометиловый эфир гематопорфирина (7-ГМП) .

Растворяют 100 мг (0,159 мМ) диметилового эфира гематопорфирина

TX в смеси 16 мл диоксана и 16 мл б н. соляной кислоты. Реакционную массу перемешивают 15 мин при 20 С разбавляют водой 15 раз и доводят рН раствора до 7 25Х-ным водным амми- у5 аком. Продукты реакции экстрагируют этилацетатом (2х300 мл). Экстракт промывают водой (Зх200 мл) и пропускают через сульфат натрия (Зх5 см).

Растворитель удаляют в вакууме, остаток хроматографируют на силикагеле 40х100, элюируя системами хлороАор — метанол 30:1 и 5:1. Вторую . фракцию R< 0,13-0,16 (кизельгель, хлороформ — метанол 15:1) собирают, а первую подвергают повторному гидролизу по указанной методике.

После трех гидролизных циклов смесь изомеров моноэфира делят на

Не0 0 0 ОИколонке (3x30 см) с силикагелем

5х40, элюируя системой хлороформ— метанол 40:1„

Первая фракция после кристаллизации из хлороформа — пептана дает

25,4 мг (267) 6-ГМП, R< 0,16 (ки— зельгель, флороформ — метанол 15:1) .

Электронный спектр (этил-ацетат) нм (P х 10 ):402 (175,06), 497 (!1,37); 529 (9,62);567 (8,01);

594пл.(1,17); 621 (3,78); 642 (0,40)

ИК-спектр (в вазелиновом масле), см : 3400 (ОН); 3300 (NH); 1735 (CO в сл.эф.); 1704 (C0 в СООН).

IIMP-спектр (в СРС1, + 10X пиридина-d ), о, м.д.: !0,76 (1Н);

10,21 (IН); 1О,IO (1Н, все с., мезо-Н); 10,73 (1Н, д.,мезо-Н); 6,66 (2Н, к., СНСН ); 4,50 (2Н); 4,44 (2Н, все т., СН СН СО); 3,68 (9Н), 3,62 (ÇH); 3,60 (ЗЙ,все с., СН );

3,36 (2H); 3,28 (2Н, все перекр.т., СН СН СО); 2,34 (ЗН); 2,30 (ЗН,все д., СЙСН ); — 3,65 (2Н, с., NH).

Из второй фракции после кристаллизации из хлороформа — пентана получают 25,5 мг (26,IX) 7-ГМП,Rg 0,13 (кизельгель, хлороформ — метанол, 15;!)

Электронный спектр (в этилацетате

+ 10X метанола),9, нм (K x10

397 (180,59); 496 (13,50); 528 (8,75); 567 (6,34); 594 пл. (1>!5);

620 (3,91); 640 (0,26).

ИК-спектр (в вазелиновом масле), см : 3400 (ÎH); 3312 (NH) 1737 (СО в сл.эф,); !702 (СО в СООН). !

ПМР-спектр (в СРС1 + I Oi. пиридина-d<) 8, м.д.: !0,58 (2Н); 10,10 (lH) 10 05 (1Н, все с., мезо-Н);

6.60 (2Н, м„, СНСНз); 4,47 (2H)

4,36 (2Н,все т., СН СН СО); 3,67 (ЗН); 3,65 (6Н); 3, á3 (3H); 3, 60 (3H, все с,,„СН ) 3,31 (2H); 3,25 (2Н, все перекр. т., СН СН СО);

Ne0

ВНИИПИ Заказ 559/26 Тираж 372 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. ужгород, ул. Проектная, 4

2,3б (6Н, д., СНСН ); — 3,80 (2Н., с,, NH) .

Общий выход изомеров 52,17. б) 6-Монометиловый эфир протопорфирина IX, 28 мг (0,046 ММ) б-ГМП нагревают в 5 мл диметилформамида в присутствии 0,02 мл бензоилхлорида в течение 3 ч при 100 С. о

Реакционную массу охлаждают до 20 С и разбавляют пять раз водой. Выпавший осадок через 30,мин отделяют, сушат на воздухе и кристаллизуют из хлороформа — метанола. Выход 25 мг (957). Н< 0,38 (кизельгельр хлороформ — метанол 15:11.

Электронный спектр (хлороформ +

+ 1Х пиридина ), q макс нм (g х 1О ):

407,5 (149,80); 506 (12,29); 542 (10,32), 576 (6,40); 630 (4, 53).

ИК-спектр (в вазелиновом масле), см : 3300 (NH); 1736 (CO в сл. эф.); 1706,8 (СО в СООН).

ПМР-спектр (в CDCI> + 10% пиридина-d<), 3, м.д.: 10,06 (!Н); 10,00 (2Н); 9,93 (1Н, все с., мезо-Н);

8,14 (2Н, к., СН=СН ); 6,24 (2Н);

6,04 (2Нр все д., СН=СН ); 4,34 (2H);

4,25 (2Н, все т., СН СН СО); 3,57 (6Н); 3,53 (6Н); 3,47 (ЗН, все с., СНз); 3,20 (2Н), 3,15 (2Н, все перекр. т., CH CH CO). отличающийся тем, что диметиловый эфир гематопорфирина IX подвергают частичному кислотному гидролизу смесью 4-6 н. соляной кислоты и диоксана, взятой в массовом соотношении 1:I, образующуюся смесь моно.метиловых эфиров гематопорфирина IX

94807 4

B ) 7-Мономе тиловый эфир II poTQITopфирина IX.

Из 33 мг (0,054 мМ) 7-ГМП по описанной методике получают 29,5 мг

5 (95K) порфирина. R> 0,38 (кизельгельр хлороформ — метанол 15:1).

Электронный спектр (хлороформ +

-э

+ 1X пиридина) р9 нм (Е х 10 ):

408 (150,86); 596 (12,67); 541 (10,32); 576 (6,25); 630 (4,62).

ИК-спектр (в вазелиновом масле), см 3307,5 (NH); 1737,5 (CO в сл.эф.); 1705,1 (СО в COOH).

ПМР-спектр (B CDCI + 10% пириди на-dz),о, м.д.: 10,17 (2Н); 10,15 (1Н); 10>03 (1H, все с., мезо-Н);

8,25 (2Н, к., СН=СН ); 6,33 (2Н); 6,15 (2Н, все д., CH=CH );4,48 (2H), 4,36 (2Н, все трр СН, СН СО);3,65 (ЗН)р ЗрбО (9H); 3,55 (ЗН, все с., СНу); 3,34 (2H) 3,28 (2Н все перекр. т., СН СН СО), Таким образом, предлагаемьп.

25 способ позволяет получать индивиду- альные б- или 7-монометиловый эфиры протопорфирина IX из диметилового эфира гематопорфирина IX с суммарным выходом 49,5Х.

Формула изобретения

Способ получения монометилового эфира протопорфирина IX формулы

0 0 ОН разделяют на силикагеле, используя в качестве элюента смесь хлороформ метанол при соотношении 40:1 с последующим превращением 6- или 7-моно" метилового эфира гематопорфирина ХХ в целевой продукт известными приема" ми.