Способ получения биологически активного препарата из дрожжей

 

Использование: биотехнология, ветеринария , получение иммуностимулирующего препарата. Сущность изобретения; Сухие дрожжи делят на две части, одну часть подвергают щелочному гидролизу 1 М раствором щелочи при 100-120°С в течение 1 ч, а другую - кислому гидролизу 1 М раствором HCI в тех же режимах. Полученные гидролизаты смешивают, доводят рН до нейтрального значения и отделяют целевой продукт в виде нерастворимой фракции. Препарат проявляет иммуностимулирующую активность . 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)л А 61 К 35/72

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Ч!е;ОТЕЙ емтнетим- ее еевиевте . т

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4902856/13 (22) 23.10.90 (46) 15.04.93. Бюл. ¹ 14 (71) Молодежный центр "Проспект" (72) П.Е. Игнатов, А.В, Горбатов и А.И. Федоров (56) Патент CLLIA N 4313934, кл. А 61 К 39/00, 1982, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ПРЕПАРАТА ИЗ ДРОЖЖЕЙ

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к технологии пол учения иммуностимулирующего препарата.

Сущность предлагаемого изобретения сводится к тому, что биологически активный препарат получают путем гидролиза дрожжей (пекарских ГОСТ 20085 или кормовых

ГОСТ 171 — 81). Дрожжи разделяют на две части, одну часть разрушают кислотным гидролизом, а другую. равную, щелочным, После проведения обоих гидролизов, гидролизаты смешивают, Устанавливают нейтральное значение рН, отделяют осадок, который промывают три-четыре раза дистиллированной водой. Промытый осадок содержит до 90 Д сахаров представленных глюканом. Полученный осадок ресуспендируют в физрастворе до концентрации 1 мг/кл и используют в качестве биологически активного вещества.

Пример 1. 50 грамм сухих пекарских дрожжей заливают 200 мл дистиллирован, ной воды. Полученную суспензию разделяют на две равные части, к одной части добавляют HCI, доводя конечную концентрацию кислоты до 0,5 M. Ко второй части

„„. Ж ÄÄ 1808331 А1 (57) Использование: биотехнология, ветеринария, получение иммуностимулирующего препарата, Сущность изобретения; Сухие дрожжи делят на две части, одну часть подвергают щелочному гидролизу 1 M раствором щелочи при 100 — 120 С в течение 1 ч, э другую — кислому гидролизу 1 М раствором

HCl B тех же режимах. Полученные гидролизаты смешивают, доводят рН до нейтрального значения и отделяют целевой продукт в виде нерастворимой фракции. Препарат проявляет иммуностимулирующую активность. 1 табл, t приливают NaOH, доводя ее концентрацию до 0,5 М. Гидролиз обеих частей проводят в течение одного часа при 100оС в емкостях с обратным холодильником. После окончания гидролиза — гидролизаты смешивают, охлаждают до комнатной температуры и устанавливают рН вЂ” 7,0. Смесь гидролизатов центрифугируют, отделяют осадок, который промывают 3 раза дистиллированной во-. дой, очищая его от растворимых белков и полисахаридов. Полученный препарат суспендируют в физиологичеком растворе и стерилизуют и применяют для нормализации иммунного статуса животных.

Пример 2. Делают две навески кормовых дрожжей по 25 грамм, Одну навеску дрежжеи ресуспендируют в 100 ме 1 М HCI, ), другую в 1 М NaOH, Обе части гидролизуют в колбах с обратным холодильником при

120 С в течение одного часа. После гидролиза, гидролизаты объединяют, охлаждают, устанавливают нейтральное значение рН, Осадок отделяют отстаиванием, сливая нэдосадочную жидкость, далее осадок промывают дистиллированной водой, 1808331

Изучение биологической активности препаратов in vitro u in vlvo

Составитель А,Федоров

Техред М,Моргентал Корректор А.Мотыль

Редактор

Заказ 1231 Тираж Подписное ВНИИПИ.Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35,.Раушская наб„4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101 стерилизуют и готовят рабочее разведение и Репарата.

Пример 3. Биологическую активность препаратов исследуют in volvo u in vitro, Общепринятыми методами определяют количество антителообразующих клеток селезенки (тест Ерне) и индекс стимуляции, количество макрофагов и фагоцитарный индекс, комплемент фиксирующую активность препарата и лизоцимную активность сыворотки крови, Изучали способность препарата защищать мышей от заражения сальмонеллезом. Мышам вводили препарат, полученный по примеру 1 и 2, а через

48 часов их заражали вирулентным штаммом Salmonella tiphimyrium 415 в дозе 10

LDso. Учет гибели животных вели в течение

10 дней и рассчитывали процент выживших мышей, Из таблицы следует, что предложенный способ позволяет получать препарат, ïðîявляющий высокую биологическую активность, воздействуя на разные звенья иммунной системы организма.

Формула изобретения

Способ получения биологически активного препарата из дрожжей, включающий гидролиз дрожжей и отделение целевого продукта, отличающийся тем, что, дрожжи разделяют на две равные части, одну часть подвергают кислотному гидролизу

1М раствором НС1, а другую — щелочному гидролизу 1М раствором NaOH, гидролиз проводят при температуре 100 — 120 С в течение 1 ч, затем полученные гидролизаты смешивают, доводят рН до нейтрального значения и отделяют целевой продукт в виде нерастворимой фракции,