Соли 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3- диметиламинопропил)-порфирина, обладающие противолучевой активностью, и способ их получения

 

1. Соли 2,7,12,18 - тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)-порфирина общей формулы где а) НХ - 2CH₃SO₃H, б) НХ - 4HCl, обладающие противолучевой активностью.

2. Способ получения солей 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)-порфирина общей формулы где а) НХ - 2CH₃SO₃H, б) НХ - 4HCl, отличающийся тем, что мезопорфирин-IX обрабатывают хлористым тионилом, на полученный хлорангидрид действуют диметиламином, образовавшийся при этом диметиламид мезопорфирина-IX подвергают взаимодействию с ацетатом цинка с последующим восстановлением алюмогидридом лития образовавшегося цинкового комплекса и деметаллированием последнего действием соляной кислоты. Изобретение относится к новым химическим соединениям порфиринового ряда, конкретно к солям 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина общей формулы
a) HX 2CH₃SO₃H;
б) HX 4HCl,
обладающим противолучевой активностью, и способу их получения. Целью изобретения является поиск в ряду водорастворимых соединений, проявляющих выраженную противолучевую активность при введении их по истечению нескольких часов после момента облучения, и разработка нового способа их получения. П р и м е р 1. Диметансульфонат 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина (1а). Растворяют 1,66 г (3 ммоль) мезопорфирина-IX в 25 мл хлористого тионила, через 1 ч упаривают досуха, остаток растворяют в 100 мл хлороформа, охлаждают до 0^oC и обрабатывают 20 мл 30%-ного водного раствора диметиламина. Органический слой отделяют, сушат Na₂SO₄ и нагревают до кипения 0,5 ч с 2 г ацетата цинка. Раствор фильтруют через слой (2 см) окиси алюминия, упаривают до небольшого объема, порфирин осаждают, добавляя избыток метанола, и получают 1,86 г (90%) цинкового комплекса диметиламида мезопорфирина-IX. Кипятят 1,86 г (2,76 ммоль) цинкового комплекса диметиламида мезопорфирина-IX c 262 мг (6,9 моль) LiAIH₄ в 150 мл тетрагидрофурана. Через 3 ч добавляют 5 мл воды, осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают досуха, растворяют в 200 мл хлороформа и обрабатывают 50 мл конц. соляной кислоты. Добавляя водный раствор аммиака, реакцию среды доводят до рН 7 8, органический слой отделяют и хроматографически выделяют 1,29 г (80%) 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина. Суспендируют 1,29 г (2,18 ммоль) 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)-порфирина в 100 мл этанола, добавляют 0,42 г (4,36 ммоль) метансульфокислоты, растворитель упаривают досуха, а остаток перекристаллизовывают из изопропанола и получают 1,57 г (92% 68% на исходный мезопорфирин-IX) диметансульфоната 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина (Ia). ИК-спектр: ν(CH₃SO^-₃) 1060, 1192 cм^-1, ν(пиррольные N-H) 3315 см^-1, ν(NH(CH₃)^[phone] см^-1 широкая полоса. Электронный спектр в хлороформе, λ макс/нм (e·10^-3): 400(156); 500 (12,7); 534 (9,73); 567 (6,55); 620 (5,02), добавлено два эквивалента триэтиламина. Электронный спектр в воде l, макс/нм (e·10^-3):375 (53,9); 398 плечо (44,0); 504 (6,37); 538 (4,97); 565 (3,95); 617 (1,66). Найдено, C 61,0; H 7,7; N 10,7. C₄₀H₆₀N₆O₆S₂. Вычислено, C 61,2; H 7,7; N 10,7. П р и м е р 2. Тетрахлоргидрат 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина (Iб). К суспензии 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина, полученного аналогично синтезу порфирина 1a, из 24 г мезопорфирина-IX, в 0,5 л этанола прибавляют по каплям при интенсивном перемешивании спиртовой раствор хлористого водорода до кислой реакции по метиловому оранжевому. Растворитель упаривают досуха, остаток перекристаллизовывают из изопропилового спирта и получают 20,11 г (62,6% в расчете на исходный мезопорфирин-IX) тетрахлоргидрата 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина (Iб). ИК-спектр: ν(NH(CH₃)^[phone] см широкая полоса, ν(пирромные NH⁺) 3200 3400 см^-1 широкая полоса. Электронный спектр в воде, λ макс/нм (e·10^-3):391(53,9); 504(4,99); 539(4,85); 563(4,85); 609(2,02). Найдено, N 11,4; Cl 19,2. C₃₈H₅₆N₆Cl₄. Вычислено, N 11,4; Cl 19,2. Данные о токсичности диметансульфоната 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина Ia и тетрахлоргидрата 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)порфирина Iб, полученные в опытах in vitro на асинхронной культуре клеток СОЦ, представлены в табл. 1. Сравнение противолучевой активности соединений Ia и Iб проводилось с 2,7,12,17-тетраметил-3,8,13,18-тетраэтил-5-диметиламинометилпорфирином (II). Опыты in vitro проводили на асинхронной культуре клеток СОЦ. Порфирины Ia и Iб в нетоксичных для интактных клеток дозах вносили в инкубационную среду через 0,25, 15,3 и 7 ч после облучения культуры. Клетки облучали на рентгеновской установке РУМ-7 в дозе 4 Гр при мощности дозы 0,4 Гр/мин и фильтре 0,47 мм Al. О пострадиационном эффекте соединений судили по разности сохранения способности клеток к образованию нормальных колоний в облученном контроле и в опыте с внесенными в среду порфиринами. Результаты экспериментов приведены в табл. 2. Парафин Ia изучали в опытах на мышах-самцах линии C57Bl (6 со средним весом 20 г). Токсичность соединения Ia определяли методом Литчфилда и Уилкоксона. По тесту трехсуточной выживаемости дозы соответствующие СД₁₆, CД₅₀ и СД₈₄ оказались равны 24, 35 (27 + 44) и 45 мг/кг. Терапевтический эффект порфирина Ia изучали при введении его в дозе 1/2 СД₁₆ через 0,25, 3, 6, 24 ч после облучения. Подопытным животным препарат вводили внутрибрюшинно, животным контрольной группы вводили внутрибрюшинно физиологический раствор. Мышей опытных и контрольных групп (по 10 животных в каждой) облучали однократно в дозе 8 Гр (ЛД_95-99/30) на гамма-установке "ИГУР-1"; мощность дозы 0,72 Гр/мин. Лечебный эффект препарата оценивали по выживаемости мышей на 30-е сутки после облучения. Результаты экспериментов приведены в табл. 3.

Формула изобретения

1. Соли 2,7,12,18 - тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)-порфирина общей формулы

где а) НХ 2CH₃SO₃H,
б) НХ 4HCl,
обладающие противолучевой активностью. 2. Способ получения солей 2,7,12,18-тетраметил-3,8-диэтил-13,17-ди-(3-диметиламинопропил)-порфирина общей формулы

где а) НХ 2CH₃SO₃H,
б) НХ 4HCl,
отличающийся тем, что мезопорфирин-IX обрабатывают хлористым тионилом, на полученный хлорангидрид действуют диметиламином, образовавшийся при этом диметиламид мезопорфирина-IX подвергают взаимодействию с ацетатом цинка с последующим восстановлением алюмогидридом лития образовавшегося цинкового комплекса и деметаллированием последнего действием соляной кислоты.

РИСУНКИ

Рисунок 1