Способ определения количества @ -каротина в белоксодержащих продуктах

 

Изобретение относится к определению содержания Д-каротина в продуктах, содержащих белок. Цель изобретения - сокращение времени определения и упрощение анализа . Пробу материала обрабатывают полярным растворителем при механическом воздействии, экстракт переносят в делительную воронку, осадок декантируют и экстрагируют неполярным растворителем. К полученному объединенному экстракту добавляют воду, встряхивают для полной экстракции полярного растворителя из гексанового экстракта. Окрашенный гексановыйэкстрактподвергают спектрофотометрированию. 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (я)5 G 01 N 33/02,33/48

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ .К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Х—

lTI (21) 4687784/13 (22) 03.05.89 (46) 30.04.92. Бюл. N. 16 (71) Краснодарский политехнический институт (72) С.П.Кудинова, P.Â.Êàçàðÿí, Е.Б.Ремизова и И.С.Кунщикова (53) 557.161.11.01(088.8) (56) Ермаков А.И, и др. Методы биохимического исследования растений. М.— Л,: Сельхозиздат, 1952, с.136. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА Р -КАРОТИНА В БЕЛОКСОДЕРЖАЩИХ

П Р ОДУ КТАХ (57) Изобретение относится к определению содержания Р-каротина в продуктах, содерИзобретение относится к определению содержания Р -каротина в пищевых продуктах, содержащих белок.

Цель изобретения — сокращение времени определения и упрощение анализа, Для этого пробу обрабатывают полярным растворителем при соотношении объема полярного растворителя и массы пробы (5 — 7):1. При механическом воздействии экстракт переносят в делительную воронку, осадок декантируют и экстрагируют неполярным растворителем при -соотношении масс осадок: экстрагент 1:(5 — 15) 2-4 раза.

Экстракт собирают в делительную воронку, добавляют воду в соотношении вода: объединенный экстракт 1:(2 — 6), встряхивают с целью полной экстракции полярного растворителя из гексанового экстракта. Нижний водно-спиртовой слой удаляют, а жащих белок. Цель изобретения — сокращение времени определения и упрощение анализа. Пробу материала обрабатывают полярным растворителем при механическом воздействии, экстракт переносят в делительную воронку, осадок декантируют и экстрагируют неполярным растворителем.

К полученному объединенному экстракту добавляют воду, встряхивают для полной экстракции полярного растворителя из гексанового экстракта. Окрашенный гексановый экстракт подвергают спектрофотометрированию. 1 з.п. ф-лы, 1 табл. окрашенный гексановый экстракт через фильтр с безводным Иа2$04 переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят до метки гексаном и определяют поглощение на спектрофотометре.

Содержание j3 -каротина (мг/г) определяют по формуле где С вЂ” количество каротина (мг) в 1 мг анализируемого раствора, определенное по градуировочному графику;

V — объем анализируемого раствора, мл;

m — на вес ка вещества, г.

Построение градуировочного графика.

1730578

Навеску около 0,02 г кристаллов Р -каротина, взвешенных с погрешностью не более 0,0002 г, тщательно переносят в мерную колбу на 100 см, предварительно заполз ненную на 1/3 гексаном, Следы каротина со стенок воронки и колбы смывают небольшими порциями по 5 см гексана. Объем расз твора в мерной колбе доводят до метки гексаном и тщательно перемешивают (раствор А). Из колбы отбирают пипеткой соответственно 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; 1,0; 1,2; 1,4; 1,6;

1,8; 2,0 мл раствора А и доводят до метки гексаном. Определяют оптическую плотность полученных стандартных растворов на спектрофотометре при 451 нм. На основании полученных данных строят график зависимости оптической плотности стандартных растворов от концентрации в них Р -каротина, По градуировочному графику определяют величину С.

Пример 1. Навеску плавленого сыра переносят в ступку и обрабатывают этанолом в соотношении 1:5, подвергают механической обработке, экстракт сливают в делительную воронку, осадок в ступке шесть раз экстрагируют гексаном в соотношении 1:5, Экстракт переносят в делительную воронку, добавляют воду в соотношении вода: объединенный экстракт

1;6, встряхивают, нижний водно-спиртовой слой удаляют. Гексановый экстракт через фильтр с безводным Ма ЯОд переносят в мерную колбу на 100 мл, доводят до метки гексаном.

Поглощение раствора определяют на спектрофотометре СФ вЂ” 26М на длине волны

451 нм. В качестве контрольного раствора используют гексан.

Содержание Р -каротина (мг/г) определяют по формуле где С вЂ” количество каротина (мг) в 1 мл анализируемого раствора, определенное по градуировочному графику;

V — объем анализируемого раствора, мл;

m — навеска вещества, г.

Пример 2. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают при соотношении его объема и массы пробы

7,5:1, четыре раза экстрагируют гексаном в соотношении 7,5:1, добавляют воду в соотношении 7,5:1.

Пример 3. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 10;1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 15:1, добавляют воду в соотношении 10:1.

Пример 4. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в со5 отношении 2,5:1, шесть раз экстрагируют гексаном в соотношении 30:1, добавляют воду в соотношении 2,5:1.

В связи с тем, что не происходит полного связывания влаги в образце, количество

10 гексана для экстракции увеличивается вдвое.

Пример 5. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 10:1, добавляют воду в соотно15 шении 5:1. Такое количество гексана на экстракцию оказалось избыточным, последняя порция гексана не была окрашена.

Пример 6. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в со20 отношении 12,5:1, три раза экстрагируют гексаном в соотношении 10:1, добавляют воду в соотношении 12,5:1, Пример 7. Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в со25 отношении 5:1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 5:1, добавляют воду в соотношении 5:1.

Произошло неполное извлечение Р -каротина, так как такого количества гексана

30 недостаточно для полного извлечения.

Пример 8, Осуществляют аналогично примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 5:1, один раз экстрагируют гек35 саном в соотношении 30:1, добавляют воду в соотношении 5:1.

При этом происходит неполное извлечение.

Пример 9. Осуществляют аналогично

40 примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 7,5, 1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 20:1, добавляют воду в соотношении 7,5:1.

В таблице приведены результаты опре45 деления содержания Р -каротина, стандартное отклонение и доверительный интервал, полученные в опытах по примерам1,2,3,6и9.

Пример 10. Осуществляют аналогич50 но примеру 1, но этанолом обрабатывают в соотношении 7,5;1, два раза экстрагируют гексаном в соотношении 2,5;1. При этом происходит неполное извлечение Р-каротина.

55 Предлагаемый способ определения Р

-каротина обеспечивает по сравнению с известным сокращение расхода растворителей, уменьшение объемов воды на промывку, а также уменьшение безвозврат1730578

Известный способ

Предлагаемый способ

Образцы с содержанием каротина, мгlг

Доверительные границы

Содержание Относительное з-каротина, стандартное мг/г отклонение, Доверительные границы

Содержание Относительное

1а-каротина, стандартное мг/г отклонение, Ф

Опыт 1

+2,96 10 Э

+3,77-10 3

0,150

Р.

0,121

О,O2O

+6,23 10

+3,21 ° 10 Э о,053

0,100

0,050

+5,01-10

+6,71 .10 о,116 о,о7 о,о7о

Опыт 2

+3,766 10

«3,77" 1о о,146

0,121

0,020

«+4,26. 10

+426!0 ç

0,085

0,071

0,050

+5,17 10 Э

+0,0107

0,»6 о,о6о

0,070

Опыт 3

+ 2,96 ° 10

«1,96-10 о,071

0,021

О, 018

0,022

0,020

0,019

О,О21

0,022

0,018

0,024

0,019

0>»5

0,020

«4,53.10-

«3,87.1o

0,050

0,075

0,044

+3,96. 10

+ 5,63 10

o,î4S о,а7о

o,О65 ных потерь растворителя. Все это улучшает условия труда.

Формула изобретения

1. Способ определения количества Р.

-каротина . в белоксодержащих продуктах, 5 предусматривающий экстракцию растворителем Р-каротина из пробы и измерение показателя, коррелирующего с количеством

Р-каротина в исследуемой пробе, о т л и ч аю шийся тем, что, с целью сокращения 10 времени и упрощения, перед экстракцией пробу обрабатывают полярным растворителем при соотношении объема последнего и о, î17

G,021

o,о18

0,023

О,О20

0,о44 о,о47 о,054

0,056

0,048

0,068 о,o64

0,062

0,072

0,075

o,î17

0,021 о,о18

0,023

0,020 о,о47 о,o45

0,051

0,046

0,053 о,о71

0,064

0,068 о,î72

0,075

0,046

0,049

0,044 о,o53

0,051

0,074

0,068

0,056

0,069

0,072 массы пробы (5 — 7):1, полученный осадок декантируют и экстрагируют, причем в качестве экстрагента используют неполярный растворитель при соотношении масс осадок

: экстрагент 1:(5-15), при этом обработку неполярным растворителем осуществляют

2 — 4 раза с последующим объединением полученных экстрактов и промывают их водой при соотношении вода; объединенный экстрактт 1:(2-6).

2. Способ по п.1. отличающийся тем, что в качестве полярного растворителя используют этиловый спирт, 0,019

О, 017

0,025

0,021

0,019

0,046

0,052

0,051

0,048

0,047

0,067

0,064

0,075

О,O81

0,084 о,о18

0,023

O,oãã

0,024

0,026

O,04S

0,052

0,046

0,044

0,054 о,067.

0,064

0,075

О,ОВ! о,о84

0,044

0,049

0,050

0,052

0,051

0,068

0,068

0,072

0,075

0,071

1730578

Продолжение таблицы

Образцы с содержанием каротина, мгlг

Известный способ

Предлагаемый способ

Содержание Относительное

Р-каротина, стандартное мг/г отклонение, ф

Содержание

1з-каротина, мг/г

Доверительные границы

Доверительные границы

Относительное стандартное отклонение, Опыт 6

1-3,98 10 з

+ 2,26.10

0,165

0,093

0,020

+ 5,77 -10

+4,69 10

0,078

0,097

0,050

+4,78,10 5,45 10-з

0,063

0,О55

0,070

Опыт 9

+3,21"10

+2,05 10

0; 079

0,119

0,020

+ 3,87 10

+4,53 "10

0,063

0,075

0>050

> 3,98. 10

-Ъ

0,048

1 5,63 ° 10

0,065

0,07

45

Редактор М.Петрова

Заказ 1510 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

0,024

0,017

0,019

0,021

0,016

0,047

0,051

0,054

0,046

0,045

0,076

0,068

0,065

0>067

0>072

0,019

0,024

0,018

0,022

0,021

0,049

0,046

0,051

0,053

0,047

0,074

0,068

0,068

0,069

0,072

0,022

0,018

0,021

О, 018

0,019

0,043

0,048

0,044

0,051

0,054

0>065

0,070

0,072

0,О66

0,074

О, 021

О, 018

0,022

0,020

0,019

0,052

0,051

0,050

0,049

0,046

0,068

0,070

0,075

0,072

0,070

Составитель Н.Арцыбашева

Техред М.Моргентал Корректор З,Лончакова