Способ получения производных стероидов

 

Изобретение относится к производным стероидов общей ф-лы I @ , где R<SB POS="POST">1</SB> - диалкил C<SB POS="POST">1</SB> - C<SB POS="POST">4</SB>-аминофенил, которые обладают фармакологическими свойствами. Цель - разработка способа получения указанных соединений. Получение ведут обезвоживанием с одновременным освобождением кетонной функции 3-кеталь, 4, 5-дигидро-5-α гидроксипроизводного соединения ф-лы I. 3 табл.

союз советских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 С 07 J 21/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (21) 4356859/04 (22) 16.09.88 (31) 8712937 (32) 18,09.87 (33) FR (46) 23.07,91. Бюл. ¹ 27 (71) Руссель-Юклаф (FR) (72) Люсьен Неделек, Андре Клосснер, Даниель Филибер и Мартин Могилевский (FR). (53) 547.689.6.07 (088,8) (56) Заявка ЕР 0116974, кл. С 07 J 41/00, 1984. (54) СПОСОБ ПОЛУ4ЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ СТЕРОИДОВ (57) Изобретение относится к производным стероидов общей ф-лы I

Изобретение относится к способу получения новых производных стероидов общей формулы где R ) — диал кил-С1-С4-аминофенил, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Цель изобретения — получение новых производных стероидов, имеющих фармакологические преимущества перед известным структурным аналогом подобного действия.

Пример 1. (17R)-11-бета-(4-(димети- л а мино(фен ил)си и ро)эст ра-4,9-диен-17,2оксетан)-3-он, „„« Ы„„1665877 А3 где R> — диалкил-С>-С4-аминофенил, которые обладают фармакологическими свойствами. Цель — разработка способа получения указанных соединений. Получение ведут обезвоживанием с одновременным освобождением кетонной функции

З-кеталь, 4,5.дигидро-5- а гидроксипроизводного соединения ф-лы 1, 3 табл.

На первой стадии получают(1,1-диметилэтило вы й) 3,3-(1,2-эта нди ил)-б ис-о кси)

-(17-бета- гидрокси-19-нор-17-альфа-и регна-5(10), 9(11)-диен-21-овой кислоты.

Раствор 568 см диизопропиламидлиз тия, титра в 0,51 М, в 1,4 л тетрагидрофурана охлаждают до — 73 С, вводят в течение

20 мин при (— 73) — (— 72) С 37,3 см третбутилового эфира уксусной кислоты и пе реме ши ва ют 1 ч при — 73 С. Дают температуре подняться до — 60 С, в течение

30 мин вводят 17,38 г 3,3-(1,2-этандиил)циклического ацеталя экстра-5(10), 9(11)-диен3,17-диона в 260 см тетрагидрофурана и затем перемешивают 1 ч 20 мин при — 60 С.

Температуру среды доводят до 0 С и в течение 15 мин прибавляют 520 см хлористого аммония в насыщенном водном растворе. Перемешивают 1 ч при комнатной температуре, декантируют и водный слой экстрагируют хлористым метиленом. Орга1665877 нические слои промывают хлористым на.грием в насыщенном водном растворе, Сушат и доводят досуха, Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируют

Смесь циклогексан — этиловый эфир уксусНой кислоты — триэтиламин, вэятых в соотношении 95:5:1.

ЯМР-спектр (СООз + 1 капля CgDgN), ./млн: 3,97 {Н этилендиокси в 3); 5,6 (Н ); ,9 (H1s); 4,55 (ОН); 1,47 (Н, принадлежаий t-Bu).

На второй стадии получают (1,2-этанди л)циклический ацеталь 17,21-дигидрокси 1 9-нор-17-альфа-прегна-5(10),9(11)-диен-3 зна.

В инертной атмосфере растворяют

0,3 r полученного на первой стадии проДукта в 400 см тетрагидрофурана и прибавляют в течение 5 мин при 18-22 С 14,38 r люмогидрата лития. Нагревают 1 ч при

40 С. После охлаждения до 15 — 20 С приравляют 600 см хлористого метилена, доводят до 0-5 С и медленно прибавляют

130 см насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, Полученный осадок отфильтровывают, промывают его, сгущая в хлористом метилене, декантируют фильтрат и водный слой экстрагируют хлористым метиленом, Органические слои промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат досуха, Остаток сгущают в эфире, отсасывают, сушат под уменьшенным давлением и получают 12,47 r целевого продукта.

RMP-спектр (СЭС!з + 1 капля C5DgN), ч./млн: 3,96 (Н этилендиокси); 5,59 (Н );

0,88 (Н1в); 3,97 (H21)l 3,33 (Н, принадлежащие ОН).

На третьей стадии получают (17R)-(1,2этандиил)циклический ацеталь спиро-(эстра-5-(10),9(11)-диен-17,2-оксета н)-3-она.

12,47 г полученного на второй стадии продукта растворяют в 250 см пиридина. з

По-немногу прибавляют 24,94 г хлористого тоэила и перемешивают 2 ч при комнатной температуре. Прибавляют лед, воду, экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, органические слои промывают насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат и доводят досуха перегонкой с толуолом, 19,80 г полученного тоэилата вводят в суспенэию в 890 см 5 (з ного этилового едкого кали и перемешивают с рефлюксом 40 мин, Отгоняют этанол под уменьшенным давлением, прибавляют воду и лед, перемешивают 10 мин, отсасывают осадок, промывают водой до нейтральности, растворяют его в хлористом .метилене, декантируют воду и сушат досуха. Хроматографируют остаток на двуокиси кремния (элюант: циклогексан-этиловый эфир уксусной кислоты — триэтиламин, вэятые в соотношении 90:10:1) и выделяют

5 8,97 г целевого продукта т.пл. 136 С.

ЯМР-спектр (СОС!з), ч./млн: 3,99 (Н этилендиокси); 5,64 (Н ); 0,76 (Н в); 4,304,50 {Н ), На четвертой стадии получают (17R)10 (1,2-этандиил)циклический ацеталь 5-альфа, 10-альфа-эпокси-спиро-(астра 5(10), 9(11)диен-17,2-оксетан)-3-она и его иэомер 5-бета, 10-бета-эпокси, 8,97 г полученного на третьей стадии

15 продукта растворяют в 180 см хлористого метилена, прибавляют 9 см гексахлорацетона, охлаждают до — 30 С и ввоздят в течение 15 мин при — 33 С 27 см 50 -ной перекиси водорода, а затем перемешивают

20 3 ч при 0-2 С. Реакционную смесь выливают на 300 см насыщенного раствора бикарз боната натрия, при 15-20 С прибавляют тиосульфата натрия до отсутствия перекиси и декантируют. Водный слой экстрагируют

25 хлористым метиленом, промывают водой органические слои и насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушат досуха. Хроматографируют на двуокиси кремния

{остаток/элюант: циклогексан — этиловый

30 эфир уксусной кислоты — триэтиламин, взятые в соотношении 80;20:1) и выделяют

1,82 r продукта 5-бета, 10-бета-эпокси и

5,36 r продукта 5-альфа, 10-альфа-эпокси.

ИК-спектр(СНС!з), см: 975,823(эпокси

35 альфа); 981, 830 (эпокси бета).

ЯМР-спектр (CDCkg), ч,/млн: эпокси альфа: 0,76 (Н фа), 3,92 (кеталь), 6,09 (Hq)), 4,304,66 {Н ); эпокси бета: 0,75 (Нщ), 3,91 (кеталь), 5,92 (Н ), 4,30 — 4,46 (Н21).

40 На пятой стадии получают(17ЙК1,2-этандиил)циклический ацеталь 5-альфа-гидрокси-11-бета-(4-(диметилами но(фен ил)спиро)экстра-9-ен-17, -2-оксетан)-она.

В инертной атмосфере растворяют

45 0,861 r полученного на четвертой стадии эпоксида 5-альфа-10-альфа в 18 см тетраз гидрофурана, прибавляют 24 мг монохлорида меди, охлаждают до 0 — 5 С, в течение

30 мин вводят 8,3 см бромида 4-диметилаз минофенилмагния в растворе (0,87 M в тетрагидрофуране) и перемешивают 1 ч при этой температуре. Реакционную смесь при

15 — 20 С выливают на 40 см хлорида аммония в насыщенном водном растворе, перемешивают 10 мин, декантируют, водный слой экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты. Органические слои промывают насыщенным раствором хлористого натрия, сушат и доводят досуха, Остаток хроматографируют на двуокиси кремния

1665877 (элюант: циклогексан — ацетат — этилтриэтиламин, взятые в соотношении 70:30:1).

Выделяют 1 г целевого продукта, т.пл, 1780С.

ЯМР-спектр (СОС!з), ч.млн; 4,00 (Н эти- 5 лендиокси); 2,91 (Н диметиламино); 4,284,45 (H11 и Н21); 0,40 (H18); 4,31 (ОН).

На шестой стадии получают(17Й)-11-бета-(4-(диметиламино(фенил)спиро)-эстра1 4,9-диен-17,2оксетан)-3-он. 10

0,944 г полученного на пятой стадии продукта растворяют в 6,6 см 70 -ной укз сусной кислоте, нагревают при 41 — 43 С и перемешивают 2 ч 15 мин, Охлаждают до

0-5 С, rðèáàsëÿþò гидрат окиси аммония 15 до рН выше, чем 8, экстрагируют хлористым метиленом, промывают насыщенным раствором хлорида натрия и сушат досуха.

Остаток хроматографируют на двуокиси кремния (элюент: циклогексан — этиловый 20 эфир уксусной кислоты, взятые в соотношении 80:20) и выделяют 0,468 г целевого продукта.

После перекристаллизации в изопропаноле продукт плавится при 108 С. 25

ИК-спектр(СНС!з), см: 1654(сопряженный кетон); 1612 (С=С); 1561 (ароматическое соединение);

УФ-спектр (ЕВОН): макс. 260 ммк, с =

17.400; макс. 302 ммк, я = 20.500, 30

УФ-спектр (EtOH HCI, 0,1. н.): макс.

300 ммк, е = 18 900; перегиб 218 — 240 ммк, ЯМР-спектр (СОС!з), ч./млн: 2,92 {Н ди- . метиламино); 5,76 (Н4); 0,48 (Н1а); 4,40 (Н11 и

Нг1); 6,67-7,07 (ароматические соединения). 35

Пример 2.(17R)-11-бета-(4-(метилтио(фенил)спиро-)эстра-4,9- диен-17,2-оксетдн} З-он.

На первой стадии получают (17R)-(1,2- 40 этандиил)циклический ацеталь 5-альфа-гидрокси-11-бета-(4-(метилтио(фенил)спиро)эстра-9-ен-17,2- оксетан)-3-он, В инертной атмосфере охлаждают до

0 — 50С в течение 15 мин 55,3 см 4-(метил- 45 тио)фенил магния в тетрагидрофуране (титр

0,81 M) и 0,148 r хлористой меди, В течение

25 мин при 3,5 — 5 С, вводят 5,36 r (1 7R)-(1,2этандиил)циклического ацеталя 5-альфа, 10-. альфа-эпокси(спиро)эстра-5(10),9(11)-диен 50

-17,2-оксетан-3-она в 53 см тетрагидрофурана и перемешивают при 0-5 С 1,5. Затем реакцию продолжают аналогично пятой стадии примера 1, получая 0,24 г целевого продукта, 55

ЯМР-спектр (СОС!з), ч,/млн: 2,46 (НзС);

3,9-4,1 (Н этилендиокси); 0,38 (Н1а); 4,30—

4,45 (Н 1, Нг! и ОН); 7,16 (ароматические соединения).

На второй стадии получают (17Щ-11-бета-(4-(метилтио(фенил)спиро-)эстра-4,9-диен-17,2-оксета н)-3-он.

2 г полученного на первой стадии продукта растворяют в 40 см этанола, прибавляют 2 г смолы Амберлит IRC 84 (Ром Хаас) и нагревают с рефлюксом в течение 7 ч в инертной атмосфере. При комнатной температуре отсасывают смесь смолы и продукта, прополаскивают этанолом, хлористым метиленом и фильтрат доводят досуха для получения 1,194 г целевого продукта, т.пл.

1540С, После перекристаллизации в 99,8 -ном этаноле получают продукт, плавящийся при

160 С.

ИК-спектр (СНС!з), см . . 1653 (С=О);

1603 (С=С); 1556 и 1493 (ароматические соединения).

УФ-спектр (EtOH): макс. 260 ммк, = 16.500; макс. 300 ммк, c = 20.10.

ЯМР-спектр (C0CI3), ч./млн: 5,77 (Н4);.

2,46 (S-СНз); 0,44 (Н а); 4,3 — 4,5 (Hzt); 7,12 и

7,18 (ароматические соединения).

Пример 3. (17S)-11-бета-(4-(диметиламино(фенил)-3,4,5,6-татрагидро-спиро) эстра-4,9-диен-17,2-(2 Н)-пи ран}-3-он.

На первой стадии получают (1,2-этандиил)циклический ацеталь 5-альфа, 17-бетадигидрокси-11-бета-(4-(диметиламино-(фенил)-17-(альфа-)- 4-гидрокси-1-бутинил)астра-9-ен-3-она.

5 г третбутилата калия растворяют в

20 см безводного тетрагидрофурана, охлаждают до — 5 С и в течение 5 мин вводят

1,9 г (1,2-этандиил)циклического ацеталя

5-альфа-гидро кси-11-бета-(4-(диметиламино(фенил)-эстра)-9-ен)-3-она. Перемешивают 10 мин, а затем в течение 15 мин вводят раствор 2,4 см 3-бутинола в 20 см тетрагидрофурана, перемешивают 1 ч и выливают в 200 см насыщенного раствора первичного фосфата натрия, а затем экстрагируют водный слой хлористым метиленом и сушатдосуха. Остаток очищают на двуокиси кремния, элюируя смесью циклогексан— этиловый эфир уксусной кислоты (1:1), а затем этиловым эфиром уксусной кислоты, содержащей 1 g, гидрата окиси аммония, Собирают 1,775 г целевого продукта.

ЯМР-спектр (СОС!з + 1 капля СаОай), ч./млн: 2,90 (Н диметиламино); 3,97 (Н этилендиокси); 0,5 (Н1а); 3,73 (CH2-ОН); 6,62 и

7,04 (ароматические соединения).

На второй стадии получают 11-бета-(4(диметиламино(фенил)-17-бета-гидрокси-17

-альфа-)4- гидроксибутил)-астра-4,9-дие н-3он.

1665877

871 г полученного на первой стадии продукта подвергают гидрогенизации в 40 см метанола в присутствии,0,4 г смеси з палладий/уголь. После фильтрации, удаления растворителей, остаток забирают в

10 см 10 g,— íîé уксусной кислоты и перемешивают 1 ч при 45 С. Нейтрализуют насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, а затем экстрагируют хлористым метиленом. Органический слой сушат, доводят досуха под уменьшенным давлением, Остаток хроматографируют на двуокиси кремния, элюируют этиловым эфиром уксусной кислоты и получают 640 мг целевого продукта.

ИК-спектр (СНС!з), см: 1654 (С=О); 1612, 1561, 1518 (N,); 3615 (ОН). йМР.спектр (CDCI3), ч./млн: 2,9 (>и©), 4,33 (H»); 0,57 (Н 1в); 5,73 (Н)); 3,67 (СН2О Н);

6,65 и 7,02 (ароматические соединения), На третьей стадии получают (17S)-11бета-(4-(диметиламино(фен ил)-(Э,4.,5,6 .— тетра гид рос п и ро)эстра-4,9-див н-17,2 (2 H)-пиран)-3-он.

Раствор, содержащий 788 мг полученного на второй стадии продукта и 15 смз безводного пиридина, охлаждают до ООС, прибавляют 1,5 r хлористого тозила и перемешивают 1 ч при комнатной температуре.

Прибавляют 30 см льда и нейтрализуют

14,5 см концентрированной соляной кислоты, Водный слой зкстрагируют хлористым метиленом и сушат дрсуха. Остаток очищают проходом на двуокиси кремния, причем элюант хлористый метилен — ацетон (95 — 5), и собирают 0,2 r целевого продукта, ЯМР-спектр (СОС!з), ч,/млн: 2,90 (Н диметиламино); 4,33 (Н1 ); 0,53 (-СН20); 5,74 (Н4); 7,02 и 6,4 (ароматические соединения), Пример 4. (17S)-11-бета-(4-(диметиламино(фенил)спиро)эстра-4,9-диен-17,2 -оксиран)-3-он.

Аналогично второй стадии примера 2 исходят из 2,42 r (1,2-этандиил)циклического ацеталя 11-бета-4-(диметиламино(фенил-5-ал ьфа-гидроксисп иро)эстра-9-ен17,2-оксиран)-З-она со смолой Амберлит

IRC 84. . После охлаждения отфильтровывают смолу, прополаскивают ее с 60 см этанола и доводят досуха. Сгущают остаток в ЗО см изопропилавого эфира, перемешивая при

40 С. Ледянят, отсасывают, прополаскивают изопропиловым эфиром, сушат подуменьшенным давлением и получают 9,844 г целевого продукта. Из маточных растворов собирают еще 0,273 г продукта, т.пл. 228 С.

После очищения хроматографией на двуокиси кремния, причем элюант: цикло5 гексан — этиловый эфир уксусной кислоты (70:30), выделяют 0,750 г продукта, т.пл.

234 С; (альфа)о= + 270 + 3,5О (k = 0,5

CHCt3).

ЯМР-спектр (СООз), ч./мин: 2,92 (Н ди

10 метиламино); 5,8 (Н4); 4,33 (Н11); 0,6 (Н1з);

2,63 и 2,98 (Н оксирана); 6,67 и 7,01 (ароматические соединения).

Пример 5. (17S)-11-бета-(4-(метилтио(фенил)спиро-)астра-4,9-диен-17,2 -ок15 сиран)-3-он.

На первой стадии получают 3,3-(1,2этандиил)циклический ацеталь 5-альфа-гидрокси-11-бета-(4-(метилтио(фенил)-эстра-9

-ен)-3,17-диена.

20 Охлаждают до -6 С 0,672 r хлозоной меди, 0,212 r хлористого лития, 165 см безводного тетрагидрофу рана и 16,5 r

3,3-(1,2-этандиил)циклического ацеталя 5ал ьфа, 10-альфа-эпокси-эстра-9-(11)-ен25 3,17-диона и вводят капля по капле в течение 1 ч 15. мин 100 см 0,75 M раствора з бромида 4(метилтио)-фенилмагния. В инертной атмосфере при — 10 С перемешивают

1 ч, прибавляют 100 см насыщенного расз

30 твора хлористого аммония и перемешивают

10 мин.

Экстрагируют этиловым эфиром уксусной кислоты, промывают водой, сушат и концентрируют досуха под уменьшенным

35 давлением. Остаток забирают в немного гексана, отсасывают, промывают гексан и получают после сушки под уменьшенным давлением при 60 С в течение 1 ч 22,2 г сырого продукта, т.пл. 202 С.

40 . После хроматографии этого продукта на двуокиси кремния, элюант циклогексанэтиловый эфир уксусной кислоты (1/I)+ 1 триэтиламина, перекристаллизации в зтиловом эфире уксусной кислоты, получают

45 продукт, плавящийся при 209ОC.

На второй стадии получают (17S)-(1,2зтандиил)циклический ацеталь 11-бета-(4(метилтио(фенил)сп иро)эстра-9-ен-17,2

-окси ран)-З-он.

50 Охлаждают до 5 C 12,7 см раствора (0,9 M) третбутилата калия, 22 см тетрагидрофурана и 27 см безводного диметилсульз фоксида, прибавляют в несколько минут

2,20 r иодида триметилсульфония и переме55 шивают 30 мин при 5 С. Затем выливают при 5 +. 1 С в течение 7 мин 2.45 r полученного на первой стадии продукта в 30 см безводного тетрагидрофурана и перемешивают 1 ч при Π— 5ОС, Реакционную.смесь

1665877

10 з выливают в 300 см воды, экстрагируют эти- насыщенного тритием продукта R (17,21-диловым эфиром уксусной кислоты, промыва- метил-19-нор-4;9-прегнадиен-3,20-дион) в ют насыщенным водным раствором присутствии увеличивающихся концентрахлорида натрия и сушат досуха. Остаток эа- ций (Π— 2500 10 M) либо холодного R, либо бирают в 15 см этилового эфира, леденят, 5 холодного прогестерона, либо холодного отсасывают, сгущают с минимальным коли- исследуемого продукта. Концентрация чеством холодного этилового эфира, сушат насыщенного тритием R (связанного В) под уменьшенным давлением и получают измеряется затем в каждом продукте ин2,1 г целевого продукта, т.пл. 130 С (мо- кубирования техникой поглощения уголь— мент.). 10 декстран.

ИК-спектр (CHCI3), см . 3508 (ОН); Глюкокортикоидный рецептор вилоч1592, 1555, 1493 (ароматические соедине- ной железы крысы. ния). Самки крысы Sprague — Dawley EOPS, Натретьейстадии получают(175)-11-бе- весящие 160 — 200 г, подвергают удалению та-(4(метилтио(фенил)спиро)-астра-4,9-ди- - 15 надпочечников . Через 4 — 8 дней после удаен-17,2 -оксиран)-3-он, ления животные умервщляются и вилочные

В инертной атмосфере растворяют 2,1 r железы вынимаются и гомогенизируются полученного на второй стадии продукта в при 0 С в буферном растворе (трис 10 мМ, 100 см этанола, Прибавляют 4,2 г смолы сахароза 0,25 М, дитиотрейтоль 2 мМ, НС!

Амберлит IRC 84/POM-XAA и нагревают с 20 РН 7,4) при помощи Поттера политетра— рефлюксом 15,5 ч. После охлаждения от- фторэтилен-стекло(1 г ткани на 10 мл ТС). фильтровывают, промывают этанолом, упа- Продукт гомогенизации подвергается ультривают фильтрат, выдерживают 1 ч на. рацентрифугации(105000гх90мн)приО С. холоде, отсасывают и сгущают продукт с Полученные аликвотные части поверхностминимальным количеством холодного эта- 25 ного продукта инкубируются при 0 С в теченола, сушат под уменьшеным давлением и ние времени l с постоянной концентрацией выделяют 0,49 r целевого продукта, т.пл. (T} насыщенного тритием дексаметазона в

121 — 122 С. присутствии увеличивающихся концентраПосле перекристаллизации в смеси эта- ций (0-2500 10 M) либо холодного дексанол — хлористый метилен (4:5) получают про- 30 метазона, либо холодного исследуемого дукт, плавящийся при 122 С, а затем при продукта. Концентрация связанного насы167 щенного тритием дексаметазона (В) измеряУФ-спектр (ЕтОН) МВ 406,6: макс етсявкаждомпродуктеинкубациитехникой

259 ммк, е = 15,700; макс, 300 ммк, с = 18,700, . поглощения уголь — декстран.

ЯМР-спектр(СОС!з), ч,/млн:2,43(СНзБ); 35 Проводят вычисление относительного

5,76 (H5); 4,32 (Н11); 0,55 (Н1в); 2,61 и 2,94 аффинитета связи (ARI), которое одинаково (Н оксирана); 7,02 и 7,13 (ароматические со- для всех рецепторов.

Чертят две кривые: процент связанного

Проводят фармакологическое изучение В продуктов, полученных по предлагаемому 40 насыщенноготритием ормона Т взависиспособу. мости от логарифма концентрации хоИзучение активности предлагаемых В продуктов проводят на гормонных рецепто- Р Т рах. зависимости от логарифма концентрации хоПрогестогенные рецепторы матки 45 лодного исследуемого продукта, крольчихи. Определяют прямую уравнения

Не достигшие полового возраста крольчихи весом в около 1 кг получают накожное прикладывание в 25 г эстрадиола. 5 дней В„„, спустя животные умерщвляются, матки вы- 50 де Т" — пРоцент свЯзанно насыщеннимаются, взвешиваются и гомогенизи- ного тритием гормона для инкубации этого руются при 0 С при помощи Поттера насыщенного тритием гормона при концентефлон/стекло в буферном растворе TS (трис трации (Т);

10 ММ, сахароза 0,25 M, HCI РН 7,4/1 г ткани Вмин на 50 мл TS), . 55 — процент связанного насыщенЗатем пРодУкт гомогенизации УльтРа- ного тритием гормона для инкубации этого центрифугируется (105000 г х 90 мин) при тритием насыщенного гормона при концен0 С. Полученные аликвотные части поверх- трации (T в присутствии большого избытка ности инкубируются при 0 С в течение вре- холодного гормона (2500 10 M), мени t при постоянной концентрации (T) 1665877

Пересечение прямой 3щ и кривых позволяет дать оценку концентраций холодноrb контрольного гормона (СН) и холодного изучаемого продукта (СХ), который ингибирует на 507 связь насыщенного тритием 5 гррмона на рецепторе.

Относительный аффинитет связи (ARL) изучаемого продукта определяется уравнением; дщ,. IC l-l(I c xl

Получают результаты, приведенные в табл. 1.

Исследуемые продукты, особенно про- 15 дукт примера 1, проявляют определенный ффинитет к глюкокортикоидному и проге тогенному рецепторам.

Из полученных результатов можно за лючить, что продукты могут проявить 20 гонистические или антагонистические ак,ивности глюкокортикоидов и прогестоге-Йов, Исследуют антиклюкортикодную активность. 25

Употребляемая техника вытекает из изВестного способа 0аиззе апб а11. The

relations hl p beetween glucocorticold

Structure and effects upon Thymoxytes.—

Molecular Pharmacology, 1977, 13, 948-955 30 для клеток загрудинной железы мыши.

Клетки загрудной железы у крыс с уда енными надпочечниками инкубируются ри 37 С в течение 3 ч, в питательной среде, содержащей 5.10 M дексаметазона в 35

Присутствии или в отсутствии изучаемого продукта при различных концентрациях.

Прибавляют тритием насыщенный уридин и продолжают инкубацию 1 ч. Охлаждают продукты инкубации, обрабатывают их 5 - 40 ным раствором трихлоруксусной кислоты, фильтруют на бумаге Ваттман GF/A, промывают их при помощи 5 -ной трихлоруксусной кислоты три раза. Определяют радиоактивность, удержанную на фильтре. 45

Глюкокортикоиды, в частности дексаметазон, вызывают уменьшение включения насыщенного тритием уридина, Продукты примеров 1-3 противодействуют этому эффекту (табл. 2). 50

Если исследуемые продукты употребляются одни, то никакого эффекта типа гликокортикоида не отмечают.

Исследуемые продукты проявляют . антиглюкокортикоидную активность и, 55 одновременно не проявляют глюкокортикоидной активности.

Исследуют абортивную активность у крысы самки.

Определяют день Di беременности присутствием сперматозоидов в вагинальном мазке, В день Dg беременности вводят продукт в суспензии в карбоксиметилцеллюлозе, содержащей 0,5 твина.

Животных умерщвляют через 72 ч после обработки и матку исследуют для определения состояния беременности.

Устанавливают полный аборт на всех животных группы с продуктом примера 1, введенного при дозе в 3 мг/кг.

Работают согласно предлагаемым условиям при определении аффинитета (сродства) соединений к гормонным рецепторам и определяют относительный аффинитет связи (АР) на рецепторах прогестогена и глюкокортикоида у следующих продуктов (табл. 3).

Продукт примера 1 (продукт А) и лактон 3(11-бета-(4-диметил амин офен ил)-17-бетаокси-З-оксо-4,9-(10)- эстра-диен-17-альфаил)-пропионовой кислоты (продукт Х). .Предлагаемое соединение имеет более высокий аффинитет к рецепторам прогестогена и глюкокортикоида, чем известный продукт, Формула изобретения

Способ получения производных стероидов общей формулы

О где R> — диалкил-С1-С4-аминофенил, отличающийся тем, что соединения общей формулы

0Н где R> имеет указанные значения;

К вЂ” группа циклического кеталя, подвергают обезвоживанию с одновременным освобождением кетонной функции.

1665877

Таблица 1

Таблица 2

Таблица 3

Составитель И. Федосеева

Техред M.Моргентал Корректор Т. Колб

Редактор И. Дербак

Производственно-издательский комбинат "Патент", f. Ужгород, ул,Гагарина, 101

Заказ 2402 Тираж 213 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5