Способ профилактики болезни гамборо
Использование: ветеринария, вирусология Способ профилактики болезни Гамборо включает использование вакцины, изготовленной на основе штамма вируса ГКВ Nfe 2200 и содержащей обезжиренное молоко в равном соотношении. Введение вакцины цыплятам осуществляют путем выпаивания вместе с водой в дозе 10 - ТЦДво/мл б табл
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (5!)5 С 12 N 7/00 А 61 К 39/12
ГОСУДАРСТВЕН-ЮЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) - ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4919303/13 (22) 19.03.91 (46) 30.06.93. Бюл. N.. 24 (71) Всесоюзный научно-исследовательский ветеринарный институт птицеводства (72) А.С.Алиев (56) Avian Disease, 23, 2, 457, 1978. (54) СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ БОЛЕЗНИ
ГАМ БОРО
Изобретение относится к ветеринарии, в частности к вакцинам против болезни Гамборо и к способам их применения, Целью изобретения является получение высокоиммуногенной, эффективной, безвредной вакцины, а также обеспечение высокого уровня иммунитета в условиях массового заражения птиц и уменьшения трудоемкости процесса вакцинации.
Для достижения цели в качестве вакционного штамма используют штамм "ВНИВИП", представляющий собой авирулентный генетически однородный вирусный материал, легко культивируемый в культуре клеток куриных фибробластов с высокой биологической активностью (титр вируса 1055 — 106вТЦД зов мл), Для профилактики болезни Гамборо птицу иммуниэиоуют путем дачи вакцины с водой в
104.0 -1-ЦД /
На первом этапе работы берут 1 — 2 ампулы лиофилиэированного штамма"ВНИВИП", добавляют в них по 2 мл стерильного физиологического раствора..Полученную суспензию используют для заражения 1,5-литровых матрацов с 24-ча.БЫ 1824443 А1 (57) Использование: ветеринария, вирусология, Способ профилактики болезни Гамборо включает использование вакцины, изготовленной на основе штамма вируса ГКВ N
2200 и содержащей обезжиренное молоко в равном соотношении. Введение вакцины цыплятам осуществляют путем выпаивания вместе с водой в дозе 10 — 10 ТЦД5о мл.
Э, 4,О
6 табл, совым MQHocëoåì культуры куриных фибробластов из расчета 0,01 ТЦДьо/ ï вируса на клетку, В контроле оставляют матрацы с незараже>и ой культурой клеток. Затем матрацы помещают в термостат пр» температуре +37,5-38 С в течение 36-48 часов.
Матрацы с зараженным монослоем трехкратно замораживают и размараживают по мере наступления цитопатического действия вируса в виде дегенерации и округления клеток и появления в клетках мелкой зернистости без нарушения целостности монослоя.
Вируссодержащую культуральную жидкость сливают в одну емкость для контроля на стерильность по общепринятой >летодике в соответствии с ГОСТом 28085-89 и биологическую активность путем титрации на культуре куриных фибробластов. Для титрования берут 7 стерильных пробирок и разливают стерильный физиологический раствор по 9 см . Из исходного разведения вируса (1. 10) берут 1 мл, вносят в первую пробирку, тщательно перемешивают и 1 Мп полученного раствора переносят в следующую пробирку. Путем последовательного
1824443 разведения заполняются осе пробирки, Для каждого разведения используют отдельную пипетку, Вирус каждого разведения в обьеме 0,2 мл вносят о 4 пробирки с культурой куриных фибробластов, устанавливают f3 штативах под углом 50-7" в неподвижном состоянии при температуре 37,5 — 38" С на 1 час для контакта вируса с культурой клеток.
Затем в каждую пробирку вносят поддер кивающую среду по 1 мл и инкубируют при температуре 37,5 — 38 С о течение 7 суток.
Четыре пробирки с незараженной культурой клеток оставля<от для контроля, Цитоанзтомический эффект вируса учитывают под микроскопом в течение 7 суток и оысчитыоз<от тканевую цитопатическую дозу.
Вируссодержащую культуральную жидкость с титром не ниже 10 -10 ТЦД5о!«<л
55 60 испольэу<от для лиофилиэации с обезжиренным молоком, Лиофилиэировзннзя вакцина хранится при температуре +4 -8 С в течение от 1 года до 1,5 лет.
Пример 1, Эффективность вакцины при введении цыплятам.рззличных доз.
Опыты проводились на 14-дневных
СПФ-цыплятах с использованием оакцины активность<О не ниже 10 ТЦД5О/мл Предг>,о варительно были приготовлены десятикратные разоедепия вируса и каждом его разведением были иммуниэирооаны по 10
СПФ-цыплят, Вакцину выпаивали с водой.
В контроле использовали 10 неозкционированных СПФ-цыплят. Иммуногенная активность вируса о разных разведениях оценивали по результатам контрольного заражения цыплят о опытных и контрольных группах через 14 суток после введения оакцины. Опыт проводили трижды (табл.1);
Из данных таблицы следует, что 1007; иммунитет создается при выпаиоании вакцины СПФ-цыплятам в дозе 10 ТЦД5О/<<л. э
Однако учитывая, что при вакцинации цыплят с пассивным имму«итетом требуется наличие некоторого "запаса" вируса. о качества имму«изирующей дозы определили не менее — 10 ТЦДОО/ «<. з,з
Пример 2. Эффективность вакцины от способа ее введения.
Было сформировано три подопытных руппы по 15 голов в каждой и одна контрольная группа. Опыт проведен на 14-днеоных СПФ-цыплятах и для иммунизации цыплят испольэооалзсь одинзковая доза вакцины (10 ТЦД5О/л), В пеРвой гРУппе
3,5 цыплятам озкцину ооодили с вОдой, оо второй — и><трз«аэзльно, о третьей — онутримы45
50 дневного возраста, Для этого было сформировано 13 групп цыплят по 15 голов е каждой. Цыплят с 1 по 4 группы вакцинировали вакциной производства ГДР в дозе 10
2 -3 -4 . 10, 10 и 10 тЦД5О/мл, соответственно.
Вакцину производства Франции испытывали в аналогичных дозах на цыплятах 5, 6, 7 и 8 групп.
Вакциной из штамма "ВНИВИП" выпаивали цыплят в 9 по 12 группах в дозах 10
10, 10, 10 тЦД5О/ соответственно.
Цыплята в 13 группе не вакцинировались, их испольэовали в качестве контроля, Оценку эффективности вакцин проводили по реэультатэм KQHãðol<üíoãо заражения
55 шечно. Контрольное заражение цыплят в опытных и контрольной группах проводили через 14 суток после вакцинации путем интранаэального введения вирулентного вируса болезни Гамборо (табл,2), Из данных, представленных в табл. 2. следует, что при введении вакцины в одинаковой дозе СПФ-цыплят наиболее высокий процент сохранности обеспечивается при оыпойке вакцины с водой.
Пример 3. Эффективности вакцины от уровня материнского иммунитета цыплят, Опыты проведены на цыплятах разного возраста. доставленных из неблагополучного птицехозяйства по болезни Гамборо.
Предварительно в каждой возрастной группе цыплят определили уровень материнских антител. Для этого у пяти цыплят в каждой
20. группе стерильно брали кровь, готовили общую пробу сыворотки и исследовали в реакции нейтрализации в культуре клеток куриных фибропластов. Цыплят всех групп вакцинировали против болезни Гамборо в
ДОЭЕ 10 ТЦД5О/«л ПУТЕМ ВЫПОйКИ И ПО 15 э.з невакцинированных голов испольэовали в качестве контроля.
Через 14 суток после вакцинации цыплята во всех группах были заражены виру30 лентным штаммом вируса болезни Гамборо (та бл.3).
Пример 4. Сравнительная оценка эффективности разных вакцин от дозы ее введения.
35 В опытах использованы вакцины производства Франции иэ штамма "Люкерт", производства ГДР и опытные образцы вакцины иэ штамма "ВНИВИП".
При проверке активности вируса в ука40 занных вакцинах, титр биологической ак тивности во всех случаях составил не ниже
10 ТЦД50/мл
Изучение эффективности укаэанных вакцин проводили на СПФ-цыплятах 141824443
50 цыплят осех групп через 14 суток после их вакцинации (табл.4).
Результаты контрольного заражения показывают, что, при вакцинации ць<плят вирулентным штаммом в дозе от 10 до 10 5
ТЦДюу <. независимо от происхождения штамма, обеспечивается 100-процентная защита птиц. Наиболее высокую иммуногенную активность при воедении вируса даже в минимальных дозах, оказывала вакцина. изготооленная из штамма "ВНИВИП".
Пример 5, ЭФфектионость вакцин против болезни Гамборо от способа их введения.
Для сравнения испытывали три метода введения вакцин: выпойку, интраназальный и внутримышечный. Доза оведения препарата для всех групп была одинаковая. Было сформировано 9 подопытных и одна контрольная группа (табл.5).
Эффективность применения оакцин производства ГДР и ВНИВИП при различных методах введения оказалась одинаковой, но значительно выше по сравнению с французской вакциной при их интраназальном и внутримышечном оведении, Пример 6, Эффективность оакцин при иммунизации цыплят разного возраста, Иммунизацию проводили с использооанием трех вакцин на цыплятах 7-, 14-, 21-, 28-дневного возраста. Вакцину в одинаковых дозах даоали с оодой. Через 14 суток после вакцинации цыплят о подопытных и контрольных группах заражали оирулентным вирусом болезни Гамборо. Результаты этих исследований представлены п табл.б.
Из данных, представле«ных о таблице, следует, что, по своим иммуногенным свойствам при введении цыплятам с материнскими антителами, вакцина, изготовленная из штамма "ВНИВИП, не уступает препарату. выпускаемому в ГДР, и значительно превосходит вакцину Франции.
Таким образом, полученные данные свидетельству<от о возможности изготооления вакцины иэ штамма "ВНИВИП" для предупреждения заболевания у цыплят, вызываемого вирусом болезни Гамборо.
t0
Произоодстоенные «I.f Гасагропрома РСФСР (М: 41 109/61 от 22.01.90r) в неблагополучном по болезни Гамборо птицехозяйстое Рязанской области. Птицу оакцинирооал<1 согласно разработанному наставлению по применению. Было привито и ревакцинироолно более 5 млн. птиц. Результаты испытаний показали, что живал вакцина против болез«и Гамборо из штамма "ВНИВИП" способствует повышению сохранности поголовья бройлеров I
0,1,, увеличению живой массы одного бройлера на 0,4 г и уменьшен<1<о затрат кормов lla 0,07 кг «а 1 ц привеса. Экономический эффект с учетом затрат l
Основываясь на результатах лабораторных «произоодствен«ых опытов по иэучеFIиlo l"" 1м" I l0ãåll < Формула изобретения
