Средство, проявляющее антиоксидантную активность

 

Изобретение относится к медицине, а именно к фармакотерапии нарушений, связанных с перекислым окислением эндогенных липидов. Цель изобретения - повышение специфической антиоксидантной активности. Для этого используют бис- М,М-диметил-М-(карбомвктилоксиметил) аммонийэтил сульфид дихлорида в качестве средства, проявляющего антиоксидантную активность. 3 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 А 61 К 31/045

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4860349/14 . (22) 15.08.90 (46) 30.03.93. Бюл. й. 12 (71) Черновицкий государственный медицинский институт (72) И.Ф,Мещишен и И,В.Мегера (56) М.Д.Машковский "Лекарственные средства", Пособие по фармакотерапии для врачей. Медицина. 1987, изд, Х, т.2, с, 37 — 39.

Изобретение относится к;биологически активным веществам, а именно,к группе синтетических антиоксидантов.

Цель изобретения — выявление в ряду четвертичных аммониевых соединений препаратов, обладающих наиболее высокой антиоксидантной активностью. Это достигается тем, что в качестве антиоксиданта используют бис-N,N-диметил-N-(карбоментилоксиметил)аммонийэтил сульфид дихлорида (БДАСХ), Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Опыты проведены на крысах-самцах массой 180 15 r, получавших ежедневно молоко и хлеб. Животных убивали декапитацией под легким эфирным наркозом, быстро забирали печень, замораживали и на льду готовили 5 -ный гомогенат, используя

0.15 М фосфатный буфер (рН 5,9). В гомогенате печени определяли: скорость НАДФНзависимого (НАДФН-3) перекисного окисления липидов (ПОЛ) в инкубационной среде следующего состава (в конечной концентрации): 5 10 М НАДФН, 2 10 М АДФ

„„ Ы„„1804841 А1 (54) СРЕДСТВО, ПРОЯВЛЯЮЩЕЕ АНТИОКСИДАНТНУЮ АКТИВНОСТЬ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к фармакотерапии нарушений, связанных с перекислым окислением эндогенных липидов. Цель изобретения повышение специфической антиоксидантной активности. Для этого используют бисN, N-диметил-N-(кар бомвктилоксиметил) аммонийэтил сульфид дихлорида в качестве средства, проявляющего антиоксидантную активность. 3 табл. и 12 10 М FeSO<; скорость аскорбатзави-6 симого ПОЛ (АС-3) в среде: 8 10 М аскорбата, 2 10 М АДФ и 12 10 M Ре304.

Скорость ПОЛ в гомогенате печени исследовали по образованию малонового диальдегида (МДА) и рассчитывали в мкмолях МДА на 1 г ткани за 30 мин инкубации. Активность супероксиддисмутаэы (СОД) измеряли по скорости торможения реакции восстановления нитросинего тетразолия в присутствии НАДН2 и фенадинметасульфата. За единицу активности СОД принимали количество фермента. необходимое для

50 .-ного торможения восстановления тетразолия в условиях определения и выражали в единицах на 1 мг белка за 1 мин

Содержание белка определяли биуретовым методом. активность глутатионредуктазы (ГР) — спектрофотометрическим методом, глутатионпероксидазы (ГП) и содержание восстановленного глутатиона — титрационным методом. Антиоксидантную активность заявляемого соединения сравнивали с такими известными антиоксидантами: витамином Е, восстановленным глутатионом и дигидроаскорбиновой кислотой. Получен1804841

Таблица 1

Влияние бис-N,N-диметил-й-(карбоментилоксиметил) аммонийэтил сульфид дихлорида на скорость ПОЛ печени белых крыс (в мкмолях МДА/г ткани эа 30 мин) Таблица 2

Влияние восстановленного глутатиона и аскорбиновой кислоты на скорость НАДФН-зависимого ПОЛ печени белых крыс (в мкмолях МДА/г ткани за 30 мин) (M m; n = 6) ные экспериментальные данные обрабатывались методом вариационной .статистики, В табл,1 представлены результаты изучения влияния БДАСХ на скорость НАДФНи аскорбатэависимого ПОЛ печени белых крыс.

Как видно из данных табл.1, ферментативное (НАДФ-зависимое) ПОЛ более чувствительное к действию предлагаемого соединения, чем аскорбатэависимое.

Действие заявляемого соединения на скорость перекисного окисления эндогенных липидов в сравнении с антиоксидантной активностью восстановленного глутатиона и аскорбиновой кислоты представлены в табл.2. Приведенные данные показывают, что аскорбиновая кислота и восстановленный глутатион проявляют выраженное ингибирующее влияние на скорость ферментативного окисления эндогенных липидов лишь при относительно высоких, по сравнению с заявляемым соединением (табл.1), конечных концентрациях (400 — 2000 мкмоль/R), Следовательно, БДАСХ является более мощным (в 5-10 раз) ингибитором скорости ферментативного окисления эндогенных липидов печени, чем восстановленный глутатион и дигидроаскорбиновая кислота.

В опытах 1и vivo изучено влияние

БДАСХ и витамина Е на состояние антиоксидантных ферментов печени (табл,3), В этой серии опытов животным, предварительно голодавшим 12 часов, внутрибрюшинно вводился БДАСХ 8 дозе 10 мг/кг и витамин

Š— 100 мг/кг. Через 12 ч после введения препаратов животных убивали и в гомогенатах печени изучали показатели активности

"0 антиоксидантных ферментов печени, содер-. жание МДА и восстановленного глутатиона.

Введение животным БДАСХ и витамина Е— ацетата вызывает достоверное понижение уровня МДА в печени. Оно обусловлено, в первую очередь, повышением активности

СОД, обезвреживающей супероксид анионрадикалы.

Таким образом, заявляемое соединение обладает более высоким антиоксидантным

20 действием, чем применяемые природные антиоксиданты: витамин Е, восстановленный глутатион и дигидроаскорбиновая кислота.

Формула изобретения

Применение бис-N,N-диметил-N-(карбоментилоксиметил)аммонийэтил сульфид дихлорида в качестве средства, проявляющего антиоксидантную активность, 1804841

Продолжение табл. 2

Таблица 3

Влияние бис-N,N-диметил-N-{карбоментилоксиметил) аммонийэтил сульфид дихлорида и витамина Е на активность антиоксидантных ферментов печени крыс (M m; n = 6) Из чаемые показатели

Витамин Е

6,6+0,15

3,94 +0,31

240 +-3,68

0,48 +0,ОБ*

26 +0,87*

0,36 -0,02

39= -1,62

0,58 +.0,06*

28+1,24*

П р и м е ч а н и е. Звездочкой отмечены достоверные изменения по сравнению с контролем (Р/0,05).

Составитель И, Мещищен

Техред М,Моргентал Корректор Л. Филь

Редактор

Заказ 912 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и.открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Глутатион восстановленный. мкмоль на 1 г ткани .

Глутатионредуктаза, нмоль НАДНФ на 1 мг белка/мин

Глутатионпероксидаза, нмоль восстановленного глутатиона на 1 мг белка/мин

Супероксиддисмутаза, единиц на 1 мг белка/мин

Малоновый диальдегид, мкмоль на 1 г ткани

Конт оль

7.14 й0,43

3,86+0,25

246 4,92

Б ACX

8. 67"=0,37

3,88 -0,35

252й5 67