Способ получения производных антибиотиков а-21978с, штамм стрептомицета sтrертомyсеs roseosporus, используемый для получения антибиотических веществ а-21978с

 

Изобретение относится к микробиологии , в частности к производству антибиотиков о Цель изобретения - упрощение способа, а также создание нового штамма, пригодного для получения антибиотических веществ А-21978С. Штамм Streptomyces roseosporus NRRL , 15998 получен путем селекции из штамма NRRL 11379. При культивировании щтаммы продуцируют антибиотический комплекс А-21978С. При дополнитель-- ном введении в процессе ферментации метилолеата и соответствующей Cg-C,- алкановой кислоты или этилового эфира капроновой кислоты или соли аммония капроновой кислоты и каприловой кислоты получают целевой продукт - соответствующие производные антибиотиков А-21978С. 2 с. и 1 з.п. ф-лы. 4 табл. СО

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К AATEHTY (21) 3964395/28"13 (22) 08.10.85 (31) 658 ° 979 (32) 09.10.84 (33) US

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР по делАм изОБРетений и ОткРытий (46) 15.01.89. Бюл. У 2 (71) Эли Лилли энд Компани (US) (72) Флойд Милтон Хабер, Ричард

Льюис Пипер, Энтони Джозеф Титц, Том Эдвард Итон; Линда Максин Форд, Отис Вебстер Годфри мл., Мери

Льюис Браун Хабер и Милтон Джозеф

Цмиевски мл. (US) (53) 615.779.931(088.8) (56) Патент США - 4331594, кл. 260-112.5, 1984 °

Патент США 11 - 4537717, кл. 260 †1.5, 1986. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ

АНТИБИОТИКОВ А-21978С, ШТАММ СТРЕПТОМИЦЕТА Streptomyces roseosporus, ИСSU, 1452484 АЗ (51)4 С 12 Р 21/04,//(C 12 Р 21/04, С 12 R 1:465) ПОЛЬЗУЕ1 Ь!Й ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ AIITHI HOTII

ЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ А-21978С (57) Изобретение относится к микробиологии, в частности к производству антибиотиков. Цель изобретения — упрощение способа, а также создание нового штамма, пригодного для получения антибиотических веществ А-21978С.

Штамм Streptomyces roseosporus NRRL

15998 получен путем селекции из штамма NRRL 11379. При культивировании штаммы продуцируют антибиотический комплекс А-21978С. При дополнитель-. ном введении в процессе ферментации метилолеата и соответствующей С -С вЂ” алкановой кислоты или этилового эфира капроновой кислоты или соли аммония капроновой кислоты и каприловой кислоты получают целевой продукт— соответствующие производные антибиотиков А-21978С. 2 с. и 1 з.п. ф-лы.

4 табл.

1452484

Изобретение относится к микробиологии, в частности к производству антибиотиков.

Цель изобретения — упрощение спо5 саба, а также создание нового штамма, пригодного для получения антибиотических веществ А-21978С.

Штамм Streptomyces roseosporus

А-21978.65 является мутантом штамма

Str.roseosporus NRRL 11379, депони. рован под номером NRRL 15998 и ха ;,рактеризуется следующими признаками.

Культурально-морфологические признаки. 15

Споровые цепи содержат более

10 спор на цепь. Поверхность спор гладкая от продолговатых до овальных.

Спорофоры от прямых до извилистых.

Размер спор 0,85 «1,78 мкм (средний). 20

Морковные пробки: воздушный мицелий — рост хороший, цвет серый с алым, субстратный — рост стабильный, цвет коричневый. Растворимые пигмеи- .25 ты отсутствуют.

Картофельные пробки: воздушный мицелий — рост хороший, цвет серый с алым, субстратный мицелий — рост обильный, цвет коричневый. Растворимый пигмент темно-коричневого цвета °

УБР М 1: воздушный мицелий — рост посредственный, цвет (W)а белый (цвет по Macr and Paul), субстратный мицелий — рост хороший, цвет (10А1) бледно-желто-зеленый. Растворимый

35 пигмент отсутствует.

УЯР М 2: воздушный мицелий обильный, (R) 5 с серо-желто-розовый, субстратный мицелий — обильный.(5D10) светлый красно-коричневый. Растворимый пигмент светло-коричневого цвета.

У$Р М 3: воздушный мицелий посредственный, (W)a белый, субстратный мицелий посредственный, (1ОА2) блед- 45 ный желто-розовый. Растворимый пигмент светло-коричневого цвета.

УБР М 4: воздушный мицелий хорошии, (W)b белый, субстратный мицелий хороший, (10Bl) бледно-желто-зеле50 ный. Растворимый пигмент светло-коричневого цвета.

УЯР М 5: воздушный мицелий посредственный, (W) 13Ьа пурпурно-белый, субстратный мицелий хороший, (377) серый желто-розовый. Растворимый пиг55 мент серо-розового цвета.

YSP 11 - 7: воздушный мицелий обильный, (R)5сЬ серый желто-розовый. Растворимый нигмент темно-коричневого цвета.

Модифицированный агар Беннета: субстратный мицелий плохо развит, бледно-желто-коричневый. Растворимый пигмент и воздушный мицелий отсутствуют.

Малат-кальциевый агар: воздушный мицелий не развит, субстратный мицелий посредственный, (7L12) красно-коричневый. Растворимый пигмент светлокоричневого цвета.

Агар Чапека: воздушный мицелий плохо развит, (W)a белый, субстратный мицелий плохо развит, беловатый.

Растворимый мицелий отсутствует.

Агар Эмерсона: воздушный мицелий плохо развит, субстратный мицелий обильный, (13,б). Растворимый пигмент отсутствует.

Глюкоза-аспарагиновый агар: воздушный мицелий хороший (W) белый, субстратный мицелий хороший, (12B2) серо-желтый. Растворимый пигмент отсутствует °

Глицерин-глициновый агар: воздушный мицелий плохо развит, субстратный мицелий обильный, (8L12) темносерый коричневый. Растворимый пигмент коричневого цвета.

Питательный агар: воздушный мицелий отсутствует, субстратный мицелий плохо развит, бледный желто-серый

Растворимый пигмент отсутствует.

Агар на томатной пасте и овсяной муке: воздушный мицелий обильный, (R)5cb серо-желто-розовый, субстратный мицелий обильный, (8L12) темно- серо-коричневый. Растворимый пигмент коричневого цвета.

Физиолого-биохимические свойства °

Из углеводов использует L-арабинозу, D-фруктоэу, D-галактоэу, D-глюкозу, D-маннит, L-рамнозу, салицин, D-ксилозу, не усваивает i-инозит, D-pафиназу, сахарозу, Меланоидные пигменты не образует.

Желатин разжижает. Тирозиновая проба отрицательная„ Растет в присутствии

1О NaCl.

Снятое молоко — вызывает слабый гидролиз. Крахмал гидролизует, нитраты в нитриты не восстанавливает.

Диапазон рН роста 5-!1.

Температурный интервал роста 25—

40 С.

1452484

Trypticase . 3,0

Декстрин 2,5Деионизирован- 25

10 мл этой культуры используют для инокулирования 450 мл среды для второй стадии вегетативного выращивания, имеющей такой же состав, как вышеописанная первичная вегетативная среда. Среду для второй стадии инкубируют в двухлитровой колбе Эрленмейера в течение 24 ч при 30 С на встряхивающем аппарате, вращающемся со скоростью 250 об/мин.

1 л вегетативной культуры второй стадии используют для инокулирования

39 л стерильной среды следующего состава, Х:

Чувствителен к антибиотикам: эритромицину (15 мкг/диск), цефалотину (30 мкг/диск), полимиксину В (300 ед/диск), стрептомицину

5 (10 мкг/диск), тетрациклину (30 мкг/

/диск), ванкомицину (30 мкг/диск).

Штамм продуцирует антибиотические вещества А-21978С.

Использование штаммов Str гозеозро-10

rus NRRL 15998 и NRRL 11379 иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Получение комплек- са А-21978С.

Получают чистую культуру и под 15 держивают ее в первой фазе жидкого азота. Str.roseosporus NRRL 15998, предварительно хранившийся в паровой фазе жидкого азота, применяют для инокулирования 50 мл вегетатив- 2р ной среды следующего состава, Е:

Соевый бульон ная вода 94,5

Инокулированную среду инкубируют в колбе Эрленмейера емкостью

250 мл при 30 С в течение 48 ч на встряхивающем аппарате, вращающемся Зо посредством дуги диаметром 2 дюйма (51,4 мм) со скоростью 250 об/мин.

Зрелую вегетативную культуру распределяют в многочисленные контейнеры (0,5 мп/контейнер) и хранят в парах жидкого азота. мл культуры, хранящейся в жидком азоте, применяют для инокулирования 80 мл вышеописанной вегетативной среды. Инокулированную вегетативную 40 среду инкубируют в.колбе Эрленмейера емкостью 250 мл при 30 С в течение

48 ч на встряхивающем аппарате, вращающемся со скоростью 250 об/мин.

0,5

Соевая мука

Дрожжевой экстракт

Глюконат каль0,5

1,0

0,02

0,02

0,0004

3 3 рН доводят до 7,0 после добавления первых двух ингредиентов и еще раз после добавления всех ингредиентов, непосредственно перед стерилизацией.

Инокулированную продуцирующую среду инкубируют в течение 6 дней в сосуде из нержавеющей стали при

30 С и аэрации стерильным воздухом с о расходом воздуха 0,5 объем/объем мнн.

Среду перемешивают обычной мешалкой ция

Хлорид калия

MgSO, 7Н,О

FeSO< 7Н,O

Sag 471 (противовспениватель) 0,03

Вода 97,9296

Следовые минералы (хлорид калия, MgSO - 7Н О, FeSO 7Н О) приготовлены следующим образом . FeSO 7H. Î (7,6 r) растворяют в концентрированной соляной кислоте (76 мл). Добавляют MgSO< 7Н О (380 r), КС1 (380 г) и деионизированную воду до получения общего объема 3800 мл. Для обеспечения необходимого количества конкретных минералов применяют 80 мл раствора на 39 л инокулята третичной стадии развития.

Инокулированную среду инкубируют в течение 24 ч в сосуде из нержавеющей стали при 30 С, Сосуд аэрируют стерильным воздухом при расходе воздуха 0,85 объем/объем/мин и перемешивают обычной мешалкой со скоростью

350-450 об/мин.

1 л инкубированного инокулята третьей стадии развития применяют для инокулирования 119 л стерильной продуцирующей среды следующего состава,7:

Соевая мука 2,2

Fe (NH <) q $04 6Н О О, 066

Декстроза, 0,825

Sag 471 0,022

Картофельный декстрин

Меласса (темное. вино) 0,275

Водопроводная вода 93,312

1452484 со скоростью 250 об/мин в течение ния раствора гидроксида аммония. Выпервых 15 ч и со скоростью 350 об/мин ход комплекса А-21978С формулы I cocпо истечении 15 ч. рН поддерживают тавляет 0,282 r на 1 л бульона по равным или более 6,5 путем добавле- окончании .ферментации

0 1ЧН, CH

II

3 .,4 .

2 I II

) N N /, . О

Я

СО 1Н>

0=. Я . I 0 I / 0

0 1 H i lМ X II NH 8

Ио) / Н Н СГ 1б""z>I.Аi. l.

Н-1, .=0 / iq 11 1 jl 1!

/ 0=. 2 0 Н . Г,ф N Н Г СО2Н

0=. =о

Н НЗ

H0C И З/ I 1! (i .. .Г r á б Н2

Г

НО С

0,2

2,0

Пример 2. Увеличенное получение А-21978С

Первичная, вторичная и третичная стадии выращивания проведены так, как 0 описано в примере 1„

Стадия продуцирования инициирована так, как описано в примере 1, за тем исключением, что, начиная с 28 ч, в ферментационную среду добавляют стерильный раствор, состоящий из 50Х (объем-объем) каприловой (октановой) кислоты и метилолеата, с расходом

0,13 мл на 1 л ферментационного бульона в 1 ч и поддерживают такой расход 4р до окончания ферментации через 144 ч.

Выход комплекса А-21978С составляет

1,255 г на 1 л бульона, т.е. на 455 больше, чем выход в примере 1. Фактор

А-21978C) (соединение формулы I,, в 4с которой R представляет собой октаноил) составляет 9Х от общего количества комплекса А-21978С, полученного по этому способу, в комплексе, полученном по способу, описаиному в приме-50 .ре 1, А-21978С> не обнаружен.

Пример 3. Увеличенное получение А-21978С g, Первичная, вторичная и третичная стадии развития инокулита выполнены так, как описано в примере 1. Стадия продуцирования инициирована так, как описано в примере 1, за тем исключением, что, начиная с 28 ч, в ферментационную среду добавляют стериль-, ный раствор, состоящий из 25Х (объем/

/объем) нонановой кислоты и 75Х метилолеата, с расходом 0,13 мл на 1 л ферментационного бульона в 1 ч и поддерживают такой расход до окончания ферментации через 144 ч. Выход комплекса А-21978С составляет 0,821 r на

1 л бульона — повьппение на 293 % по сравнению с выходом, полученным в примере 1. Фактор А-21978С > (формула (1:К==нонаноил ) составляет 10 от общего количества комплекса А-21978С, полученного по этому способу, в комплексе А-21978С, полученном по методу, описанному в примере 1, фактор

А-21978С 9 не обнаружен.

Пример 4. Увеличенное полу" чение фактора А-21978С,- (формула Х

R — н-деканоил)..

Первичная и вторичная стадии вегетативного выращивания выполнены так, как описано в примере 1. На третичной стадии применяют 800 мл вторичной культуры инокулята для инокулирования 950 л стерильной среды для третичного выращивания инокулята следующего состава, :

Декстроза 2,0

Карбонат кальция

Соевая мука

145

Дрожжевой экстракт 0,1

КС1 0,02

М880, 7Н,О 0,02

РеЯО . 7Н О 0,0004

Sag 471 (противоспениватель) 0,02

Вода 95,6396

Раствор следовых минералов (KC1, MgSO 7Н О, FeSO 7Н О) приготовлен так же, как описано в примере 1 °

Инокулированную среду инкубируют в течение 24 ч при 30 С в сосуде из нержавеющей стали. Сосуд аэрируют стерильным воздухом с расходом воздуха 0,8 объем/объем/мин и перемешивают обычной мешалкой. 1 л этого инокулята третичной стадии применяют для инокулирования 119 л среды на стадии продуцирования, имеющей состав, приведенный в примере l. Стадию продуцирования тоже иницируют, как описано в примере 1, за тем исключением, что, начиная с 28 ч, в ферментационную 25 среду подают стерильный раствор, состоящий из 50Х (объем/объем) капроновой (декановой) кислоты и 50 . метилолеата, при расходе 0,26 мл/л ферментационного бульона в 1 ч и под- д0 держивают такой расход до окончания процесса ферментации через 283 ч. Выход комплекса А-21978С составляет

1,94 r на 1 л бульона,,это на 687 Х больше выхода, достигнутого в примере 1. Концентрация фактора А-21978Cro (формула 1:R — н-деканоил) составляет 1,63 r на 1 л или 84 . от общего количества комплекса А-21978С. Это на 13583 Х больше количества

А-21978С,, полученного по методике, описанной в примере 1.

Пример 5. Вариант способа увеличенного получения А-21978Cto

Первичная, вторичная и третичная pr„ стадии развития инокулята выполнены так же, как описано в примере 1. Стадия продуцирования инициирована так же, как описано в примере 1, за тем исключением, что, начиная с 28 ч, в Sp ферментационную среду добавляют стерильный раствор, состоящий из 25 (объем/объем ) этилового (сложного) эфира капроновой кислоты (этилкапрата ) и 75 метилолеата, при расходе .

0,13 мп/л ферментационного бульона в

1 ч и поддерживают такой расход до окончания процесса ферментации через

144 ч. Выход комплекса А-21978С сос2484

8 тавляет 1,022 г/л увеличение на 362 по сравнению с выходом, достигнутым в примере 1. Концентрация фактора

А-2!978С составляет 0,202 г/л или

20 . от общего количества комплекса., А-21 978 С.

Пример 6. Вариант способа увеличенного получения А-21978С, Первичную и вторичную стадии вегетативного выращивания проводят так, как описано в примере 1. Третичную стадию выращивания инокулята проводят так, как описано в примере 4, за тем исключением, что объем среды составляет 1900 л и продолжительность стадии увеличена до 48 ч. Скорость аэрации 0,3 об/об. в 1 мин в течение первых 24 ч, 0,45 об./об. в 1 мин в течение 24-40 ч и 0,90 об./об. в lмин в течение 40-48 ч. Стадия продуцирования инициирована так, как описано в примере 1. После 23 ч в ферментационную среду вводят 0,004Х дрожжевого экстракта, а начиная с 36 ч — раствор глицерола и деканоата аммония при расходе О, 84 мл/л ферментационного бульона в 1 ч. Питательный раствор содержит глицерин (3600 r), деионизированную воду (9000 мл), капроновую кислоту (1 л) и концентрированный раствор гидроксида аммония (630 мл).

Расход поддерживают на этом уровне до окончания ферментации (143 ч). Выход комплекса А-21978С составляет

1,772 г/л. Концентрация фактора

А-21978С, составляет 0,739 г/л или

42 . от общего количества комплекса

A-21978С.

Пример 7. Увеличенное получение А-21978С

Первичную, вторичную и третичную стадии получения инокулята проводят так, как описано в примере 1. Стадия продуцирования инициирована так, как описано в примере 1, за тем исключением, что, начиная с 28 ч, в ферментационную среду вводят стерильный раствор, состоящий из 25 (об./об.) ундекановой кислоты и 75Х метилолеата, при расходе 0 13 мл на 1 л ферментационного бульона в 1 ч до окончания процесса ферментации через

144 ч. Выход комплекса А-21978С составляет 1,62 г/л. Концентрация фактора А-21978С, (формула 1: R — ундеканоил) составляет 0,70 г/л или 43Х от общего количества комплекса А-21978С.

В комплексе А-21978С, полученном по

1452484!

Комплекс

3310 330

3050 3050

2910 2910

2840 2840

1655 . 1650

1540 1540

1450 1445

1395 1395

3300 3310

3040 3050

2910 2910

2840 2840

1650 1665

1535 1535 !

450 1450

1395 1395!

655 1650

1650

1395

1395 1390

1 Г T

1310

1240

1215

1220 1225

1160 1160

1065 1065

1160

1160 1160

1060 1065

1155

1155

1065

1060

1065 способу, описанному в примере I, фактор А-21978С« не обнаружен.

Пример 8. Увеличенное получение А-21978С

Первичная, вторичная и третичная стадии культивирования инокулята вы полнены так же, как описано в примере 1. Стадия продуцирования иници ирована так же, как описано в примеI ре 1, за тем исключением, что, начи наяя с 28 ч, в ферментационную среду вводят стерильный раствор, состоящий ! ,,из 25% (объем-объем) лауриновой кис. лоты и 75% метилолеата, при расходе !

; 0,13 мл/л ферментационного бульона в 1 ч до окончания ферментации через

; 144 ч. Выход комплекса А-21978С сос: тавляет 1,12 г/л. Концентрация фак: тора А-21978С (формула I:R — додека-! ноил) составляет 0,372 г/л или 33% от общего количества комплекса

,А-21978С.

Пример 9. Вариант получения комплекса A-2)978C.

Комплекс А-21978С получен по ме.тодике, описанной в примере 1, но с применением культуры Streptomyces

roseosporusNRRL 113?9.

ИК-максимумы, см-, jc, 1 с, (с, Пример 10. Вариант способа увеличенного получения А-21978Cfo .

Получают антибиотики А-2!978С„ по методике, описанной в примере 6, 5 но с применением куль:уры Streptomyces roseosporus NRRL l!379.

Пример 11 ° Получение комплекса А-21978С во встряхиваемой колбе. и Применяют методику, описанную в примере 1, но в условиях встряхива мой колбы с применением следующей ферментационной среды, г/л .

Глюкоза 7,5 !

5 Декстрин 30

Гидролизованный ферментом казеин 5

Пептон 5

20 Меласса 2,5

Деионизированная вода До1л

Выход комплекса А-21978С на зтой ферментационной среде составляет

1800 мкг/мл бульона.

В табл.1 представлены инфракрасные спектры поглощения комплекса

А-21978С и факторов (в виде натриевых солей, таблетки из бромистого

ЗО калия) °

Таблица ) комплекса А-21978С и факторов

c, (сc, ) с, 3310 3320 3300

3040 7050 3045

2910 2920 20!О

2935 2850 2840

1535 1525 1525

1450 1455 1445

1225 1220 1215

1452484

Продолжение табл. 1

Ж-максимум, см-, комплекса А-21978С и факторОв

С С С С Су

745 745 745 740 745 735

745

645

555

518

Прадолненне табл.2

3,89

2,502

Ser

3,93

3-МеС1. и 2,528

2,04

1,15

Gly

1,00

l,565

1,630

Ala

1,12

l,521

l,92

Trp

),551

35

Asp

3,81

1,48

Thr

1,358

1,342

3,92

Молярная доля

Найденное количество, мкмолей/мг

Аминокислота

3,88

Ser

3,84

3-МеС1 и 1,324

2,06

l 800

1,388

3,96

Gly

2,24

Asp

1,00

Аlа

3,91

2,513

Thr

Оптическое вращение Вращение

Фактор А-21978С

Со +11,9 (с 0,?,Н О)

С1 +16,9 (с 0,?,H O)

С +18,6 (с 0,9,Н О) 20

С +20,9 (с 0,4, Н О)

С +14,8 (с О,?,Н О)

Cs +17,9 (с 0,7,Н О)

Факторы комплекса А-21978С наиболее удобно разделять и идентифицировать с помощью тонкослойной хроматографии на силикагеле с обращенной фазой (Quantum, С ). Предпочтительным растворителем является смесь— 3 вода: метанол: ацетонитрил (45: 15: 40), содержащая 0,27. пиридина и 0,2Х уксусной кислоты. С помощью этой системы были получены следующие значения

Rf:

Фактор А-21978С Значение Ы

Со 0,71

С1 0,64

С1 0,56 ь 0,47 40

С Р,63

С, 0,53 н-Октановое производное (С ).

УФ (Н О), Л„„,кс, нм: 220 (Е- 47,500);

255 (E 11,000); 262 (810,000);

282 (Е 4950); 290 (E 4800); 365 (Е 4900).

Аминокислотный анализ приведен в табл. 2.

Таблица 2

В использованных условиях Asn гидролизуется до Asp. н-Нонановое производное (С g) .

УФ (н О), Лб,акс,нм: 220 (E46,000))

250 (E 9,500); 255 (Е11,250); 261 (F 10,750); 280 (E 4975); 288 (E 4250); 364 (E 4000).

Аминокислотный анализ приведен в табл.3.

Т а б л и ц а 3

1452484

l4

Продолжение табл,3

Продолжение табл.4

1 т 2

l 368

1,256

1,240

1,95

Куп

Ser

4,87

2,459

1,66

Trp

3-МеС1 и 2,465

4,88

1,88

Orn

1,09

2,07

10 Gly

1,00

1,526

А1а

1,10

1,577

1,408

1,529

Куп

1,77

Trp

1,00

Orn

Найденное количество, мкмолей/мг

Молярная доля

Аминокислота

4,00

4,93

2,15

2,488

Asp

Thr о ян

CH

lI 1

11 о

М

0 ° -.-- --.-0 соын, 1, 3

° =о ./ СИ il !I lif i!l .l о ц,ф — /NH CO Н М ./

° 2 I о=, Н сн, о 1д

Н

ÍÎ,С И-11 1! > . °

X. r < r,r x.r r Hg

Г но,с

В использованных условиях Asn гидролиэуется до Asp. н-Декановое производное (С,„).

Вычислено,%: С 53,36; H 6,28;

N l4,69; 0 25,67.

С, Н „„М,0 >, (м.в. 1620).

Найдено,7: С 53,15, Н 6,13;

N 14,95, 0 25,55.

Масс-спектр M.S (М) 1620.

УФ (Et OH), нм: 223 (E 53,819);

260 (E 9531); 281 (f. 6029); 289 (Е 5340); 365 (Е 52! 9) .

Ундекановое производное С „ .

УФ (Н 0) э Л мл кс, нм: 220 (Е46, 250); 25

249 (Е 8550); 255 (Е 10,500); 261 (E l0,250); 264 (Е 4950); 288 (E 4000); 264 (4000) .

Аминокислотный анализ приведен в табл.4.

Таблица 4

В использованных условиях Asn гидролизуется до Asp..

Додекановое производное (С ) имеет характеристики, аналогичные

А-21978С .

Использование изобретения позволяет получать как антибиотический комплекс, так и производные антибиотических факторов более простым способом.

Формула изобретения

1. Способ получения производных. антибиотиков А-21978С формулы

452484

Составитель Г. Смирнова

Техред Л.Сердюкова Корректор М Самборская

Редактор Н.Киштулинец

Тираж 500

Заказ 7096/58

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1!3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

I где R — С -С,> -алканоильная группа, отличающийся тем,что, с целью упрощения способа, штамм

Streptomyces roseosporus NRRL 15998 или NRRL 11379 культивируют в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, в условиях аэрации и перемешивания в присутствии метилолеата и соответствующей С>-С, -алкановой кислоты или этилового эфира капроновой кислоты, или соли аммония капроновой кислоты и каприловой кислоты с последующим выделением целевого продукта.

2. Способ по п.1, о т л и ч а ю5 . шийся тем что используемая С В

С -алкановая кислота является капрои новой кислотой, нонановой кислотой, ундекановой кислотой, лауриновой кислотой или их эфиром или солью.

3. Штамм стрептомицета Streptomyces roseosporus NRRL 15998, используемый для получения антибиотических веществ A-21978С.