Способ определения зараженности семян фитопатогенами

 

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способу определения зараженности семян фитопатогенами,,и может быть использовано при подготовке семян к посеву. Целью изобретения является повьшение достоверности способа за счет выявления скрытой формы заражения. Проращивают семена в рулоне из гигроскопического материала, затем внешне здоровые проростки отбирают и выращивают на свету в стерильной дистиллированной воде в течение 2-10 сут

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК.е

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4056628/30-13 (22) 14.04.86 (46) 07,06,88. Бюл. 9 21 (71) Украинский научно-исследовательский институт растениеводства, селекции и генетики им.р.Я.Юрьева (72) Е.N.Äîëãoíà (53) 634 0.232.3 18 (088.8) (56) Грисенко Г.В. и др. Ф тоекспертиза насхння соняшнику методом пророщування в рулонах. — В1сник с1ль° е ер ськогосподарсько1 науки, — Ки в, 1983, Р 5, 79-81.

„.SU„, 1401038 А1 (51) 4 C 12 () t /00, А 01 С 1/04 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЗАРАЖЕННОСТИ

СЕМЯН ФИТОПАТОГЕНАМИ (57) Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к способу определения зараженности семян фитопатогенами,.и может быть использовано при подготовке семян к посеву, Целью изобретения является повышение достоверности способа sa счет выявления скрытой формы заражения. Проращивают семена в рулоне иэ гигроскопического материала, затем внешне здоровые проростки отбирают и выращивают на свету в стерильной дистиллированной воде в течение 2-10 сут при гемпературе 20-23 С. 3 табл.

14< ?! I (! 38

Изсбретенн» > нас нтс я к cельсксму

КОз вист ну р =" имен?!О спОс сбЯМ! Опр !"" деления зараженности семя?! фитапатс-!. åнами и может быть использовано

5 при псдгатОвк! (емян к посеву с це

Лью отбраковкH инфицирана??ных семян.

Цель изобретения — повышение да Стовернссти способа эа сче T ныя аления скрытой формы заражения.

П р и и е р 1. Установление <зтег<еИи зараженности семян подсолнечника учетам наличия скрытой формы патс71енов.

Для Определения лабОратсрнай Всхo 1<;

7, ести и заряженности пятсг<= нами сими-"

1 а подсолнечника раскладывают вдаль увляженных дистиллированной водой

Полосок фильтровальной бумаги зародышем вниз, отступая от края на 23,см. Расстояние между семенами 1,5-2 см. Сверху их накрывают узкой полоской бумаги, Все это занорачина?

Н 7я боковых корешков на центральном корне.,При температур 25-26" Г ани появляются на 4-5-й день, после чего подсчитывают количество проросших

СВмян здоровых и пораженных патсгенамй и устанавливают степень зараженвссти их наружной и внутренней инЬ фикцией?, Вид возбудителя на больных с менах и прорсстках уточняют мнкрос опическим просмотром, затем подсчит вают количество семян, пораженных т м или иным возбудителем„ и выводят середний процент зараженности по отдельным видам. Полученные вне<лне здо- 4О ровые прсростки вынимают из рулонов, промывают в стерильной воде H продолжают выращива-ь в условиях„ обеспечивающих им процесс фотосинтеза„ Io у<.траняющих полностью минеральное J<5 питание,, необходимое для даг?ьнейшега развития праростксв сразу же после и< .пользования запасов, имевшихся в семенах, Во внешне здоровых пророст?;-ах„ содержащих патогены B скрытой фapMB„ к этому времени уже устанан пинаются пеевдосимбиотические взаимсатнашенHH, и для выявления патогенав необходима нарушить их ° Осуществляют это у< тра 55 нaнием БегетирJю!цих прарасткОн Bсaх элементов ми??еряльнаго питания, для чаго псгpyzaI

ЧЯСТЬ ГИ!!СКОТ!»?<1?1 H ДИСТИЛЛН<ЭОВЯННУ— н аду и o< та В?!я ют !х расти Б т !. ч< . ниР

2-10 дн. при комнатной температуре на свету. Комнат?!ая температура 2Q23 С является оптимальной для раста баль<

Появление перетяжки или побурения тканей на гипскатиле выше поверхности нсды свицетельствует об этом. Начинается паталогический процесс. Этот грацесс у исследуемых проростков HB ступает не одновременно, У одних он проявляется уже через "- дн., а у дру. ?х — через 8-10 дн. Максимальное количества праростков, имеющих патогенав н скрытой форме, погибают в течение б дн. ПроросTKH, не содержащие патогенных организмов в скрытой форме, продолжают вегетировать в ТВКНх условиях свыше 2О дн, Так как для проявления патологического процесса некоторым проросткам достаточно 2 дн,, то учет и удаление пораженных прсростков из сосуда проводят через каждые 2 дн. после размещения их н сосуды, При этом у остан!<7ихся здоровых праростков промывают корневую систему и меняют дистиллированную воду в связи с тем, чта бактерии, вьгшедшие из проростков воду„ используя продукты их обмена, вызывают процесс брожения. Передача инфекции от пораженного проростка к здоровому в течение 2 дн, (интервал между проявлением заболевании и удалением пораженного проростка3 не происходит, так как мицелий патогенов и органы спорсношения формируются только через 3-4 дн, после проявления патологического процесса в условиях влажной камеры, У некоторых прорсстков на семядольных листьях после снятия луэги имеются небольшие бурые пятна,, которые свидетельствуют а наличии патагенон, ?ак??е прорсстки размещают в сосудах свободна, чтобы не происходила г<.редача инфекции ст

î ного прорастка к друг

1 41!10 (8

ДлЯ oiEP(j(еsE(f н!(Я г те(!("111! 3 11f:(ж(IIIIЯ и Видового со((тз Ра 11ап 01 е l(ÎÂ 1(л ив дящихся в семенах в скрытой форме, пораженный участок извлеченных из

5 сосудов проростков разме!цают и чашки

Петри на увлажненную филяьтрова11 ную бумагу так, чтобы они не соприкасались друг с другом. Чашки Петри вью держивают в термостате при 22-24 С в течение 3-4 дн..до проявления спороношения у патогенов ° Видовую принадлежность патогенов уточняют при микроскопическом просмотре, Общую зараженность семян патогенами с уче5 том наличия их в скрытой форме устанавливают путем суммирования зараженности. обнаруженной при определении лабораторной всхожести, с зараженностью проростков скрытой формой патогенов.

В табл. 1 представлены результаты определения степени зараженности семян подсолнечника, сорт Харьковский

101. урожай 1984 года, При определе- 25 нии лабораторной всхожести указанной партии семян установлено, что 117 их погибло от наличия наружной и внутренней инфекции патогенов. При дальнейшем росте полученных внешне здо-.- ровых проростков на свету без доступа минерального питания через два дня после размещения их в сосуды удалено 3,25% проростков с перетяжкой на гипокотиле. Максимальное количество гибели внешне здоровых про- 35 ростков (23,0 и 30,757.) отмечено на

4-й и 6-й дни. На 8-й и 10-й день степень проявления заболеваний уменьшается до 7,5 и 2,257. В последующие дни (12-й и 14-й) гибели проростков 40 не отмечают.

Суммируя зараженность семян патогенами, обнаруженную при определении лабораторной вхожести (11 ), и зараженность патогенами, развивающимися 45 в скрытой форме (66,5X) устанавливают общую зараженность семян (77,5%). При посеве таких семян в прохладную и влажную почву получают сильно изреженные всходы, что вызвано гибелью проростков от скрытой инфекции еще до выхода их иа поверхность почвы, а у вьвкивших вегетирующих растений листья нижнего яруса суммируют уже в фазах футонизации и 1(P(lò(: IIHR Все это ока>5 зывает отрицательное впияние на урожай подсолнечника.

В табл. 2 представлены результаты обследования степеии .(аражен!!ости сеf !!i I(ii 1 Гi I (! f, I. f f:f I III I IЕ ВИ!.IE 1tl(III(É

Ф

Гltб )!! (Оп 11 (

3-207.

Зараженность внешне здоровых проростков патогенами, находящимися в скрытой форме, значительно Выше (1564X). Суммируя пораженность семян подсолнечника наружной и внутренней инфекцией, обнаруженной при определении лабораторной всхожести, с пораженностью внешне здоровых проростков скрытой формой патогенов, получают общую зараженность семян. У исследуемых партий она составляет 22-847..

Пример 2. Установление видового состава патогенов, находящихся в скрытой форме в семенах подсолнечника.

Для анализа используют три партии семян подсолнечника (сорт Х-!01, урожай 1985 года): кондиционные семена, собранные из пораженных корзинок белой гнилью и пораженных корзинок серой гнилью. Условия и режимы проращивания семян, определение зараженности их патогенами, выявление скрытой формы патогенов в проростках такие же, как в примере 1. Лабораторная всхожесть кондиционных семян составляет 907, а собранных из пораженных корзинок белой и серой гнилями на. 20-30Х ниже, Полученные внешне здоровые проростки во всех трех вариантах помещают в сосуды с дистиллированной водой которые выдерживают о на свету при 20-23 С. Через каждые

2 дн. удаляют из сосудов проростки с проявлением заболевания. Пораженные участки из них вырезают и размещают в чашках Петри на увлажненную фильтровальную бумагу в асептических условиях таким образом, чтобы они не соприкасались друг с другом. Чашки

Петри выдерживают В термостате в тео чение 3-4 дн, при 22-24 С. Оставшиеся в сосудах еще здоровые проростки после каждого удаления пораженных промывают в дистилл!!рованной воде и заменяют воду в сосудах. МикроскопиХ»блиц а

Пор»ивииоств свили м ииличил capaeott фо ив»в» враил, дн. (лрвдл»гввиыо. с

4,0 18,0

ЗЗ,О ТЬ,О, 92,0

6),0 75,0

74,0 . 82,0

50,0 67,0

2,0 о о

О О

80 ЭO Э60

92,0

ЗО,О З,о

2,0

83,0

60 20,0 22,0 J,Î 1,0 О . 0

12,0

15,0 86,0

8990

tt 0 О 18,0 38,0 t5,0 4,0

О 0

Ср»дм»в < »ива»иив 8tt,о

665 . ЦS

Э,25 2Э,О 30,15 7,5 . 2,25 О О

11,О

Та блица 2

Названи сорта гибрида линии

Пораже ность пророс ков от щая енрансть стскрыто инфекци

% (пре лагаем способ мян

% т ной тй цин, вестпособ) Харьковский 50

Харьковский 101.

HHVLHNK

6540 .улучшен31,0 35,0

52,0 58,0

4,0

6,0

5 14010 ческому осмотру подвсргакФ каждый пораженный участок проросткон.

Подсчитывают количество проростков пораженных .тем или иным возбуди»

5 телем, и выводят средний процент зараженности по отдельному виду. При анализе выяснилось, что гибель проростков происходит не от одного патогена, а от комплекса их (2-5).

ТО

Видовая принадлежность и степень зараженности проростков патогенами, выделенными с помощью предлагаемого способа, представлены в табл. 3.

Внешне здоровые проростки во втором и третьем вариантах заражены патогенами в скрытой форме на 100%, Выделены возбудители белой, серой, сухой гнилей подсолнечника, ложной мучнистой росы, альтернариоэа и фуэа- 2> риоза. Проростки кондиционных семян (II класс) также заражены патогенами

18 в скрытой форме, но степень заражения их составля т 13,8%, что в 4-5 раэ меньше, чем во втором и третьем вариантах, Формула из обретения

Способ определения зараженности семян фитопатогенами, предусматривающий проращивание семян в рулоне иэ гигроскопичного материала с последующей оценкой результатов и отбором внешне здоровых проростков, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения достоверности способа за счет выявления скрытой формы заражения, внешне здоровые проростки выращивают на свету в стерильной дистиллированной воде в течение 2-10 сут при 20-23 С.

140! 1)18 8

Продолжение табл.2

2 ) 3 ) 4

20,0 ный

ВНИИ1"1К

6540

64,0

84,0

7,0

12 0

12,0

5 0

9,0

-514

Вк-66

13,0

0-3

10,0 30,0 40,0

514" 772п

0-3

3,0

22,0 25,0

Теблпле 3 ерененость семен неруяой н пнут ренней нн»

Ее<о<Ей< и

«i4ecrr«tt бнлое<Ф состое петогеное тлрененность

cet<4et

1lc1eret leis

° c1< roг(огоп

Int ry< l4 clнстее роя

F44

r1ое реп

AlterПят14 п<коб) %o4tttNWlett

ЮЮ Оееп<НЯ °

22 лес

9,8

90,2

13,8 23,6

3<0 3,0 13,0 10<0 8 ° 3 б и 0е<еене не поролон е<44 норте<нее белой гнпяь<е

60,6 . 39<6

60 6 t00 36,3

t6rtt 2t,0 13 ° 3 9<3 6 3

70,8

70,8 100 12 2 70,6 70,8 18 9 27„2 948

29,2

Составитель Т,Полянская

Редактор H.ßöîëà Техред 11.Иоргентал . Корректор И.Иаксимишинец

Тираж 520 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам иэобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Закаэ 3633

Проиэводственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектнаяе 4 улучшенный

Одесский

96

Санбред

254

Солдор

220 ер<)нен

<кть роростон серегой нное<о<ей<2 (преяяегеЕН<<я СПОс об) 15 0 22,0

55,0 67,0

26,0 38 O

35,0 40,0

18 0 27,0

38,0 51,0