Способ количественного определения @ - и @ -каротина в биологических материалах
Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в сельскохозяйственном производстве , пищевой промышленности,в здравоохранении при контроле за содержанием микроколичеств #- и в-каротина в кормах , продуктах питания и других биологических материалах. Цель изобретения - упрощение способа и сокращение времени анализа. Способ включает омыление анализируемого образца, экстракцию каротинов циклогексаном, ввод экстракта в хроматографическую колонку (сорбент - силасорб С18), последующее разделение ft1 - и А каР°тина и отделение мешающих примесей в потоке 1-2% раствора изопропанола в циклогексане. 2 табл. (Л
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
А1
„SU„,165 (51)5 G 01 N 30/02
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМ,К СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И (ЛНРЬГТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4602138/35 (22) 05.11.88 (46) 23.05.91. Бюл. И- 19 (71) Научно-исследовательский институт животноводства Лесостепи и Полесья УССР (72) Н.A.Ðîìàíîâ, Т.Л.Осипова и P.À.Òàòóçÿí (53) 543.544(088.8) (56) Andre А. à.o. Simultaneaus determination of g-and IJJ-carotene. — Acta .
Bot nurlandica, 1975, v. 24, N 2, р. 225-?28.
Hiduraglon N. а.о. ",щЧид<1 chromatographic determination of caratenes
cattle scrim and liver — Tnt J.Uitamin and Natrition Besearch, 1986, ч. 56, N 4,,р. 339-344.
Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано при контроле за содержанием микроколичеств (- и Р --каротина в кормах, продуктах питания и других биологических материалах.
Цель изобретения — упрощение способа и сокращение времени анализа.
Способ включает следующие операции: омыпение анализируемого образца, экстракцию каротинов циклогексаном, ввод экстрактав хроматографическую колонку с силасорб С18, последующее разделение 0(- и 1о-каротина и отде2 (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕЛЕНИЯ М вЂ” И /3-КАРОТИНА В БИОЛОГИЧЕСКих ИАТЕРИАЛАХ (57) Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано в сельскохозяйственном проиэводстве, пищевой промышленности, в здравоохранении при контроле за содержанием микроколичеств ф- и P-êàðoòèía в кормах, продуктах питания и других биологических материалах. Цель изобретения — упрощение способа и сокращение времени анализа. Способ включает омыление анализируемого образца, экстракцию каротинов циклогексаном, ввод экстракта B хроматограйическую колонку а (сорбент — силасорб С18), последующее разделение и - и Р-каротина и отделение Ц) мешающих примесей в потоке 1-2Х раствора изопропанола в циклогексане °
2 табл. ление мешающих примесей в потоке
2Х-ного раствора иэопропанола в циклогексане. Пример 1. Определение ф(- и
Р-каротина в искусственных растворах с добавками и без добавок витамина
А, E и каротиноидов.
30 мкл раствора OC — и /3-кароти- а на в циклогексане с добавками и беэ добавок других каротиноидов, витами- и на А, Е вводят в хроматограАическую колонку с силасорбом С 18 жидкостного микроколоночного хроматографа
"Иилихром" и элюируют 0(- и Р-каротин
1 — 2Х-Hым раствором иэопропанола в
1651199
Та блица 1
Определено
Содержани сопутствяощего, вещества, мг/л айдено изомеров аротина, мг/л опутст вуюее вещетво ц(-каро-" j8-каротина тина
0,009 0,011
О, 047 О, 049
О, 098 О, 102
0, 009 0,503
0,497 0 010
О, 098 О, 099
0, 101 0,097
0,103 0,099
О, 010
О, 050
О, 100
О, 010
0,500
О, 100
0,100
О, 100
О, 010
О, 050
О, 100
0,500
0,010
О, 100
О, 100
О, 100
0,08
0,06
0,03
0,08
0,04
0,04
0,05
0,05
0,08
0,05
0,04
0,03
0,09
0 05
0,03
0,06
100
Витамин А
Витамин Е
Каротиноиды*
*Каротиноиды выделяют из растений на хроматографической колонке и определяют их суммарное содержание по светопоглощению при 460 нм; пиклогексане с детектированием в УФспектре при 274 нм. Расчет содержания
М- и / -каротина ведут по площадям их хроматографических пиков. Результаты определения О - и Р-каротина в искусственных растворах приведены в табл.1.
Пример 2. Определение р - и
P-каротина в биологических материалах.
К 0,5-5,0 г анализируемого образца10 добавляют 5-20 мл 1ОХ-ного спиртового раствора КОН и ведут гидролиз в течение 30 мин при 60 С в атмо- сфере инертного газа. Экстрагируют ф- и P-каротин 1-5 мл циклогексана, 15 очищенного от примесей, вводят 1
30 мкл экстракта вхроматографическую колонку (сорбент силасорб С 18) жидкостного микроколоночного хроматографа "Инлихром" и элюируют о(- и Р- 20 каротин 1 - 2X-mm раствором изопропанола в циклогексане с детектированием в УФ-спектре при 274 нм. Расчет содержания g- P -каротина ведут по площадям их хроматографических пиков . 25
Результаты определения Ф- и Р-каротина в биологических материалах приведены в табл. 2.
Как следует из представленных в табл. 1 и 2 данных, предлагаемый 30 способ может быть использован для анализа любых биологических материалов .
Чувствительность определениями - и/3каротина равна 0,01 мг/л, что является достаточным для анализа биологичес-35 ких материалов, при этом определению ф(" и Р-каротина не мешают 1000-кратI ные избытки других каротиноидов, витаминов А и E.
Таким образом, предлагаемый способ количественного определения ф. — и Ркаротина в биологических материалах по сравнению с известным способом имеет следующие преимущества: способ позволяет упростить определение К- и Р -каротина, так как не требуется проведение таких сложных операций, как упаривание экстракта досуха, растворение сухого остатка в малом количестве органического растворителя и отделение мешающих примесей на предварительной хроматографической колонке способ позволяет в 2 раза сократить время анализа за счет сокращения числа последовательных операций.
Формула изобретения
Способ количественного определения р - и Р-каротина в биологических материалах, включающий омыпение анализируемого образца, экстракцию каротинов, ввод пробы экстракта в хроматографическую колонку, заполненную сорбентом, и разделение компонентов пробы в потоке элюента, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью упрощения способа и сокращения времени анализа, в качестве экстрагента каротинов используют циклогексан, в качестве сорбента — силасорб С 18, а разделение осуществляют в потоке
1 — 2%-ного раствора изопропанола в циклогексане.
1651199
Таблица 2
Найдено иэомеров каротина, мг/кг
° (8 -определения а
Введено изомеров каротина, мг/кг
Айалиэируемый объект
0(-каро- /3- каротина тина
9,47
1 70 15,50 11,09
152,80 Оу05
169 ° 23 0,05
0,05
0,01
21,69
3, 00 22, 42
84,28 0,06
86 25 0 01
0,03
0,02
0,70
9,92
2,00 15,40 11, 75
45,52 0,01
61,50 О, 03
0,02
0,01
2,69
1,50 10, 70 4,07
0,02
0,05
20,60 0,05
30,86 0,01
376,95 0,06
402, 70 0,06
14, 77
24,90 16 14
0,05
0,01
1,30
0,24
0,37
4,69 0,06
6,51 О, 02
0,03
0,06
0,14
1,69
1,87
2,62 0,04
Не обн.
0,01
0,03
0,01
0,80
0 01
0,23
0,80 0,41
2,45 0,06
3,29 0,01
0,05
0,04
0,20
Редактор В.Бугренкова
Подписное
Тираж 396
Заказ 1604
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат ."Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101
Зеленая масса люцерны (абсолютно сухое веществ)
То же
Зеленая масса кукурузы (абсолютно сухое вещество)
То же
Сено люцерновое (абсолютно сухое вещество)
То же
Сено овсяное (абсолютно сухое вещество)
То же
Морковь (абсолютно сухое вещество)
То же
Плазма крови (натуральная влажность)
То же, Молоко (натуральная влажность)
То же
Печень цыплят (натуральная влажность)
То же
Составитель В.Толстых
Техред М.Моргеитал КорректорС,Шекмар
