Способ получения лектина
Изобретение относится к медицине и биологии, касается способа получения лектина из растительного сырья, в качестве которого используют надземную часть коланхре Блосфельда. Экстракцию сырья ведут 29-31%-ным этиловым спиртом. Затем проводят осаждение центрифугированием при 6000 g 78-82%-ным этиловым спиртом и очистку на аффинном .сорбенте. В качестве элюента используют 0,08- 0,12 н. уксусную кислоту или 0,1- 0,18 М р-р NaCl.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУбЛИК (19) (11) (S1) 4 А 61 К 35/78
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4265015/28-14 (22) 19.06.87 (46) 23.11.88. Бюл. У 43 (71). Киевский государственный университет им.Т.Г.Шевченко (72) В.Ф.Лапчик, Т.В.Юрчишина и Л.В.Багрий . (53) 615.32 (088.8) (56) Аllеп А.К., Neuberger А., Sharon N., The purification, composition and specificity of wheatgerm agglutinin. — The Biochemical
Journal, 1983, ч.131, ю 1, р.155162. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКТИНА (57) Изобретение относится к медицине и биологии, касается способа получения лектина из растительного сырья, в качестве которого используют надземную часть коланхое Блосфельда.
Экстракцию сырья ведут 29-31Х-ным этиловым спиртом. Затем проводят осаждение центрифугированием при
6000 g 78-82Х-ным этиловым спиртом и очистку на аффинном,сорбенте. В качестве элюента используют 0,08О, 12 н. уксусную кислоту или О, 1О, 18 М р-р NaC1.
1438800
Формула и з о б р е т е н и я
Способ получения лектина путем измельчения растительного сырья, экстракции, осаждения целевого продукта, очистки и сушки, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью упрощения способа и сокращения времени процесса, в качестве источника сырья используют надземную часть каланхое
Блоссфельда (Kalanchoe blossfeldiana
v,Poelln) экстракцию ведут 29-317.ным этиловым спиртом, осаждение осуществляют 78-827.-ным этиловым спиртом, а очистку проводят на аффинном
Ф сорбенте, используя в качестве элюента 0,08-0,12 н. уксусную кислоту или О, 1-0, 18 М раствор хлористого натрия.
Составитель E.Çîðèí
Техред Л.Сердюкова Корректор С.Шекмар
Редактор А.Шандор
Заказ 5992/9
Тираж 655 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, И-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4
Изобретение относится к медицине и биологии и касается способа получения лектина из растительного сырья.
Целью изобретейия является упро5 щение способа и сокращение времени процесса.
П р и M е р >.1 кг надземной части каланхое Блоссфельда измельчают, отжимают сок, фильтруют его через бумажный фильтр при комнатной температуре. Фильтрат охлаждают до 4 С и добавляют охлажденный до 4 С 967ный этиловый спирт до конечной концентрации спирта 307. и оставляют на о
1 ч при 4 С. Через.1 ч смесь центрифугируют в рефрижераторной центрифуге при 4 С в течение 10 мин при
6000 g. К надосадочному 307.-ному спиртовому раствору добавляют ох- 20
О лажденный до 4 С 967.-ный этиловый
1спирт до получения 80/-ного насыщения и выдерживают ) ч при 4 С.
Затем центрифугируют в рефрижераторной центрифуге при 4 С в течение 25
5 мин при 6000 g. Осадок собирают и растворяют в минимальном (до 50 мл) количестве охлажденной до 4 С дистиллированной воды.
Растворенный осадок диализируют З0 против охлажденной до 4 С дистиллированной воды в течение 2 ч. Затем центрифугируют в рефрижераторной цено трифуге при 4 С в течение 20 мин при
6000 g. Надосадочный раствор собирают и извлекают из не-о лектин следующим образом.
Колонку (Зх15 см) наполняют аффинным сорбентом (овогелем) при 4 С, промывают водой, охлажденной до 4 С.
Промывку колонки ведут до тех пор, пока оптическая плотность вытекающей жидкости при 280 нм не снизятся до
0,10.
Раствор лактина после последнего центрифугирования пропускают через
45 колонку с аффинным сорбентом при 4 С, после чего колонку промывают охлажо, деннси до 4 С дистиллированной водой до тех пор, ока оптическая плотность вытекающей жидкости при 280 нм не снизится до О, 15. Затем через колонку пропускают О, 10 н., раствор уксусной кислоты или О, 15 M раствор хлористого натрия в 0,1 M ацетатном буфере при комнатной температуре и собирают фракции, содержащие лектин.
Наличие лектина во фракциях определяют с помощью реакции эритроагглютинации либо по оптической плотности раствора на спектрофотометре. Собранные фракции, содержащие лектин, сливают вместе и диализируют против дистиллированной воды в течение 2 ч ,о при 4 С, затеи лиофильно высушивают.
Выход готового продукта составляет
103 мг при элюции лектина уксусной кислотой и 99 мг при элюции лектина раствором хлористого натрия. Способ состоит из 13-ти стадий. Продолжительность процесса 15,5 ч. Известный способ включает 2 1-у стадию, его продолжительность 51 ч.
