Способ получения суспензии для реконструкции мембран клеток печени

 

Изобретение относится к медицине, предназначено для создания лекарственного средства для лечения заболеваний печени. Цель изобретения - повышение репарирующего действия суспензии путем смешивания фосфатидилхолина хлопчатника (ФХхл) и детергента солодкового пенообразователя (СП) при соотношении компонентов (в массовых частях) 1:(0,1 - 0,4) мас.ч. Затем смесь обрабатывают ультразвуком в режиме средней мощности (180 Вт, частота 30 кГц) 6 - 10 мин при 10°С. Когда суспензия становится прозрачной, воздействие ультразвука прекращают. Суспензию используют для реконструкции мембран.

СОНЗЗ СОЕЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (5пс G 01 и 33/48, А 61 К 47/00

ГОсудА Р с т Бе нны Й кОмитеt

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4053104/28 — 14 (22) 08.04.86 (46) 30,08.91. Бюл, N. 32

1 (71) Научно-исследовательский институт физико-химической медицины (72) Г,И.Бачманова, И.П.Канаева, Е,Д.Скоцеляс, T.È.Toðõoâñêàÿ, Э.М.Халилов, С.С.Маркин, А.И.Арчаков, Ю.М.Лопухин, А.И. Глуше н к ова, T.À.Äàìèнов, A. Н,Арипов, А.Ш.Исамухамедов и М.Ш.Каримов (53) 612.015(088.8) (56) Сб. матсриэлов симпозиума Гиперлипопротеинсмия кэк фактор риска и терапии эссенциэльными фо=фолипидами", Кельн, 1984, с. 23-31.

Изобретение относится к медицине, и в час;ности, может быть использовано при создании лекарственного средства для лечения заболеваний печени.

Цель изобретения — повышение репарирующего действия суспенэии, Цель достигается путем смешивания фосфатидилхолина хлопчатника (ФХхл) и детергента солодкового пенообразователя (СП) при соотношении компонентов 1:(0,10,4) мас ч, с последующей обработкой полученной смеси ультразвуком в режиме средней мощности в течение 6 — 10 мин.

Способ осуществляют следующим образом.

Готовят суспензию из ФХхл + СП. Для этого берут 1 мэс.ч, ФХхл, растворяют в органическом растворителе (бензол, метанол, хлороФорм), после чего растворитель

„„5U„„1673969 А1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СУСПЕНЗИИ

ДЛЯ РЕКОНСТРУКЦИИ МЕМБРАН КЛЕТОК

ПЕЧЕНИ (57) Изобретение относится к медицине, предназначено для создания лекарственного средства для лечения заболеваний печени. Цель изобретения — повышение репарирующего действия суспензии путем смешивания фосфатидилхолина хлопчатника и детергента солодкового пенообраэователя при соотношении компонентов

1:(0,1-0;4) мгс.ч. Затем смесь обрабатывают ультра. вуком в оежиме средней мощности (180 Вт, частота 30 кГц) 6-10 мин при 10 С.

Когда суспензия становится прозрачной воздействие ультразвуком прекращают.

Суспенэию используют для реконструкции мембран. упэривают досуха и nоилива от зодннй г эствор, содержащий СП. Содержание Г П составляе 0,1--0,4 мэс..ч. нэ 1 мас.ч, ФХх", сод<:ржание ФХхл в 1 мл раствора 15- 25 м г.

Компоненты тщательно перемешивают до растворения ФХхл. Полученную мутную жидкость переносят в стакан для ультразвуковой обработки и воздействуют ультразвуком в режиме средней мощности(180 Вт, частота 30 кГц) в течение 6-10 мин при температуре не выше 10 С. Когда су".ïåíзия становится прозрачнои, воздействие ультразвуком заканчивают, Полученную таким образом суспенэию используют для реконструкции мембран In vitro u In vivo.

In vitro поврежденные мембраны зндоплазматического ретикулума (1-3 кг белка микросом в 1 мл водного раствора, смешивают с суспензией ФХхл + СП (1 -4 мг фос1673969

Формула изобретения

Способ получения суспенэии для реконструкции мембран клеток печени, включающий смешивание фосфатидилхолина и детергента в определенном соотношении, отличающийся тем, что, с целью повышения репарирующего действия суспенэии, используют фосфатидилхолин иэ хлопчатника, а в качестве детергента— солодковый пенообразователь при соотношении компонентов 1:0,1 — 0,4 соответственно с последующей обработкой полученной смеси ультразвуком в режиме средней мощности в течение 6-10 мин, Составитель А. Агуреева

Техред М.Моргентал Корректор Э. Лончакова

Редактор А. Огар

Заказ 2915 Тираж 403 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 фолипида 1 мл водного раствора) и инкубируют при 4 С в течение 1 ч. In vlvo суспензию ФХхл + СП вводят крысам с токсическим гепатитом в дозе 20 мг фосфолипида на 100 г массы в течение 3 дн. 5

Реконструирующее действие суспензии оценивают по скорости инактивации цитохрома P-450 в интактных и поврежденных мембранах. В интактных мембранах время полуинактивации цитохрома Р-450 10 составляет 30 мин. Использование суспензий, содержащих ФХхл + СП при соотношении компонентов 1:(0,1-0,4) мас.ч. с последующей обработкой ультразвуком в режиме средней мощности в течение 15

6-10 мин сопровождается увеличением времени полуинактивации гемопротеина с 4 — 5 мин в поврежденных мембранах до

21-27 мин после их инкубации суспензией ФХхл + СП, а в случае использо- 20 вания препарата "Эссенциале" оно составляет 6 мин.

Пример 1. Способ осуществляют аналогично описанному, но используют суспенэию ФХхл + СП при их соотношении 25

1:0,1 мас.ч., время озвучивания составляет 6 мин. При этом получают суспензию, обладающую репарирующим действием и вызывающую увеличение времени полуинактивации цитохрома Р— 450 до 21 мин в 30 поврежденных мембранах после их инкубации с суспензией ФХхл + СП по сравнению с 4-5 мин в мембранах без воздействия суспенэии.

Пример 2. Способ осуществляют 35 аналогично описанному, но используют суспензию ФХхл + СП при их соотношении

1:0,4 мас.ч. время озвучивания составляет

10 мин. При этом получают суспензию, обладающую репарирующим действием и вы- 40 зывающую увеличение времени полуинактивации цитохрома P-450 до 24 мин в поврежденных мембранах после их инкубации с суспензией ФХхл+ СП по сравнению с 4-5 мин в мембранах без воздействия суспензии, Пример 3. Проверка репарирующего действия суспенэии при оптимальном соотношении ФХхл и СП 1:0,25 мас,ч. и времени озвучивания 8 мин показывает, что в этом случае после инкубации поврежденных мембран с суспензией время полуинактивации цитохрома P-450 в них составляет

27 мин по сравнению с 4-5 мин в мембранах беэ воздействия суспенэии. Кроме того, введение такой суспенэии крысам с токсическим гелиотриновым гепатитом приводит к увеличению N-деметилазной и р-гидроксилаэной активности в 2 раза и времени полуинактивации цитохрома P

450 в 5 раэ в поврежденных мембранах эндоплазматического ретикулума печени крыс по сравнению с мембранами животных, не получавших суспенэии ФХхл + СП.