Способ оценки активности воспалительного процесса при гломерулонефрите у детей

 

Изобретение относится к нефрологии . Цель изобретения - повышение точности спо.со6а, В две пробирки вносят инкубационную среду, кровь с гепарином и раствор адреналина. Смесь перемешивают и инкубируют. В опытную пробирку вносят взвесь опсонизированных микробов, а в контрольную - инкубационную среду . После инкубации и центрифугирования супернатант подвергают спектрофотометрии и производят расчет фагоцитарного показателя . СО a:i

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (51)4 А 61 К 39/02

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

H A BTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3725999/28-14 (22) 12,04.84 (46) 23.05.87, Бюл. ¹ 19 (71) Московский научно-исследовательский институт педиатрии и детской хирургии и Институт сердечно-сосудистой хирургии им. А.Н, Бакулева (7?) В.А. Комаров, N.Ñ. Игнатова, И,А, Коровина, А,А. Ананенко, В.П. Мищенко, Я.A. Соколов и Ю.Е. Вельтищев (53) 615,375(088.8) „„Я0„„11736 А1 (54) СПОСОБ ОЦЕНКИ АКТИВНОСТИ ВОСПА-

ЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА ПРИ ГЛОГ1ЕРУЛОНЕФРИТЕ У ДЕТЕЙ (57) Изобретение относится к нефрологии. Цель изобретения — повышение точности способа, В две пробирки вносят инкубационную среду, кровь с гепарином и раствор адреналина.

Смесь перемешивают и инкубируют. В опытную пробирку вносят взвесь опсонизированных микробов, а в контрольную — инкубационную среду. После инкубации и центрифугирования супернатант подвергают спектрофотометрии и производят расчет фагоцитарного показателя.

1 1З117З

Изобретение относится к медицине, к нефрологии детского возраста, точнее к способам оценки активности воспалительного процесса в почках по показателю фагоцитарной активности.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Способ осуществляют следующим образом

Предварительно опсонизируютмикробы10

Micrococcus lisodeikticus, для чего

10 мг микробов суспендирун т в 1,0 мл смешанной сыворотки,представляюшейпул от 10 и более доноров. Инкубацию выполняют 30 мин при 37 С при перемеши- 1S вании. Субстрат центрифугируют 10мин при 4000-5000 об/мин и надосадок декантируют. Осадок промывают 2-3 раза в 3 0 мл инкубационной среды и после заключительного центрифугирова- 20 ния ресуспендируют в 1,0 мл инкубационной среды. Полученный препарат представляет собой взвесь опсонизированных микрококков, Состав инкубационнои среды — физи25 ологический раствор с концентрациями, ммоль/л: глюкоза 5, 55; СаС1> О, 9;

КС1 4, 5.

Раствор адреналина тартрата:

0,37.-ный раствор на инкубационной среде, Кровь для исследования забирают у пациента из локтевой вены утром натощак и смешивают с гепарином из расчета 5 ед/мл крови. Для анализа дос- 35 таточно 0 3 мл крови.

Определение выполняют в пластиковых или силиконизированных стеклянных пробирках. В две пробирки (опытную и контрольную)вносят по 1,0 40 ционной среды, по О,) мл гепаринизированной крови, подлежащей анализу, и по 0,1 мл О,ЗЕ-ного раствора адреналина тартрата. Смесь перемешивают и инкубируют 5-10 при 37 С. Далее в 45 опытную пробирку вносят 0 15 мл взвеси опсонизированных микробов, а. в контрольную 0 15 мл инкубационной среды. Смесь перемешивают и инкубируют 12015 мин при 37 С ° Пробирки 50 центрифугируют 5 мин при 4000 об/мин и супернатант подвергают спектрофотометрии при 480 нм, Результат рассчитывают по формуле

1,35х1000 55 (F. -Е ) х — О 3 8

= E х 355 мкмоль 0< (120 мин) 0,1 мл крови, 6 2 где Š— экстинкция опыта;

F, — экстинкция контроля;

1,35 — общий объем реакционной смеси, мл;

1000 — коэффициент пересчета, мкмоль1

3,8 — коэффициент молярной экстинкции адренохрома при

480 нм.

Пример 1, Оценка активности воспалительного процесса у ребенка А.А., 13 лет, от 05.07 ° 84ã. Клинический диагноз: гломерулонефрит, нефротическая форма.

III степень активности. Фагоцитарный показатель

596 мкмоль 02, Пример 2 ° Оценка активности воспалительного процесса у ребенка

П.А., 6 лет, от 30,01,85 r Клинический диагноз: гломерулонефрит, нефротическая форма.

1ТХстепеньактивности.. Фагоцитарный показатель

329 мкмоль 02

Пример 3. Оценка активности воспалительного процесса у ребенка М,Ф., 4 года, от 14,11 ° 84 г. Клинический диагноз; гломеруланефрит, нефротическая форма, степень активности. Фагоцитарный показатель

259 мкмоль О

Пример 4. Оценка активности воспалительного процесса у ребенка

Д.С., 6 лет, от 04.08.81г, Клинический диагноз: гломерулонефрит, нефротическая форма.

0-1 степень активности,Фагоцитарный показатель

1!О мкмоль 02

Использование предлагаемого способа обеспечивает по сравнению с известным ряд преимуществ. Опсонизированные частицы микрококка, использованного в предлагаемом способе, существенно влияют на супероксидобразующую функцию фагоцитирующих гранулоцитов в цельной крови по сравнению с другими изученными частицами опсонизированного стафилококка, синегнойной палочки и угля, Статистическая обработка материала выявила достоверность для всех случаев при Р 0,001.

Использование опсонизированного эимоэана в качестве стимулятора супероксидобразующей функции фагоцитоэа не позволяет выявить существенные разСоставитель П, Бондарцев

Редактор H. Тупица Техред А.Кравчук Корректор Н. Рогулич

Заказ 1914/6 Тираж 596 Подписное

BHHH1IH Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4

3 131173 личия активности воспалительного процесса при гломерулонефрите и этот недостаток зимозанового способа может быть устранен в предлагаемом мнкрококковом способе. При выраженной активности воспалительного процесса при нефротической форме гломерулонефрита показатели супероксидобраэующей функции существенно выше, чем при минимальной степени активности fo вне, зависимости от глюкокортикоидной терапии при P 0,001.

При применении предлагаемого способа по сравнению с известным в !5

4,7 раза увеличивается точность определения активности воспалительного процесса.

6 4

Формула нэ обретения

Способ оценки активности воспалительного процесса при гломерулонефрите у детей путем забора крови, внесения в нее фагоцитируемых частиц с последующей регистрацией результатов реакции фагоцитоза, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью повыше" ния точности способа, в качестве фагоцитируемых частиц используют опсо- ниэированные микроорганизмы M crococcus lisodeikticu8 ° а регистрацию реакции фагоцитоза осуществляют по выявлению супероксида 0- и прн его коицентрации 396+197 мкмоль устанавливают высокую степень, а при 112 +

25 мкмоль — низкую степень актйвности воспалительного процесса.