Способ определения чувствительности лизосом к рн среды

 

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для исследования лизосом. Цель изобретения - упрощение способа. Способ состоит в инкубации лизосом в растворе, содержащем 0,7 М сахарозы и этилендиаминтетраацетат, при рН 5-8 и регистрации скорости разрушения лизосом по снижению экстинкции при 520 нм. Способ позволяет упростить определение за счет непосредственного измерения рН-чувствительности лизосом в кювете спектрофотометра .

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 J4 33/52

ГОСУДА P СТ В Е ННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

s с:

1

1 -;,,л-„".y) )

1

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Формула изобретения (21) 4071857/14 (22) 26.05,86 (46) 30.12,91. Бюл. ¹ 48 (71) Университет дружбы народов им. Патриса Лумумбы (72) С.П, Сяткин и В.А. Фролов (53) 612.015(088,8) (56) Badenoch-lonec, Н. Baum. Blochem.l.

1974, 142, ¹ 1, р.1, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЛИЗОСОМ К рН СРЕДЫ

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для исследования лиэосом.

Цель изобретения — упрощение способа.

Способ осуществляется следующим образом, Обогащенную фракцию лизосом ресуспендируют в 0,7 М растворе сахарозы, рН 7, до концентрации лизосомного белка 3 — 5 мг/мл. Эту суспензию добавляют к пред-. варительно охлажденному до 150С раствору сахарозы. рн ь-ь. содержащему 1 нМ этилендиаминтетраацетата, таким образом, чтобы начальная величина оптической плотности смеси была около 0,4. О скорости разрушения лизосом судят по скорости снижения экстинкции проб при 520 нм при инкубации проб в течение 1 мин в термостатируемой кювете на регистрирующем спектрофотометре.

Способ поясняется следующим примером.

„„5U „„1702312 А1 (57) Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для исследования лиэосом. Цель изобретения — упрощение способа. Способ состоит в инкубации лизосом в растворе, содержащем 0,7 М сахарозы и этилендиаминтетраацетат, при рН 5-8 и регистрации скорости разрушения лизосом по снижению экстинкции при 520 нм. Способ позволяет упростить определение за счет непосредственного измерения рН-чувствительности лизосом в кювете спектрофотометра.

\ (Пример, Методом дифференциального центрифугирования получали лизосомы из печени интактных самцов белых беспо- ф родных крыс массой 120 — 180 r после 48 ч голодания. и

Исследовали влияние инкубации исходной суспензии изолированных лизосом при 4

0 — 4 С в течение 24 ч на чувствительность их O к изменению рН среды. Показано, что устой- Я чивость лизоссм к изменению рН возраста- (ь) ла при рН 3 — 8. и

Способ позволяет упростить определение рН-чувствительности лизосом эа счет непосредственного ее измерения при инкубации проб в кювете спектрофотометра.

Способ определения чувствительности лиэосом к рН среды, включающий инкубацию их в растворе сахарозы с этилендиаминтетраацетатом и определение степени разрушения лиэосом по снижению оптиче1702312

Составитель Н.Гуляева

Редактор А.Маковская Техред M.Mîðãåíòàë Корректор О.Кундрик

Заказ 4541 . Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r, Ужгород, ул.Гагарина, 101 ской плотности при 520 нм, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью упрощения способа, инкубацию проводят в 0,7 M растворе сахарозы при 15 С,