Штамм вируса гепатита утят для изготовления вакцины против вирусного гепатита утят
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
PECnvsnw
239 А1
09) 1И) (51) 5 С 12 0 7/00
ОПИСАНИЕ И3ОБРЕТЕНИЯ
Н Д ВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
КЕ
11Л БЮ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОЗНРЫТИЯМ
Г1РИ ГКНТ ССО (46) 15, 09. 90. Бюл. ш 34 (21) 4097146/30-13 (22) 15. 04. 86 (71) Украинский научно-исследовательский институт птицеводства (72) И.Ю.Безрукавая, А.И.Фотин и М.К.Скоробагатько (53) 576.8.094.29(088.8) (56) Результаты разработки и изучения сухой вирус-вакцины против вирусного гепатита утятиз штамма"ВГНКИ".
Материалы к заседанию НТС МСХ СССР, М.,1983.
Временная инструкция по изготовлению и контролю жидкой вакцины про. тив вирусного гепатита утят из штамма "ЗМ-УНИИП",. утвержденная ГУВМСХ
СССР, 1971. (54) ШТАММ ВИРУСА ГЕПАТИТА УТЯТ ДЛЯ
ИЗГОТОВЛЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА УТЯТ .(57) Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и касается нового штамма вируса гепатита утят, пригодного для получения вакцины против
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и касается создания нового штамма вируса гепатита утят, пригодного для получения вакцины против вирусного гепатита утят.
Цель изобретения — новый штамм вируса гепатита утят, соответствующий по антигенной структуре- эталонному и циркулирующим вирусам и характеризующийся высокой иммуногенностью и высокой репродуктивной ак6- ЖГ вирусного гепатита утят. Цель изобретения — новый штамм вируса гепатита утят, соответствующий по антигенной структуре эталонному и циркулирующим вирусам и характеризующийся высокой иммуногенностью и высокой репродуктивной активностью в развивающихся эмбрионах кур. Адаптационные свойства. Исходный возбудитель вирусного гепатита утят адаптирован к куриным эмбрионам, при этом сохраняет патогенность для эмбрионов и иммуногенность для утят. Титр инфекционности возбудителя из штамма "КУНИИП" на куриных эмбрионах составляет 10 -!О ЭХЩ 50/0,2 мп. На введение штамма "К-УНИИП" в организме утят образуются вирус-нейтрализующие антитела. Штамм "К-УНИИП" вируса гепатит утят предлагае ся использовать как продуцент вакцины против вирусного гепатита утят, которая стимулирует у привитых утят напряженный иммунитет, гивностью в развивающихся эмбрионах кур (РЗК) .
Штамм выделен от павших bio причине вирусного гепатита утят, затем аттенуирован и адаптирован к 8-9дневным Р3К. Хранится в коллекции микроорганизмов Всесоюзного государ,ственного научно-контрольного инстиЯ тута ветеринарных препара гов Госагропрома СССР под номером 08 и называется "К-УНИИП".
59239
4 в течение 24-72 ч при температуре
37+1 С и относительной влажности 6070Х. Зараженные эмбрионы просматривают с помощью овоскопа 2 раза в день
s течение 3 сут. Все эмбрионы, погибшие эа первые 24 ч после заражения, выбраковывают, а погибшие после 24 ч и позднее используют для отбора ви10 руссодержащего материала, предварио тельно охладив из при 2-4 С в течение 2-3 ч. Эмбрионы вскрывают в условиях строгой асептики, Стерильными ножницами срезают часть скорлупы
15 в области расположения воздушной камеры, стерильным пинцетом снимают одскорлупную оболочку и аллантоисноамннотическую (зкстраэмбриональную) жидкость отсасывают с помощью вакуумнасоса в стерильные флаконы емкостью не более 1 л и добавляют антибнотики., преимущественно пенициллин и стрептомицин по 1000 ЕЛ/мл вакцины или гентамицин 2-2,5 мкг/мл, а также ниста25 тин в количестве 500-1000 ЕД/мл.
Из каждого флакона делают высевы экстраэмбриональной жидкости на питательные среды. До выяснения результатов проверки экстраэмбриональной
ЗО жидкости на стерильность флаконы с вируссодержащим материалом хранят при +2-4 С. Для изготовления вакцины используют только свободную от контаминации бактериями и грибами аллантоисно-амниотическую жидкость, кото-: рую сливают в одну емкость в асептических условиях, смешивают" и добав ляют антибиотики,.преимущественно пенициллин и стрептомицин по
1000 ЕД/мл или гентамицин 2-2, 5 мкг/мп, а также нистатин в количестве 5001000 ЕД/мл. После смешивания вакцину разливают в стерильные флаконы емкостью 100 иля 200 мп. Флаконы быстро закрывают реэчновыми пробками и об45 катывают металлическими колпачками.
Все изготовленные серии вакцины подвергаются контролю на стерильность, безвредность, биологическую активность и нммуногенность, 5А
55 з 14
Морфологические признаки. Вирусные частицы округлой формы величиной 20-40 нм, Культуральные свойства. Штамм
"К-УНИИП" репродуцируется s 8"9-дневных РЭК.
Адаптационные свойства. Штамм
"К-УНИИП" вирусного гепатита, утят адаптирован к куриным эмбрионам. При этом штамм сохраняет патогенность для РЭК и РЭУ и иммуногенность для утят. Биологическая активность штамма "К-УНИИП" на РЭК 6-7 18 ЭЛД
50/0,2 мл, а биологическая активность штамма "ЗИ-УНИИЙ" 5"6 1g
ЭЛД 50/0,2 мл на РЭУ, т.е. гомологичной для исходного вируса среде культивирования.
Антигеиные свойства. Родственен штаммам вируса гепатита, выделенным в СССР. На введение штамма КУНИИП" в организме утят образуются вирус нейтралнзующне антитела. 100Х-ная устойчивость утят к эксперименталь-. ному заражению вырабатывается при введения 10000 ЭЛД 50/0,2 мл штамма
"К-УНИИП" и 100000 ЭЛД 50/0,2 мл штамма "ЗИ-УНИИП".
Вирулентные свойства. Штамм вирулентен для однодневных утят при внутримьппечном введении 5 10 ЭЛД
50/0,2 мл. При заражении 8-9-дневных
РЭК вызывает их гибель через 48-.72 ч.
1ибель РЭУ при заражении их вирусом гепатита из штамма "ЗИ-УНИИП" наступает через 72-96 ч. Стабильность биологических свойств прослежена до
200 пассажа на РЭК.
Штамм "К-УНИИП" вируса гепатита утят безвреден, вызывает иммунитет у 100Х привитых утят при внутримышечной аппликации в дозе 10 ЭЛД
50/0,2 мл (разведение 1:100), биоло гическая активность в пределах 10
10 ЭЛД 50/0,2 мл и может быть использован в качестве вакцинного.
Пример. Изготовление жидкой вирус-вакцины против вирусного гепатита утят.
Куриные эмбрионы заражают в 8-9дневном возрасте в аллантоисную полость суспензйй вируса из штамма
"К"УНИИТ" в дозе 10 -10 ЭЛД 50/0,2 мл (разведенным 1:100 на физиологическом растворе), а затем инкубнруют их
Формула и зо брет ения
Штамм вируса гепатита утят ВГНКИ
В 8 для изготовления вакцины против вирусного гепатита утят.
