Способ диагностики стадий развития системной склеродермии

 

Изобретение относится к иммунодиагностике активного патологического процесса при системной склеродермии (ССД). Цель изобретения - повышение точности, обеспечение ранней диагностики, ускорение способа и снижение трудоемкости. Для исследования берут кровь из локтевой вены в объеме 2-3 мл. Для выделения лимфоцитов используют градиент плотности фиколл-верографин (1,077 г/мл). Количественную оценку антигенсвязывающих лимфоцитов (АСЛ), реагирующих с кожным антигеном, проводят на основе метода непрямого розеткообразования. Количественную оценку Тусупрессоров и Т)мхелперов проводят в тесте ЕА-розеткообразования. Результаты определения . Ту - лимфоцитов и АСЛ выражают относительным показателем в процентах к числу циркулирующих в периферической крови лимфоцитов Рассчитывают отношение АСЛ к произведению Т и лимфоцитов, выражая его в условных АР Л АСЛ х 100% (уел ед.) Ана т/ единицах. ъ лиз показал, что у больных ССД в 1 стадии: 11,8 уел ед. при 24,2 усл.ед у больных ССД II стадии. 34..0-79.5 усл.ед., 1 табл. сл С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУбЛИК (я)5 G 01 N ЗЗ/53

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССP (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4851958/14 (22) 18,07.90 (46) 23.11.92. Бюл, ¹ 43 (71) Ташкентский государственный медицинский институт

-(72) М.Р, Елисеева, Ф.Ю. Гариб, P,А. Карабаева и В.,Г. Давтян (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТАДИЙ

РАЗВИТИЯ СИСТЕМНОЙ СКЛЕРОДЕРМИИ (57) Изобретение относится к иммунодиагностике активного патологического процесса при системной склеродермии (ССД). Цель изобретения — повышение точности, обеспечение ранней диагностики, ускорение способа и снижение трудоемкости; Для исследования берут кровь из локтевой вены в объеме 2-3 мл. Для выделения лимфоцитов используют градиент плотности фиколл-веИзобретение относится к иммунодиагностике активного патологического процесса при системной склеродермии (ССД).

Известен способ диагностики стадий развития ССД путем оценки клинической картины заболевания с учетом отдельных лабораторно-инструментальных данных (Н,Г. Гусева, Системная склеродермия. — М., Медицина, — 1975, 271 с). Стадии развития .ССД выделены в соответствии с принятой в нашей стране рабочей классификацией ССД (Н.Г. Гусева, 1975). Стадия начальных проявлений (1) характеризуется наличием суставного синдрома, синдрома Рейно или поражения кожи; отличается от развернутой стадии (генерализации — 11 и терминальной — III) отсутствием висцеральной патологии, полисиндромности и полисистемности поражения, Относительное диагностическое значение имеют лабораторные. Ц. 1777083 А1 рографин (1,077 г/мл). Количественную оценку антигенсвязывающих лимфоцитов (АСЛ), реагирующих с кожным антигеном, проводят на основе метода непрямого розеткообразования. Количественную оценку

Т. — супрессоров и Т»- хелперов проводят в

Р тесте ЕА-розеткообразования. Результаты определения T —. Т вЂ” лимфоцитов и АСЛ выражают относительным показателем в процентах к числу циркулирующих в периферической крови лимфоцитов. Рассчитывают отношение АСЛ к произведению Т. и

Тч лимфоцитов. выражая его в условных единицах;, АСЛ х 100$ (усл.ед.). АнаАСЛ .,Ч лиз показал, что у больных ССД в 1 стадии:

11,8 усл.ед. при 24,2 усл.ед. у больных ССД

Il стадии. 34,0 — 79.5 усл.ед., 1 табл. данные, важные в основном для установления степени активности заболевания: определение . СОЭ, СРБ, серомукоида, аг —, )"глобулинов, РФ в средних титрах, исследование мочи, оксипролина в плазме крови и моче, определение иммуноглобулинов классов G, А,М„морфологическое исследование биоптатов кожи. Установлено накопление. АНА, увеличение ЦИК при диффузной, быстро прогрессирующей ССД. Для диагностики висцеральной патологии необходимо также проведение ряда инструментальных исследований (рентгенологическое исследование органов грудной клетки, желудочно-кишечного тракта, суставов, при необходимости зндоскопическое, ультразвуковое исследование, ЭКГ, изучение функции внешнего дыхания, почек), При далеко зашедших изменениях с развитием тяжелых фиброзно-склеротических или сосудисто-некротических поражений, приводящих

° 3

1777083 к недостаточности тех или иных органов, диагностируют терминальную стадию.

Цель изобретения — повышение точности, обеспечение ранней диагностики, ускорение способа и снижение трудоемкости, Предлагаемый способ осуществляется следующим образом, Для исследования берут кровь из локтевой вены (2 — 3 мл крови в пробирки, содержащие гепарин, — 25 ЕД на 1 мл жидкости), .

Выделение лимфоцитов проводят по методу

А. Boym (Вауп1 А. — Separation blood

lencocytes. granulocytes and lymphocytes, Tissue Antigens. — 1974. — N 4, — р. 269}.

Регуляторные Т-субпопуляции (Т супрессоры и Т„-хелперы) определяют по I .

Moretta е.а. (J. gmmunol. 1976, — N 117, —.р.

2171-74) в модификации Ф.10, Гариба, М,В.

Залялиевой (Нормативные материалы по содержанию отдельных субпопуляций лимфоцитов в периферической крови человека в возрастном аспекте. Методические рекомендации. Ташкент, 1983. — с, 4 — 7). Принцип метода заключается в образовании розеток

Т-лимфоцитами с эритроцитами, нагруженными антиэритроцитарными антителами классов G или M- и основан на выявлении

Т-лимфоцитов, несущих рецепторы к Fc— фрагменту иммуноглобулина 6 (Т -клеткисупрессоры) и М:(Т -клетки-хелперы).

Количественная оценка антигенсвяэывающих лимфоцитов (АСЛ) проводилась на основе метода непрямого роэеткообраэования (Ф.I0. Гариб и соавт. Клиническая ценность определения антигенсвязывающих клеток у больных брюшным тифом и другими заболеваниями. Методические рекомендации. Ташкент. 1983. — с. 3 — 8). Принцип метода заключается в образовании розеток, состоящих из центрально расположенного сенсибилизированного лимфоцита и прикрепленных к нему эритроцитов, предварительно нагруженных кожным антигеном.

Результаты определения Т -, T -лимфоцитов, АСЛ выражали относительным показателем в процентах к числу циркулирующих в периферической крови лимфоцитов.

Рассчитывается коэффициент степени аутоиммунизации (КСАИ), вычисляемый по формуле: КСАИ = „х 100% (усл.ед,)

АСЛ

> х

Анализ показал, что у здоровых лиц КСАИ составляет в среднем (M m) — 1,4"-0,16 усл,ед„при М 2гтот 0.74 до 2,5 усл,ед. Стадия начальных проявлений ССД(1) характеризуется КСАИ равным в среднем 16Я ь0,9 усл.ед., при М+2гт от 8,7.до 25,1 усл.ед. Генерализованная стадия (II) характеризуется

20

25 Рентгенограмма коленных суставов: на фоне бедренной кости в мягких тканях множе40

- общ.ан.крови: ускорение СОЭ до 30 мм/час, 50 ЦИК в сыворотке крови — 2,2 ед. ОП, АСЛ—

10%, Т вЂ” лимфоциты — 5,3%, Тр -лимфоциты — 7,8%, КСАИ вЂ” 24,2 усл.ед„что соответствует I стадии ССД.

КСАИ в среднем равным 61,0+3,1 усл,ед., при M+2p 31,5 до 90,5 усл.ед, Показатели

КСАИ у больных с терминальной стадией (III) существенно не отличаются от таковых при генералиэованной стадии (II).

Пример 1, Больная M., 35 лет. Диагноз — системная склеродермия (ССД) хронического течения, первой стадии, II стадии активности. Синдром Рейно, склеродермический полиартрит, сгибательные контрактуры суставов кистей, гиперпигментация кожи, кальциноз мягких тканей. Длительность заболевания 7 лет. Начало заболевания с болей и скованности в мелких суставах кистей с последующим присоединением синдрома Рейно, пора>кени:> кожи. Объективно: синдром Рейно, дефигурация коленных, голеностопных суставов, сгибательные контрактуры мелких суставов кистей, гиперпигментация кожи лица и шеи, кальциноэ мягких тканей по ходу позвоночника, в области коленных суставов, ягодиц, На рентгенограммах костеи и стоп — остеопороз, местами сужение межсуставных .щелей. ственные петрифицированные тени, В общ,ан. крови ускорение СОЭ до 30 мм/ч, альбуминь1 — 38,1%, 1"-глобулины — 35,7%, РФ в латекс-тесте 1/320, lj — лимфоциты—

6,7%, Ту - лимфоциты — I0,1%, АСЛ вЂ” 8%, КСАИ вЂ” 11,8 усп.ед„что соответствует 1 стадии ССД, Пример 2. Больная Ш.. 48 лет. Диагноз: ССД хронического течения, первой стадии, II степени активности, Индурация и гиперпигментация кожи, синдром Рейно, полиартралгии, Длительность заболевания — 8 лет. Начало заболевания с синдрома

Рейно с последующим поражением кожи, суставов. При объективном обследовании у больной выявлен плотный отек кистей, лица, индурация и гиперпигментация кожи конечностей, симптом "кисета", трофические нарушения пальцев кистей, отмечается выраженный синдром Рейно. На рентгенограмме кистей — околосуставной остеопороз. На ЭКà — синусовая аритмия, В

П р и м .е р 3. Больная А., 33 года.

Диагноз: ССД хронического течения, II стадии, степени активности. Плотный отек, индурация и гиперпигментация кожи. синдром Рейно, полиартралгии, начальные про1777083 явления поражения желудочно-кишечного тракта. Длительность заболевания 4 года, Начало заболевания с синдрома Рейно, Объективно: плотный отек кистей, индурация и гиперпигментация кожи конечностей, 5 живота, лица, выраженный синдром Рейно.

Рентгеноскопия желудочно-кишечного тракта — гастроптоз, явления гастрита, спастическая деформация толстого кишечника. На ЭКà — дистрофические изменения мио- 10 карда. В общ.ан.крови — ускорение СОЭ не наблюдается (14 мм/час). ЦИК в сыворотке крови — 1,3 ед. ОП, T — супрессоры-4,2%

Т - хелперы — 7,7%, АСЛ вЂ” 11%, KCAN — 34,0 усл.ед,. Данное значение КСАИ является от- 15 ражением начала иммунологической генералиэации. заболевания, предшествующей клинической генерализации и соответствует ll стадии ССД, Пример 4. Больная К., 54 гадя. Диаг- 20 ноз: ССД хронического течения, второй стадии, I стадии активности. Диффузный пневмофиброэ, кардиосклероз, эзофагит, гиперпигментация кожных покровов, синдром Рейно, Длительность заболевания 23 25 года. Объективно: состояние больной средней тяжести, цианоз губ, акроцианоз, одышка, Отмечается выраженный синдром

Рейно, гиперпигментация кожи лица, симптом "кисета". На рентгенограмме органов 30 грудной клетки — диффузный пневмофиброз. На ЭКà — синусовая брадикардия. Гипертрофия левого желудочка, перегрузка миокарда левого предсердия, В общем анализе крови: ускорение СОЭ до 25 мм/час, 35

LlMK-2,2 ед, ОП, Т>-супрессоры — 4,2%, Т— хелперы — 5,4%, АСЛ вЂ” 18%, КСАИ вЂ” 79,4 усл.ед., что соответствует I I стадии ССД.

Пример 5. Больная X„42 года.

Диагноз; ССД хронического течения, терми- 40 нальная стадия (III), активность lll степени, Выраженные-сосудистые и трофические нарушения (синдром Рейно, множественные стойкие иэъязвления на кончиках пальцев рук, выпадение волос, падение массы тела 45 на 15 кг). поражение кожи (индурация и атрофия), склеродермический полиартрит, диффузный пневмофиброэ, легочная недо-. статочность ill степени, декомпенсировэнное легочное сердце,— НК II Б — III ст, 50

Больная погибла при явлениях нарастающей легочно-сердечной недостаточности.

Длительность заболевания 15 лет. Начало заболевания с синдрома Рейно. Объективно: состояние больной крайне тяжелое.

Диффузный цианоз, нарастающая одышка, набухшие шейные вены, отеки на ногах, печень выступает на 4 см из-под края реберной дуги. Отмечается выраженный синдром

Рейно, синюшность пальцев кистей с изъязВлениями и дистрофическими и"-.Гленони»ми, цианоз пальцев стоп, индурация и гиперпигментация кожи лица и конечностей, симптом "кисета". На рентгенограмме органов грудной клетки-диффузный пневмофиб- роз, На ЭКГ-синусовая тахикардия, желудочковые экстрасистолы, блокада правой ножки пучка Гиса. Гипертрофия обоих желудочков v. левого предсердия с дистрофическими изменениями и перегрузкой в миокарде. В общ, ан; крови — ускорение

СОЭ до 42 мм/час, ЦИК вЂ” 2,8 ед. ОП, РФ в латекс-тесте 1/120, Т -супрессоры — 4,7%.

Т„- хелперы — 4,4%, АСЛ вЂ” 16%, КСАИ вЂ” 77,4 усл.ед., что соответствует развернутой стадии заболевания (11 и!1I), Данный пример не вошел в представленную таблицу, Однако иммунологическое обследование данного слу гая покязало, что вhlðçæåíность имMóíîлогических сдвигов, а также цифровое значение КСАИ не выходят за пределы показателей генерализованной стадии, что является подтверждением приоритета физического износа пораженных органов в патогенезе развития терминальной стадии заболевания, Положительный эффект от использования предлагаемого способа, B сравнении с прототипом, состоит в повышении точности, что подтверждается показателями все.. групп больных, которые не перекреьциваются, позволяя проследить за развитием стадий, показывая его достоверность. Кроме того, способ обеспечивает раннюю диагностику и прогноз перехода начальной стадии и развернутую стадию ССД.

Ранняя диагностика возможна при условии специфичности способа. 1ак, при расАСЛ чете соотношения ., «100 (усл.ед.), где

Т;xT„

АСЛ, реагирующие с тем же кожным антигеном, в группе больных хронической экземой его цифровое значение составляет:

5,55» 0,5 усл,ед. при М+2п от 2,6 до 8,4 усл,ед. против 16,9+0,9 усл.ед. при М+2и от 8,7 до 25,1 усл,ед. у больных с I стадией

ССД (р<0,01). Ускорение способа и снижение трудоемкости, по сравнению с прототипом, об еспечивается эа счет одномоментного исследования 10 человек, время исследования 24 ч (в прототипе 5 — 7 дней), Способ неинвазивен и осуществить его можно в амбулаторных условиях, тогда как прототип предусматривает эндоскопические, рентгенологические и другое комплексное обследование, требующее стационарного наблюдения.

Формула изобретения

Способ диагностики стадий развития системной склеродермии, включающий исс1777083

Показатели КСАИ у здоровых лиц и больных ССД в зависимости от стадии заболевания

Составитель М, Иванов

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор О, Кравцова

Редактор

Заказ 4120 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР.

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул,Гагарина, 101 ледование крови, отл ича ю щи йс я тем, что, с целью повышения точности, обеспечения ранней диагностики, ускорения способа и снижения трудоемкости, в периферической крови больного определяют количественное содержание антигенсвязывающих лимфоцитов, реагирующих с кожным антигеном, Т -супрессоры и -хелперы, вычисляют в условных единицах отношение антигенсвязывающих лимфоцитов к произведению Т и Т и при.значении от 11,8

5 до 24,2 диагностируют l стадию заболевания, от 34,0 до 79,5 диагностируют ll стадию системной склеродермии.