Способ выявления чувствительности организма к антигенам

 

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и решает вопросы, связанные с выявлением сенсибилизации организма к различным антигенам. Цель - ускорение и упрощение выявления. Определяют морфологические изменения нуклеолярного аппарата лимфоцитов периферической крови после воздействия антигеном и при превышении количества лимфоцитов с зоной просветления вокруг ядрышка (ядрышек) в опыте по сравнению с контролем на 16% и более выявляют чувствительность организма к данному антигену. Использование микрообъемов крови, взятой из пальца обследуемого лица, позволяет установить этиологический фактор инфекционно-воспалительного заболевания у новорожденных и детей раннего возраста.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51) 5 С 01 N 33/53

1.)

I (ф

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) . 4207016/28-14 (22) 09,03.87 (46) 07,01.90. Бюл. N - 1 (71) Институт клинической и экспериментальной медицины СО АГ1Н СССР (72) А.И.Аутеншлюс, Л.О,Гаврилова и В.Д.Петерсон (53) 61 5.375 (088.8) (56) Никитин В,Г1. Справочник методов иммунологии. 1982, с. 113-116, (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕН1Я ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ОРГАНИЗМА К АНТИГЕНА11 (57) Изобретение относится к медицине и ветеринарии .и решает нопросы, связанные с выявлением сенсибилизании

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, может найти применение в диагностике заболеваний, преимушественно предназначено для использования в педиатрии и, кроме того, может быть использовано в терапии.

Пелью изобретения является ускорение и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим обра зом.

В пробирки с 0,02 мл 57.-ного трехзамещенного нитрата натрия добавляют

О, 08 мл периферической крови, взятой из пальца обследуемого лина. В одну пробирку добавляют 0,02 мл раствора антигена, например туберкулина, ипи токсоплазменного антигена в концентрации 2 мкг/мл (опыт), а н другую такое же количество физиологического

„„в 0„„,ш ц щя А 1

2 организма к различным антигенам, Пель — ускорение и упрощение выявления. Определяют морфологические изменения нуклеолярного аппарата лимфоцитон периферийной крови после воздействия антигеном и при превышении количества лимфоцитон с зоной просветления вокруг ядрышка (ядрышек) в опыте по сравнению с контролем Hà 161 и более выявляют чувствительность организма к данному антигену. Использование микрообъемов крови, взятой из пальца обследуемого лица, позволяет установить этиологический фактор инфекционно-носпалительного заболевания у новорожденных и детей раннего возраста. раствора (контроль) . Пробирки помещают в термостат и инкубируют 6 ч при о

37 С, после чего готонят мазки, окрашивают их раствором метиленоного синего в концентрации 0,015Х н течение 3 мин, высушивают на воздухе при комнатной температуре и подсчитывают под микроскопом (об. 90, ок. 7,масll к ляная иммерсия) процент лимфоцитов с зоной просветления. При превышении процента лимфонитов с зоной просветления в опыте по сравнению с контролем на 167 и более выявляют чувст- Ф вительность к данному антигену. При В концентрации антигена менее 2 мкг/мл количество лимфоцитон с зоной просветления в опыте снижается, что не позволяет выявить чувствительность организма к антигенам. При концентраl 534402

Формула изобретения

Составитель А.Бонарцев

Редак то р В. Петраш Техред N.Дидык Корректор С.111екмар

Подписное

Тираж 501

Заказ 39

ВНИИПИ Го-ударственного комитета по изобретениям н открытиям при ГКНТ СССР

113035, 11осква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óæãoðîä, ул. Гагарина, 101 пии антигена более 2 мкг/мл, например

10 мкг/мл, отмечают повышение количества лимЬопитов с зоной просветления и у лиц, не чувствительных к данному антигену.

Пример 1. Ребенок Т.,2 мес., с диагнозом 1желтуха . Ничем не боЛел, вскармливался только грудным молоком, в весе прибавил за 2,5 мес

2,4 кг. В1% привит в родильном доме.

В контроле 747. лимфоцитов с зоной

Просветления вокруг ядрышка (ядрышек), в опыте с туберкулином 96%, а в опь1те с токсоплазменным антигеном ! 1 э

76%, т,е. отмечается увеличение на уберкулин íà 29, 7%, а на токсоплазменный антиген на 2,77, его мать, 23 r., практически здорова, количество лимфоцитов с зоной просветления

68/ (контроль), а в опыте с токсоплазменным антигеном 707., т.е. увеличение произошло всего на 2,9%, что не входит в установленные критерии поло ж тельных показателей, 25

Пример 2, Ребенок Т.,1,5 мес, находился в отделении патологии новорОжденных с диагнозом. врожденный т ксоплазмоэ, субкомпенсированная гидропефалия. РСК с токсоплаэменным антигеном 1:1О ++++, 1:20 ++. В контроле количество лимфоцитов с зоной просветления 74, в опыте с токсоплазменным антигеном 947, т.е. произошло увеличение на 27,0 ; Его мать, 35

27 лет, ничем не болела. Беременность протекала начиная с 12-14-й недели с субфебрильной температурой, на токсЮплазмоз во время беременности не

|обследована, РСК после родов положительная в титре 1: 20++++. Количество лимфоцитов с зоной просветления в опыте с токсоплазменным антигеном увеличилось на 18,27. по сравнении с контролем.

Пример 3. Ребенок С ° 1 мес. и 3 нед. Находилась в отделении патологии новорожденных с диагпозом. врожденный токсоплаэмо 3, менингоэнпефалит, судорожный синдром, микропефалия. PCK положительная в титрах

1:10 ++++. Б13 < не привита. Количество лимфоцитов в опыте с туберкулином увеличилось íà 10, 77., т.е. увеличение не достоверно (менее 167) . В опыте с токсоплаэменным антигеном количество лимфопитов с зоной просветления увеличилось на 32,17.. Ребенок погиб в возрасте 4 мес. На вскрытии был поставлен диагноз врожденный токсоплазмоэ.

Таким образом, предлагаемый способ ускоряет до б ч и упрощает за счет снижения трудоемкости процесс выявления чувствительности организма к антигенам используя микрообъемы жидкости и, следовательно, применим в педиатрии, особенно в неонатологии, что дает воэможность проводить "раннюю диагностику и своевременно начать лечение заболевания, чем достигается экономический и социальный эффект.

Способ выявления чувствительности организма к антигенам путем культивирования клеток крови в присутствии антигена с последую@им определением в окрашенных мазках клеток изменения процентно го содержания тран сфо рмированных лимфоцитов, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа, используют микрообъемы крови йз пальца, культивирование клеток крови проводят в тео чение 6 ч при 37 С, мазки клеток окрашивают О, Q l 5X-ным раствором, метиленового синего, процентное содержание трансформированных лимфоцитов on— ределяют по количеству лимфоцитов с зоной просветления вокруг ядрышек и при его повышении на 16% и более выявляют чувствительность к данному ан- тигену.