Способ окраски нервных волокон на гистологическом препарате

 

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрогистологии. Целью является улучшение контраста нервных структур в органах. Цель достигается тем, 4fo в сосуды перфузируют раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин и диметилсульфоксид. Перфузию проводят на промытых 5%-ной глюкозой сосудах. Температура перфузионной жидкости 10-15°С, рН 3,5- 3,8. Затем в сосуды вводят 0,3-0,6%-ный раствор сульфида натрия, рН 7,3-7,4. После потемнения органа его извлекают, фиксируют , готовят гистологические препараты. Способ позволяет проводить докраску препаратов любыми гистологическими красителями . На препаратах видна вся сеть нервных волокон.

СО!ОЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 G 01 N 1/28

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ о 4 (Л

4 Э ф зом

12,0 — 13.0

45-65

1 — 2

Остальное

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4153960/14 (22) 25.11.86 (46) 07.09.91. Бюл, М 33 (71) Благовещенский государственный медицинский институт и Институт физиологии. и патологии дыхания СО АМН СССР (72) В.И,Кириченко, М.Т.Луценко и В,Я,Ерофеев (53) 61 6-0.89.9(088,8) (56) Ромейс Б. Микроскопическая техника.

M.; ил. 1953, 1908 — 1914. (54) СПОСОБ ОКРАСКИ НЕРВНЫХ BOJ10К0Н НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОМ ПРЕПАРАТЕ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к нейрогистологии. Целью является

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрогистологическим методам исследования, Целью изобретения является улучшение контраста нервных структур в органахх.

Способ осуществляют следующим обраВ кровоток органа, например легкие, перфузируют раствор, содержащий 5%-ную глюкозу, до полного освобождения сосудов от крови. Далее в те же сосуды перфузируют раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин и диметилсульфоксид, Температура раствора 10-15 С и рН 3,5-3,8, Далее орган извлекают, перевязывают сосуды и помещают в емкость с той же жидкостью на 10-15 мин, Затем в артерии органа вводят 0,3 — 0,6%-ный раствор сульфида натрия, рН которого 7,3 — 7,4, рН устанавливают азотной кислотой. Дополнительно ор. Ж 1675726 А1 улучшение контраста нервных структур в органах, Цель достигается тем, что в сосуды перфузируют раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин и диметилсульфоксид. Перфузию проводят на промытых

5%-ной глюкозой сосудах. Температура перфузионной жидкости 10 — 15 С, рН 3,5—

3,8. Затем в сосуды вводят 0,3 — 0,6%-ный раствор сульфида натрия, рН 7,3 — 7,4. После потемнения органа его извлекают, фиксируют, готовят гистологические препараты.

Способ позволяет проводить докраску препаратов любыми гистологическими красителями. На препаратах видна вся сеть нервных волокон. ган помещают в тот же состав сульфида натрия на 15-20 мин, Орган темнеет и приобретает мраморный вид. После потемнения орган отмывают от сульфида натрия 5%ным раствором глюкозы затем фиксируют в 10%-ном растворе формалина.

Срезы готовят замороженные толщиной

20 — 40 мкм.

Возможна докраска препаратов любыми гистологическими красителями.

Пример. Легкое через сосуды перфузируют 5%-ным раствором глюкозы, Сосуды промывают до выхода светлого раствора, Далее вводят раствор, содержащий азотнокислый кобальт, цистеин, диметилсульфоксид, при следующих соотношениях компонентов мас.%:

Азотнокислый кобальт

Цистеин

Диметилсульфоксид

Вода

1675726 ков, что также позволяет учесть этот критерий при оценке и анализе нервных структур в органе.

Составитель Л.Стебаева

Техред М.Моргентал Корректор M.Êó÷åðÿâàÿ

Редактор Л.Волкова

Заказ 2996 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж"35, Раушская наб., 4/5

Пппизвплственнп-изллтеллский комбинат "Патент". r, Ужгпппл. чл,Глгзпинл. 101 рН этого раствора устанавливают до 3,53,8, а температура введения 10-15 С.

Затем перевязывают все сосуды, извлекают легкое из грудной клетки и помещают в раствор того же состава на 10-15 мин, После в сосуды вводят раствор сульфида натрия. Легкое темнеет, приобретает мраморный вид, его дополнительно выдерживают в растворе сульфида натрия, затем тщательно промывают, помещают в формалин и готовят замороженные срезы, Срезы красят гематоксилин — эозином и исследуют под микроскопом. На срезах хорошо видна структура нервных волокон, при докраске гематоксилин--зозином в дополнение хорошо видны клеточные структуры, Способ позволяет увеличить контраст нервных структур, особенно при выявлении их в органах. Поскольку именно в органах тяжело полностью выявить все отделы волоКон, в отличие от пленочной структуры. При окраске предложенным способом также хорошо видна плотность нервных проводни5 Формула изобретения

Способ окраски нервных волокон на гистологическом препарате путем импрегнации в растворе, содержащем азотнокислый кобальт, и осаждения кобальта сульфидом

10 натрия, отличающийся тем, что, с целью улучшения контраста нервных структур в органах, импрегнацию проводят при

10-15 С и рН 3,5-3,8 раствором, дополнительно содержащим цистеин и диметил15 сульфоксид при следующих соотношениях компонентов, мас. :

Азотнокислый кобальт 12,0-13,0

Цистеин 44-65

Диметилсульфоксид 1 — 2

20 Вода Остальное при этом осаждение проводят 0,3-0,6 ным раствором сульфида натрия с рН

7,3-7,4.