Способ количественного определения фурагина

 

Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для определения фурагина в лекарственных формах. Цель изобретения - повышение селективности определения. Пробу нагревают с концентрированной серной кислотой на водяной бане в течение 1 ч. Затем фотометрируют полученный раствор на длине волны 590 нм и по величине оптической плотности определяют содержание фурагина в пробе. 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)ю G 01 N 21/78, 33/52

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4757309/25 (22) 09.11.89 (46) 15.12.91. Бюл. N. 46 (71) Курский государственный медицинский институт (72) А.С.Квач, О,О.Новиков и И,П.Павлик (53) 543.432 (088.8) (56) Коваленко Л.И., Поравлева М.И. Количественное спектрофотометрическое определение фурагина и фурадонина. — Сб. Тезисы докл.конф."Некоторые проблемы биофармации", M., 1 ММИ им. Сеченова, 1973, с. 80 — 81.

Кур!нна Н.В. Спектрофотометричне визначення л!Карських речовин пох!дних 5н1трофуран1в. — Фармацевтический журнал, 1973, N. 6, с, 15-18.

Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для количественного определения фурагина как в таблетках, так и в сложных лекарственных формах.

Известен способ количественного определения фурагина в порошках и таблетках путем выполнения растворением анализируемой пробы в смеси диметилформамида и диоксана (1:1) с дальнейшим раэбавлением полученной смеси. Фотометрирование полученного окрашенного продукта проводят при длине волны (Л) 403 нм.

Недостатком этого способа является большое. количество операций и связанная с этим трудоемкость проведения опыта, а также использование большого количества реактивов, низкая стабильность полученно= го окрашенного продукта.

Наиболее близким к предлагаемому является способ, согласно которому анализи„„5Ц„„1698716 А1 (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУРАГИНА (57) Изобретение относится к фармацевтической химии и может быть использовано для определения фурагина в лекарственных формах. Цель изобретения — повышение селективности определения. Пробу нагревают с концентрированной серной кислотой на водяной бане в течение 1 ч. Затем фотометрируют полученный раствор на длине волны

590 нм и по величине оптической плотности определяют содержание фурагина в пробе.

4 табл. руемый препарат обрабатывают 507-ной серной кислотой и оптическую плотность окрашенного продукта измеряют в ультрафиолетовой области спектра.

Однако при анализе содержания фурагина с помощью данного способа в лекарственных формах выявлены следующие недостатки: при спектрофотометрическом определении содержание исследуемого препарата в процессе нагревания его с

50 )(,-ной серной кислотой опыт необходимо проводить в защищенном от света месте, окраска получаемого окрашенного продукта не стабильна, метод характеризуется большой относительной ошибкой (+ 2,5 ).

Реакция не отличается специфичностью: определение всех производных 5-нитрофурано в основано на измерении светопоглощения в ультрафиолетовой области спектра. Кроме того, при анализе лекарственных препаратов возможно влияние

1698716

Оптическая плотность, А

5 0,025 45

15 0,45

20 0,50

30 0,50

30 0,53

40 0,54 50

50 0,55

60 0,55

90 0,55

120 0,55

150 0,55 55

Пример 1. Фотоэлектроколориметрическое определение фурагина в порошке, Точную навеску порошка фурагина(около 0,01 r) количественно переносят в мерпримесей на измеряемую оптическую плотность получаемых окрашенных продуктов, что может привести к серьезным ошибкам при проведении аналитических исследований. 5

Цель изобретения — повышение селективности.

Поставленная цель достигается обработкой анализируемой пробы концентриро ванной серной кислотой с последующим 10 нагреванием на кипящей водяной бане в течение 1 ч. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют в помощью фо- . тоэлектроколориметра КФК-2 при светофильтре кафф = 590й 10 нм в кювете с 15 толщиной слоя 50,0 мм или с помощью спектрофотометра СФ-46 при длине волны

A,= 590 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10,0 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную сер- 20 ную кислоту.

Выбор оптимальных условий проведения реакции фурагина с концентрированной серной кислотой

Предварительными исследованиями ус- 25 тановлено, что присутствие в реакционной смеси даже минимальных количеств воды мешает взаимодействию, поэтому импольэуют концентрированную серную кислоту.

Выбор оптимального времени нагрева 30 реакционной смеси

Исследования проводят на фотоэлектроколориметре КФ К-2 при значении

М фф= 590 + 10 нм, соответствующем максимальному значению оптической плотно- 35 сти полученных окрашенных растворов в кювете с толщиной рабочего слоя 50,0 мм.

3начение оптической плотности приведено как среднее трех независимых измерений и выведено из значений величины пропуска- 40 ния, Время нагрева мин ную колбу на 250 мл, растворяют в концентрированной серной кислоте и обьем раствора в мерной колбе доводят концентрированной серной кислотой до метки (раствор А). 50,0 мл полученного раствора А переносят в мерную колбу на 250 мл и доводят до метки конЦентрированной серной кислотой(раствор Б), После тщательного перемешивания в мерную колбу на 50,0 мл вносят по 1 мл исследуемого раствора Б, а 1 мл которого содержится 8 мкг фурагина, общий объем раствора доводят концентрированной серной кислотой до 25 мл. Раствор в мерной колбе на 50,0 мл нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают и измеряют оптическую плотность раствора с помощью фотоэлектроколориметра КФ К-2 при Лэфф = 590 + 10 нм в кювете на 50,0 мм.

В качестве раствора сравнения применяют концентрированную серную кислоту, Расчет содержания препарата в пробах вычисляют по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, Построение калибровочного графика

В колбы на 50 мл вносят по 1,0; 3,0; 5,0;

10,0; 20,0 мл стандартного раствора фурагина в концентрированной серной кислоте, содержащего 8 мкг фурагина в 1 мл (раствор

Б), прибавляют недостающий до 25 мл объем концентрированной серной кислоты. Содержимое колб тщательно перемешивают, нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч и после охлаждения измеряют опти-. ческую плотность полученных окрашенных растворов с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 при Лэфф = 590 ++ 10 нм в кю-. вете с толщиной слоя 50,0 мм, используя в качестве раствора сравнения концентрированную серную кислоту.

В табл. 1 приведена зависимость оптической плотности окрашенных растворов от количества фурагина, взятого на реакцию, и расчет уравнения калибровочного графика для фотоэлектроколориметрического определения фурагина с помощью фотоэлектроколориметра КФК-2 в кюветах 50,0 мм при светофильтре Л фф - 540 + 10 нм, Из данных приведенных в табл, 1, следует. что светопоглощение окрашенных растворов фурагина подчиняется закону

Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций 8-160 мкг в 25 мл конечного фотометрируемого раствора.Данные зависимости светопоглощения окрашенных растворов от количества взятого фурагина использованы для расчета па1698716 раметров уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, имеющего общий вид

D=kX+b, где D — оптическая плотность;

k — коэффициент пропорциональности, который равен тангенсу угла наклона калибровочного графика к оси абсцисс; 10

Х вЂ” содержание определяемого вещества в анализируемой пробе,мкг;

Ь вЂ” константа, указывающая, в каком месте прямая пересекает ось ординат.

С учетом рассчитанных параметров k и 15 .Ь уравнение прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика для фотозлектроколориметрического определения фурагина, имеет следующий вид: 20

0 = 0,002X + 0,029.

В табл. 2 приведена зависимость оптической плотности окрашенных растворов от 25 количества фурагина, взятого на реакцию. и расчет уравнения калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина с помощью спектрофотометра

СФ-46 в кюветах 10,0 мм при длине волны 30

il= 590 нм.

Пример 2, Количественное on ределение фурагина в таблетках по 0,05 г.

Точную нэвеску хорошо растертой массы десяти таблеток фурагина (около 1 r) рас- 35 творяют в химическом стакане в 50 мл диметилформамида, Полученный раствор фильтруют через предварительно обработанный диметилформамидом бумажный фильтр (красная полоса) в мерную колбу на 40

250 мл, тщательно перемешивают и общий объем раствора в колбе доводят диметилформамидом до метки. В колбу на 50,0 мл помещают 1-2 мл полученного раствора, диметилформамид выпаривают на кипящей 45 водяной бане. к сухому остатку добавляют

25 мл концентрированной серной кислоты.

Полученный раствор нагревают в течение 1 ч на кипящей водяной бане, охлаждают и окрашенный раствор фотометрируют с по- 50 мощью фотоэлектроколориметра КФ К-2. при светофильтре Яэфф = 590 + 10 нм в кювете на 10 0 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту. 55

Расчет содержания фурагина в анализируемых таблетках производят по калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

В табл. 3 приведены результаты количественного определения фурагина в таблетках по 0,5 г фотоэлектроколориметрическим методом, Из данных табл. 3 следует, что ошибка определения фурагина в таблетках по 0.05 r предлагаемым способом составляет 2,4$.

Пример 3. Спектрофотометрическое определение фурагина в порошке.

Точную навеску фурагина (около 0,01 г) количественно переносят в мерную колбу на

250 мл, растворяют в концентрированной серной кислоте и объем раствора в мерной колбе доводят концентрированной серной кислотой до метки (раствор А), Раствор тщательно перемешивают. 1 мл полученного раствора А вносят в мерную колбу на 50 мл и общий объем жидкости доводят концентрированной серной кислотой до 25 мл. Колбу нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч. охлаждают и измеряют оптическую плотность полученного окрашенного раствора с помощью снектрофотометра

СФ-46 при л, = 590 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту. Расчет содержания препарата в пробах производят по предварительному построенному калибровочному графику или по уравнению прямой, соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика, Построение калибровочного графика.

В колбы на 50,0 мл вносят по 1,0; 3,0;

5,0; 10,0; 20,0 мл стандартного раствора фурагина в концентрированной серной кислоте, содержащего 40 мкг в 1 мл раствора. Во все колбы добавляют недостающий до 25 мл объем концентрированной серной кислоты.

Содержимое колб нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают и проводят измерение оптической плотности окрашенных растворов с помощью спектрофотометра при А = 590 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения концентрированную серную кислоту.

Результаты опытов приведены в табл. 2.

Как следует иэ данных табл, 2, светопоглощение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в пределах концентраций 40 — 400 мкг фурагина в 25 мл конечного фотометрируемого раствора.

Данные табл. 2 используют для расчета параметров k и Ь уравнения прямой, соответствующей прямолинейному участку ка1698716 соответствующей прямолинейному участку калибровочного графика.

Результаты количественного определения фурагина в таблетках по 0,05 спектрофотометрическим методом представлены в табл, 3.

Данные, приведенные в табл. 3, позволяют сделать вывод о том, что с помощью данного способа можно определить содержание фурагина в таблетках по 0,05 г с относительной ошибкой + 1,7%.

Пример 5. Определение фурагина в моче.

При клинических исследованиях возникает необходимость определения концентрации фурагина в моче больного. Ниже приведены спектры фурагина в моче, обработанной по предлагаемому и известному способам, Для этого определенное количество аналйэируемой мочи (раствора препарата в моче) пускают на анализ (значение оптических плотностей приведены как среднее трех независимых измерений).

О = 0,0008Х + 0,020, Предлагаемый способ

Л,нм А

Известный

Л,нм А

0.662

0.455

0.341

0.311

0297

0,288

0.277

0.263

0.255

В результате приведенных примеров доказана селективность способа с использованием аппаратуры, которой располагают аптечные службы и клинические лаборатории.

Формула изобретения

Способ количественного определения фурагина, заключающийся в обработке пробы серной кислотой, измерении оптической либровочного графика методом наименьших квадратов, Уравнение прямой, соответствующее калибровочному графику для спектрофотометрического определения фурагина, имеет вид

В табл. 4 приведены результаты количественного определения фурагина в порошке фотоэлектроколориметрическим и спектрофотометрическим методами.

Данные, полученные при построении калибровочного графика для спектрофотометрического определения фурагина, использованы для расчета значения удельного молярного е „) козффициен1 % 1м та светопоглощения окрашенного раствора, образующегося при взаимодействии фурагина с концентрированной серной кислотой, Удельный коэффициент светопоглоще1 ОЕ ния равен Е „) = 201,08, Молярный коэффициент светопоглощения равен (е 1 ) =5312,83.

1м

Пример 4. Количественное определение фурагина в таблетках по 0,05 г спектрофотометрическим методом.

Точную навеску хорошо растертой массы десяти таблеток фурагина (около 1 г) растворяют в химическом стакане 50 мл диметилформамида. Полученный раствор фильтруют через предварительно обработанный диметилформамидом бумажный фильтр (красная полоса) в мерную колбу на

250 мл. Нерастворившийся остаток в химическом стакане еще дважды обрабатывают новыми порциями ДМФ по 50 мл и получен. ные растворы фильтруют в ту же мерную колбу на 250 мл, Общий объем раствора в колбе доводят диметилформамидом до метки. В колбу на 50,0 мл вносят 1-2 мл полученного раствора, диметилформамид выпаривают на кипящей водяной бане. К сухому остатку добавляют 25,0 мл концентрированной серной кислоты, полученный раствор нагревают в течение 1 ч на кипящей водяной бане, охлаждают и окрашенный раствор фотометрируют с помощью спектрофотометра СФ-46 при длине волны Л = 590 нм в кювете на 10,0 мм. В качестве раствора сравнения используют концентрированную серную кислоту, Расчет содержания фурагина в анализируемых таблетках производят по предварительно построенному калибровочному графику или по уравнению прямой.

25 г

590

0,042

0,041

0,040

0,041

0.043

0,050

0,058

0,077

0,091

0,116

0,136

0,167

0,201

0,258

0,298

0,255

0,223

0,305

0,363

380

1698716

Таблица1

Е) =0,002 Х +0,029.

Таблица 2 — 0.02 .

0 =0,0008Х+ 0,02. плотности полученного раствора и определении концентрации фурагина по значению оптической плотности, отличающийся тем, что, с целью увеличения селективности, 6 x435,6 — 728 х2,18 0 0

6 х 150464 — 728

150464 х 2,18 — 728 х 435,6 0 029

372800

6 X 1016,08 — 2140 х 1,839

6М1 211600 — 2140 пробу нагревают на водяной бане с концентрированной серной кислотой в течение 1 ч, а измерение оптической плотности производят на длине волны 590 нм.

1698716

Номер Взято на ана- Значение оптилиз мкг ческой плотности мкг

Найдено

1 Иетрологические характеристики

Прибор

КФК-2 1

3

93,60

97,40

96,20

93,70

Э7,50

Х» 96,72

5 1,87

6 Х 0,83

2о,чэ» 2,31

А»2,38 . и 96)7L+2,31

Х» 98,240

6 1,337

6 Х 0,598

1 о qs 1,660

Л 1,690 и 98,240О,650

40,00

S3,00

26,10

63,20

50,80

37,50

80,90

27,00

62,40

49)50

0,13

0,25

0,10

0,20

0,17

СФ-46 1

2,3

96,100

98,500

Э8)300

99.600

Э6,500

36,400

81,600

27,300

63,100

50,100

40, 000

83,00

26,100

63,200

50,800

0,174

0,347

0,130

0,272

0,221 таблица 4

Най ено 3 - Нет логические

Прибор Номер взято на ана- Значение оптилиз, мкг ческой плот- . ности д. ) ро мкг характеристики ф

96,30

Э9,50

92,70

100,10

Э6,90

Х» 98,50

G 1.5166

5 Х 0,6762

? о, э » 1,6626

Л 1,91 и 98,5т1)86

Х » 99,080 б 0,8758

2о е 1,0873

5 k 0,392 л 1,0974 и» 99 03+1 09 ъ»44в

41,30

163,30

60,60

126,40

101 80

39,30

162,50

59)20

126,50

100,70

0,14

0,48

0,12

0,38

0,31

КФК-2 1

3

0,1S2

0,672

0,261

0,525

0,419

40,600

163,000

60,300

126)200

99,700

Э8,400

999,800

Э9,500

99,300

97,900

41,300

183,300

60,600

126,400

101,600

Сф -46 1

3

Составитель А.Воробьев

Тех ред М.Моргентал

Редактор M.Ïåòðîâà

КоРРектоР Т,Малец

I*

Заказ 4388 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101