Способ получения гидрохлоридов производных дистамицина а

 

Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению новых производных дистамицина А ф-лы @ где R - группа а) -CON(NO)R<SB POS="POST">4</SB>, где R<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, незамещенный или замещенный галогеном или б)-CO(CH<SB POS="POST">2</SB>)<SB POS="POST">M</SB>-R<SB POS="POST">2</SB>, где R<SB POS="POST">2</SB> - галоген, оксиранил, метилоксиранил, азиридинил, циклопропил

M=0,1 или 2, в форме соли с хлористоводородной кислотой, обладающих противовирусной и противоопухолевой активностью. Цель - разработка способа получения новых соединений, обладающих указанными свойствами. Получение ведут реакцией хлористоводородной соли N - деформил дистамицина с соединением ф-лы Z-R, где R - указано выше

Z - трихлорфеноксиили пивалоилоксигруппа. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

) ",,"." ъ, с .I>

5/ : <сA

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТ,Ф

Н Н

RHN N N

1 I .) )-СН;С1-1,-g

NH

CH> QH> (:Н ный ипи замещенный галоген

I I кн

С 3 / Я / lg. н-сн;сн;с

0, 0 i 0 сн сн сн

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР

1 (21) 4027842/23-04 (22} )5.07.86 (3)) 85)7923 (32) 16.07.85 (33)"СВ (46) 07.01.90. Бюл . )) 1 (71) Фармиталиа Карло Эрба С.п.А.(IT) (72) Федерико Аркамоне, Никола Монджелли и Фабио Анимати (IT) где R — группа а) -ГОН(МО) R где

К1 С!-С4-а ки неэамещенный или

i замещенный галогеном или б) -СО(СН )

rtl

R z, гле R < — галоген, оксиранил, метилоксиранил, азиридинил, циклопропил, m = 0,1 или 2, в форме соли с хлористоводородной кислотой, обладающих пр тивовирусной и противоопуИзобретение относится к получению новых производных дистамицина А общей

Формулы где R — группа а) -CON(NO)R,, где

R, — С,-С 4-алкил, незамещен„.SU„„5 5378 A 3 (д1) 5 С 07 D 207/34

2 (53) 547. 749. 07 (088. 8) (56) Nature, ) 964, 203, 1064. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРОХЛОРИДОВ

ПРОИЗВОДНЫХ ДИСТАМИЦИНА А (57) Изобретение относится к гетероциклическим соединениям, в частности к получению новых производных дистамицина А ф-лы холевой активностью ° Цель - разработка способа получения новых соединений, обладающих указаннымисвойствами.

Получение ведут реакцией хлористоводородной соли N-деформилдистамицина с соединением ф-лы Z-R где В ука- р зано выше, Z -трихлорфенокси- или Фд пивалоилоксигруппа. 1 табл.

1 ном. или б) -СО (СН )„,-Rz, где

R . .— галоген, окснранил, метилоксиранил, азиридинил, циклопропил, m 0,) или 2, в форме соли с хлористоводородной кислотой, обладающих противовирусной и противоопухолевой активностью.

)535378

Целью изобретения является разработка на основе известных приемов способа получения новых соединений, обладающих ценными фармакологически5 ми свойствами при низкой токсичности.

Пример l . В охлаждаемый льдом раствор N-деформилдистамицин A гидрохлорида (0,132 г) .в 2 мл диметилформамнда (ДМФ) и 78 мг 2,4,5-трихлорфенил"N-метилнитрозокарбамата по каплям добавляют раствор диизопропилзтиламина (0,041 мл) в

2 мл ДМФ. Полученный раствор перемешивают в течение 40 мин при 0 С.

Реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают с помощью колоночной хроматографии, в результате получают 62 мг N-деформил-N-(N -метил-11- нитрозокарбамоилднстамицин А гидрохлорида.

Аналогично получают Ю-деформип-N-fN -(2-хлорэтил)-N íèòðîçîêàðбамоил )-дистамицин А гидрохлорид.

Il p и м е р 2. В раствор (2P, 25

ЗК)-3-метилоксирана карбононой кислоты (153 мг) в безводном тетрагидрофуране (ТГФ) 4 мл, охлажденный до -20 С, добавляют N-метилморфолин (0,165 мл), а затем пивалоилхлорид (0,184 мл). Полученную суспензию перемешивают при -20 С в течение о

20. мин и затем смесь вливают в охлажденный раствор N-деформилдистамицина А (500 мг) в ДМФ (10 мл) и NaHCO

35 (80 мг). Смесь перемешивают в течение 30 мин при 0 С и затем в течение

4 ч при комнатной температуре. Растворители выпаривают в вакууме досуха и остаток хроматографируют на двуоки- „ си кремния (растворитель: СНС1 (80)/

/СН OH (20)) и получают 280 мг N-деформил-N-(3-метил-(2R,ЭК)-оксиран-l

-карбонил )-дистамицин А гидрохлорида.

Аналогично получают следующие сое- 45 динения:

N-деформил-N-(2-хлорзтипкарбонил) о

-дистамицин А гидрохлорид, т.пл.160 С (разложение);

N-деформил-N-(3-метилоксиранкар50 бонил)-дистамицин А гидрохлорид, N-деформил-N- (циклопропил к арбо» нил)-дистамицин А гидрохлорид, N-деформил-N — (1 — (а зиридин) карбонил) дистамицин А гидрохлорид, N-деформил-N-(бромметилкарбоннл)55

-дистамицин А гидрохлорид;

N-деформип-N-(хлорметилкарбонил)-дистамицин А гндрохлорид;

N-деформил-N-(оксиранкарбонил)—

-дистамицин A гидрохлорид.

Предлагаемые соединения в значительной степени подавляют репродук-. тивную активность патогенных вирусов и защищают клетки тканей от вирусных инфекций. Например, они проявляют активность против ДНК-вирусов, таких как вирусы лишая и аденовирусы, например простого и опоясывающего лишая против ретровирусов, таких как вирусы саркомы, и лейкемии.

Так, например, вирусы лишая и рес" пираторные синсициальные вирусы испытывали следующим образом в жидкой среде. Ceps Bo HIi e Be eH соединений от 200 до 1,5 мкг — мл распределяют на 96 микропластин для тканевой культуры по 0,1 мл/пластину.

Суспензии клеток(2 ° 10 t:ëåòîê/èë), неинфецированные для контроля на цитотоксичность или инфецированные

5 10 TC1D вирус j êëåòêà, немедленно добавляют в количестве 0,1 мл/пластина.

Через 3-5 дней инкубирования при

37 С в 57. СО культуры подвергли микроскопическому исследованию и с определили максимальную толерантную дозу (МТД) и минимальную ингибируюшую концентрацию (МИК). МТД представляет собой максимальную концентрацию соединения, которая допускает рост монослоев, аналогичных контрольным по плотности и морфологии. 1413K представляег собой минимальную концентрацию, которая определят снижение цитопатологического эффекта по сравнению с инфицированными контрольными ,пробами.

Соединения считают активными, ког да их индекс активности рассчитан как отношение МТД/МИК 3 2.

Предлагаемые соединения проявляют цитостатические свойства против опухолевых клеток, в результате чего их можно использовать для замедления роста различных опухолей.

В таблице показ аны данные активности некоторых соединений предлагаемой формулы, идентифицированных внутренним кодом, в сравнении с наиболее изученным известным соединением дистамициномА.

Соединения, указанные в таблице, испытывались на цитотоксичность (что является выражением противоопухоле6

Продолжение таблицы

35378

FCE 24743

FCE 24573

96

1,20

" FCE 24609 — хлоргидрат N-деформил-N- (бромметип)— карбонил дистамицина А, FCE 24561 — хлоргидрат N-деформил-N-(оксиранкарбонил) дистамицина А, FCE .24559 — хлоргндрат N-деформил-К- 1-(азирндин)карбонил дистамицина А, FCE 24743 - хлоргидрат N-деформил-N-(N -метил-N-нитрозо1 карбамоип) дистамици20 на А.

FCE 24573 - хлоргидрат N-деформил-К- (N - (2-хлорзтил) -И—

"нитрозокарбамоил ) дис1 тамицина А.

25. Формула изобретения

Способ получения гидрохлоридов про, иэводных дистамицина А общей формулы 1 50

26

1,20

2,02

1Дистамицин А

FCE 24609

FCE 24561

° FCE 24559

Н Н

ВНИ N Ы

1 I -СН,-СН;С

I О I О I 0

NH

СН СН3 СН где R-группа а) -СОК(ИО )В,, где R„C, -С -алкнл, неэамещенный или замещенный галогеном

40 или б) -CO (CH ) -R» где

R < — галоген, оксиранип, Н Н

СН3 СНЗ CH) Н

I СН Л ..NH2 с

5, 15 вой активности) на мьппиных клетках, поврежденных лейкемией Ь 1210.

Испольэовали клетки иэ опухоли in

vivo и помещали в клеточную культуру. Клетки использовали до десятого протока. Цитотоксичность определяли подсчетом выкивших клеток после 4 ч обработки и 48 ч роста в среде, свободной от лекарственных препаратов.

Процент роста клеток в обработанной среде сравнивали с процентом контрольных клеток. Значения LD (дозы, ингибирующие 50Х клеточного роста до отмеченного к контрольным) подсчитывали на кривой дозе-реакция . подвергают взаимодействию с соединением общей формулы

Z-P метилоксиранил, азиридинил, цикло пропил, ш 0„1 или 2, отличающий ся тем, чтохлористо-водородную соль N-деформипднстамицина формулы где R имеет указанные значения, Z — трнхлорфенокси- нли пивалрилокснгруппа.