Способ диагностики сифилиса
Изобретение относится к области медицины, в частности к кожно-венерологическим болезням. Целью изобретения является ранняя диагностика. Для этого проводят определение активности церулоплазмина в сыворотке крови натощак модифицированным методом Г.А.Бабенко и клинико-анамнестическое обследование больного, при снижении уровня активности церулоплазмина относительно нормы и наличия предшествовавшего контакта с больным, язв и эрозий, характерных для этой инфекции, диагностируют сифилис. Способ позволяет выявлять сифилис уже на стадии ранних его форм и диагностировать его с высокой степенью достоверности (100%). 1 табл.
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН (5))5 С: 01 М 33/68
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГННТ СССР
1 (21) 4600107/30-14 (22) 10.11.88 (46) 30.04.90. Бюл. !» 16 (71) Киевский мецицинский институт им. акад. A.A.Hoãoèoëüöa (72) В.И.Степаненко, В.Г.Коляденко, В.Б.Терлецкий и В.Ф. .1айданюк (53) 616.07 (088.8) (56) Овчинников Н,И. и др, Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем. И.: Иедицина, 1987, с. 250. (54)СПОСОБ ЦИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА (57) Изобретение относится к медицине, в частности к кожно-венерологиИзобрегение относится к медицине, в частности к кохшо-венерологическим болезням.
Целью изобретения является ранняя диагностика. Способ осуществляется следуюцим образом.
Определение церулоплазмина проводят натощак по методике Г.А.Бабенко.
Используют следующие реактивы: 0,5 ный раствор соляпокислого перафенилендиамина, если нет его, то можно воспользоваться демител-пара-Ьенилендиамином или диэтил-пара-Ьенилендиамином (если готовят 100-200 мл реактива, то сохранять его пух<но в емкости с притертой пробкой в холодильнике); физиологический раствор 0,1 н.ацетатный бубер рН =- 6,0 + 0,05;
0,5Х-ный раствор гидроксиламина со„„SU „„1561043 А 1
1 ческим бале..зпям. Целью изобретения является ранняя диагностика. Пля этого проводят определение активности церулбплазмипа в сыворотке крови натощак модиЬицировапным методом
Г.А, Бабенко и клшшко-анамнестическое обследование больного, при свив женин уровня активности церулоплазмина относительно нормы и наличии предше ствова вюего конти,", а с больным, язв и эрозий, характерных для этой
l инфекции, диагностируют спЬилис. Способ позволяет выявлять сифилис уже на стадии ранних его форм н диагностировать em с высокой степенью дос— товерности (100 ). 1 табл. лянокпслого; 0,5Z-íûö паствор хлористого натрия. фи@
Хоц определения. Сл
Пля,данного определения берут три и »1 центрифужных пробивки, которые соцержат по 1 мл физиологического раствора. В кахдую пробирку помещают по
0,2 мл "крови, взятой микропипеткой из пальца после прокола иглой бран- 41 1 ка. Содержимое пробирок центрифугируют 10 мин. Зятем из пробирки набирают по 0,8 мл надосадочной жидкости и переносят в другие три пробирки.
После этого в каждую пробирку, кото- В рая содержит 0,8 мп надосадочпой жид в «В» кости, вносят по 1 мл пара-фенилендиамина и 2 мл ацетатного буЬера. Две пробирки после встряхивания помецают о в термос-:aò при 37 С на один час, а в третью пробирку (контрольная проба) 1561043 г сразу же после добавления ацетатного буфера вносят 1 мл раствора гидро— ксиламина и 10 MJI раствора хлористого натрия. После инкубации в две пробир— ки также вносят аналогичные количества растворов гидроксилатлина и хлорис— того натрия. Исследуемые пробы колориметрируют при помощи фотоэлектрот олориметра против контрольной пробы г1ри зеленом светофильтре (530 MM).
ПоСкольку при различных заболеват1иях соотношение содержания плазмы
Й форменных элементов может существенно изменяться, а для определения фиктивности церулоплазмина берут цельт1ую кровь,.то при расчете активности г ерулоплазмина в плазме крови неободимо учесть показатели гематокрита. ля определения активности церулоплаз20 мина и показателя его в условных фдиницах расчет производят по форму:ле
10 E (1 + 0 002а)
0,01ба, 25
Из данных экскреции и гематокрита можно определять активность церулоплазмина в 0,1 тлл плазмы крови в условных единицах.
Исследовалась активность церулоплазмина у 75 больньгх заразными Ьормами сифилиса до начала специбическо( го лечения и в конце курса терапии. де A, — активность фермента в условньгх едийицах в плазме;
Š— показатель барабана электрофотокалориметра; 30 а — показатель гематокрита.
-Гематокритная величина (общий объем эритроцитов) дает представление о соотношении глежду Объемом плазмы и объемом форменных элементов кро- З5 .ви. Определение производят в гематокрите, представляюцем собой стек— лянную трубочку, разделенную на 100 равных частей. Перед взятием крови гематокрит промывают гепарином или 40 раствором, составленным из 1,2 r оксалата аммония и 0,82 оксалата калия в 100 мл воды, Затем набирают в гематокрит до отметки 100 кровь пз пальца пациента, закрывают конец пипетки резиновым колпачком, центрифугируют в .течение 30 мип при 3000 об/мин и отмечают, какую часть в градуированной,трубке гематокрита занимают эритроциты..
I о
Параллельно проводилось исслеяование цеттулоплазмина у 21 здорового му;кчины (контроль) (таблица).
У всех 75 больных (100 ) до начала специфического лечешы активность церулоплазтлина в сыворотке крови в сведнем была равной 15,20 + 1,20 усл. ед., что значительно ниже в сравнении со зцоровЫми людьми (коэффициент различия равен 5,93). Лтгтивность церулоплазмина у всех больных (1007) в конце курса лечения возросла в среднем до 29,21 + 2,68 усл. ед.
В таблице приведены данные о результатах исследования активности церулоплазмина у 75 больных всеми заразными формами сифилиса, которые свидетельствуют о том, что при всех формах сифилитцческой инфекции опре— деление этого фермента является абсолютно необходимьпл и должно проводиться в комплексе с диагностическими серологическими реакциятли.
Особо ва><нм значение имеет определение активности церулоплазмтпта в динамике и после курса специфического лечения для выявления динамики его нормализации, что является свидетельством излеченности от инфекции, так как обцепринятые серологические реакции могут быть положительными еще длительное время (в течение нескольких месяцев).
Наиболее важное значение имеет определение церулоплазмина с целью улучшения диагностики ранних форм сифилиса. Так как при первичном сифилисе снижение активности церулоплазмина в сыворотке крови предшествует положительным реакциям иммунофлуоресценции, реакции Вассермана и микрореакции и поэтому является наиболее чувствительным и ранним диагностическим тестом наличия сифилитической инфекции в организме, что было выявлеНо у всех . 20 больных (таблица) первичным серонегативным сифилисом.
Пример 1, Вольной К., 26 лет, поступил в КВД с диагнозом обследование на сифилис. Из анамнеза установлено, что 4 недели тому назад он имел случайную половую связь с неизвестной жеттциной. Через три нецели после этого полового контакта на квайней плоти половог о члена у него появилась овальной формы язвочка диаметром 0,5-1 см, безболезненная птти пальпации, еце через неделю
5 1 увеличился лнмбатический узел в паховой области слева, диаметрсм 1,5—
2 см, безболезненный, не спаянный с окружающей клетчаткой. Со слов больного было установлено, что он самостоят ельно принимал антибиотики, проводил прижигание появившейся язвочки раствором перманганата калия, Больному было начато исследование из отделяемого язвы на наличке возбудите ля сифилиса (бледной трепонемы). Полового партнера привлечь к обследованию на сифилис е удалось, так как больной не смог указать ее фамилии и места жительства. Проводимое многократное бактериоскопическое исследование на бледную трепонему не позволило обнаружить возбудителя. Серо логические реакции крови.и микрореакция были отрицательными, Больному про ведено исследование активности церулоплазмпна, показатели которого составляли 14,17 2 2,19 усл. ед., что явилось основанием для постановки диагноза: сифилис первичный, серонегативный. Через два дня после этого в пунктате увеличенного регионарного пахового лимЬатического узла путем бактериоскопического.исследования в темном поле были обнаружены возбудители сифилиса (бледные трепонемы), что явилось подтверхдением исследований активности церулоплазмина у данного больного, ему быпо назначено специфическое лечение по схеме лечения первичного сифилиса.
С целью ранней,диагностики сифилиса было проведено исследование активности церулоплазмина у 6 пациентов, которые были в половом контакте с больными активными Ьормами сифилиса две недели тому назад. У всех больных быпо выявлено снижение его активности до 17,32 2,23 усл. ед.
Пример 2. Больной В., 26 лет, поступил в КВД для обследования, ",как половой контакт с больной вторичным свежим сиЬилисом. Из анамнеза установлено, что половая связь с больной быпа цве недели тому назад.
Клинических проявлений сифилиса у обследуемого еще не было, серологические реакции крови — отрицательные.
Проведенное исследование активности церулоплазмина в сыворотке крови у обследуемого показало, что его показатели были значительно ниже нормальных и составляли 17,34+2,23. Больно-
561043 6 му, не дожидаясь клинических прояв— лений сифилиса, быпо проведено превентивное лечение сифилиса.
Таким образом, в данных конкретных случаях, падение актиг;ности церулоплазмина в сыворотке крови было зафиксировано уже в конце инкубационного периода, предыествуя первым кли—
10 ническим проявлениям сифилиса, т.е. тверпому шанкру, которщй появляется в среднем через 3-6 недель от момента заражения. Так как в инкубационном периоде никаких клинических субъективных и объективных проявлений
15 сиЬилиса еще нет, то данные актив-, ности церулоплазмина в сыворотке крови пациентов являются первым диагностическим критерием заражения (т.е.
20 заболевания) сифилитической инфекцией.
Также были проведены исследования по определению активности церулоплазмина у всех леченых больных различными формами сифилиса (таблица) пос25 ле проведения специфического лечения, с целью раннего прогнозирования эффективности лечения.
Необходимость этих исследований была обусловлена тем, что общепринятые серологическке методы (реакция
Вассермана и др.), применяемые с целью сероконтроля излеченности, могут оставаться положительными еще в течение нескольких месяцев после проведения специфического лечения.
35 Резуль;àòû проведенных исследований (таблица) свидетельствуют о том, что после проведенного специфического лечения у всех леченых больных;. (т.е. в 1OOZ случаев) независимо от
40 стадии заболевания наблюдалосв увеличение активности церулоплазмина до
4 нормальных его показателей (в среднем 29,21 + 2,68. усл. ед.), что является свидетельством высокой эЬЬек45 тивности проведенного лечения.
Проведенные многолетние клинические и лабораторные ис"ледования по определению активности церулоплазмина у больных различными заразными фор50 мами сифилиса и в инкубационный период инфекции свидетельствуют о том, что этот способ является высокочувствительным (в 100K случаев) и может быть включен в число необходимых ис55 следований как для Ранней диагностики сифилитической инфекции, так и для ускоренного прогнозирования эффективности проводпмой специфической терапии сиЬилиса.
1561043
Формула изобретения
Диагноз
До лечения
Г (Г
После лечения м с м р м с м п
25,91 9,4 5,03 0,01 l4,17 5 016 2 19 15
21,62 11,82 4,23 0,05
23,20 12,65 6,88 0,05
14,29 5,84 2,39 25
18,87 5,69 3,22 13
15,23 4,82
15,20 5,32
30,87 12,46 5,21 0,02
2,11 22
1,20 75
29,21 11,87 2,68 0,01
24,94 8,02 5,56
23,24 5,81 2,48
21
Составитель Л,Шилина
Техред M,яндык
Редактор M, . Áàíäóðà
Корректор С.Шевкун
Заказ 976 Тираж 508 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,101
Способ диагностики сифилиса путем клинико-анамнестического обследования больного и исследования сыворотки
5 крови, о т л и ч а ю ш и и с я тегл, что, с целью ранней диагностики, доП ервичный серонегативный сифилис 20 Первичный серопозитивный сифилис 23 Вторичный свежий сифилис 12
Вторичный ре:цидивный си,филис
Все формы ,сифилиса
После месячного пере,рыва
Контроль полнительно определяют соцержание церулоплаз лина и при снижен|ил его уровня относительно нормы и наличии ! предшествовавшего полового контакта с больным, лзв и эрозий, характерных для этой инфекции, диагностируют сифилис.
