Производные цефалоспорина или их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли и способы их получения

 

Использование: в медицине в качестве противобактериальных средств. Сущность изобретения: продукт - производные цефалоспорина ф-лы, приведенной в тексте описания, при определенных значениях радикалов и способы их получения. 3 с. п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- (замещенный) иминоацетамидо] -3-[3-(четвертичный аммонио)-1- пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилатам формулы I R¹NH (1) в которой R¹ и R² имеют значения, определенные ниже и ⊕N ≡ Q представляет собой четвертичную аммонио-группу, определенную ниже, и к их солям и сложным эфирам. Изобретение также относится к способам получения соединений формулы (I), к фармацевтическим композициям, содержащим, по крайней мере, одно соединение формулы (I), и к промежуточным продуктам для их получения.

Известны цефемовые и цефамовые соединения формулы в которой R¹ представляет собой амино или защищенный амино; R² представляет собой водород, ацил, не обязательно замещенный арил, замещенный алкил, алкенил, алкинил, необязательно замещенный циклоалкил, циклоалкенил или О- или S-содержащее 5-членное гетероциклическое кольцо, замещенное оксо-группой (или группами); R³ представляет собой водород или алкил; R⁴ представляет собой водород, ацилоксиалкил, ацилтиоалкил, не обязательно замещенный пиридиниоалкил, не обязательно замещенный гетероциклилтиоалкил, алкил, галоген, гидроксил или не обязательно замещенный тиазолиоалкил; и R⁵ представляет собой карбокси или защищенную карбокси; при условии, что R⁵ представляет собой СОО, когда R⁴ представляет собой не обязательно замещенный пиридиниоалкил или не обязательно замещенный тиазолиоалкил;
и пунктирная линия показывает наличие или одинарной, или двойной связи,
Известны [1] цефемовые соединения формулы

в которой R¹ представляет собой амино или защищенный амино;
R² представляет собой не обязательно замещенную низшую алифатическую углеводородную группу, или циклоалкенил; и
группа формулы
представляет собой не обязательно замещенную гетероциклическую катионовую группу, содержащую более одного атома азота; и фармацевтически приемлемые соли их. Также раскрываются промежуточные соединения формулы:
CH в которой R¹ и R² имеют определенные значения, R⁴ представляет собой защищенную карбоксильную группу, и Х^- кислотный остаток.

Известны [2] цефемовые соединения формулы:
CH^⊕₂N
где R¹ амино или защищенный амино;
R² не обязательно замещенная низшая алифатическая углеводородная группа, цикло (низший) алкил или цикло (низший) алкенил;
R³ (низший) алкиламино, N-защищенный (низший) алкиламино, ди(низший) алкиламино, сульфо(низший) алкиламино, окси(низший) алкиламино, N-защищенный окси (низший) алкиламино, ацилокси (низший) алкил, (низший) алкокси (низший) алкокси (низший) алкил, ди (низший) алкиламино (низший) алкил, (низший) алкилтио (низший) алкил, (низший) алкилтио, (низший) алкокси, (низший) алкокси (низший) алкокси, окси (низший) алкокси, ацил (низший) алкил, окси (низший) алкилтио, ди(низший) алкиламино(низший) алкилтио, N-содержащая ненасыщенная 5-членная гетероциклическая группа, N-содержащая ненасыщенная 5-членная гетероциклическая тиогруппа, или N-содержащий ненасыщенный 5- или 6-членный гетероциклический тио(низший) алкил, который может быть замещен подходящим или подходящими заместителями; и
R⁴ водород или (низший) алкил; или соли их.

Известны соединения формулы

где R¹ амино или защищенный амино;
R² (низший) алкил и Х водород или карбамоил.

Известны цефемовые соединения формулы
Am T CONH где m равно 0 или 1;
Am не обязательно замещенный амино;
Т тиадиазолильный фрагмент (присоединенный к другим группам своими двумя атомами углерода);
R₂ водород, не обязательно замещенный алкил, циклоалкил или не обязательно замещенный карбамоил; и
R₁ не обязательно замещенный тиазолио, не обязательно замещенный пиразолио, три (низший) алкиламмонио или пиридинио группа формулы
в которой R^a замещенный (низший) алкил [причем, заместителем является циклоалкил, фенил, окси, алкокси, галоген, циано, карбамоил, карбоксил или сульфо] (низший) алкенил или карбоксизамещенный (низший) алкенил, (низший) алкилтио или карбокси замещенный (низший) алкилтио, амино или моно-замещенный амино [заместителем является (низший) алкил, (низший) алканоил или аминобензолсульфонил] ди (низший) алкиламино, замещенный карбамоил [заместителем является (низший) алкил окси (низший) алкил, (низший) алкокси, гидроксил или циано] ди (низший) алкилкарбамоил, тиокарбамоил, циклоалкил, фенил, гидроксил, (низший) алкокси, галоген, (низший) алкоксикарбонил, (низший) алканоилокси, (низший) алканоил, карбоксил, сульфо, циано, нитро или оксисульфо (низший) алкил;
R^b водород или карбамоил, или имеет то же значение, что и R^a и R^c- водород или имеет те же значения, что R^a; и их соли.

Известны 3-винил-цефемовые соединения формулы
Rʹ- A CONH гетероциклическая группа, которая может также иметь галоген, или группа формулы:
R³SO₂HN в которой R³ (низший) алкил; R² карбокси или защищенная карбокси и А низший алкилен, который может иметь заместитель, выбранный из групп: амино, защищенный амино, гидроксил, оксо и группы формулыN ≈ OR⁴, в которой R⁴ водород, цикло (низший) алкенил, (низший)-алкинил, (низший) алкенил [не обязательно замещенный группой карбокси или защищенной карбокси] (низший) алкил [не обязательно замещенный одной или более из групп карбокси или защищенной карбокси, амино, защищенной амино, циано, фосфоно, защищенной фосфоно и гетероциклической группы, которая сама по себе может быть замещенной] и их соли.

Соединения формулы
в которой OR⁴ метокси, карбоксиметокси, трет-бутоксикарбонилметокси или 1-трет-бутоксикарбонилэтокси.

Известен обширный ряд цефалоспоринов формулы
R O NH
в которой R водород или органическая группа, R^a простая этерифицирующая моновалентная органическая группа, связанная с кислородом через атом углерода, В группа S или S _→ O и Р органическая группа. В одном из воплощений Р может представлять собой наряду с другими винильную группу формулы
-CH= C в которой R³ и R⁴ независимо могут представлять собой водород, нитрил, (низший) алкоксикарбонил, или замещенный или незамещенный и алифатический, циклоалифатический, аралифатический или ароматический. Однако 5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ильная группа не идентифицирована в качестве возможного R заместителя и нет никакого высказывания или предположения о том, что Р может быть четвертичной аммонио-замещенной пропенильной группой.

Известны соединения формулы
Rʹ- CONH в которой R¹ (незамещенный) тиадиазолил;
R² карбокси(низший) алкил или защищенный карбокси (низший) алкил;
R³ водород, галоген или (низший) алкенил; и
R⁴ карбокси или защищенный карбокси.

Хотя в качестве одного из возможных значений R³ указывается 1-пропенил, в заявке иллюстрируются только соединения, в которых R³ водород, хлор или винил.

Известны производные формулы
в которой R⁵ наряду с другими может быть алкилом, винилом, цианометилом или защитной группой, такой как 2-метоксипроп-2-ил, и R³ и R⁴представляют собой алкильные группы (не обязательно замещенные группами окси, алкокси, амино, алкиламино или диалкиламино), или фенильные группы, или R³ и R⁴, взятые вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать насыщенное гетероциклическое кольцо из 5 или 6 членов, не обязательно содержащее еще один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы, и не обязательно замещенное алкильной группой. Данные соединения полезны в качестве промежуточных продуктов при получении 3-тиовинилцефалоспориновых производных. В патенте нет никакого описания или предположения о наличии 5-амино-1,2,4- тиадиазол-3-ильного фрагмента вместо 2-аминотиазол-4-ильного заместителя, или четвертичного аммонио-замещенного пропенильного фрагмента в качестве 3-заместителя.

Известны 3-винилцефалоспориновые производные формулы
в которой R₅^a и R₅^b являются одинаковыми или различными и представляют собой водород или алкил, или взятые вместе, образуют алкиленовую группу, содержащую 2 или 3 атома углерода,
R₅^c представляет собой группу, защищающую кислоту,
R₂ представляет собой защитную группу кислоты, такую, как сложноэфирную группу,
R₃ и R₄ являются одинаковыми или различными и представляют собой водород, алкил (не обязательно замещенный гидроксилом, алкокси, амино, алкиламино или диалкиламино) или фенильные группы, или
R₃ и R₄ взятые вместе с азотом, к которому они присоединены, могут образовывать 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, не обязательно содержащее еще один гетеро-атом, выбранный из азота, кислорода и серы, и не обязательно замещенное алкильной группой. Эти соединения полезны в качестве промежуточных продуктов при получении 3-тиовинил-цефалоспориновых производных. Нет указания или предположения о наличии 5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил фрагмента вместо 2-аминотиазол-4- ильного заместителя или четвертичной аммонио-замещенной пропенильной группы в качестве 3-заместителя.

Известен обширный ряд 3-винилцефалоспориновых производных формулы
R^o_1a-NH в которой R_1a⁰ (в одном из нескольких воплощений) может быть группой формулы
- в которой R₅ наряду с другими может представлять собой водород, алкил, винил, цианометил, оксим-защищающую группу, такую как тритил, и др. или группу формулы
C -OOR^c₅ в которой R₅^a и R₅^b являются одинаковыми или различными и могут представлять собой водород, алкил, или, взятые вместе, алкиленовый радикал с 2 или 3 атомами углерода, и
R₅^c представляет собой водород или кислото-защищающий радикал;
R_2a^o представляет собой водород или кислото-защищающий радикал, такой как метоксиметил;
R^o (в одном из нескольких воплощений) может быть метильной группой, замещенной 5- или 6-членным ароматическим гетероциклическим кольцом, содержащим единственный гетеро-атом, таким как 2- или 3-пиридил, 2- или 3-тиенил или 2- или 3-фурил; и
R₃ представляет собой группу формулы R₄SO₂O в которой R₄ может представлять собой алкил, тригалоидметил или не обязательно замещенный фенил.

Эти соединения являются промежуточными продуктами при получении соединений, в которых 3-заместитель представляет собой группу формулы
-CH=SR которые не обладают антибактериальной активностью.

Хотя предусматривается возможность того, чтобы R⁰ представлял собой метильную группу, замещенную N-содержащим гетероциклическим кольцом, как в промежуточных соединениях, так и в конечных продуктах (давая таким образом гетероциклический замещенный пропенильный фрагмент), но говорится только, что гетероциклическое кольцо присоединено через один из его атомов углерода. Таким образом, совершенно не предполагается четвертичная аммонио-замещенная пропенильная группа. Данная ссылка приводит в качестве примера R^o в промежуточных соединениях и конечных продуктах только метил. Кроме того, и в промежуточных, и в конечных продуктах пропенильная группа должна содержать еще один заместитель (соответственно -O₃SR₄ или -SR). Нет указания или предположения о наличии 5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ильного фрагмента вместо 2-амино- тиазол-4-ильного заместителя.

Известны 3-винилцефалоспориновые промежуточные соединения формулы
H₂NCH= CH-R³ в которой n равно 0 или 1, R⁵ водород, алкил, винил, цианометил или оксим-защитная группа, и R³ галоген.

Данная заявка относится к новым цефалоспориновым производным, которые являются сильными противобактериальными агентами. Более конкретно, она относится к соединениям формулы
RʹNH в которой R¹ представляет собой водород или общепринятую аминозащищающую группу, R² представляет собой водород, алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, циклоалкильное или циклоалкенильное кольцо, содержащее от 3 до 6 атомов углерода, или группу формулы
CH CH-R³, - C ≡ C R³, в которых R³ представляет собой водород, (низший) алкил или карбоксил; Х представляет собой галоген, гидроксил или (низший) алкокси; и R⁴ и R⁵каждый независимо представляет собой водород, метил или этил; или R⁴ и R⁵, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут представлять циклоалкилиденовое кольцо, содержащее от 3 до 5 атомов углерода; и группа -⊕N≡Q представляет собой четвертичную аммонио-группу; и к нетоксичным фармацевтически приемлемым солям и физиологически гидролизуемым сложным эфирам их. В объем данного изобретения включены также сольваты (включая гидраты) соединений формулы (I), а также таутомерные формы соединений формулы (I), например 2-иминотиазолин-4-ильная форма 2-аминотиазолл-4-ильного фрагмента. Согласно еще одному аспекту, данная заявка относится к способу получения соединений формулы (I) и к некоторым промежуточным продуктам при их получении.

Как показано в структурной формуле, соединения формулы (I) имеют "син" или "Z" конфигурацию по отношению к алкоксиимино-группе. Вследствие того, что соединения являются геометрическими изомерами, может также присутствовать некоторое количество "анти" изомера. Данное изобретение включает соединения формулы (I), содержащие, по крайней мере, 90% "син" изомера. Предпочтительно, соединения формулы (I) представляют собой "син" изомеры, которые фактически свободны от соответствующих "анти" изомеров. В дополнение к геометрическим изомерам, возможным относительно алкоксиимино-группы, соединения формулы (I) (и промежуточные соединения формул VIII и IX) также образуют геометрические изомеры (цис и транс) в связи с двойной связью пропенильной группы. В сферу изобретения конкретно включены, как цис (Z), так и транс (Е) изомеры этих соединений.

Нетоксичные фармацевтические приемлемые соли соединений формулы (I) включают соли с минеральными кислотами, такими как соляная, бромистоводородная, фосфорная и серная, или с органическими карбоновыми кислотами, или сульфокислотами, такими как уксусная, трифторуксусная, лимонная, муравьиная, малеиновая, щавелевая, янтарная, бензойная, винная, фумаровая, миндальная, аскорбиновая, яблочная кислота, метансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая и другие кислоты, известные и используемые в области пенициллинов и цефалоспоринов. Приготовление этих кислотно-аддитивных солей осуществляется с помощью общеизвестных приемов.

Примеры физиологически гидролизуемых сложных эфиров соединений формулы (I) включают инданиловый, фталидиловый, метоксиметиловый ацетоксиметиловый, пивалоилоксиметиловый, глицилоксиметиловый, фенилглицилоксиметиловый, 5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4- илметиловый и другие физиологически гидролизуемые сложные эфиры, известные и используемые в области пенициллинов и цефалоспоритов. Такие сложные эфиры приготавливаются с помощью общепринятых приемов, известных в данной области.

Соединения формулы (I), в которой R¹ представляет собой водород, проявляют высокую противобактериальную активность против различных грамположительных и грамотрицательных бактерий и являются полезными при лечении бактериальных заражений у животных, включая человека. Соединения формулы (I) могут преобразовываться в препаративные готовые формы для парэнтерального использования общепринятым образом, с использованием известных фармацевтических носителей и эксципиентов, они могут быть представлены в форме дозированных единиц или в многодозовых контейнерах. Композиции могут быть в форме растворов, суспензий или эмульсий в масляном или водной носителях, они могут содержать общепринятые диспергирующие, суспендирующие или стабилизирующие агенты. Композиции также могут быть в форме сухого порошка для подготовки к применению непосредственно перед использованием, например со стерильной, свободной от пирогенов водой. Соединения формулы (I) могут также преобразовываться в препаративные формы в виде медицинских свечей с использованием общепринятой основы для свечей, такой как масло какао или другие глицериды. Соединения изобретения, могут, если необходимо, назначаться в сочетании с другими антибиотиками, такими как пенициллины и другие цефалоспорины.

Когда композиции предусматриваются в форме дозированных единиц, они предпочтительно содержат от около 50 до 1500 мг активного ингредиента формулы (I). Доза соединений формулы (I) зависит от таких факторов, как вес и возраст пациента, а также от конкретного характера и остроты заболевания, и находится в пределах компетенции врача. Однако доза для взрослого человека обычно находится в интервале примерно от 500 до 5000 мг в сутки, в зависимости от частоты и способа применения. Когда препарат назначается взрослому человеку внутримышечно или внутривенно, общая суточная доза, составляющая примерно от 750 до 3000 мг в виде раздельных доз, обычно будет достаточной, хотя в случае заражения бактериями рода Pseudomonas могут быть желательными более высокие суточные дозы некоторых соединений.

Четвертичная аммонио группа формулы -⊕N≡Q может быть ациклической, циклической или может представлять сочетание двух, может содержать один или более дополнительных гетеро-атомов, выбранных из атомов азота, серы и кислорода.

Примером ациклической четвертичной аммонио-группы является группа формулы
-- R⁷ в которой R⁶, R⁷ и R⁸ могут быть одинаковыми или различными и могут представлять, например, (низший) алкил или замещенный (низший) алкил, в котором заместителями являются, например, галоген, амино при условии, что амино-группа не может быть у альфа-углерода, гидроксил, при условии, что гидроксильная группа не может быть у альфа-углерода, (низший) алкокси при условии, что алкокси-группа не может быть у альфа-углерода, (низший) алкилтио, (низший) алкиламино, ди(низший)алкиламино, карбамоил, (низший) алкенил, фенил(низший) алкил, фенил или замещенный фенил (в котором заместителями могут быть, например, галоген, гидроксил, амино, (низший)алкиламино, ди(низший)алкиламино, ациламино, (низший)алкил, (низший) алкилтио, (низший)алкокси или аналогичные).

Примерами циклических четвертичных аммонио-групп являются полностью ненасыщенные моноциклические гетероциклические кольцевые системы и бициклические гетероциклические кольцевые системы, в которых, по крайней мере, одно N-содержащее кольцо является полностью ненасыщенным. Подходящие циклические четвертичные аммонио-кольцевые системы включают, например, системы формул
-⊕N -⊕N -⊕N,

- ,
RR⁹, R _,
,
_R9 и аналогичные, в которых R⁹ и R¹⁰ являются одинаковыми или различными и могут представлять собой, например, водород, галоген, амино, (низший)алкил, (низший)алкенил, (низший) алкилтио, карбокси, гидроксил, (низший)алкокси, (низший) алкокси (низший)алкил, галоид (низший)алкил, окси(низший)алкил, амино (низший)алкил, (низший) алкиламино (низший) алкил, ди(низший) алкиламино (низший) алкил, (низший)алкиламино, ди(низший) алкиламино, карбокси (низший)алкил, карбокси (низший) алкиламино, карбокси (низший) алкилтио, карбамоил N-(низший)алкилкарбамоил, формиламино, ациламино, ацилокси, фенил, пиридил, амидино, гуанидино и аналогичные. Когда структура гетероциклического кольца позволяет, R⁹ и R¹⁰ взятые вместе, могут представлять алкиленовую группу, содержащую от 3 до 5 атомов углерода, например пропилен.

Примеры объединенных ациклических (циклических четвертичных) аммонио-групп включают, например, группы формул
NR¹², NR¹², NR¹²
N, N, N
N, NR¹², NR¹²,
NN-(низший) алкил NR¹², и аналогичные, в которых R¹¹ может представлять собой, например, (низший) алкил, (низший) алкокси (низший) алкил, окси (низший) алкил, при условии, что окси не может быть у альфа-углерода, карбокси(низший) алкил, амино (низший) алкил с условием, что амино не может быть у альфа-углерода, (низший) алкенил, галоид (низший) алкил, аллил и аналогичные, и R¹² может представлять собой, например, водород, окси, галоген (низший) алкил, окси (низший) алкил, (низший) алкокси(низший) алкил, галоид(низший) алкил, амино (низший) алкил, (низший)алкокси, (низший) алкилтио, (низший) алкенил, амино, (низший) алкиламино, ди(низший) алкиламино, ациаламино, ацилокси, карбамоил, амидино (низший) алкил, фенил, пиридил, амидино, гуанидино и аналогичные.

Предпочтительными четвертичными аммонио-группами являются группы формул
⊕-, -⊕N
R¹⁸, и в которых R¹³, R¹⁴ и R¹⁵ являются одинаковыми или различными и представляют собой (низший)алкил, (низший) алкенил, амино (низший) алкил при условии, что амино не может находиться у альфа-углерода, или окси (низший) алкил при условии, что гидроксильная группа не может находиться у альфа-углерода;
R¹⁶ представляет собой водород, (низший) алкил, (низший) алкокси, (низший) алкилтио, (низший) алкиламино, ди(низший) алкиламино, формиламино, (низший)алканоиламино, карбокси, гидроксил, карбокси(низший) алкил, карбокси (низший) алкилтио, окси (низший) алкил, галоид (низший) алкил, амино (низший) алкил, (низший) алкокси (низший) алкил, карбамоил или N-(низший) алкилкарбамоил, или R¹⁶ может представлять двухвалентную алкиленовую группу, имеющую от 3 до 5 атомов углерода.

R¹⁷ представляет собой (низший) алкил, (низший) алкокси (низший) алкил, галоид(низший) алкил, аллил, окси (низший)алкил при условии, что гидроксильная группа не находится у альфа-углерода, амино (низший) алкил при условии, что амино группа не находится у альфа-углерода, или фенил (низший) алкил;
R¹⁸ представляет собой водород, (низший) алкил, (низший) алкокси, (низший) алкокси (низший) алкил, (низший) алкилтио, амино, (низший) алкиламино, ди (низший) алкиламино, карбокси, гидроксил, карбокси (низший) алкил, окси (низший) алкил, амино (низший) алкил, формил-амино, (низший) алканоиламино, карбамоил или N-(низший) алкилкарбамоил;
n представляет собой целое число от 1 до 3 включительно;
Z представляет собой СН₂ или, когда n-2, Z также может быть серой, кислородом или группой N-R¹⁹ в которой R¹⁹ представляет собой водород или (низший) алкил; и
R²⁰ и R²¹ являются одинаковыми или различными и представляют собой водород, (низший) алкил, (низший) алкокси, (низший) алкилтио, амино, (низший) алкиламино, ди (низший) алкиламино, карбокси, гидроксил, окси (низший) алкил, амино (низший) алкил, (низший)алкокси (низший) алкил, карбокси (низший) алкил, карбокси (низший) алкиламино, (низший) алканоиламино, карбокси (низший) алканоиламино, карбамоил или N-(низший) алкилкарбамоил.

Особенно предпочтительными четвертичными аммонио-группами являются N-(низший) алкилпирролидино (и особенно N-метилпирролидино) три (низший) алкил (аммонио) и особенно триметиламмониопиридинио, аминопиридинио, формиламинопиридинио, карбамоилпиридинио, амино(низ- ший) алкилпиридинио, карбоксипиридинио, окси (низший) алкилпиридинио, N-(низший) алкилкарбамоилпиридинио, (низший) алкиленпиридинио, 2-метилтиазолио и 2-амино-5-тиазоло (4,5-с) пиридинио.

В соединениях формулы (I) особенно предпочтительными значениями R²являются (низший) алкил (и особенно метил), циклоалкилсодержащий от 3 до 5 атомов углерода, 1-карбоксициклоалк-1-ил, содержащий от 3 до 5 атомов углерода, аллил, пропаргил и карбокси (низший)алкил (особенно 2-карбоксипроп-2-ил). Наиболее предпочтительными соединениями данного изобретения являются:
1) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(триметиламмонио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-кар-боксилат,
2) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(1-метилпирролидинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-кар- боксилат,
3) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамино] 3-[3-пиридинио-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат.

4) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-аминопиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбо-ксилат,
5) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-формиламинопиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат,
6) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-аминометилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат,
7) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат,
8) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат,
9) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(2-метилтиазолио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбокси- лат,
10) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(2-амино-5-тиазоло[4,5-c]пиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем- 4-карбоксилат,
11) 7,[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-оксиметилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат,
12) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-оксиметилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат,
13) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-{N-метилкарбамоил}пиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат,
14) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(2,3-пропиленпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем- 4-карбоксилат,
15) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-этоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат,
16) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- циклопентилоксииминоацетамидо]-3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1- пропен-1-ил]-3- цефем-4-карбоксилат,
17) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-аллилоксииминоацетамидо] -3- [3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем- 4-карбоксилат,
18) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-пропаргилоксиимино- ацетамидо] -3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-це- фем-4- карбоксилат,
19) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбоксипиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат,
20) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-этоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбоксипиридинио)-2-пропен-1-ил]-3-цефем-4-кар- боксилат,
21) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-карбо-ксиметилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-це- фем-4- карбоксилат, и
22) 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбо-ксиметилтиопиридинио)-1-пропен-1-ил]-3- цефем-4- карбоксилат.

Система нумерации, используемая здесь для различных реагентов, промежуточных соединений и конечных продуктов является следующей:
[Римские цифры] (
Римская цифра обозначает, является ли соединение конечным продуктом (I) или промежуточным соединением, или другим реагентом [все другие римские цифры] Арабские цифры и буквенные обозначения не используются в тех случаях, когда имеется в виду общий класс (род) соединений.

Арабские числа обозначают конкретное значение заместителя R². Если частная R² группа содержит карбоксильную группу, которая защищена обычной карбоксилзащищающей группой, для указания на это после арабской цифры используется значок "прим" ('). Значок "прим" не используется, если карбоксильная группа является незащищенной. Значок "прим" также используется с родовым заместителем (т. е. R²¹), когда относится в общем к R² группе, содержащей защищенную карбоксильную группу.

Буква в конце номера соединения относится к частному значению четвертичной аммонио грппы -⊕N≡Q
Для удобства арабские числа и буквы, приписанные некоторым из предпочтительных R²-групп и четвертичных аммонио-групп, представлены ниже.

Арабское R²
число
1 метил
2 этил
3 аллил
4 пропаргил
5 циклопентил
Буква _⊕N≡Q
А 1-метилпирролидинио
В пиридинио
С 2-амино-5-тиазоло[4,5-c]
пиридинио
D триметиламмонио
Е 3-аминопиридинио
F 3-формиламинопиридинио
G 3-карбамоилпиридинио
Н 4-карбамоилпиридинио
I 3-аминометилпиридинио
J 2-метилтиазолио
К 3-оксиметилпиридинио
L 4-оксиметилпиридинио
М 4-(N-метилкарбамоил) пи-
ридинио
N 4-карбоксипиридинио
О 2,3-пропенилпиридинио
Р 3-карбоксиметилпири-
динио
Q 4-карбоксиметилтиопи-
ридинио
При первичной оценке соединений изобретения определялись минимальные ингибирующие концентрации (МИК) соединений с помощью метода двукратного разбавления агара на агаре Мюллера-Хинтона против 32 штаммов испытываемых организмов в шести группах. Геометрические значения МИК, определенные в этих испытаниях, показаны в табл.1.

(G+1)-1a: Чувствительный к пенициллину S. aureus (5 штаммов)
(G+1)-1b: Устойчивый к пенициллину S. aureus (5 штаммов)
(G-1)-1a: Чувствительный к цефалотину E. coli (2 штамма), К1, pneumoniae (1 штамм) и Pr. mirabilis (2 штаммов)
(G-1)-1b: Устойчивый к цефалотину E.coli (3 штамма) и (2 штамма)
(G-1)-11: M. morganii (1 штамм), Ent. cloacae (2 штамма) Sir. mazcescens
(G-1)-III: Ps. aezuginosa (7 штаммов)
В табл.2 дана защитная доза (PD₅₀) при опыте на мышах для ряда соединений формулы (I) против отобранных микроорганизмов. В табл.3 дано содержание в крови различных соединений формулы (I) при внутримышечном назначении испытываемых соединений мышам в дозе 20 мг/кг.

Согласно еще одному аспекту данное изобретение относится к процессам получения соединений формулы (I). Предпочитаемые процедуры показаны ниже на схемах реакции 1a, 1b и 1с, при этом на схеме реакции 2 показан альтернативный прием. Сокращение "Ph" означает фенильную группу. Таким образом (-CH/Ph)₂ фрагмент представляет собой бензгидрильную группу, которая является предпочтительной карбоксилазащищающей группой. Когда R² содержит карбоксильную группу, желательно защитить карбоксильную группу общепринятой группой, защищающей карбоксил, такой как трет-бутильная группа, Y представляет собой хлор, бром или иод.

Cхема реакции 1a




На схеме реакции 1а показаны два альтернативных способа реакции, начиная от соединения IX до соединения XII. Прямой путь, использующий третичный амин (XI) применим для получения всех соединений формулы (I). Косвенный путь, через соединение (X), использует в качестве реагента вторичный амин, и на следующей стадии осуществляется кватернизация. Вторичный амин RR'NH может быть ациклическим (например, диметиламин) или циклическим (например, пирролидин), и данный косвенный способ, следовательно, является пригодным для получения соединений формулы (I), в которых четвертичная аммонио-группа является ациклической или "смешанной" ациклической циклической. Данный косвенный способ не пригоден для получения соединений формулы (I), в которых четвертичный азот находится в полностью ненасыщенном гетероциклическом кольце (например, пиридинио, тиазолио, 2-амино-5-тиазоло[4,5-c]пиридинио, и аналогичные).

Схема реакции 1b
CHO


Схема реакции 1b представляет собой видоизменение схемы реакции 1а, заключающееся в том, что 7-амино-группа исходного вещества (II) является защищенной в виде Шиффова основания в течение большинства из стадий реакции, и позднее в ходе синтеза добавляется требуемая 7-боковая кислотная цепь. В других отношениях общая процедура является сходной.

Реакционная схема 1с


Схема реакции 1с является дальнейшим видоизменением схемы реакции 1b. Согласно схемам реакции 1а и 1b кватернизация 3-боковой цепи является последней стадией, а по схеме реакции 1с последней стадией является ацилирование 7-амино-группы. Взаимосвязь между схемами реакций 1а, 1b и 1с показана на следующей схеме.

На схемах реакций 1а, 1b и 1с бензгидрильная группа показана в качестве предпочтительной карбоксилзащищающей группы. Специалистам в данной области техники должно быть понятно, что могут использоваться и другие карбоксилзащищающие группы, хорошо известные в технике. Ацилирующая кислота формулы (III) может использоваться в форме производного, такого как галоидангидрид кислоты, активированный сложный эфир, смешанный ангидрид кислоты и др. все из которых хорошо известны в технике. Мы предпочитаем использовать ее в форме хлорангидрида кислоты. Ацилирующая кислота формулы (III) также может иметь амино группу, защищенную любой из обычных аминозащищающих групп, например N-тритильной, N-формильной или аналогичной. Основанием, используемым для превращения иодида фосфония (VI или XV) для получения фосфорилида (VII или XVI) может быть гидроокись натрия, карбонат натрия, смола IRA-410 (OH^-), смола IRA (CO₃^-) или аналогичные, или смеси их. Хлорацетальдегидом, используемым для превращения фосфорилида VII в 3-хлорпропенил-3-цефемовое соединение VIII (или соединения XVI в соединение XVII) может быть коммерчески доступный 40-50% водный раствор, дистиллированный раствор (например 70%) или безводный альдегид. Обнаружили, что соединение VIII, полученное из соединения VII (схема 1а) в типичном случае имеет соотношение Z:E около 2:1 при пропенильной двойной связи. Соединение VIII, получаемое из соединения XVIII (схема 1b), с другой стороны, обычно почти исключительно состояло из Z изомера. Разница не может заключаться в используемом способе, а в условиях, используемых при реакции Виттига (VII в VIII или XVI и XVII). Также обнаружили, что использование соответствующего силильного реагента, такого как N, O-бис-(триметилоилил)ацетамид в реакции Виттига (VII в VIII в схеме 1а и XVI в XVII по схеме 1b) вызывало улучшение выходов и чистоты соединений VIII и XVII. Реакция предпочтительно осуществляется с использованием 2-5 эквивалентов силильного реагента. Когда хлорпропенил-цефем (VIII) вводился в реакцию с иодистым натрием в ацетоне, давая иодпропенил-цефем (IX), двойная связь в пропенильной группе изомеризовалась из Z в Е в ходе иодирования. Короткий период реакции сохранял в огромной степени конфигурацию исходного соединения VIII, хотя длительная реакция давала главным образом Е изомер соединения IX. Однако реакция в течение избыточного периода времени при высокой температуре дает более низкую чистоту соединения IX. Реакция в течение около 10 мин при 25^оС и в течение 2 ч при 5^оС дает чистое соединение IX с хорошим выходом. При использовании схемы реакции 1с нашли, что при иодировании соединения XIV иодистым натрием получается более чистое соединение, если раствор ацетона разбавляется четыреххлористым углеродом, когда иодирование в основном завершается, и часть реакции, относящаяся к изомеризации, проводится в смеси ацетона и четыреххлористого водорода. Когда иодирование хлорпропенилцефема (XVII) для получения иодпропенил-цефема (XIX) проводилось с помощью иодистого калия в диметилформамиде, изомеризация двойной связи из Z в Е протекала также быстро, как и иодирование. Вся реакция завершалась за 45 мин при комнатной температуре, давая чистое XIX без разбавления четыреххлористым углеродом в течение реакции.

Соединение XII обычно деблокировалось без очистки, и конечный продукт (I) очищался с помощью хроматографии на колонке с обратной фазой с использованием стеклянной колонки, содержащей насадку, взятую с угольного брикета ПрепПак-500/С₁₃ фирмы Уотерс Ассошиэйтс (Waters Associates)
Схема реакции 2


Схема реакции 2 является аналогичной схеме реакции 1а, за исключением того, что соединение XXIII (эквивалентное соединению IX схемы реакции 1а) превращается в его S-окись перед кватернизацией. Соединение XXV впоследствии восстанавливается, а остальная часть реакционной схемы 2 является такой же, как и схема реакции 1а. По схеме реакции 2 предпочитается защищать амино-группу 7-боковой цепи известной аминозащищающей группой, такой как тритильная группа (трифенилметильная).

Ацилирующие кислоты формулы (III), используемые здесь, являются или известными соединениями, или легко получаются с помощью опубликованных методик. Известен пример получения соединений формулы III, в которых R²представляет собой метил, этил, пропил и изопропил. Известен пример получения широкого разнообразия соединений формулы (III), в которой R²представляет собой, например, циклопентил, 2-циклопентен-1-ил, аллил, 2-пропинил, 1-трет-бутилоксикарбонил-1-метилэтил, 1-трет-бутилоксикарбонил- 1-циклопентил, 1-этоксикарбонил-1-метилэтил, трет-бутил- оксикарбонилметил, 1-трет-бутилоксикарбонил-2- метилпропил, тритил и аналогичные.

Соединение (II) (7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4-карбоксилат), используемое в качестве исходного материала в схеме реакции 1а, 1b и 1с, является известным соединением.

Третичные амины формулы (XI) (и вторичные амины RR'NH), используемые при получении четвертичных аммониосоединений данного изобретения, являются или известными соединениями или легко могут быть получены средними специалистами в данной области. Многие из аминов являются промышленно и коммерчески доступными.

Настоящее изобретение также предоставляет процесс получения соединений формулы

в которой R³ представляет собой водород или обычную амино-защищающую группу, R²-водород, алкильная группа с прямой или разветвленной цепью, содержащая от 1 до 4 атомов углерода, циклоалкильное или циклоалкенильное кольцо, содержащее от 3 до 6 атомов углерода, или группа формул
^{- C} ≡ ^{C - или} в которых R³ представляет собой водород, (низший) алкил или карбоксил, Х представляет собой галоген, гидроксил или (низший) алкокси, и R⁴ и R⁵каждый независимо представляет собой водород, метил или этил, или R⁴ и R⁵, взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут представлять циклоалкилиденовое кольцо, содержащее от 3 до 5 атомов углерода, и группа -⊕N≡Q представляет собой четвертичную аммонио группу, и их нетоксичных фармацевтических приемлемых солей и физиологически гидролизуемых сложных эфиров, причем данный процесс предусматривает взаимодействие соединения формулы
B²HNH= CHCH₂Z в которой R^2' имеет те же значения, что и R², или представляет собой группу формул
^{или -} в которых Х, R⁴ и R⁵ имеют значения, определенные выше, В¹ представляет собой общепринятую карбоксилзащищающую группу, В² является водородом или общепринятой амино-защищающей группой, представляет хлор, бром или иод, и m равно нулю или единице, с третичным амином Q ≡ N (или последовательно с вторичным амином RR'NH и соединением формулы R"Z), и, если m равно 1, восстановление сульфоксида с помощью обычных средств, и последующее удаление всех блокирующих групп с помощью обычных средств.

Изобретение также предусматривает процесс получения соединений формулы
CH= CH-CH₂-⊕N≡Q в которой R¹ представляет собой водород или обычную амминозащищающую группу, R² представляет собой водород, алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, циклоалкильную или циклоалкенильную группу, содержащую от 3 до 6 атомов углерода, или группу формулы
CH-R³, - C ≡ C R³, или в которых R³ водород, (низший) алкил или карбоксил, Х галоген, гидроксил или (низший) алкокси, и R⁴ и R⁵ каждый независимо представляет собой водород, метил или этил, или R⁴ и R⁵ взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут представлять циклоалкиленовое кольцо, содеpжащее от 3 до 5 атомов углерода, и группа -⊕N≡Q представляет собой четвертичную аммонио группу, и нетоксичных фармацевтически приемлемых солей и физиологически гидролизуемых сложных эфиров их, данный процесс предусматривает ацилирование соединения формулы
кислотой формулы
или ацилирующим производным указанной кислоты, где R^2' имеет те же значения, что и R² или представляет собой группу формул
или - COOB¹ в которых Х, R⁴ и R⁵ имеют значения, определенные выше, В¹ представляет собой обычную карбоксил-защищающую группу, и В² водород или общепринятая амино-защищающая группа.

Реакции осуществляются в неводном органическом растворителе, таком как диметилсульфоксид, гексаметилфосфорамид, метиленхлорид, хлороформ, этиловый эфир, гексан, этилацетат, тетрагидрофуран, ацетонитрил и аналогичные, или смесях таких растворителей. Реакции удобным образом осуществляются при температуре примерно от -10^оС до +50^оС; обычно предпочитают проводить реакции при комнатной температуре. Во время стадии кватернизации на 1 моль соединения IX, XIX, XXIII и XXIV следует использовать, по крайней мере, 1 моль третичного амина, обычно предпочитают использовать примерно от 25 до 100% избытка третичного амина.

Карбоксил-защищающими группами, подходящими для использования в качестве В¹ в указанных выше реакциях, являются хорошо известные специалистам в данной области группы, и они включают аралкильные группы, такие как бензил, п-метоксибензил, п-нитробензил и дифенилметил (бензгидрил); алкильные группы, такие как трет-бутил; галоидалкильные группы, такие как 2,2,2-трихлорэтил, и другие известные карбоксил-защищающие группы. Предпочитают использовать карбоксил-защитные группы, которые легко удаляются при обработке кислотой. Особенно предпочтительными карбоксил-защищающими группами являются бензгидрил и трет-бутил.

Амино-защищающие группы, подходящие для использования в качестве В², также хорошо известны в технике и включают тритильную группу и ацильные группы, такие как хлорацетил, формил и трихлорэтоксикарбонил. Предпочитаются амино-защищающие группы, которые легко удаляются при обработке кислотой, например, тритильная группа.

Когда цефалоспориновое ядро используется в форме 1-окси (m 1), 1-окись получается с помощью известных приемов, таких как окисление м-хлорнадбензойной кислотой, надуксусной кислотой, вольфраматом натрия и др. 1-окись может впоследствии восстанавливаться с помощью известных процедур, например восстановления соответствующей алкоксисульфониевой соли иодидным ионом в водной среде. Алкоксисульфониевая соль сама по себе легко получается с помощью обработки 1-окиси, например, ацетилхлоридом.

Согласно еще одному аспекту изобретение относится к новым промежуточным соединениям формулы

в которой Z представляет собой хлор, бром или иод, R² представляет собой водород, алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, циклоалкильное или циклоалкенильное кольцо, содержащее от 3 до 6 атомов углерода, или группу формул
CH-R³, - C ≡ C R³, или в которых R³ представляет собой водород, (низший) алкил или карбоксил, Х представляет собой галоген, гидроксил или (низший) алкокси и R⁴ и R⁵каждый независимо представляет собой водород, метил или этил, или R⁴ и R⁵ взятые вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут представлять циклоалкилиденовое кольцо, содержащее от 3 до 5 атомов углерода, и их солям и сложным эфирам. В сферу изобретения включены также соединения формулы XXVIII, в которой амино и/или карбоксильная группы защищены обычными аминозащищающими или карбоксил-защищающими группами.

Согласно еще одному аспекту изобретение относится к новым промежуточным соединениям формулы
RCH= N в которой R²² представляет собой водород или обычную карбоксил-защищающую группу, и R²³, R²⁴ и R²⁵ являются одинаковыми или различными и представляют собой водород, гидроксил, (низший) алкил или (низший) алкокси; или к их солям, сольватам, гидратам или сложным эфирам.

Согласно еще одному аспекту изобретение относится к новым промежуточным соединениям формулы
CH= CH-CH₂-Q в которой -⊕N≡Q представляет собой четвертичную аммонио группу; или солям, сложным эфирам, сольватам или гидратам их. В том смысле, как они используются здесь, термины ациламино и ацилокси относятся к ацилированным амино или ацилированным гидроксильным группам, в которых ацильная часть представляет собой (низший)алканоил (например, формил, ацетил, пропионил, бутирил, изобутирил, изовалерил и др.), ароил (например, бензоил и др.), (низший) алкансульфонил (например, метилсульфонил, этансульфонил и др.) или арилсульфонил (например, бензолсульфонил, тозил и др.).

В том смысле, как они используются здесь, термины (низший)алкил, (низший)алкокси, (низший)алкилтио (или аналогичные) означают алкильную, алкокси, алкилтио (или аналогичные) группы с прямой или разветвленной цепью, содержащие от 1 до 6 атомов углерода, включительно. Аналогичным образом, термины (низший)алкенил и (низший) алкинил обозначают алкенильные или алкинильные группы, содержащие от 2 до 6 атомов углерода.

П р и м е р 1.

H₂N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3- [3-(1-метилпирролидинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат (1-1А).

К раствору дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Z/E 2/1, 150 мг, 0,21 ммоль) в этилацетате (2 мл) добавлялся раствор 1-метилпирролидина (36 мг, 0,42 ммоль) в этилацетате (1 мл) одной порцией при перемешивании. Смесь перемешивалась в течение 15 мин и разбавлялась изопропиловым эфиром (10 мл) для образования осадка, который собирался фильтрацией. Смесь твердого вещества (130 мг), муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной соляной кислоты (0,1 мл) перемешивалась при комнатной температуре. Спустя час реакционная смесь концентрировалась при пониженном давлении, разбавлялась водой (20 мл) и фильтровалась. Водный раствор пропускался через колонку в обратной фазе (насадка угольный брикет ПрепПАК-500/С₁₈, 100 мл), элюировался водой и 10%-ным метанолом. Желаемые фракции собирались и концентрировались в вакууме до небольшого объема и сушились вымораживанием, давая 13 мг (12%) целевого соединения (1-1А) (Z/E 1/1), плавящегося при > 280^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3400, 1760, 1660, 1610.

УФ: λ _макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (E_1см^1% 236/372), 288 (322).

ЯМР: δ D₂O, млн.дол. 2,31 (4Н, мультиплет, N (3,12) 3Н, и N 3,79 (1Н, синглет, 2-Н), 4,1 (2Н. дублет, J 2, CH₂N), 4,2 (3Н, синглет, ОСН₃) 5,36 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,95 (3Н, мультиплет, 7Н и 3-СН=СН), 6,66 (1/2Н, дублет, J 10, 3-СН цис), 7,0 (1/2Н, дублет, J 16, 3-СН транс).

П р и м е р 2.

CH^*=CH-CH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3- [3-пиридинио-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат (1-1В).

Смесь дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Е, 716 мг, 1 ммоль), пиридина (153 мг, 2 ммоль) в диметилсульфоксиде (ДМСО) (1 мл) перемешивалась в течение 1 ч при комнатной температуре. К смеси добавлялся этилацетат (20 мл) для осаждения твердого вещества (620 мг), которое добавлялось к муравьиной кислоте (6 мл), содержащей бисульфит натрия (60 мг). Смесь перемешивалась при температуре 40^оС в течение 30 мин и концентрировалась досуха. Остаток растворялся в воде (40 мл), и нерастворимые вещества удалялись. Водный раствор загружался в колонку с обратной фазой (ПрепПАК-500 (С₁₈, 100 мл) элюировался водой (300 мл) и 5%-ным водным метанолом (800 мл), и элюат контролировался с помощью УФ (254 нм) и HPLC (жидкостная хроматография высокого давления). Фракции (5%-ный водный метанол), содержащие желаемый продукт, объединялись, концентрировались до небольшого объема и лиофилизовались, давая 40 мг (8% ) соединения (1-1В), плавящегося при > 200^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3350, 1760, 1660, 1600.

УФ: λ_макс. Фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 240 (352), 258 (366), 267 (279), 290 (469).

ЯМР: δ D₂O+ДМСО-d₆, млн.дол. 3,74 (2Н, широкий синглет, 2-Н), 4,20 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,92 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,15 (1Н, мультиплет, 3-CH= CH), 7,04 (1Н, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,2 (2Н, мультиплет, Ру-Н_3,5), 8,62 (1Н, мультиплет, Ру-Н₄), 8,97 (2Н, мультиплет, Ру-Н_2,6).

П р и м е р 3.

7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3- [3-пиридино-1-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбо-ксилат (1-1Н).

Хлорпропенильное соединение, дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-хлор-1-пропен-1-ил)- 3-цефем-4-карбоксилат (VIII-I) (Z 937 мг, 1,5 ммоль) добавлялось к перемешиваемому раствору пиридина (237 мг, 3 ммоль) в ДМСО (3 мл), содержащего NaI (11 мг, 0,075 ммоль). Смесь оставлялась стоять в течение ночи при комнатной температуре в темноте. Смесь разбавлялась этилацетатом (30 мл) для отделения осадка, который затем собирался фильтрацией, промывался этилацетатом (10 мл) и сушился, давая 350 мг блокированного продукта. Осадок обрабатывался муравьиной кислотой (3,4 мл), содержащей бисульфит натрия (34 мг) в течение 30 мин при 40^оС. После удаления муравьиной кислоты остаток очищался колоночной хроматографией в обратной фазе (насадка угольной брикет ПрепПАК-500 (С₁₈, 100 мл) с элюированием 5%-ным водным метанолом. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединялись на основании анализа HPLC, упаривались при пониженном давлении и лиофилизовались, давая 41 мг (5,5%) целевого соединения (1-1В) (Z/E 4/1). Т.пл. > 200^оС (разл.).

ИК: ν _макс. KBr, см^-1: 3300, 1760, 1660, 1600.

УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7) нм (Е_1см^1% 237) 386, 250 (377), 258 (369), 265 (347), 280 (311).

ЯМР: δ D₂O, млн. дол. 3,45 и 3,76 (каждый 1Н, дублет, J 16, 2Н), 4,18 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,34 (3Н, мультиплет, СН=СН=СН₂ и 6-Н), 5,92 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,58 (4/5Н, дублет, J 11, 3-СН цис), 7,03 (1/5Н, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,12 (2Н, мультиплет, Ру-Н_3,5), 8,56 (1Н, мультиплет, Ру-Н₄), 8,82 (2Н, мультиплет, Ру-Н_2,6).

П р и м е р 4.

CH^*=CHCH₂-
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[8- (2-амино-5-тиазоло[4,5-c] пиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат (1-1С).

Перемешиваемый раствор дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4- тиадиазол-3-ил-2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-про- пен-1-ил)-3- цефем-4-карбоксилата (IX-I) (Е изомер, 714 мг, 1 ммоль), 2-аминотиазоло[4,5-c]пиридина (приготовленного в соответствии с приемом R.Rakahashi et al. Farm Bull (Japan) 2,34 (1954)) и сухого ДМСО (1 мл) хранился при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавлялся этилацетат (20 мл), давая желтый порошок (710 мг). К порошку (700 мг) добавлялись муравьиная кислота (7 мл) и бисульфит натрия (70 мг), смесь перемешивалась в течение 30 мин при 40-45^оС. После упаривания остаток растирался с водой (40 мл). Нерастворимые вещества отфильтровывались, и фильтрат хроматографировался на колонке с обратной фазой (ПрепПАК-500/С₁₈, 100 мл) с использованием воды и 10%-ного метанола в качестве элюента. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединялись, растворитель отгонялся при пониженном давлении. Лиофилизация давала желаемый продукт (1-С1) в виде бесцветного аморфного порошка Е изомера. Выход 110 мг (19%). Т.пл. более 200^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3300, 1760, 1680, 1630, 1600.

УФ: λ _макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 245 (499), 285 (286).

ЯМР: δ ДМСО-d+D₂O, млн.дол. 3,86 (3Н, синглет, OCH₃), 4,98 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,2 (2Н, мультиплет, CH=CH-CH₂, 5,57 (1Н, мультиплет, 3-CH=CH), 5,96 (1Н, мультиплет, 7-Н), 7,16 (1Н, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,36 и 8,45 (каждый 1-Н, дублет J= 7,Ру-Н), 8,92 (1Н, синглет, Ру-Н).

П р и м е р 5.

CH^*=CH-CH₂-⊕N(CH₃)₃
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3- (3-триметиламмонио-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4-карбокси- лат (1-1D).

К раствору дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Z/E 2/1, 490 мг, 0,68 ммоль) в этилацетате (14 мл) добавлялся 0,1 М раствор триметиламина в простом эфире (13,6 мл) одной порцией. Смесь перемешивалась в течение 10 мин и упаривалась досуха, остаток растирался с простым эфиром (20 мл). Полученное в результате твердое вещество добавлялось к трифторуксусной кислоте (0,2 мл), содержащей одну каплю анизола. После полуторачасового перемешивания смесь упаривалась досуха при пониженном давлении, и остаточное масло растиралось с простым эфиром (20 мл). Полученный в результате осадок собирался фильтрацией и растворялся в воде (20 мл). Нерастворимые вещества удалялись и водный раствор элюировался на колонке С₁₈ с обратной фазой (насадка угольный брикет ПрепПАК-500/С₁₈. Уотерс, 30 мл) с использованием воды в качестве элюента. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединялись и концентрировались до небольшого объема и лиофилизовались, давая 30 мг (9,2%) целевого соединения (1-1D) (Z/E 1/1) в виде бесцветного аморфного порошка, плавящегося при более 150^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3300, 1770, 1670, 1605.

УФ: λ_макс. Фосфатный буфер (рН 7) (Е_1см^1% (236/389), 286 (343)
ЯМР: δ D₂O, млн.дол. 3,45 и 3,7 (1Н, J 16, 2-Н), 3,81 (1Н, синглет, 2-Н), 4,1 (2Н, дублет, J 8, -CH₂N) 4,21 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,39 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,95 (2Н, мультиплет, 3-CH=CH и 7-Н), 6,61 (1/2H, дублет, J 11, 3-СН, цис), 7,05 (1) 2Н, дублет, J 16, 3-СН, транс).

П р и м е р 6.

7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (3-аминопиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбо-ксилат (1, 1Е).

Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4-карбокси- лат (IX-I) (Е, 716 мг, 1 ммоль) добавлялся к перемешиваемому раствору 3-аминопиридина (188 мг, 2 ммоль) в ДМСО (1 мл). Смесь перемешивалась в течение 1 ч и разбавлялась этилацетатом (20 мл). Полученный в результате осадок собирался фильтрацией, промывался этилацетатом и сушился, давая 520 мг желтого порошка. Смесь порошка (500 мг), муравьиной кислоты (5 мл) и бисульфита натрия (50 мг) перемешивалась в течение 30 мин при 40^оС. Смесь концентрировалась в вакууме, растворялась в воде (40 мл) и фильтровалась для удаления нерастворимых веществ. Водный раствор хроматографировался на колонке с обратной фазой (насадка ПрепПАК-500/С₁₈, 100 мл) с использованием 7,5%-ного водного метанола в качестве элюента. Фракции, содержащие желаемый продукт, упаривались и лиофилизовались, давая целевое соединение (1-1Е) (7 мг, 1,4%), плавящееся при более 185^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3400, 1765, 1675, 1620, 1600.

УФ: λ_макс. Фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 246 (403), 290 (468)
ЯМР: δ D₂O, млн.дол. 3,72 (2Н, мультиплет, 2-Н), 4,14 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,35 (3Н, мультиплет, 6-Н и CH=CH-CH₂, 5,9 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,11Н, мультиплет, 3-CH=CH, 7,05 (1Н, дублет, J 16, 3-СН, транс), 8,1 (1Н, мультиплет, Ру-Н₅), 8,54 (1Н, широкий синглет, Ру-Н₆, 8,68, (1Н, мультиплет, Ру-Н₄), 9,4 (1Н, мультиплет, Ру-Н₂).

Обработка IX-I (716 мг, 1 ммоль) в соответствии с описанной процедурой 3-трет-бутоксикарбониламинопиридином (324 мл, 2 ммоль) давала 12 мг (2,3%) 1-1Е.

П р и м е р 7.

CH^*=CHCH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамид] -3-[3- (3-амино-1-пиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат (1-1Е).

Смесь дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Z/E 2/1, 500 мг, 0,7 ммоль) и 3-аминопиридина (66 мг, 0,7 ммоль) в диметилсульфоксиде (1 мл) перемешивалась в течение 20 мин при комнатной температуре. Смесь разбавлялась этилацетатом (10 мл) и простым эфиром (10 мл), полученный в результате осадок собирался фильтрацией, промывался простым эфиром (10 мл) и сушился. Кватернизованная соль растворялась в муравьиной кислоте (0,3 мл) и перемешивалась в течение полутора часов при комнатной температуре. Смесь концентрировалась досуха при пониженном давлении. Остаток растворялся в 2% -ной соляной кислоте (10 мл) и фильтровался. Водный слой хроматографировался на колонке с обратной фазой (ПрепПАК-500/С₁₈ 100 мл). После промывания водой (500 мл) колонка элюировалась 5%-ным водным раствором метанола. Фракции, содержащие целевое соединение, объединялись, концентрировались в вакууме и сушились вымораживанием, давая 15 мг (4,2%) целевого соединения (1-1Е) (Z/E 1/1) в виде бесцветного аморфного порошка. Т.пл. более 160^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3400, 1765, 1675, 1620, 1600
УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 244 (434), 286 (333).

ЯМР: δ ДМСО-d₆+D₂O, млн.дол. 3,73 (2Н, мультиплет), 4,14 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,35 (3Н, мультиплет, 6-Н и CH=CH-CH₂, 6,0 (2Н, мультиплет, 7-Н и 3-СН= СН)), 6,6 (1/2H, дублет, J 11, 3-СН цис), 7,05 (1/2H, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,08 (1Н, мультиплет, Ру-Н), 8,6 (2Н, мультиплет, Ру-Н_4,6); 9,4 (1Н, мультиплет, Ру-Н₂).

П р и м е р 8.

7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (3-формиламинопиридино)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат (1-1F).

Смесь дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Е, 716 мг, 1 ммоль) и 3-формиламинопиридина (приготовленного в соответствии с процедурой N. Enomoto et al. Bull. Chem. Soc. Japan, 45, 2665 (1972)) (244 мг, 2 ммоль) в ДМСО (2 мл) перемешивалась при комнатной температуре течение 1 ч и выливалась в этилацетат (200 мл). Осадок собирался фильтрацией, промывался хорошо этилацетатом и сушился. Смесь кватернизированной соли (500 мг) и бисульфата натрия (50 мг) в НСООН (5 мл) перемешивалась при 40-50^оС в течение 80 мин и упаривалась досуха в вакууме. Остаток растворялся в воде (40 мл), нейтрализовался NaHCO₃ и затем фильтровался для удаления нерастворимого вещества. Чистый фильтрат хроматографировался на колонке с обратной фазой, ПрепПАК-500/С₁₈ (100 мл) с использованием воды и 5%-ного метанола, 10%-ного метанола, 20%-ного метанола и 30%-ного метанола. Фракции, содержащие желаемое соединение, объединялись, концентрировались в вакууме и лиофилизовались, давая 16 мг (2,9%) целевого соединения (1-1F/E) в виде рыжеватого коричневого порошка. Т.пл. более 170^оС (разл.).

ИК: ν _макс. KBr, см^-1: 3340 (широкий) 1760, 1670, 1620 (широкий), 1690
УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 218 (428), 248 (362), 290 (474).

ЯМР: δ D₂O+NaHCO₃, млн.дол. 3,68 (2Н, широкий, 2-Н), 4,15 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,91 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,25 (1Н, мультиплет, CH=-CH₂), 6,98 (1Н, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,8-7,9 (4Н, мультиплет, Ру-Н), 9,38 (1Н, широкий, NHO).

П р и м е р 9.

7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамид] -3-[3- (3-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-кар- боксилат (1-1G).

К раствору дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I), (Е, 716 мг, 1 ммоль) в ДМСО (2 мл) добавлялся никотинамид (244 мг, 2 ммоль), и смесь перемешивалась при температуре окружающей среды в течение полутора часов и выливалась в этилацетат (200 мл) при перемешивании. Полученный в результате осадок собирался фильтрацией. Кватернизированная соль (500 мг) растворялась в НСООН (5 мл) в присутствии бисульфита натрия (50 мл), и смесь нагревалась при 40-50^оС в течение 40 мин при перемешивании и упаривалась досуха. Остаток растворялся в воде (40 мл), и нерастворимое твердое вещество отфильтровывалось и промывалось небольшим количеством воды. Фильтрат и вода объединялись и хроматографировались на колонке с обратной фазой, ПрепПАК-500/С₁₈ (100 мл). После последовательного элюирования водой и 5% 10% и 20% -ным водным метанолом, фракции, содержащие желаемое вещество, объединялись, концентрировались в вакууме и сушились вымораживанием, давая 21 мг (3,8%) целевого соединения (1-1G) (E) в виде желтого порошка. Т.пл. более 175^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3340 (широкий), 1760, 1670, 1600.

УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7) нм (Е_1см^1%) 235 (326), 274 (плечо, 405), 290 (446).

ЯМР: δ D₂O+NaHCO₃, млн.дол. 3,68 (2Н, широкий, 2-Н), 4,15 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,32 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,45 (1Н, дублет, J 7, CH=CH-), 5,88 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,15 (1Н, дублет-триплет, J 16 и 7,3-CH=), 7,00 (1Н, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,23 (1Н, мультиплет, Ру-Н₅), 9,03 (2Н, мультиплет, Ру-Н₄ и 6), 9,34 (1Н, синглет, Ру-Н₂).

П р и м е р 10.

CH=^*CHCH₂-⊕NCONH₂
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (4-карбамоилпиридинио)-пропен-1-ил)-3-цефем-4-кар- боксилат (1-1Н).

К перемешиваемому раствору дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-про- пен-1-ил)-3- цефем-4-карбоксилата (IX-I) (Е, 716 мг, 1 ммоль) в сухом ДМСО (2 мл) добавлялся ихоникотинамид (244 мг, 2 ммоль). Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 1 ч и затем выливалась в этилацетат (200 мл). Полученный в результате осадок собирался фильтрацией, хорошо промывался этилацетатом и сушился. Перемешиваемая смесь кватернизированного вещества (400 мг) и бисульфита натрия (40 мг) в НСООН (4 мл) нагревалась при 40-50^оС в течение 1 ч и упаривалась досуха при пониженном давлении. Неочищенное твердое вещество растворялось в воде (40 мл). После фильтрации нерастворимого вещества фильтрат хроматографировался на колонке с обратной фазой (насадка ПрепПАК/С₁₈, 100 мл) с использованием воды и 5% 10% 20% и 30%-ного водного метанола в качестве элюента. Фракции, содержащие желаемое соединение, упаривались и лиофилизовались, давая 21 мг (3,8% ) целевого соединения (1-1Н) (Е) в виде бледно-желтого порошка. Т.пл. более 180^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3340 (широкий), 1760, 1670, 1600.

УФ: λ_макс. Фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 222 (362), 285 (452).

ЯМР: δ D₂O+NaHCO₃, млн.дол. 3,68 (2Н, широкий, 2-Н), 4,15 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,33 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,46 (2Н, дублет, J 7, СН=С-СН₂), 5,90 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,17 (1Н, дублет-триплет, J 16, и 7,3-СН=СН), 7,02 (1Н, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,43 и 9,09 (каждый 2Н, дублет, J 7, Ру-Н).

П р и м е р 11.

CH=^*CHCH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (3-аминометилпиридинио)-1-пропен-1-ил-3-цефем-4- карбоксилат (1-11).

Смесь дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Е, 716 мг, 1 ммоль) и 3-(трет- бутилоксикарбониламинометил)пиридина (516 мг, 2 ммоль) в ДМСО (2 мл) перемешивалась при температуре окружающей среды в течение 30 мин. Смесь выливалась в этилацетата (200 мл) и осадок собирался фильтрацией, промывался хорошо этилацетатом и сушился. Смесь кватернизованной соли (500 мг), бисульфита натрия (50 мг) в НСООН (5 мл) перемешивалась при 40-50^оС в течение 80 мин и упаривалась досуха при пониженном давлении. Оставшееся твердое вещество растворялось в воде (40 мл), и смесь нейтрализовалась NaHCO₃. Нерастворимое вещество отфильтровывалось, фильтрат хроматографировался на колонке с обратной фазой (насадка угольный брикет ПрепПАК-500 (С₁₈, 100 мл), элюировался водой, и соответственно 5% 10% 20% и 30%-ным водным метанолом. Фракции, содержащие желаемое соединение, объединялись, упаривались и лиофилизовались, давая 10 мг (1,8%) целевого соединения (I-II) (Е) в виде рыжевато-коричневого порошка.

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3380 (широкий), 1760, 1650 (широкий), 1620 (широкий).

УФ: λ _макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 235 (широкий, 260), 286 (370).

ЯМР: δ D₂O+NaHCO₃, млн.дол. 3,68 (2Н, широкий, 2-Н), 4,16 (3Н, синглет, ОСН₃), 6,98 (1Н, дублет, J 16, 3-СН транс), 8,05 (1Н, мультиплет, Ру-Н₅), 8,50 (1Н, мультиплет, Ру-Н₄), 8,80 (2Н, мультиплет, Ру-Н_2,6).

П р и м е р 12.

C=CHCH₂-⊕NCONH₂
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4- карбоксилат (I-IH).

Смесь дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Е изомер, 4,1 г, 5,7 ммолей) и изоникотинамида (1,4 г, 11 ммолей) в сухом ДМСО (6 мл) перемешивалась в течение 2 ч при комнатной температуре при контролировании с помощью тонкослойной хроматографии (силикагельная пластина, CHCl₃: CH₃OH 3:1). Реакционная смесь разбавлялась этилацетатом (100 мл) для отделения желтой смолы, которая обрабатывалась муравьиной кислотой (40 мл) и бисульфитом натрия (390 мг) при 45^оС в течение 30 мин. Полученный в результате раствор концентрировался досуха. Остаток растворялся в воде (100 мл) и нерастворимые вещества удалялись фильтрацией. Объединенные фильтрат и промывная вода наносились на верхнюю часть колонки, содержащей насадку в обратной фазе (ПрепПАК-500/С₁₈, 120 мл). Колонка элюировалась водой. Элюат собирался фракциями по 300 мл и контролировался УФ (254 нм) и HPLC (Лихросорб RP-18, 4 х 300 мм, 0,01 М аммонийфосфатный буфер, рН 7,2, содержащий 20% метанола). Фракции N 4 и 5 объединялись и концентрировались до небольшого объема. Лиофилизация давала 250 мг (8,1% ) целевого соединения 1-1Н, плавящегося при более 180^оС (разл.). Спектры показывали, что продукт был идентичным веществу, полученному в примере 10.

Приготовление хлоргидрата. К суспензии соединения 1-1Н (98 мг, 0,18 ммоль) в метаноле (1 мл) добавлялась 10%-ная соляная кислота (0,1 мл), и смесь перемешивалась в течение 5 мин. К полученному в результате желтому раствору добавлялся ацетон (100 мл), в результате чего получался осадок, который собирался фильтрацией, промывался ацетоном (2 х 10 мл) и сушился в вакууме, давая хлористоводородную соль 1-1Н в виде бесцветного порошка. Выход составил 88 мг (79%). Т.пл. более 190^оС (разл.).

ИК: ν _макс. KBr, см^-1: 3300, 1770, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 227 (385), 286 (374).

ЯМР: δ D₂O, млн. дол. 2,32 (1Н, синглет, ацетон-Н), 3,79 (2Н, широкий синглет, 2-Н), 4,17 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,34 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,49 (2Н, дублет, J 7, CH=CH-), 5,93 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,28 (1Н, дублет-триплет, J 16 и 7,3-CH=), 7,15 (1Н, дублет, J 16, 3-), 8,43 и 9,1 (каждый 2Н, дублет, J 7, Ру-Н).

П р и м е р 13.

CH=^*CHC
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (2-метилтиоазолио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбо- ксилат (1-1J).

К смеси дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Е, 714 мг, 1 ммоль) и 2-метилтиазола (приготовленного в соответствии с процедурой R. P.Kurkjy, E.V.Brown, J. Am. Chem. Soc. 74, 5778 (1952)) (198 мг, 2 ммоль) в сухом CH₂Cl₂ (10 мл) добавлялся AgBF₄(90% чистоты, 217 мг, 1 ммоль) при -20^оС. Смесь перемешивалась в течение 30 мин при комнатной температуре и фильтровалась. Осадок экстрагировался с помощью 1%-ного СН₃-СНСl (3х20 мл). Объединенные экстракты промывались насыщенным солевым раствором (2 х 5 мл), сушились над MgSO₄и упаривались досуха, давая желтый осадок, который растирался с изопропиловым эфиром и фильтровался, при этом получалось 350 мг кватернизированного продукта. Смесь этого твердого вещества, бисульфита натрия (35 мг) и муравьиной кислоты (3,5 мл) перемешивалась в течение 30 мин при 40^оС. Смесь концентрировалась для удаления муравьиной кислоты и остаток разбавлялся водой (40 мл). Нерастворимые вещества удалялись фильтрацией. Фильтрат помещался на колонку с обратной фазой (ПрепПАК-500/С₁₈, 100 мл). Колонка последовательно элюировалась водой (200 мл), 5%-водным метанолом (400 мл) и 10%-ным водным метанолом (300 мм). Фракции, содержащие желаемое вещество, объединялись на основе HPLC анализа (Лихросорб RP-18, 4 х 300 мм, 0,01 М аммонийфосфатный буфер 7,2, содержащий 20% метанола). Объединенный раствор концентрировался до небольшого объема и лиофилизовался, давая 40 мг (7,7%) целевого соединения (1-1J) (E). Т.пл. более 195^оС (разл.).

ИК: ν _макс. KBr, см-¹: 3300, 1760, 1660, 1600,
УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 238 (442), 292 (421).

ЯМР: δ D₂O+DMSO-d₆, млн.дол. 3,06 (3Н, синглет, тиазол-СН₃), 3,74 (2Н, широкий синглет, 2-Н), 4,19 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,92 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,1 (1Н, мультиплет, 3-CH=), 6,8 (1Н, дублет, J 16, 3-CH транс), 8,04 и 8,23 (каждый 1Н, дублет, J 4, тиазол-Н).

П р и м е р 14.

CH=^*CHCH₂-⊕NCH₂OH
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (4-оксиметилпиридинио)-1-пропен-1-ил] -3-цефем-4-карбоксилата (1-1L). Смесь дифенил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо]-3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-це- фем-4- карбоксилата (IX-I) (Е изомер, 1,07 г, 1,5 ммоль), 4-оксиметилпиридина (818 мг, 7,5 ммоль) в CH₃CN (4,5 мл) и метанола (3 мл) перемешивалась при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 1 ч. После удаления растворителя упариванием остаточное масло растиралось с изопропиловым эфиром, собиралось фильтрацией и промывалось смесью изопропилового эфира и метанола (3:1, 10 мл), давая 1,28 г кватернизованного цефемового эфира в виде желтого порошка. Раствор кватернизованного сложного эфира (1,25 г) и бисульфита натрия (600 мг) в 85%-ном НСООН (10 мл) перемешивался при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 1 ч. После добавления 85%-ного НСООН (5 мл) смесь перемешивалась при тех же условиях дополнительно в течение часа. Добавлялся толуол и смесь азеотропно упаривалась при пониженном давлении. Остаток растирался с ацетоном, давая 1,17 г неочищенного формата целевого соединения. Суспензия этого соединения (1,15 г) в воде (100 мл) фильтровалась для удаления нерастворимых веществ, которые промывались водой (10 мл х 2). Фильтрат и промывные воды объединялись и подвергались хроматографии на колонке с обратной фазой. Колонка, которая наполнялась насадкой, взятой из колонки с угольным брикетом (ПрепПАК-500/С₁₈ (Уотерс, 60 мл), проявлялась последовательно водой, 5%-ным метанолом и 10% -ным метанолом. Фракции, содержащие желаемое соединение, объединялись, концентрировались при пониженном давлении, и осаждались добавлением ацетона, давая 100 мг целевого соединения (1-1L) в виде желтого порошка. К суспензии порошка (90 мг) в метаноле (9 мл) добавлялся 1 М HCl в метаноле (0,5 мл) и смесь перемешивалась при комнатной температуре и концентриро- валась в вакууме. К концентрату добавлялся изопропанол для осаждения 77 мг хлоргидрата целевого соединения. Бледно-желтый порошок. Т.пл. более 190^оС (разл.)
ИК: ν_макс. KBr, см-¹: 1775, 1670, 1635, 1530.

УФ: λ_макс. Фосфатный буфер (рН 7), нм: (ε) 230 (22600), 264 (плечо, 16300).

ЯМР: δ D₂O, млн.дол. 3,83 (2Н, широкий 2-Н), 4,17 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,06 (2Н, синглет, N-CH₂OH), 5,36 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,41 (2Н, дублет, J 7 Гц, CH=CH-), 5,94 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,36 (1Н, дублет-триплет, J 16 и 7 Гц, CH=CCH₂), 7,13 (1Н, дублет, J 16 Гц, C=CH-CH₂), 8,08 и 8,83 (каждый 2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н).

П р и м е р 15.

CHHCH₂-⊕NCONH₂
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- этоксииминоацетамидо]-3-[3- (4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил] -3-цефем-4-кар- боксилат (1-2Н). К раствору 200 мг 7-амино-3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1- ил]-3-цефем-4-карбоксилата хлоргидрата (Е изомер) в 5 мл 50%-ном водном ацетоне добавлялось порциями 190 мг хлоргидрата 2-этоксиимино-2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)ацетил- хлорида (приготовленного в соответствии с процедурой, описанной в японской патентной заявке (Кокаи) 57-24389 (2/8/82)), и смесь доводилась до рН 6,5-7,0 с помощью 2 норм Na₂CO₃ (около 1 мл). Реакционная смесь перемешивалась при 10^оС в течение часа, подкислялась до рН 21 н. соляной кислотой и упаривалась в вакууме. Остаток фильтровался и фильтрат хроматографировался на колонке НР-20, которая элюировалась последовательно 500 мл воды и 25% -ным водным изопропанолом. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединялись и упаривались при пониженном давлении. Маслянистый остаток обрабатывался изопропанолом (20 мл), давая 263 мг (93%) целевого соединения (1-2Н), Т.пл. 170^оС (разл.). К перемешиваемой суспензии 225 мг (0,40 ммоль) указанного цвиттер-иона в 10 мл метанола добавлялся 1 мл 1н. HCl в метаноле, и смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 30 мин. Раствор фильтровался и концентрировался при пониженном давлении. К остатку добавлялось 15 мл изопропанолового спирта, и полученный в результате осадок собирался фильтрацией и сушился в вакууме, в результате чего получалось целевое соединение в виде его хлоргидрата. Выход 146 мг (57%). Т.пл. 160^оС (разл. ). Оцененная чистота 65%
ИК: ν_макс. KBr, см-^1: 3300, 1780, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7), нм (Е): 227 (22300), 288 (22800).

ЯМР: δ D₂O, млн.дол. 1,44 (3Н, триплет, J 7 Гц, OC-CH₃), 3,74 (2Н, широкий синглет, 2-Н), 4,45 (2Н, кв, J 7 Гц, OC-CH₃), 5,36 (1Н, дублет: J 4,5 Гц, 6-Н), 5,46 (2Н, дублет, J 7 Гц, 3-CH=CH-C) 5,92 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,20 (1Н, мультиплет, 3-CH=C), 7,04 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-CH=C), 8,43 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н_А), 9,10 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н_В).

П р и м е р 16. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил] 3-цефем-4-карбоксилат (1-1Н) (Е изомер).

Этот пример показывает приготовление соединения 1-1Н посредством нескольких последних стадий реакционной схемы 1а или 1, при котором промежуточный бензгидрил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3- ил)-2-метоксииминоацетамидо]-3-[3-(4-карбамо- илпиридинио)-1-пропен- 1-ил-]-3-цефем-4-карбоксилат-формат (XXVII-1H) выделяется.

А. Бензгидрил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксиимино- ацетамидо] -3-[3-(4-карбамоил-1-пиридинио)-1-пропен-1-ил] -3-цефем- 4-карбоксилат-формат (Е изомер) (XXVII-1H).

Раствор XII-1H Y⊝=I⊝, Е изомер) (34 г 75% чистоты) в смеси ацетона и метанола (1/1, 1,200 мл) помещался на колонку Амберлита IRA-410 (форматная форма 340 мл). Колонка элюировалась той же самой системой растворителя. Первая фракция (1 л) упаривалась до около 100 мл объема, и коричневый остаток растирался с изопропиловым эфиром (400 мл). Полученный в результате порошок собирался фильтрацией и сушился в вакууме, в результате чего получалось 29 г (75% чистота при определении с помощью HPLC) целевого соединения XXVII-1H (Е изомер) в виде коричневого порошка, плавящегося при более 150^оС (разл.).

ИК: ν _макс. KBr, см^-1: 3300, 1780, 1680, 1630, 1600.

УФ: λ _макс. EtOH, нм: (Е_1см^1%) 282 (186).

ЯМР: δ млн.дол. ацетон-d₆ (CH₃OH-d₄ 1(1): 4,0 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,26 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,43 (2Н, дублет, J 2, Гц, CN⁺), 5,99 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,5 (1Н, мультиплет, 3-CH=C), 6,92 (1Н, синглет, CPh₂), 7,1 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-C), 7,35 (10Н, мультиплет, Ph-), 8,36 (1Н, синглет, НСОО), 8,46 и 9,12 (2Н, каждый, дублет, J 8 Гц, Ру-Н).

В. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбамоил-1-пиридинио)-1-пропен-1-ил] -3-цефем-4- карбоксилат (1-1Н) (Е изомер).

Смесь XXVII-1H (Е изомер) из стадии А (29 г, 75%-ная чистота) и 85%-ной муравьиной кислоты (290 мл) перемешивалась в течение 2 ч при комнатной температуре. Упаривание смеси давало коричневое масло, которое растиралось с ацетоном (500 мл). Порошок собирался фильтрацией, промывался ацетоном (2 х 100 мл) и сушился в вакууме, получалось при этом 24 г (50%-ная чистота согласно определению с помощью HPLC) целевого соединения. Коричневое твердое вещество дважды обрабатывалось 2 н. соляной кислотой (1 л и 0,5 л). Водные экстракты объединялись и помещались на колонку, наполненную Диаионом НР-20 (1,5 л). Колонка промывалась водой (8 л) и элюировалась 30%-ным метанолом (5 л). Фракции, содержащие желаемый продукт, упаривались до около 30 мл. Концентрат обрабатывался ацетоном (200 мл), давая осадок, который собирался фильтрацией и сушился в вакууме, в результате чего получалось 10,1 г (85%-ная чистота) целевого соединения (форма цвиттер-иона) в виде желтого порошка. К суспензии этого продукта в метаноле (100 мл) добавлялся норм. HCl в метаноле (55 мл) при комнатной температуре и смесь перемешивалась в течение 30 мин. Полученный в результате прозрачный раствор фильтровался для удаления нерастворимых веществ, концентрировался до объема примерно 50 мл и осаждался изопропанолом (200 мл). Полученный в результате порошок собирался, промывался изопропанолом (50 мл) и сушился в вакууме, давая 10,5 г (85%-ная чистота) целевого соединения 1-1Н (Е изомер) (HCl соль), плавящегося при более 180^оС (разл.). Бледно-желтый порошок.

П р и м е р 17. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил] 3-цефем-4-карбоксилат (1-1Н) (Е изомер).

Этот пример показывает приготовление соединения 1-1Н посредством последних нескольких стадий реакционной схемы 1а и 1b, где промежуточное соединение XXVII-1H (формат) не изолируется.

Раствор IX-I (Е изомер) (27,6 г, 38,5 ммоль) и изоникотинамида (22,8 г, 187 ммоль) в смеси метанола (100 мл) и CH₃CN (120 мл) перемешивался при комнатной температуре в течение 1 ч в атмосфере азота. После упаривания органических растворителей маслянистый остаток растирался с изопропиловым эфиром, давая 50,5 г смеси кватернизованной соли и изоникотинамида. Раствор смеси (50,3 г) и бисульфита натрия (16 г) в 85% НСООН (160 мл) перемешивался при комнатной температуре в течение 40 мин и затем при 40^оС в течение 1 ч в атмосфере азота. Смесь упаривалась в вакууме. Остаточное масло смешивалось с толуолом (50 мл), азеотропно упаривалось и растиралось с ацетоном (400 мл), давая 27,8 г неочищенного целевого соединения. Это вещество дважды обрабатывалось 2 н, соляной кислотой (1 л и 0,5 л). Кислотные экстракты объединялись и помещались на колонку со смолой НР-20 (1,5 л). Колонка элюировалась водой (9 л) и 30%-ным метанолом (10 л). Фракции, содержащие желаемое соединение, концентрировались, давая желтое масло, которое растиралось с ацетоном (300 мл), в результате чего получалось 9,35 г целевого соединения в форме цвиттер-иона. К суспензии продукта (9,3 г) в метаноле (180 мл) добавлялась 1 н. соляная кислота в метаноле (55 мл) для получения светлого раствора. Раствор концентрировался до объема около 100 мл и разбавлялся изопропанолом для осаждения 9,50 г (чистота 75%) целевого соединения 1-1Н (Е изомер) в виде его хлоргидрата. Светло-желтый аморфный порошок. Т.пл. более 195^оС (разл.).

П р и м е р 18. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропен-1-ил] 3-цефем-4-карбоксилат (1-1Н) (Е изомер).

Пример показывает приготовление соединения 1-1Н с использованием последней стадии (7-N-ацилирования) реакционной схемы 1 с. К охлаждаемой льдом суспензии 7-амино-цефем-гидрохлорида XXII-H (Е изомер) (5,0 г, 12,6 ммоль) в 50%-ном водном ацетоне (100 мл) добавлялся бикарбонат натрия небольшими порциями. рН смеси контролировалось рН-метром в продолжение всей реакции. К холодному нейтрализованному раствору (рН около 7) добавлялся хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетилхлорида (4,02 г, 15,6 ммоль) небольшими порциями на протяжении периода 1 ч, и рН реакционной смеси поддерживалась в пределах 6,8-7,5 путем добавления время от времени бикарбоната натрия. Реакция также контролировалась с помощью ТСХ. После того, как все соединение XXII-H потреблялось, смесь подкислялась до рН 3 путем добавления 2 н. соляной кислоты. Смесь фильтровалась, и фильтрат концентрировался при пониженном давлении. Остаток разбавлялся ацетоном (400 мл) для отделения осадка, который собирался фильтрацией, при этом получалось 9,59 г неочищенного соединения в виде светло-желтого порошка. Оцененная с помощью HPLC чистота 40% Суспензия неочищенного продукта (9,5 г) в 2 н. соляной кислоте (150 мл) фильтровалась, фильтрат адсорбировался на колонке со смолой НР-20 (500 мл). После промывания водой (1,5 л) колонка элюировалась 25%-ным изопропиловым спиртом, и элюат собирался в 100 мл фракции. Желаемые фракции сливались, подкислялись 2 н. соляной кислотой (10 мл) и концентрировались. Остаточное масло растиралось с изопропиловым спиртом (200 мл) и осадок собирался фильтрацией. После сушки над пятиокисью фосфора получалось 5,18 г целевого соединения 1-1Н (Е изомер) в виде хлоргидрата в виде желтого аморфного порошка. Т.пл. более 190^оС (разл.). Оцененная чистота 75%
П р и м е р 19. Очистка и кристаллизация соединения 1-1Н (Е изомер).

Соединение хлоргидрат 1-1Н, полученное в примере 16, бледно-желтый аморфный порошок 85%-ной чистоты.

Процедура 1. 6 г хлоргидрата 85%-ной чистоты растворялось в 20 мл воды и фильтровалось через целитную прокладку. Янтарно-окрашенный фильтрат (рН 2) пропускался через колонку с обратной фазой (насадка угольный брикет препПАК-500/С₁₈, Уотерс, 120 мл), который элюировался водой. Элюат собирался в 120 мл фракции с контролированием с помощью HPLC. Фракции с 3 по 5 объединялись и концентрировались до около 10 мл, осаждались ацетоном (100 мл), давая 3,3 г 1-1Н в форме цвиттер-иона (бледно-желтый аморфный порошок, оцененная чистота 95% ). К суспензии порошка 95%-ной чистоты (3,2 г) в метаноле (32 мл) добавлялась норм. HCl в метаноле (18 мл) и смесь перемешивалась при комнатной температуре до тех пор, пока не получится прозрачный раствор. Раствор фильтровался, и фильтрат концентрировался до около 10 мл. К концентрату добавлялся изопропанол (100 мл) для отделения бледно-желтого осадка, который собирался фильтрацией, промывался изопропанолом (5 мл) и сушился, при этом получалось 2,6 г соли HCl (аморфный порошок, оцененная чистота 95%). Раствор хлоргидрата 95% -ной чистоты (1 г) в воде (4 мл) доводился до рН 6,5 с помощью NaHCO₃ (200 мг) и перемешивался в течение 30 мин. Кристаллы, которые выделялись в процессе перемешивания, собирались фильтрацией, промывались водой (2 х 5 мл) и сушились в вакууме, давая 710 мг 1-1Н (в форме цвиттер-иона) в виде бледно-желтых призм. Т.пл. более 185^оС (разл.). Микроанализ показал, что они были тригидратом.

ИК: ν _макс. KBr, см^-1: 1780, 1695, 1660, 1690, 1610.

УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (ε)227 (22000), 290 (23000).

ЯМР: δ млн. дол.ДМСО-d₆+D₂O: 3,45 (2Н, широкий, синглет, 2-Н), 3,9 (3Н, синглет, ОСН₃), 4,99 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,16 (2Н, дублет, J 7 Гц, CH₂N⁺), 5,61 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 5,8 (1Н, дублет-триплет, J 16 и 7 Гц, 3-CH=C), 6,93 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 8,18 и 8,89 (каждый 2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н).

Вычислено для C₂₁H₂₀N₈O₆S₂ ˙3H₂O, C 42,14; H 4,38; N 18,72; S 10,71
Найдено, C 42,41; H 4,35; N 18,86; S 11,00
Колонка, Лихросорб RP-18, 4 x 300 мм: мобильная фаза, 0,01 М фосфатный буфер (рН 7,2) (метанол 85/15: детектирование, УФ (254 нм).

Процедура 2. После того как с помощью процедуры 1 получено кристаллическое соединение 1-1Н, можно получить форму кристаллического цвиттер-иона 1-1Н непосредственно из неочищенного 1-1Н хлоргидрата с помощью затравки некоторым количеством кристаллов чистого 1-1Н. Раствор хлоргидрата 85%-ной чистоты (250 мг) в воде (1 мл) обрабатывался древесным углем. Раствор доводился до рН 6,5 с помощью NaHCO₃ (60 мг) и обесцвечивался древесным углем. Фильтрат затравливался несколькими кусочками кристаллов, полученных из процедуры 1, и перемешивался всю ночь при комнатной температуре. Выделившиеся кристаллы собирались фильтрацией, промывались водой (2 х 2 мл) и сушились при пониженном давлении, давая 170 мг (80% выход) бледно-желтых призм 1-1Н (в форме цвиттер-иона), т.пл. более 185^оС (разл.), которое было идентичным тому, которое было получено посредством процедуры 1 (как показано ИК, УФ и ЯМР). Кристаллическая цвиттер-ионная форма соединения 1-1Н была слегка растворимой в воде (6 мг/мл в солевом растворе при 23^оС).

П р и м е р 20.

CHCH-CH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (3-оксиметилпиридинио)-1-пропенил]-3-цефем-4-кар- боксилат (1-1К) (Е изомер).

А. Иодид дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(3-оксиметилпиридинио)-1- пропенил]-3- цефем-4-карбоксилата (Е-изомер) (XII-1K).

К раствору IX-I (Е изомер, 1,79 г, 2,5 ммоль) в 2,5 мл метанола и 7,5 мл CH₃CN добавлялся 3-оксиметилпиридин (545 мг, 5 ммоль), и смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционная смесь выливалась в этилацетат (100 мл) при энергичном перемешивании. Полученный в результате осадок собирался фильтрацией, промывался небольшим количеством этилацетата и сушился, при этом получалось 2,06 г (100%) целевого соединения XII-1K в виде рыжевато-коричневого порошка. Т.пл. 170-180^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 1780, 1725, 1675, 1615, 1530, 1385, 1225, 1040, 750, 700
УФ: λ_макс. (C₂H₅OH), нм: (Е_1см^1%) 290 (196).

ЯМР: δ (ДМСО+D₂O), млн.дол. 3,7 (2Н, широкий синглет, 2-Н), 3,91 (3Н, синглет, ОСН₃), 4,70 (2Н, синглет, Py-C-OH), 5,28 (2Н, мультиплет, CH₂-N⁺), 5,23 (1Н, дублет, J 5 Гц, 6-Н), 5,90 (1Н, дублет, J 5 Гц, 7-Н), 6,34 (1Н, мультиплет, 3-CH= C), 6,86 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 6,89 (1Н, синглет, CHPh₂), 7,35 (10Н, мультиплет, Ph-H), 7,9-8,9 (4Н, мультиплет, Ру-Н).

В. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-оксиметилпиридинио)-1-пропенил] -3-цефем-4-кар- боксилат (1-1К) (Е изомер).

Смесь XII-1K (Е изомер, 2,0 г, 2,4 ммоль) и бисульфита натрия (1 г) в 85% НСООН (10 мл) перемешивалась в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционная смесь концентрировалась до приблизительно 5 мл при пониженном давлении. Маслянистый остаток выливался в ацетон (100 мл) при энергичном перемешивании. Осадок собирался фильтрацией, промывался небольшим количеством ацетона и сушился, при этом получалось 1,1 г рыжевато-коричневого порошка, который очищался с помощью хроматографии на колонке (с использованием в качестве насадки угольного брикета (ПрепПАК-500/С₁₈, Уотерс), при этом получалось 283 мг (22%) соединения 1-1К в виде аморфного порошка. Порошок кристаллизовался из 4 норм. H₂SO₄и ацетона, давая 144 мг целевого соединения 1-1К в виде бесцветных игл. Т.пл. 185-188^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 1775, 1680 плечо, 1660, 1630, 1225, 1045, 850
УФ: λ_макс. (фосфатный буфер, рН 7), нм: (Е_1см^1%), 236,5 (283), 275 плечо (280), 292,5 (330)
ЯМР: δ (D₂O), млн. дол. 3,75 (2Н, синглет, 2-Н), 4,18 (3Н, синглет, ОСН₃), 4,97 (2Н, синглет, Py-C-OH), 5,35 (1Н, дублет, J 4 Гц, 6-Н), 5,43 (2Н, дублет, J 6,5 Гц, СН₂-N⁺), 5,92 (1Н, дублет, J 4 Гц, 7-Н), 6,18 (1Н, дублет-триплет, J 16 Гц, J 6,5 Гц, 3-CH=C-), 6,97 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 8,13 (1Н, д-д. J 8 Гц, J 16 Гц, Ру-Н), 8,60 (1Н, дублет, J 8 Гц, Ру-Н), 8,84 (1Н, дублет, J 6 Гц, Ру-Н), 8,90 (1Н, синглет, Ру-Н).

П р и м е р 21.

CHCH-CH₂-⊕NCONHCH₃
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- (Z)-метоксииминоацетамидо] -3- [3-(4-N-метилкарбамоилпиридинио)-1-пропенил] -3- цефем-4-карбоксилат (1-1М) (Е изомер).

Смесь дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропенил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Е изомер, 450 мг, 0,62 ммоль) и 4-N-метилкарбамоилпиридина (полученного согласно методике М. Самедзима, Yakugaku Zasshi 80, 1706 (1960) (215 мг, 1,58 ммоль) в ацетонитриле (2 мл) перемешивалась в атмосфере азота в течение 5 ч при комнатной температуре. Смесь упаривалась при пониженном давлении, и остаток растирался с простым эфиром, давая 530 мг четвертичной соли. Смесь твердого вещества и бисульфита натрия (150 мг) в 85% муравьиной кислоте (2 мл) перемешивалась в течение 4 ч, а затем нагревалась при 40^оС в течение 30 мин. Смесь упаривалась при пониженном давлении. Остаток растирался с ацетоном и неочищенный продукт собирался фильтрованием. Неочищенный продукт хроматографировался на колонке НР-20 (1,5 х 18 см), и колонка элюировалась водой и 30% водным метанолом. Метанольный элюат упаривался при пониженном давлении, и остаток сушился вымораживанием, давая 140 мг аморфного порошка, который далее очищался с помощью HPLC (Колонка: Лихросорб RP-18, растворитель: 15% метанол), и элюат от HPLC сушился вымораживанием, давая 60 мг (18%) целевого продукта 1-1М. Т.пл. 180-183^оС (разл.). Оцененная чистота: 80%
ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 1760, 1660, 1600.

УФ: λ _макс. (Фосфатный буфер, рН 7), нм: ε 230 (22100), 286 (22100).

ЯМР: δ (D₂O), млн.дол. 3,08 (3Н, синглет, CONHCH₃), 3,72 2Н, синглет, 2-Н), 4,16 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,35 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,95 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 7,00 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 8,35 (2Н, дублет, J 6 Гц, пиридин-Н), 9,05 (2Н, дублет, J 16 Гц, пиридин-Н).

П р и м е р 22.

CHCH-CH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (4-карбоксипиридинио)-1-пропенил]-3-цефем-4-карбо-ксилат (1-1N).

К перемешиваемой суспензии изоникотиновой кислоты (340 мг, 2,8 ммоля) в сухом ДМФ (3,5 мл) добавлялся N,O-бис-(триметилсилил) ацетамид (0,7 мл, 2,8 ммоль) в атмосфере азота. К полученному в результате светлому раствору добавлялся дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3- ил)-2-метоксииминоацетамидо]-3- (3-иод-1-пропенил)-3-цефем-4-карбоксилат (IX-I) (Е изомер, 720 мг, 1 ммоль) в виде одной порции, и красный раствор перемешивался в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Реакционная смесь добавлялась по каплям к перемешиваемому насыщенному раствору хлористого натрия (50 мл), содержащему тиосульфат натрия (150 мг). Желтый осадок собирался фильтрацией, промывался водой, и сушился для получения 722 мг бледно-желтого порошка. Порошок (700 мг) и бисульфит натрия (70 мг) растворялись в 85%-ной муравьиной кислоте (5 мл) и раствор оставлялся стоять при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Смесь суспендировалась в толуоле (50 мл) и концентрировалась. Остаток растирался с ацетоном (70 мл), и осадок изолировался фильтрацией, давая 421 мг желтого порошка. Этот неочищенный порошок (400 мг) суспендировался в воде (2 мл), и к суспензии добавлялся бикарбонат натрия. Полученный в результате темный раствор адсорбировался на колонке с насадкой (50 мл) из угольного брикета ПрепПАК/С₁₈ (Система Уотерс, 500), и колонка элюировалась водой (200 мл). Элюент фракционировался на 10 фракций (по 20 мл в каждой), желаемые фракции (фракции N 4-7) объединялись, подкислялись до рН 32 н. соляной кислотой и концентрировались. Остаток растирался с ацетоном (30 мл), осадок собирался фильтрацией, давая 201 мг (37%) целевого соединения 1-1N в виде желтого порошка. E/Z 7/1; 80%-ная чистота. Т.пл. более 189^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 1770, 1665, 1660.

УФ: λ_макс. (фосфатный буфер, рН 7), нм: ε 227 (22500), 290 (22100)
ЯМР: δ (D₂O+NaHCO₃) в млн.дол. 3,7 (2Н, широкий синглет), 4,15 (3Н, синглет), 5,32 (1Н, дублет, J 4 Гц), 5,39 (2Н, дублет, J 6 Гц), 6,14 (1Н, дублет-триплет, J 15,5 и 6 Гц), 7,03 (1Н, дублет, J 15,5 Гц), 8,31 (2Н, дублет, J 7 Гц), 8,94 (2Н, дублет, J7 Гц).

П р и м е р 23.

CHCH-CH₂-
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- (Z)-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(2,3-циклопентенпиридинио)-1-пропенил] -3-цефем- 4- карбоксилат (1-10) (Е изомер)
Смесь дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-)3-иод-1-пропенил)-3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (Е изомер, 450 мг, 0,62 ммоль) и 2,3-циклопентенпиридина (217 мг, 1,83 ммоль) в ацетонитриле (2 мл) перемешивалась в атмосфере азота в течение 4 ч при комнатной температуре. После упаривания при пониженном давлении смесь растиралась с простым эфиром, при этом получалось 560 мг четвертичной соли. Смесь твердого вещества и 85%-ной муравьиной кислоты (2 мл) перемешивалась в атмосфере азота в течение 3 ч при комнатной температуре и затем нагревалась при 40^оС в течение 30 мин. Смесь упаривалась при пониженном давлении, и растирание остатка давало 391 мг неочищенного продукта, который очи- щался хроматографией на колонке НР-20 (1,5 х 18 см). Колонка элюировалась водой и 30%-ным водным метанолом. Упаривание метанольного элюата при пониженном давлении с последующей сушкой вымораживанием давало 160 мг аморфного порошка, который в дальнейшем очищался с помощью HPLC (Колонка: Лихросорб, растворитель: 10%-ный метанол). Элюат HPL^Cсушился вымораживанием, давая 50 мг (15%) целевого продукта 1-10. Т.пл. более 190^оС (разл.). Оцененная чистота: 75%
ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 1765, 1670, 1600.

УФ: λ_макс (фосфатный буфер, рН 7), нм: (ε) 235 (20000), 283 (25000).

ЯМР: δ (D₂O)+NaHCO₃), млн.дол. 2,2-2,6 (2Н, мультиплет, -СН₂-), 3,1-3,6 (4Н, мультиплет, -СН₂-), 3,72 (2Н, синглет, 2-Н), 4,17 (3Н, ОСН₃), 5,33 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,90 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,75 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 7,65-8,2 (3Н, мультиплет, пиридин-Н).

П р и м е р 24.

CH=CH-CH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тадиазол-3-ил)-2-(Z)-этоксииминоацетамидо] -3- [3-(4-карбоксипиридинио)-1-пропенил]-3-цефем-4-карбо- ксилат (1-2N, Е изомер).

7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- (Z)-этоксииминоацетамидо] -3- [3-(4-карбоксипиридинио)-1-пропенил] -3-цефем-4-кар- боксилат (1-2N,Z изомер).

К охлажденной смеси BSA (1,0 мл, 4,12 ммоль) и изоникотиновой кислоты (506 мг, 4,12 ммоль) добавлялось IX-2 (из приготовления N 21 (1,0 г, 1,37 ммоль) и смесь перемешивалась в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь выливалась в 10% Na₂S₂O₃ (20 мл) для осаждения 1,3 г четвертичной соли, которая собиралась фильтрацией, промывалась в воде и сушилась. Смесь твердого вещества и бисульфита натрия (0,3 г) в муравьиной кислоте (98% 5 мл) нагревалась при 40^оС в течение 1 ч и упаривалась при пониженном давлении. Остаток растирался с ацетоном и фильтровался, в результате чего получалось 900 мг неочищенного продукта (Е пропенильный изомер, Z пропенильный изомер 2: 1). Разделение изомеров выполнялось с помощью HPLC (колонка: Лихросорб, растворитель: 15%-ный метанол). Собирались более быстро движущиеся фракции HPLC, упаривались при пониженном давлении, при этом получался Е-пропенильный изомер 1-2N (44 мг, выход 6%). Медленно движущиеся фракции давали Z-пропенильный изомер 1-2N (32 мг выход 5%) при выполнении сходной процедуры.

1-2N, E изомер
Т.пл. более 200^оС (разл.)
ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 1765, 1660, 1620, 1380,
УФ: λ_макс (вода), нм: (ε) 228 (22200) 291 (23600).

ЯМР: δ (D₂O), млн. дол. 1,45 (3Н, триплет, J 6 Гц, СН₂СН8), 3,72 (2Н, синглет, 2-Н), 5,45 (2Н, квартет, CCH₃), 5,40 (1Н, дублет, J 4 Гц, 6-Н), 5,90 (1Н, дублет, J 4 Гц, 7-Н), 7,05 (1Н, дублет, J 15 Гц, 3-СН), 8,30 (2Н, дублет, J 6 Гц, Ру-Н), 8,95 (2Н, дублет, J 6 Гц, Ру-Н).

1-2N,Z изомер
Т.пл.более 200^оС (разл.).

ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 1760, 1660 (плечо), 1620, 1370
УФ: λ_макс (фосфатный буфер, рН 7) в нм (ε) 225 (22400), 275 (16000).

ЯМР: δ (D₂O), млн. дол. 1,45 (3Н, триплет, J 7 Гц, CH₂C), 3,50 (1Н, дублет, J 17 Гц, 2-Н), 3,75 (1Н, дублет, J 17 Гц, 2-Н), 5,38 (1Н, дублет, J 4 Гц, 6-Н), 5,95 (1Н, дублет, J 4 Гц, 7-Н), 6,62 (1Н, дублет, J 11 Гц, 3-СН), 8,35 (2Н, дублет, J 6 Гц, Ру-Н), 8,92 (2Н, дублет, J 6 Гц, Ру-Н).

П р и м е р 25.

CHCH-CH₂-⊕NCONH₂
7-[2-(амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(про- пен-3-илоксиимино) ацетамидо] -3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропенил] -3-цефем-4- карбоксилат (1-3Н) (Е изомер).

К раствору 35 мг (0,08 моль) хлоргидрата 7-амино-3-[3-(4- карбамоилпиридинио)-1-(E)-пропенил]-3-цефем-4-карбоксилата в 2 мл 50%-ного водного ацетона добавлялось 52 мг хлоргидрата 2-[5- амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)]-2-(пропен-3-илоксиимино) ацетилхлорида (из приготовления 25), и смесь доводилась до рН 6,5-7,0 2 н. Na₂CO₃. Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 1 ч, подкислялась до рН 2 с помощью 1н. соляной кислоты и концентрировалась при пониженном давлении. Остаток хроматографировался на колонке из смолы НР-20, которая элюировалась 300 мл воды и 30% смесью метанол-вода. Фракции, содержащие продукт, объединялись и упаривались при пониженном давлении. Остаток, 73 мг, очищался на колонке с обратной фазой, носитель которой был взят из угольного брикета ПрепПАК-500/С₁₈ (Уотерс, 30 мл). Колонка последовательно элюировалась водой, 5%-ным метанолом, 10 и 20%-ным метанолом. Фракции, содержащие продукт, объединялись и лиофилизовались, давая 26 мг (62%) целевого продукта 1-3Н, Т.пл. 160^оС (разл.).

ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 3400, 1765, 1680, 1605, 1400.

УФ: λ_макс (фосфатный буфер, рН 7), нм: (ε) 226 (24600), 288 (22800).

ЯМР: δ (D₂O), млн.дол. 3,75 (2Н, синглет, 2-Н), 5,41 (1Н, дублет, J 5 Гц, 6-Н), 5,50 (4Н, мультиплет, CH₂N⁺ и CH=C), 5,98 (1Н, дублет, J 5 Гц, 7-Н), 6,20 (1Н, мультиплет, 3-СН=СН), 7,09 (1Н, дублет, J 17 Гц, 3-СН), 8,50 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н), 9,16 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н).

П р и м е р 26.

CHCH-CH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- пропаргилоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбамоилпиридинио)-1-пропенил] -3-це- фем-4-карбоксилат (1-4Н) (Е изомер).

К раствору 86 мг (0,19 ммоль) хлоргидрата 7-амино-3-[3-(4- карбамоилпиридинио)-1-(Е)-пропенил] -3-цефем-4-карбоксилата (XXII-H) в 2 мл 50%-ного водного ацетона добавлялось 63 мг хлоргидрата 2-пропаргилоксиимино-2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил) ацетилхлорида (из приготовления 26). Суспензия поддерживалась при рН 6,5-7,0 с помощью Na₂CO₃ и затем перемешивалась при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционная смесь подкислялась до рН 21 н. соляной кислотой и концентрировалась в вакууме.

Остаток разбавлялся 30 мл воды, нейтрализовался NaHCO₃ и фильтровался. Фильтрат переносился на вершину колонки, которая была наполнена носителем в обратной фазе (30 мл), взятом из угольного брикета ПрепПАК-500/С₁₈ (Уотерс). Колонка элюировалась, последовательно водой, 5, 10 и 20%-ным метанолом. Фракции, содержащие продукт, объединялись и лиофилизовались, давая 13 мг (12%) целевого соединения 1-4Н. Оцененная чистота 70% Т.пл. 160^оС.

ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 3400, 2120, 1765, 1680, 1610.

УФ: λ_макс (фосфатный буфер, рН 7), нм: (ε) 229 (24000), 288 (21200),
ЯМР: δ (D₂O), млн.дол. 3,78 (2Н, синглет, 2-Н), 5,15 (2Н, дублет, J 1 Гц, -C-C= CH), 5,40 (1Н, дублет, J 5 Гц, 6-Н), 5,50 (2Н, мультиплет, C-N⁺), 5,98 (1Н, дублет, J 5 Гц, 7-Н), 6,20 (1Н, мультиплет, 3-CH=C), 7,05 (1Н, дублет, J 17 Гц, 3-CH), 8,50 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н), 9,16 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н).

П р и м е р 27.

CHCH-CH₂-⊕NCONH₂
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- циклопентилоксиимидо]-3-[3- (4-карбамоилпиридинио)-1-пропенил-3-цефем-4-карбо-ксилат (1-5Н) (Е изомер).

К перемешиваемому раствору 139 мг (0,31 ммоль) хлоргидрата 7-амино-3-[3-(4-карбамоилпиридино)-1-пропенил] -3-цефем-4- карбоксилата в 3,5 мл 50%-ного водного ацетона в охлаждаемой льдом ванне добавлялось порциями 120 мг (0,44 ммоль) 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-циклопентилоксииминоацетилхлорида хлоргидрата (из приготовления 27). Смесь доводилась до рН 6,5-7,0 с помощью 2 н. Na₂CO₃ (0,9 мл) и перемешивалась в течение 1 ч при 10^оС. Реакционная смесь подкислялась до рН 21 н. соляной кислотой и упаривалась при пониженном давлении. Остаток хроматографировался на колонке со смолой НР-20 (20 мл) и элюировался последовательно 300 мл воды и 30%-ной смесью метанол-вода. Фракции, содержащие продукт, объединялись и концентрировались в вакууме. Остаток обрабатывался 60 мл ацетона, давая 111 мг (83%) целевого соединения 1-5 Н. Т.пл. 160^оС (разл.). Оцененная чистота 70%
ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 3400, 1770, 1680, 1605, 1530.

УФ: λ_макс (фосфатный буфер, рН 7), нм: (ε) 224 (23300), 286 (24600).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 1,70 (8Н, широкий синглет, H), 4,48 (1Н, широкий синглет, ), 5,05 (1Н, дублет, J 5 Гц, 6-Н), 5,30 (2Н, мультиплет, CH₂N⁺), 5,67 (1Н, дублет-дублет, J 5 Гц и 7 Гц, 7-Н), 6,20 (1Н, мультиплет, 3-CH=CH), 7,08 (1Н, дублет, J 17 Гц, 3-СН), 3,34 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н), 9,11 (2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н), 9,38 (1Н, дублет, J 7 Гц, 7-NH).

П р и м е р 28.

CHCH-CH₂-⊕N
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (3-карбоксиметилпиридинио)-1-пропенил]-3-цефем-4-карбоксилат (1-1Р) (Е изомер).

А. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(3-карбоксиметилпиридинио)-1-пропе- нил] 3-цефем-4-карбоксилат (XII-1P, иодид, Е изомер).

К суспензии хлоргидрата 3-карбоксиметилпиридина (0,89 г, 5 ммоль) в 10 мл CH₂Cl₂ добавлялся N,O-бис-(триметилсилил)ацетамид (4,97 мл, 18 ммоль) и смесь перемешивалась при комнатной температуре до тех пор, пока не будет получен прозрачный раствор. К раствору добавлялось IX-I (1,79 г, 2,5 ммоль), смесь оставлялась стоять при комнатной температуре. После 3 ч к охлажденной смеси добавлялось 3 мл метанола и раствор упаривался в вакууме, в результате чего получалось масло, которое растиралось с этилацетатом, что давало 2,28 г целевого соединения XII-1P в виде рыжевато-коричневого порошка. Т.пл. 161^оС (разл.).

ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 1780, 1720, 1675, 1630, 1530, 1385, 1225, 1045, 755, 700.

УФ: λ_макс (этиловый спирт), нм: (Е_1см^1%) 295 (188).

ЯМР: δ (ДМСО+D₂O), млн.дол. 3,70 (2Н, широкий синглет, 2Н), 3,90 (5Н, синглет, ОСН₃ и Ру-СН₂СО), 5,25 (3Н, мультиплет, -CH₂N⁺ и 6-Н), 5,92 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,35 (1Н, мультиплет, 3-CH=CH-), 6,90 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 6,92 (1Н, синглет, CHPh₂), 7,35 (10Н, мультиплет, Ph-H), 8,8-8,0 (4Н, мультиплет, Ру-Н).

В. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(3-карбоксиметилпиридинио-1-пропенил] -3-цефем-4-карбоксилат (1-1Р) (Е изомер).

Смесь XII-1P (иодида) 2,28 г) и бисульфита натрия (1,1 г) в 85% НСООН (10 мл) перемешивалась при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционная смесь концентрировалась до объема приблизительно 5 мл при пониженном давлении. Маслянистый остаток растирался с ацетоном (100 мл), в результате чего получалось 1,22 г неочищенного продукта, который очищался с помощью хроматографии на колонке (НР-20, 420 мл), при этом получалось 533 мг целевого соединения 1-1Р (38% из IX-I) в виде бледно-желтого аморфного порошка. Т.пл. 165^оС (разл.).

ИК: ν_макс (KBr), см^-1: 1770, 1670, 1600, 1530, 1385, 1140, 1040.

УФ: λ_макс (фосфатный буфер рН 6,2), нм: (Е_1см^1%) 234 (374), 277 плечо (390), 290 (402),
ЯМР: δ (D₂O+NaHCO₃), млн.дол. 3,78 (2Н, синглет, 2-Н), 3,92 (2Н, синглет, Ру-СН₂СО), 4,22 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,40 (1Н, дублет, J 4 Гц, 6-Н), 5,44 (2Н, дублет, J 6,5 Гц, -CH₂-N⁺), 5,97 (1Н, дублет, 4 Гц, 7-Н), 6,20 (1Н, дублет-триплет, J 16 и 6,5 Гц, 3-CH=CH), 7,08 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 8,11 (1Н, дублет-дублет, J 8 и 7 Гц, Ру-Н5), 8,53 (1Н, дублет, J 8 Гц, Ру-Н₄), 8,82 (1Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н₆), 8,86 (1Н, синглет, Ру-Н₂).

П р и м е р 29.

CHCH-CH₂-⊕NS-CH₂COOH
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазолил-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо]-3- [3-(4-карбоксиметилтиопиридинио)-1-пропенил] -3-цефем- 4- карбоксилат (1-1Q) (E изомер).

А. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(4-карбоксиметилтиопиридинио)-1- пропенил] -3-цефем-4-карбоксилат (XII-IQ, иодид, Е изомер).

К суспензии 4-карбоксиметилтиопиридина (0,88 г, 5 ммоль) в 10 мл CH₂Cl₂, добавлялся N, O-бис-(триметилсилил)ацетамид (5 мл, 18 ммоль), смесь перемешивалась при комнатной температуре до тех пор, пока не будет получен прозрачный раствор. К раствору добавлялось IX-I (Е изомер, 1,79 г, 2,5 ммоль), смесь оставлялась стоять при комнатной температуре. После 3 ч к охлажденной смеси добавлялось 3 мл метанола и раствор упаривался в вакууме, давая маслянистый остаток, который растирался с этилацетатом, давая 2,43 г целевого соединения XII-1Q (иодид) в виде рыжевато-коричневого порошка. Т.пл. 155^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 1780, 1720, 1670, 1625, 1525, 1385, 1225, 1115, 1040, 755, 700
УФ: λ_макс. (этиловый спирт), нм: (Е_1см^1%) 312 (299).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆+D₂O), млн.дол. 3,70 (2Н, широкий синглет, 2Н), 3,93 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,07 (2Н, мультиплет, CH₂-N⁺), 5,23 (1Н, дублет, J 5 Гц, 6-Н), 5,90 (1Н, дублет, J 5 Гц, 7-Н), 6,29 (1Н, мультиплет, 3-CH=C), 6,87 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН), 6,91 (1Н, синглет, CHPh₂), 7,35 (10Н, мультиплет, Ph-H), 7,88 и 8,58 (каждый 2Н, дублет, J 6 Гц, Ру-Н).

В. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-(4-карбоксиметилтиопиридинио)-1-пропенил] -3-цефем-4- карбоксилат (1-1Q) (Е изомер).

Смесь XII-IQ (иодид, 2,43 г) и бисульфита натрия (1,1 г) в 85% НСООН (10 мл) перемешивалась при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционная смесь концентрировалась до объема ≈ 5 мл при пониженном давлении. Маслянистый остаток растирался с ацетоном (100 мл), фильтровался и сушился, давая неочищенный продукт (1,39 г), который очищался с помощью хроматографии на колонке (НР-20, 20 мл), при этом получалось 577 мг целевого соединения I-IQ (39% из IX-I) в виде бледно-желтого аморфного порошка. Т.пл. 188^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 1765, 1670, 1625, 1530, 1380, 1110, 1035.

УФ: λ_макс. (фосфатный буфер, рН 6,2), нм: (Е_1см^1%) 234 (459), 310 (678).

ЯМР: δ (D₂O+NaHCO₃), млн.дол. 3,79 (2Н, широкий синглет 2-Н), 4 н. 10 (2Н, синглет, S-CH₂), 4,23 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,25 (2Н, дублет, J 6,5 Гц, CH₂-N⁺), 5,39 (1Н, дублет, J 4,0 Гц, 6-Н), 5,97 (1Н, дублет, J 4 Гц, 7-Н), 6,18 (1Н, дублет-триплет, J 15,5 Гц и 6,5 Гц, 3-CH=CH), 7,05 (1Н, дублет, J 15,5 Гц, 3-СН), 7,84 и 8,35 (каждый 2Н, дублет, J 7 Гц, Ру-Н).

П р и м е р 30.

CHCH--
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (1-метилпирролидинио)-1-пропенил] -3-цефем-4-кар- боксилатсульфат (1-1А, сульфат).

А. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(1-метилпирролидинио)-1-пропенил] -3- цефем-4-карбоксилат (XII-IA, иодид).

К холодному раствору дифенилметил 7-[2-(3-амино-1,2,4-тиадиазол- 3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3-иод-пропенил] -3-цефем-4- карбоксилата (IX-I) (из приготовления 14) (21,5 г, 30 ммоль) в этилацетате (300 мл) добавлялся по каплям раствор 1-метилпирролидина (2,55 г, 30 ммолей) в этилацетате (30 мл на протяжении 1 ч при от -5 до 0^оС, полученный в результате осадок собирался фильтрацией и промывался хлороформом (200 мл), в результате чего получалось 23,0 г (95,8%) целевого соединения (IX-IA, иодид), плавящегося при более 175^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3330, 1780, 1730, 1685, 1615.

УФ: λ_макс. (этиловый спирт), нм: (Е_1см^1%), 218 (435), 295 (188).

В. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-5-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3-(1-метилпирролидинио)-1-пропенил] -3- цефем-4-карбоксилат (XII-IA, хлорид).

Соединение (XII-IA, иодид) (23 г, 28,7 ммоль) растворялось в смеси ацетона и метанола (1:1, 230 мл) и наносилось на колонку из амберлита IRA-410 (в форме хлорида, 230 мл), которая предварительно обрабатывалась тем же смешанным растворителем. Колонка проявлялась растворителем, и фракции, содержащие желаемый продукт, объединялись и концентрировались до маслянистого остатка, который растирался с этилацетатом (300 мл), при этом получалось 17,9 г (87,7% целевого соединения (XII-IA, хлорид), плавящегося при 190^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 2380, 1780, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. (этиловый спирт), нм: (Е_1см^1%) 220, (369), 290 (232).

С. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (1-метилпирролидинио)-1-пропенил]-3-цефем-4-кар- боксилат сульфат (1-1А, сульфат).

Смесь соединения (XII-IA, хлорида) (17,8 г, 25 ммоль) в 85%-ной муравьиной кислоте (178 мл) перемешивалась при комнатной температуре в течение 2 ч в атмосфере азота. Смесь упаривалась в вакууме, и маслянистый остаток растирался с ацетоном, давая 9,80 г неочищенного 1-1А. Концентрирование фильтрата и ацетонных смывок давало дополнительные 2,95 г неочищенного 1-1А. Два сбора неочищенного материала объединялись и экстрагировались 2 н. соляной кислотой (1 л и 0,5 л). Объединенные экстракты адсорбировались на смоле Диаион НР-20 (колонка 1,5 л), которая элюировалась водой и 30%-ным водным метанолом. Желаемые фракции собирались и упаривались в вакууме до маслянистого остатка, который растирался последовательно с изопропанолом (200 мл) и ацетоном (200 мл), при этом получалось 7,09 г светло-желтого порошка. Это вещество (6,80 г) растворялось в воде (20 мл) и затем подвергалось хроматографии на колонке с насадкой угольным брикетом ПрепПАК-500/С₁₈(90 мл), с использованием в качестве элюента воды и 10%-ного метанола. Элюат собирался в 20 мл фракции с контролированием при помощи HPLC. Колонка, Нуклеоцил SSC-ODC-262,8 х 100 мм) мобильная фаза, 0,01 М фосфатный буфер (рН 7,2) (метанол 90:10; детектирование, УФ (254 нм)). Фракции от 4 до 10 объединялись, упаривались при пониженном давлении и лиофилизовались, при этом получалось 2,28 г желтого порошка (E/Z 7/1, 70%-ная чистота). Фракции 11-85 обрабатывались таким же образом, как описано выше, при этом получалось 3,27 г желтого порошка, (E/Z 5/1, 70%-ная чистота) (Сбор 2). Порция сбора 1 (1,0 г) очищалась повторной хроматографией на насадке угольном брикете ПрепПАК-500/С₁₈ (90 мл). Колонка последовательно элюировалась водой и 5%-ным водным метанолом. Элюат, содержащий желаемое соединение, концентрировался и лиофилизовался, в результате чего получалось 638 мг (E/Z 7/1, 80%-ная чистота) желтого порошка. Другая часть сбора 1 (1,14 г) обрабатывалась тем же способом, давая 880 мг (E/Z 7/1, 80%-ная чистота) желтого порошка. Две очищенные пробы объединялись, и порция (1,45 г) растворялась в 1 н. серной кислоте (5 мл). Раствор разбавлялся ацетоном (315 мл) при перемешивании. Осадок кремового цвета собирался фильтрацией, при этом получалось 1,48 г целевого соединения (1-1А, сульфат) (E/Z 7/1, 80% чистота) плавящегося при более 185^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3380, 3000, 1765, 1675, 1630, 1535, 1390, 1115.

УФ: λ_макс. (фосфатный буфер, рН 7), нм: (ε) 286 (19900), 291,5 (22500).

ЯМР: δ (D₂O+NaHCO₃), млн.дол. 2,36 (4Н, широкий, N), 3,15 (3Н, синглет, CH₃± N), 3,62 (5Н, широкий, 2-Н и ), 3,83 (1Н, широкий, 2-Н), 4,13 (2Н, дублет, J 8 Гц, CH₂N⁺), 4,22 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,39 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,96 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,00 (1Н, мультиплет, 3-CH=C), 6,67 (1/8Н, дублет, J 10 Гц, 3-СН, цис), 7,04 (7/8Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН, транс).

П р и м е р 31.

CHCH-CHN(CH₃)₃
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо] -3-[3- триметиламмонио-1-пропенил]-3-цефем-4-карбоксилат (I-ID)
А. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксиимино ацетамидо] -3- [3-триметиламмонио-1-пропенил]-3-це- фем-4-карбоксилат (XII-ID, иодид).

К раствору 13,0 г (19 ммоль) дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-иодпропе- нил)-3- цефем-4-карбоксилата (IX-I, из приготовления 10) в 38 мл сухого этил-ацетата добавлялось 1,75 мл (19,1 ммоль) 2,1 н. триметиламина в этилацетате при -5^оС, и смесь перемешивалась в течение 1 ч при -5^оС. Полученный в результате осадок отфильтровывался, промывался хорошо CHCl₃и сушился, при этом получалось 12,5 г (88%) целевого соединения (XII-ID) в виде иодида.

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3300, 1765, 1720, 1665.

УФ: λ_макс. (этиловый спирт), нм: (ε ) 300 (18400).

В. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетамидо]-3-(3-триметиламмонио-1-пропенил)-3-це- фем- 4-карбоксилат (XII-ID, хлорид).

Иодид (XII-ID, 12,5 г) растворялся в 60 мл смеси метанолацетон (1:1) и пропускался через колонку из ионо-обменной смолы (IRA-410 (Cl-), 125 мл). Колонка элюировалась 300 мл смеси метанол:вода (1:1), и элюат упаривался в вакууме и растирался с 300 мл изопропилового эфира, при этом получалось 10,4 г (91%) четвертичной соли (XII-ID, хлорид).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3300, 1765, 1710, 1665.

УФ: λ _макс. (этиловый спирт), нм: (ε ) 298 (15100).

С. 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] 3-[3-триметиламмонио-1-пропенил]-3-цефем-4-карбоксилат (I-ID, сульфат, Е изомер).

Раствор 10,4 г (16,0 ммоль) XII-ID (хлорида) в 20,8 мл 85%-ной муравьиной кислоты оставлялся стоять при комнатной температуре в течение 3 ч и концентрировался в вакууме. Остаток обрабатывался 210 мл изопропанола, и осадок отфильтровывался. Твердое вещество (10,1 г) растиралось с 210 мл воды и нейтрализовалось бикарбонатом натрия. Суспензия отфильтровывалась, и фильтрат хроматографировался на колонке НР-20 (300 мл), которая последовательно элюировалась водой (1000 мл), 10%-ным метанолом (200 мл) и 30%-ным метанолом (150 мл). Фракции, содержащие желаемый продукт, объединялись и концентрировались при пониженном давлении. Остаток очищался хроматографией в обратной фазе. Колонка наполнялась насадкой угольным брикетом, полученным из ПрепПАК-500/С₁₈ (Уотерс, 200 мл). Элюирование последовательно водой (600 мл) и 30% -ным метанолом (200 мл) с последующим концентрированием фракций, содержащих желаемый продукт, давали 2,52 г (18%) целевого соединения. Раствор цвиттер-ионного продукта (1,5 г в 1 н. серной кислоте (5 мл) добавлялся порциями к 300 мл ацетона, и полученный в результате осадок фильтровался и сушился. Выход I-ID в виде сульфата был 1,42 г (80%). Соотношение E/Z было приблизительно 10/1 на основе HPLC.

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3380, 1765, 1665.

УФ: λ_макс. (фосфатный буфер, рН 7), нм: (ε ) 237 (19500), 293 (22400).

ЯМР: δ (D₂O), млн.дол. 3,25 (9Н, синглет, N⁺-CH₃), 3,94 (2Н, синглет, 2-Н), 4,14 (2Н, дублет, J 7 Гц, CH₂N⁺), 4,23 (3Н, синглет, О-СН₃), 5,42 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 6,00 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,23 (1Н, дублет-триплет, J 7 и 16 Гц, 3-CH=C), 7,23 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-СН).

П р и м е р 32.

CHCH-CHNCONH₂
7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-[3- (4-карбамоилпиридинио)-1-пропенил]-3-цефем-4-кар- боксилат (I-IH, Е изомер).

К смеси гидрохлорида 7-амино-3-[3-(4-карбамоил-пиридинио)-1-(Е)- пропенил] -3-цефем-4-карбоновой кислоты (XXII-H, 397 мг, 1 ммоль) и NaHCO₃ (168 мг, 2 ммоль) в водном ДМФ (вода, 3,5 мл и ДМФ, 7,5 мл) добавлялся бензотразол-1-ил-2-(5-амино-1,2,4-тиадазол-3-ил)- 2-метоксииминоацетат (479 мг, 1,5 ммоль) (из приготовления 28). Смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 3,5 ч. Реакционная смесь доводилась до рН 3-4 3 н. соляной кислотой и разбавлялась 200 мл ацетона, давая осадок, который собирался фильтрацией. Неочищенный продукт растворялся в небольшом объеме водного ТГФ, и раствор доводился до рН 6,8 с помощью NaHCO₃, обрабатывался обеспечивающим углем, концентрировался до объема ≈ 1 мл и затравливался несколькими кусочками кристаллического I-IH. После перемешивания в течение ночи кристаллический осадок собирался фильтрацией для получения целевого соединения I-IH (в форме цвиттер-иона). Выход 83 мг (16%). Т.пл. более 185^оС (разл.). Физико-химические показатели этого продукта были идентичными таковыми соединениями в примере 10.

Приготовление 1. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил) 2-метоксииминоацетамидо]-3-хлорметил-3-цефем-4-кар- боксилат (IV-I).

К перемешиваемой суспензии 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоуксусной кислоты (III-I) (2,1 г, 10 ммоль) в сухом метиленхлориде (50 мл) добавлялся пятихлористый фосфор (2,09 г, 10 ммоль) при -30^оС, смесь перемешивалась в течение 20 мин при температуре от -15 до -20^оС. К указанному раствору хорангидрида кислоты добавлялся раствор хлоргидрата дифенилметил-7-амино-3- хлорметил-3-цефем-4-карбоксилата (II) (4,5 г, 10 ммоль) в метиленхлориде (50 мл), содержащий N,O-бис-(триметилсилил) ацетамид (10 г, 50 ммоль), при -30^оС. После перемешивания при -10^оС в течение 1 ч смесь концентрировалась для удаления метиленхлорида и разбавлялась этилацетатом (200 мл). Смесь промывалась последовательно 10% водным бикарбонатом натрия (2 х 40 мл), водой (2 х 20 мл) и солевым раствором (10 мл) и сушилась над сульфатом магния. Растворитель упаривался в вакууме, и получающийся маслянистый остаток (10 г) растворялся в хлороформе (20 мл) и хроматографировался на силикагеле (Вако гель С-200, 100 г содержащий 10 мл 1/1,5 М рН 7 фосфатного буфера) с использованием 1-3% смеси метанол-хлороформ. Фракции, содержащие целевое соединение, упаривались, давая 5,7 г (95%) соединения IV-I в виде желтого аморфного порошка. Т.пл. выше 140^оС (разл.).

ИК: ν _{макс. (}KBr), см^-1: 3300, 1780, 1720, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. (этанол, нм: (ε) 245 (1800), 280 (9800).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн. дол. 3,53 (2Н, ABq, 2-Н), 3,94 (3Н, синглет, OC), 4,42 (2Н, синглет, 3-СН₂), 5,22 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,92 (1Н, д-д. J 4,5 и 6, 7-Н), 6,93 (1Н, синглет, CHPh₂), 7,36 (10Н, мультиплет, Ph-H), 8,1 (2Н, шир. синглет, NH₂), 9,58 (1Н, дублет, J 6, 7-NH).

Приготовление 2. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил) 2-метоксииминоацетамидо]-3-иодметил-3-цефем-4-кар-боксилат (V-I).

Смесь IV-I из приготовления 1 (5,7 г, 9,5 ммоль) и иодистого натрия (4,3 г, 29 ммоль) в сухом ацетоне (50 мл) перемешивалась в течение 5 мин при комнатной температуре. Смесь концентрировалась при пониженном давлении, и получающееся масло встряхивалось со смесью этилацетата (100 мл) и воды (10 мл). Органический слой отделялся и промывался последовательно 10 мас. объем тиосульфатом натрия и солевым раствором. После сушки этилацетат удалялся в вакууме, давая 6,1 г (93%) целевого соединения (V-I) в виде желтого аморфного порошка, плавящегося при выше 120^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3300, 1780, 1725, 1680, 1620.

УФ: λ _макс. (этанол), нм: (ε) 245 (17000) 282 (12000)
ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 3,72 (2Н, ABq 2-H), 3,94 (3Н, синглет, ОСН₃), 4,23 (2Н, синглет, 3-СН₂), 5,21 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,89 (1Н, д-д. J 4,5 и 6, 7-Н), 6,94 (1Н, синглет, CPh₂ 7,35 (10Н, мультиплет, Ph-H), 8,12 (2Н, шир. синглет, NH2), 9,65 (1Н, дублет, J 6, 7-NH).

Приготовление 3. Иодистый дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-трифенил- фосфониометил- 3-цефем-4-карбоксилат (VI-I).

Смесь соединения V-I из примера приготовления 2 (690 мг, 1 ммоль) и трифенилфосфина (786 мг, 3 ммоль) в этилацетате (20 мл) перемешивалась в течение ночи при комнатной температуре. Твердое вещество, которое отделялось, собиралось с помощью фильтрования, промывалось этилацетатом (2 х 10 мл) и сушилось, давая 950 мг (100%) иодистого фосфония VI-I. Т.пл. 186^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3300, 1780, 1710, 1680, 1610.

УФ: λ _макс. (этанол), нм: (ε) 268 (15000), 275 (13000), 300 (7300).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 3,52 (2Н, шир. синглет, 2Н), 3,94 (3Н, синглет, OC), 5,34 (1Н, дублет, J 4,5, 6-H), 5,9 (1Н, мультиплет, 7-Н), 6,3 (1Н, синглет), 7,3 (10Н, мультиплет, Ph-H), 7,8 (15Н, мультиплет, Ph-H).

Приготовление 4. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метокси- иминоацетамидо] -3- [(трифенилфосфоранилиден)метил]-3-цефем-4-карбоксилат (VII-I).

Смесь соединения VI-I из примера приготовления 3 (952 мг, 1 ммоль). Амберлита IRA-410 (ОН- форма, 500 мг) и норм. гидроокиси натрия (4 мл) в метиленхлориде (10 мл) перемешивалась в течение 1 ч при комнатной температуре. Смесь фильтровалась, и отделенный органический слой сушился над сульфатом магния и концентрировался при понимженном давлении. Получающееся в результате масло растиралось с этилацетатом, получающийся желтый осадок собирался фильтрованием, давая 740 мг (90% 0 целевого соединения VII-I. T.пл. выше 180^оС (разл.).

ИК: ν _макс. (KBr), см^-1: 3400, 1750, 1630.

УФ: λ _макс. (этанол), нм: (ε) 268 (12000), 276 (10000) 384 (23000)
Приготовление 5. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил) 2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-хлор-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилат (VII-I).

К раствору VII-I из приготовления 4 (6,9 г, 8,4 ммоль) добавлялись сульфат магния (3 г) и 40% хлорацетальдегид (810 мг, 8,4 ммоль). Смесь перемешивалась в течение 1,5 ч при комнатной температуре, а затем фильтровалась. Фильтрат элюировался на силикагеле (Вако гель С-200, 100 г, содержащий 10 мл 1/1,5 М фосфатного буфера) на колонке с использованием CHCl₃, и CHCl₃, содержащего метанол. Фракции, содержащие желаемый продукт (0,5-1% метанол-хлороформ), упаривались в вакууме, давая 1,6 г (30%) целевого соединения VIII-I в виде желтого аморфного порошка, который представлял собой смесь Z и Е изомеров относительно хлорпропенильной части (Z/E 2/1; по данным ЯМР). Т.пл. выше 130^оС (разложение).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3300, 1780, 1725, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 240 (20000), 286 (12000).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆+D₂O), млн.дол. 3,56 и 3,8 (мультиплет, 2Н), 3,94 (3Н, синглет, ОСН₃), 4,16 (дублет, J 4,5, CCl), 5,26 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н), 5,87 (1Н, дублетб J 4,5, 7-H), 6,28 (2/3Н, дублет, J 11, 3-C цис-Н), 6,72 (1, 3Н, дублет, J 16, 3-C, транс-Н), 6,81 (2, 3Н, синглет, CPh₂), 6,92 (1, 3Н, синглет, CPh₂), 7,4 (10Н, мультиплет, Ph-H).

Приготовление 6. Дифенилметил 7-бензилиденамино-3- [(трифенилфосфоранилиден)метил]-3-цефем-4-карбоксилат (XVI).

К раствору иодистого дифенилметил 7-бензилиденамино-3- [(трифенилфосфинио)метил] -3-цефем-4-карбоксилата (XV приготовленного в соответствии с процедурой, описанной в опубликованной японской патентной заявке (Кокаи) 56-86187, 1981 г), (60 г, 70 ммоль) в метиленхлориде (350 мл) добавлялись норм. гидроокись натрия (140 мл) и Амберлит IRA-410 (ОН^-форма, 35 г) при 5^оС. Смесь перемешивалась в течение 1 ч при 5^оС и фильтровалась. Органический слой отделялся, сушился над сульфатом магния, концентрировался приблизительно до 100 мл объема и осаждался этилацетатом (500 мл). Получающееся желтое твердое вещество собиралось с помощью фильтрования и сушилось в вакууме, давая 48 г (94%) целевого соединения XVI, плавящегося при 195-8^оС (разложение).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 1770, 1620.

Приготовление 7. Дифенилметил 7-бензилиденамино-3-(3-хлор-1- пропен-1-ил)-3-цефем-4-карбоксилат (XVII).

К перемешиваемому раствору соединения XVI из приготовления 6 (2,9 г, 4 ммоль) в смеси метиленхлорида (40 мл) и воды (10 мл) добавлялся безводный хлорацетальдегид (800 мг) при комнатной температуре. К смеси добавлялось дополнительно 800 мг хлорацетальдегида тремя порциями на протяжении периода в 1 ч, при этом рН смеси поддерживалась между 6 и 9 путем добавления норм. гидроокиси натрия. Спустя 15 мин, водный слой удалялся, а органический слой сушился над сульфатом магния. Упаривание растворителя дало красное масло, которое растворялось в смеси этилацетата и изопропилового эфира (1/2, 80 мл). Раствор, промывался последовательно насыщенным водным бикарбонатом натрия (10 мл) и водой (10 мл). После сушки над сульфатом магния, удаление растворителя давало 3,3 г желтого масла. Раствор масла в метиленхлориде (50 мл) фильтровался с помощью силикагеля (12 г, Вакогель С-200), содержащего 1/1,5 М фосфатный буфер (1,2 мл, рН 6,4), и силикагель промывался метиленхлоридом (50 мл). Фильтрат и промывная вода объединялись и упаривались досуха. Остаток растирался с н-гексаном, давая 1,7 г (80%) целевого соединения (XVII) в виде желтого порошка. Спектр ЯМР показал, что хлорпропенильная часть молекулы имела Z конфигурацию. Т.пл. выше 50^оС (разлож.).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3400, 1775, 1720, 1630
УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 253 (11000), 258 (11000), 26 (10000), 273 (8300), 281 (7000), 290 (6300).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн. дол. 3,63 (2Н, шир, синглет, 2-Н), 4,0 (2Н, мультиплет, C-Cl), 5,42 (2Н, мультиплет 6Н и 3-CH=C), 5,72 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,27 (1Н, дублет, J 11, 3-СН), 6,85 (1Н, синглет, CHPh2), 7,33 (10Н, мультиплет, Ph-H).

Приготовление безводного хлорацетальдегида.

Безводный хлористый кальций добавлялся к охлаждаемому раствору 50% водного хлорацетальдегида (50 мл) при перемешивании для разделения его на два слоя. Хлорацетальдегид-гидратный слой (I) (верхний) отделялся и разбавлялся хлороформом (100 мл), смешивался с сульфатом магния (20 г), нагревался до кипения с обратным холодильником в течение 5 мин и фильтровался. Растворитель и вода удалялись азеотропно (т.кип. 56-64^оС) (2), остаток перегонялся, давая безводный хлорацетальдегид (3), т.кип. 70-82^оС/760 мм рт.ст.

ИК: ν_макс. (пленка), см^-1: 1720).

(1) R.P.Kurkjy, E.V.Brown, J.Amer. Chem. Soc. 74, 5778 (1952).

(2) S.Trippett, D.M.Walker, J.Chem. Soc, 1961, 1266.

(3) H.C.House, V.K.Jones, G.A.Frank, J.Org. Chem. 29, 3327 (1964).

Приготовление 8. Дифенилметил 7-амино-3-(3-хлор-1-пропен-1-ил)-3- цефем-4-карбоксилат (XVIII).

Раствор соединения XVII из приготовления 7 (180 мг, 0,34 ммоль) в этилацетате (10 мл) добавлялся к раствору реактива Жирарда Т [(карбоксиметил) триметиламмонийхлорид-гидразид] (251 мг, 1,5 ммоль) в метаноле (10 мл), содержащем уксусную кислоту (0,25 мл), при 5^оС. После перемешивания в течение 30 мин при 5^оС, смесь концентрировалась для удаления метанола, а затем добавлялся этилацетат (20 мл). Этилацетатный раствор промывался последовательно водой (2 х 5 мл), насыщенным водным бикарбонатом натрия (5 мл) и солевым раствором (5 мл) и сушился над сульфатом магния. Упаривание растворителя дало 145 мг (97%) целевого соединения XVIII (Z изомера) в виде желтого порошка. Т.пл. выше 100^оС (разлож.).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3400, 1770, 1720.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 252 (3700), 253 (3800), 260 (4000), 274 (4000), 285 (4000).

Приготовление 9. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил) 2-метоксииминоацетамидо]-3-(3-хлор-1-пропен-1-ил)-3-4- карбоксилат (VIII-I).

Смесь 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоуксусной кислоты (III-I) (10, 1 г, 50 ммоль) и пятихлористого фосфора (10,4 г, 50 ммоль) в сухом метиленхлориде (100 мл) перемешивалась при -7 -15^оС в течение 2 ч. Прозрачный раствор выливался в н-гексан (500 мл), давая осадок. Органический слой отбрасывался с помощью декантации, и оставшееся твердое вещество растиралось с н-гексаном (100 мл). Желтый осадок собирался с помощью фильтрования и сушился в вакууме, давая 12,5 г (99%) хлорангидрида кислота, плавящегося при 80^оС (разложение).

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 1770.

Хлорангидрид кислоты (25 мг, 0,1 ммоль) добавлялся к раствору соединения XVIII (Z изомера) из приготовления 8 (44 мг, 0,1 ммоль) в сухом метиленхлориде (5 мл) при комнатной температуре при перемешивании. Через 30 мин смесь концентрировалась при пониженном давлении и разбавлялась этилацетатом (20 мл) и насыщенным водным бикарбонатом натрия (5 мл). Органический слой промывался насыщенным водным бикарбонатом натрия (5 мл), солевым раствором (5 мл), 10% HCl (5 мл) и солевым раствором (5 мл). Растворитель сушился над сульфатом магния, а затем упаривался досуха, давая продукт в виде желтой пены. Пена очищалась с помощью хроматографии на силикагельной колонке (Вакогель С-200, 1 г, содержащий 0,1 мл 1/1,5 М фосфатного буфера рН 6,4) с элюированием смесью метиленхлорида и метанола (100:1), давая 31 мг (50%) целевого соединения VIII-I (Z изомера) в виде желтого порошка. Т.пл. выше 150^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3400, 1775, 1675, 1630.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 240 (17000), 280 (10000).

ЯМР: δ (ДМСО-D₆), млн.дол. 3,6 (2Н, мультиплет, 2-Н), 3,92 (3Н, синглет, О-СН₃), 4,0 (2Н, мультиплет, СHCl), 5,27 (2Н, мультиплет, 6-Н и 3-СН=СН), 5,83 (1Н, д-д. J 4,5 и 10, 7-Н), 6,25 (1Н, дублет, J 11, 3-СН), 6,83 (1Н, синглет, CHPh₂), 7,33 (10Н, мультиплет, Ph-H), 8,0 (2Н, широкий синглет, NH₂), 9,57 (1Н, дублет, J 10, 7-NH).

Приготовление 10. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3- ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3-цефем-4- карбоксилат (IX-I).

Раствор VIII-I из примера приготовления N 5 (Z/E 2/1, 480 мг, 0,77 ммоль) в сухом ацетоне (10 мл), содержащий Nal (346 мг, 2,3 ммоль) перемешивался в течение 30 мин при температуре окружающей среды. Реакционная смесь упаривалась при пониженном давлении. Получающееся в результате масло распределялось между этилацетатом (50 мл) и водой (10 мл). Верхний слой промывался последовательно 10 мас./объем водным раствором тиосульфата натрия (10 мл) и солевым раствором (10 мл) и сушился над сульфатом магния. Упаривание растворителя дало 540 мг (98%) целевого соединения IX-I (Z/E 1-1) в виде красноватого аморфного твердого вещества, плавящегося при температуре выше 120^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3300, 1780, 1720, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. нм: (ε ) 240 (21000), 290 (12000).

ЯМР: δ млн.дол. (ДМСО+D₂O) 3,67 (2Н, мультиплет, 2-Н), 5,29 (1Н, дублет, J 4,5, 6-Н-, 5,95 (1Н, дублет, J 4,5, 7-Н), 6,27 (1) 2Н, дублет, J 11, 3-СН цис), 6,72 (1) 2Н, дублет, J 16 3-СН трансэ, 6,87 и 6,96 (каждый 1-2Н, синглет, CHPh₂), 7,4 (10Н, мультиплет, Ph-H).

Приготовление 11. Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3- ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3- цефем-4- карбоксилат (IX-I).

Смесь VIII-I (Z изомера) из приготовления 9 (5,6 г, 9 ммоль и иодистого натрия (4 г, 27 ммоль) в сухом ацетоне (100 мл) перемешивалась в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Смесь упаривалась, и получающееся в результате масло разбавлялось этилацетатом (90 мл). Этилацетатный слой промывался 10 мас. /объем водным раствором тиосульфата натрия (10 мл) и водой (10 мл). Удаление высушенного (сульфатом магния) растворителя дало желтое масло, которое отверждалось с помощью растирания с изопропиловым эфиром. Фильтрование осадка дало 4,3 г (67%) целевого соединения IX-I в виде Е изомера Т. пл. выше 165^оС (разл.)
ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3400, 1780, 1725, 1680, 1610.

УФ: λ_макс. этанол, нм: (ε ) 240 (18000), 297 (11000).

ЯМР: δ млн,дол. (ДМСО-d₆+D₂O) 3,90 (3Н, синглет, ОССН₃), 5,25 (1Н, мультиплет, 6-Н), 5,95 (1Н, мультиплет, 7-Н), 6,72 (дублет, J 16, 3-СН транс), 6,96 (1Н, синглет, СН-Ph), 7,4 (10Н, мультиплет, Ph-H).

Приготовление 12. Бензгидрил 7-амино-3-[3-хлор-1-пропен-1-ил] -3- цефем-4-карбоксилат (Z-изомер) (XVIII).

Соединение XVIII представляет собой обычный промежуточный продукт, используемый в схемах реакции 1b и 1с.

А. Хлорид бензгидрил 7-бензилиденамино-3-трифенилфосфониометил-3- цефем-4-карбоксилата (XV).

К суспензии бензгидрил 7-амино-3-хлорметил-3-цефем-4-карбоксилата-гидро- хлорида (11 гидрохлорид) (200 г, 0,44 моль) в метилен-хлориде (940 мл) добавлялась 1 н. гидроокись натрия (440 мл) при комнатной температуре. Смесь встряхивалась в течение 10 мин, и органический слой отделялся. К органическому слою добавлялись сульфат магния (75 г) и бензальдегид (51 г, 0,48 моль), смеси давали возможность стоять в течение 3 ч. Реакционная смесь фильтровалась, и нерастворимые вещества промывались метиленхлоридом (200 мл). К объединенному фильтрату и промывным водам добавлялся трифенилфосфин (126 г, 0,48 моль). Смесь концентрировалась до примерно 400 мл и оставлялась стоять в течение 4 дней. Получающееся вязкое масло разбавлялось этилацетатом (1 л) и растиралось для отделения целевого соединения XV бледно-желтого кристаллического порошка, который собирался с помощью фильтрования и сушился в вакууме. Выход 322 г (96%). Т.пл. 185-190^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 1780, 1720, 1630
УФ: λ_макс. метиленхлорид, нм: (ε ) 260 (24100).

В. Бензгидрил 7-бензилиденамино-3-[(трифенилфосфоранилиден)метил] 3-цефем-4-карбоксилат (XVI).

Смесь XV (322 г, 0,42 моль) и 5 н. карбоната натрия (252 мл) в метиленхлориде (1,6 л) перемешивалась энергично в течение 15 мин при комнатной температуре. Органический слой отделялся, сушился над сульфатом магния и концентрировался примерно до 500 мл объема. Концентрат добавлялся к ацетону (1 л) при перемешивании, давая светло-желтый кристаллический порошок, который собирался с помощью фильтрования, давая 237 г (78%) соединения XVI, плавящегося при 195-198^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 1770, 1620.

УФ: λ_макс. метиленхлорид, нм: ( ε ) 254 (23000), 389 (22000).

ЯМР: δ млн. дол. (CDCl₃) 2,56 и 3,16 (2Н, ABq), 5,00 (1Н, дублет, J 4 Гц), 5,23 (1Н, дублет, J 4 Гц), 5,47 (1Н, дублет, J 22 Гц), 6,95 (1Н, синглет), 7,2-7,8 (30Н, мультиплет), 8,55 (1Н, синглет).

С. Хлоргидрат бензгидрил 7-амино-3-хлор-1-пропен-1-ил-3-цефем-4- карбоксилата (Z изомер) (XVIII хлоргидрат).

К кипящему с обратным холодильником раствору соединения XVI (214 г, 0,294 моль) и N,O-бис-(триметилсилил) ацетамида (40 мл, 0,15 моль) в сухом метиленхлориде (2,9 л) добавлялся по каплям при перемешивании 50% раствор хлорацетальдегида (93 г, 0,59 моль) в хлороформе на протяжении периода 15 мин. После стояния в течение 30 мин смесь концентрировалась досуха. К остаточному маслу добавлялись метиленхлорид (1,5 л), реактив Жирарда Т (99 г, 0,59 моль) и 10% водный HCl (300 мл), и смесь перемешивалась в течение 1 ч при комнатной температуре. Органический слой промывался водой (200 мл) и насыщенным раствором хлористого натрия (200 мл, сушился над сульфатом магния, обрабатывался древесным углем (5 г) и фильтровался. Фильтрат охлаждался до -10^оС и обрабатывался 1 н. HCl в метаноле (300 мл). Смесь перемешивалась в течение 30 мин при комнатной температуре и концентрировалась примерно до 300 мл. Концентрат разбавлялся этилацетатом (400 мл) и затравливался небольшим количеством кристаллов хлоргидрата XVIII. Через 2 ч отделенные кристаллы собирались фильтрованием, промывались этилацетатом (200 мл) и сушились в вакууме, давая 74 г (53%) целевого соединения XVIII в виде его хлоргидрата, плавящегося при выше 185^оС (разл.). Бледно-желтые иглы.

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 2830, 1780, 1720.

УФ: λ_макс. нм: (ε ) 286 (8800).

ЯМР: δ млн.дол. (ДМСО-d₆) 3,73 (2Н, шир. синглет, 2-Н), 3,97 (2Н, мультиплет, CCl), 5,22 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,37 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 5,77 (1Н, мультиплет, 3-CH=C), 6,45 (1Н, дублет, J 11 Гц, 3-С), 6,88 (1Н, синглет, CPh₂), 7,33 (10Н, шир. синглет, Ph-).

Вычислено для C₂₃H₂₁N₂O₃SCl HCl, C 57,67; H 4,65; N 5,87; S 6,72; Cl 14,85
Найдено, C 57,62; H 4,53; N 5,70; S 6,64; Cl 14,89.

Приготовление 13. Бензгидрил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)- 2-метоксииминоацетамидо]-3-(3-хлор-1-пропен-1-ил)-3-це- фем-4- карбоксилат (Z изомер) (VIII-I).

К перемешиваемому раствору XVIII (Z изомера) (20 г, 42 ммоль) в метиленхлориде (420 мл), содержащему N,O-бис-(триметилсилил) ацетамид (34 мл 125 ммоль) добавлялся хлоргидрат 2-(5-амино- 1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетилхло-рида (15,2 г, 59 ммоль) тремя порциями на протяжении периода 30 мин при от -10 до 0^оС. Смесь перемешивалась в течение 30 мин при 0-5^оС и концентрировалась при пониженном давлении. Остаточное коричневое масло растворялось в этилацетате (420 мл), и раствор промывался последовательно насыщенным водным бикарбонатом натрия (3 х 15 мл), насыщенным водным хлористым натрием (15 мл), 10% HCl (15 мл) и насыщенным водным хлористым натрием (15 мл), и концентрировался примерно до 50 мл объема. К концентрату добавлялся н-гептан (200 мл); давая 28,5 г (90% чистоты) целевого соединения VIII-I (Z изомер) в виде бесцветного порошка. Т.пл. выше 150^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3400, 1780, 1720, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. этанол, нм: (ε ) 240 (20000), 283 (12000).

ЯМР: δ млн.дол. (ацетон-d₆) 3,6 (2Н, мультиплет, 2-Н), 3,95 (3Н, синглет, OC), 4,0 (2Н, мультиплет, CCl), 5,32 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 5,62 (2Н мультиплет, 3-CH=C), 6,03 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 7-Н), 6,32 (1Н, дублет, J 11 Гц, 3-ОН), 6,87 (1Н, синглет, CPh), 7,33 (10Н широкий синглет, Ph-H).

Приготовление 14. Бензгидрил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)- 2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-иод-1-пропен-1-ил)-3- цефем-4- карбоксилат (Е изомер) (IX-I).

Смесь соединения VIII-I (Z изомера) (28,5 г, 90% чистоты) и иодистого натрия (19 г) в сухом ацетоне (420 мл) перемешивалась в течение 10 мин при комнатной температуре и оставлялась стоять при 5^оС в течение 2 ч. Смесь концентрировалась при пониженном давлении. К остатку добавлялись этилацетат (420 мл) и 10 мас./объем водный раствор тиосульфата натрия (30 мл), и смесь встряхивалась Органический слой промывался водой (30 мл), сушился над сульфатом магния и упаривался примерно до 50 мл объема. Концентрат разбавлялся н-гептаном (200 мл), давая 30,6 г (95% чистоты) целевого соединения IX-I (Е изомера) в виде желтого порошка, плавящегося при более 120^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3400, 1780, 1725, 1680, 1620
УФ: λ_макс. этанол, нм: ( ε ) 306 (15000).

ЯМР: δ млн.дол. (ацетон d₆) 3,71 (2Н, мультиплет, 2-Н), 3,97 (3Н, синглет, OC), 4,0 (2Н, дублет, J 8 Гц, CI), 5,26 (1Н, дублет, J 4,5 Гц, 6-Н), 6,03 (1Н, д-д. J 4,5 и 8 Гц, изменившийся на дублет J 4,5 Гц при действии D₂O, 7-Н), 6,32 (1Н, д-т, J 15 и 8 Гц, 3-CH=C), 6,79 (1Н, дублет, J 15 Гц, 3-С), 6,98 (1Н, синглет, CHPh₂), 7,35 (10Н, мультиплет, Ph-H), 7,63 (2Н, шир. синглет, исчезнувший при действии D₂O, NH₂), 8,52 (1Н, дублет, J 8 Гц, исчезнувший при действии D₂O, 7-NH).

Приготовление 15. Иодистый бензгидрил 7-[2-(5-амино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетамидо] -3-(3-4-карбамо-ил-1- пиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбоксилат (Е изомер) (XII-1H).

К суспензии IX-I (Е изомера) (30,5 г) и изоникотинамида (26 г, 212 ммоль) в CH₃CN (120 мл) добавлялся метанол (100 мл) до тех пор, пока смесь не становилась прозрачной. Раствор перемешивался в течение 2 ч в атмосфере азота при комнатной температуре и концентрировался примерно до 100 мл при пониженном давлении. Остаточное полутвердое вещество растиралось с изопропиловым эфиром (200 мл). Растворитель удалялся с помощью декантации, и остаточный желтый порошок промывался смесью изопропилового эфира и метанолом (3/1, 120 мл). Порошок собирался с помощью фильтрования и сушился в вакууме, давая 36 г (75% чистого по оценке HPhC) целевого соединения XII-IH (Е изомера) в виде светло-желтого порошка плавящегося при температуре выше 150^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 1780, 1720, 1680, 1620.

УФ: λ_макс. этанол, нм: (Е_1см^1%) 282 (170).

ЯМР: δ млн.дол. (ДМСО-D₆) 3,72 (2Н, мультиплет, 2-Н) 3,90 (3Н, синглет, ОСН₃), 5,25 (3Н, мультиплет, 6-Н и CN⁺ 5,9 (1Н, д-д. J 4,5 и 8 Гц, изменившийся на дублет J 4,5 Гц при добавлении D₂O, 7-Н), 6,35 (1Н, мультиплет, 3-CH= CH) 6,89 (1Н, синглет, CPh) 6,9 (1Н, дублет, J 16 Гц, 3-C), 7,35 (10Н, мультиплет, Ph-H), 8,06 (2Н, шир. синглет исчезающий при добавлении D₂O, N), 8,21 (2Н, шир. синглет, исчезнувший при добавлении D₂O, NH₂), 8,36 и 9,07 (каждый 2Н, дублет, J 6 Гц, Py-), 9,57 (1Н, дублет, J 8 Гц, исчезнувший при добавлении D₂O, 7-NH).

Приготовление 16. Бензгидрил 7-бензилиденамино-3-(3-хлор-1-пропен 1-ил)-цефем-4-карбоксилат (XVII) (Z изомер).

К охлаждаемой льдом смеси кристаллического 7-аминоцефемного промежуточного соединения XVIII (Z изомера) (13,4 г, 28 ммоль) и бензальдегида (8,3 г, 31 ммоль) в этилацетате (150 мл) добавлялась по каплям 0,5 н. гидроокись натрия (56 мл, 28 ммоль) на протяжении периода 20 мин для поддержания температуры реакционной смеси ниже 10^оС. Смесь перемешивалась при охлаждении в течение еще 15 мин, органический слой отделялся, промывался насыщенным водным бикарбонатом натрия (100 мл х 2) и сушился над сульфатом магния. К высушенному раствору добавлялось небольшое количество древесного угля, и смесь фильтровалась. Фильтрат концентрировался досуха. Остаточное масло растворялось в четыреххлористом углероде (50 мл), и концентрировалось снова. Данная процедура повторялась 3 раза и смесь контролировалась с помощью ТСХ в обратной фазе для того, чтобы удостовериться, что весь исходный 7-аминоцефалоспорин превратился в Шиффово основание. Удаление растворителя в вакууме давало 16,45 г целевого соединения XVII (Z изомера) в виде бледно-желтого порошка (чистота по оценке 85% Т.пл. 74^оС (разл.), которое использовалось для следующей стадии без очистки.

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 1780, 1725, 1635
УФ: λ_макс. метиленхлорид, нм: (Е_1см^1%) 257 (400).

ЯМР: δ млн.дол. (CDCl₃) 6,18 (1Н, дублет, J 11 Гц).

Приготовление 17. Иодистый бензгидрил 7-бензилиденамино-3-[3-(4- карбамоил-1-пиридинио)-1-пропен-1-ил]-3-цефем-4-кар- боксилат (XXI-H) (Е изомер).

К охлаждаемой смеси 3-хлорпропенилцефема XVII (Z изомера) (16,4 г) в ацетоне (5 мл) добавлялся по каплям раствор иодистого натрия (6,3 г, 42 ммоль) в ацетоне (30 мл) на протяжении 10 мин в атмосфере азота, смесь перемешивалась при комнатной температуре. Реакция контролировалась степенью УФ абсорбции (Е_1см^1%) (320 нм). Когда степень достигала менее 1,30 (спустя 45 мин), смесь разбавлялась четыреххлористым углеродом (400 мл) и оставлялась стоять при комнатной температуре. Когда степень доходила до величины ниже 1,10 (спустя 3 ч), смесь концентрировалась до половины ее объема. Концентрат обрабатывался небольшим количеством древесного угля и диатомовой земли и фильтровался. Осадок на фильтре промывался смесью 1:1 (100 мл) метиленхлорида и четыреххлористого углерода. К объединенному раствору фильтрата и промывных вод добавлялся раствор изоникотинамида (3,5 г, 28,7 ммоль) в диметилформамидe (20 мл), и смесь концентрировалась при пониженном давлении. Концентрату давали возможность стоять при комнатной температуре в течение 1,5 ч и его промывали изопропиловым эфиром (100 мл х 3). Остаточное коричневое полутвердое вещество растворялось в метиленхлориде (50 мл), раствор добавлялся по каплям при перемешивании к этилацетату (1,5 л). Поучающийся в результате осадок собирался с помощью фильтрования и промывался этилацетатом (200 мл). После сушки над пятиокисью фосфора в вакууме, получалось 17 г целевого соединения XXI-H (Е изомера). Желтый аморфный порошок. Т.пл. 150-155^оС (разл. ). Чистота по оценке 80% с помощью ЯМР.

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 1775, 1725, 1690, 1635
УФ: λ_макс. метиленхлорид, нм: (Е_1см^1%) 258 (335), 298 (255)
ЯМР: δ млн.дол. (ДМСО-d₆) 3,4-3,8 (2Н, шир.), 5,35 (2Н, шир.), 5,41 (1Н, дублет, J 4 Гц), 5,73 (1Н, дублет, J 4 Гц), 6,93 (1Н, синглет), 6,97 (1Н, дублет, J 16 Гц), 7,3-7,5 (15Н, шир. синглет), 8,40 (2Н, дублет, J 6,5 Гц), 9,15 (2Н, дублет, J 6,5 Гц).

Приготовление 18. 7-амино-3-[3-(4-карбамоил-1-пиридинио-1-пропен- 1-ил] -3-цефем-4-карбоксилат (XXII-H) (Е изомер).

К суспензии кватернизованного цефема XXI-H (17 г) в 85% муравьиной кислоте (25 мл) добавлялась по каплям концентрированная соляная кислота (5 мл), смесь перемешивалась при комнатной температуре в течение 1,5 ч и обрабатывалась небольшим количеством древесного угля. Смесь фильтровалась и промывалась 85% муравьиной кислотой (5 мл). Фильтрат объединялся с промывной водой и выливался в ацетон (1 л) при перемешивании. Получающийся в результате осадок собирался с помощью фильтрования, давая 9,52 г окрашенного в желтый цвет неочищенного продукта. К суспензии неочищенного вещества (9,5 г) в воде (50 мл) добавлялось небольшое количество древесного угля, смесь фильтровалась. Фильтрат добавлялся по каплям при перемешивании к изопропиловому спирту (700 мл). Получающийся в результате осадок собирался фильтрованием, промывался небольшим количеством метанола (30 мл), и сушился, давая 7,58 г целевого соединения XXII-H (Е изомера) в виде хлоргидрата. Светло-желтый порошок. Чистота по оценке с помощью УФ 85% Т.пл. 173-188^оС (разл.).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 1795, 1680, 1620, 1575, 1540.

УФ: λ_макс. фосфатный буфер (рН 7), нм: (Е_1см^1%) 294 (457).

ЯМР: δ млн.дол. (D₂O+DCl) 3,82 (2Н, синглет), 5,17 (1Н, дублет, J 5 Гц), 5,33 (2Н, дублет, J 7 Гц), 5,43 (1Н, дублет, J 5 Гц), 6,37 (1Н, д-т. J 16 и 7 Гц), 7,23 (1Н, дублет, J 16 Гц), 8,34 (2Н, дублет, J 7 Гц), 9,00 (2Н, дублет, J 7 Гц).

Приготовление 19. 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- метоксииминоацетилхлорид хлоргидрат (III-I в виде хлоргидрата хлорангидрида кислоты).

А. 2-Циано-2-метоксииминоацетамид.

К перемешиваемой смеси α-цианоацетамида (252 г, 3 моль) и нитрата натрия (414 г, 6 моль) в воде (600 мл) добавлялась уксусная кислота (371 мл, 10 моль) при 5-10^оС на протяжении 1,5 ч. Смеси давали возможность перемешиваться еще в течение 1,5 ч и доводили ее до рН 8,5 с помощью 6 н. гидроокиси натрия. К смеси добавлялся диметилсульфат (568 мл, 6 моль) при 15-20^оС, и смесь перемешивалась при 45^оС в течение 1,5 ч. Реакционная смесь доводилась до рН 8,5 с помощью 6 н. гидроокиси натрия и оставлялась стоять при 5^оС в течение ночи для отделения осадка, который собирался с помощью фильтрования, промывался холодной водой и сушился на воздухе, давая 292 г (77%) целевого соединения в виде коричневых игл, плавящихся при 170-172^оС.

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3400, 3188 (1720 (плечо), 1715, 1690, 1615, 1570.

УФ: λ_макс. вода, нм: ( ε ) 238,5 (8290), 268 (плечо, 3870)
ЯМР: δ млн.дол. (ДМСО-d₆) 4,20 (3Н, синглет, ОСН₃), 7,85 (2Н, шир. NH₂).

Анализ для C₄H₅N₃O₂
Вычислено, C 37,80; H 3,97; N 33,06.

Найдено, C 37,43; H 3,75; N 32,51.

В. 2-Метоксииминопропандинитрил.

Перемешиваемая смесь 2-циано-2-метоксииминоацетамида (88,9 г, 0,7 моль), хлористого натрия (70 г) и хлорокиси фосфора (97 мл, 1,05 моль) в сухом 1,2-дихлорэтане (350 мл) нагревалась с обратным холодильником в течение 16 ч. Нерастворимые вещества отфильтровывались через декалитовый фильтр и промывались дихлорэтаном. Фильтрат и промывная вода объединялись и выливались в перемешиваемую смесь льда с водой (1,5 л) для разложения избытка хлорокиси фосфора. Органическая фаза промывалась 10% бикарбонатом натрия (500 мл), водой (500 мл х 3) и насыщенным раствором хлористого натрия (500 мл) и сушилась над сульфатом магния. Фильтрат перегонялся при пониженном давлении, давая 61,5 г (81%) целевого соединения, кипящего при 62^оС/24 мм рт.ст. (Лит. т.кип. 47-48^оС/12 мм рт.ст.).

ИК: ν_макс. жидкая пленка, см^-1: 3020, 2960, 2245, 2020, 1530, 1080.

ЯМР: δ млн.дол. (CDCl₃) 4,35 (3Н, синглет, ОСН₃).

С. 2-Циано-2-метоксииминоацетамидинийацетат.

К раствору хлористого аммония (28,4 г, 0,53 моль) в 28% водном аммиаке (355 мл) и этаноле (180 мл) добавлялся по каплям раствор 2-метоксииминопропандинитрила (58,0 г, 0,53 моль) в этаноле (120 мл) при -15 -10^оС на протяжении периода 30 мин при перемешивании. Смесь перемешивалась при -10^оС в течение ночи, а затем при температуре окружающей среды (20-25^оС) в течение одного дня. Реакционная смесь распределялась между водой (350 мл) и метиленхлоридом (350 мл), и водная фаза насыщалась хлористым натрием и экстрагировалась снова метиленхлоридом (300 мл). Органические экстракты объединялись, сушились над сульфатом магния и упаривались в вакууме. Раствор остатка в этилацетате (1,6 л) доводился до рН 3-4 с помощью уксусной кислоты для осаждения целевого соединения в виде кристаллов, которые собирались фильтрованием и промывались этилацетатом. Выход 67,6 г (69%). Т.пл. 152-4^оС (разл.). (Лит. т.пл. 150-155^оС (разл.)).

ИК ν_макс. KBr, см^-1: 3160, 2900, 2360, 2235, 2000, 1665, 1495, 1415.

УФ: λ_макс. этанол, нм: (ε ) 243 (8500), 265 (плечо, 5380), 305 (плечо, 1400).

ЯМР: δ млн. дол. (ДМСО-d₆), 1,88 (3Н, синглет, СН₃СООН), 4,15 (3Н, синглет, ОСН₃), 7,60 (4Н, уширенный).

Вычислено для C₄H₆N₄O CH₃COOH, C 38,71; H 5,41; N 30,09
Найдено, C 38,71; H 5,59; N 29,51
D. 2-(5-Амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетонитрил.

К суспензии 2-циано-2-метоксииминоацетамидинийацетата (125 г, 0,672 моль) в метаноле (1,25 л) добавлялись по каплям триэтиламин (234 мл, 1,68 моль) при -10^оС, и впоследствие бром (41,6 мл, 0,806 моль) на протяжении 20 мин при от -15 до -10^оС, и смесь перемешивалась в течение 20 мин. К смеси добавлялся по каплям раствор тиоцианата калия (KSCN) (78,3 г, 0,806 моль) в метаноле (550 мл) на протяжении 1 ч при от -15 до -10^оС. После перемешивания при 0-5^оС в течение 1 ч смесь выливалась в смесь льда и воды (12 л) для образования кристаллического осадка, который собирался с помощью фильтрования, промывался водой и сушился на воздухе, давая 120 г (98%) целевого соединения. Т.пл. 263-5^оС (разл.) Т.пл. соединения, полученного нами, является более высокой примерно на 50^оС, чем известная (т.пл. 210-15^оС (разл.)) но спектральные и микроаналитические данные соответствуют структуре.

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3435, 3260, 3120, 2960, 2245, 2020, 1630, 1545, 1455, 1415.

УФ: λ_макс. этанол, нм: (ε) 246 (13300), 310 (3470).

ЯМР: δ млн. дол. (ДМСО-D₆) 4,21 (3Н, синглет, ОСН₃), 8,30 (2Н, уширен. Н₂).

Анализ для C₅H₅N₅O.

Приготовление 20.

Вычислено, C 32,78; H 2,75; N 38,23; S 17,50.

Найдено, C 32,76; H 2,31; N 38,02; S 17,50.

Е. 2-(5-Амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминуксусная кислота (III-I).

Смесь 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-метоксииминоацетонитрила (18,3 г, 0,1 моль) в 4 н. гидроокиси натрия (250 мл) нагревалась при 50-55^оС при перемешивании в течение 3 ч. Реакционная смесь доводилась до рН 1 с помощью фосфорной кислоты и промывалась этилацетатом (100 мл), насыщалась хлористым натрием и экстрагировалась три раза смесью этилацетата и тетрагидрофурана (51, 300 мл х 2 и 200 мл х 1). Экстракты объединялись, сушились над сульфатом магния, и концентрировались при пониженном давлении. Остаток растирался с изопропиловым эфиром, давая бледно-желтые кристаллы целевой кислоты. Выход 16,8 г (83%). Т.пл. 184-5^оС (разл.). (Лит. т.пл. 180-182^оС (разл.)).

ИК: ν_макс. KBr, см^-1: 3460, 3260, 3140, 1725, 1620, 1605, 1545
УФ λ_макс. вода, нм: (ε ) 234 (13200), 288 (плечо, 3620).

F. Хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадизол-3-ил)-2- метоксииминоацетилхлорида.

К суспензии 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-)-2-метоксииминоуксусной кислоты (III-I) (40,4 г, 0,2 моль) в сухом метиленхлориде (400 мл) добавлялся пятихлористый фосфор (41,6 г, 0,2 моль) одной порцией при -50^оС. Смесь перемешивалась в течение 4 ч при от -20 до -5^оС и выливалась в смесь н-гептана и изопропилового эфира (2:1,2 л). Желтый осадок собирался с помощью фильтрования, промывался той же смесью растворителей и сушился гидроокисью калия при пониженном давлении, давая 46,0 г (90% целевого хлорангидрида кислоты.

ИК: ν_макс. нуйол, см^-1: 1775.

Приготовление 20
CH₂-Cl
Дифенилметил 7-[2-2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(Z)- этоксииминоацетамидо] -3-(3-хлор-1-пропенил)-3-цефем-4-карбо- ксилат (VIII-2-2, Z изомер).

К смеси О-бис-(триметилсилил)ацетамида (2,3 мл, 9 ммоль) и кристаллического хлоргидрата дифенилметил 7-амино-3-[3-хлор-1-(Z) пропен-1-ил]-3-цефем-4-карбо-ксилата (XVIII) (1,338 г, 2,8 ммоль) (из примера приготовления 12) в метиленхлориде (10 мл) добавлялся хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(Z)-этокси имино-ацетилхлорида (800 мг, 2,95 ммоль) порциями при перемешивании при -10^оС, смесь оставлялась стоять при 0^оС в течение 2 ч. Смесь разбавлялась этилацетатом (200 мл), промывалась водой и упаривалась при пониженном давлении. Растирание остатка с изопропиловым эфиром давало целевой продукт VIII-2 в виде аморфного порошка. Выход 1,70 г (95%). Т.пл. выше 150^оС (разл.).

Приготовление 21.

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3300, 1780, 1720, 1690, 1380, 1220.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: ( ε) 285 (11000).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 1,26 (3Н, триплет, J 7 Гц, CH₂C), 4,25 (2Н, квартет, J 7 Гц, CCH₃), 5,90 (1Н, д-д-. J 4 и 8 Гц, 7-Н), 6,26 (1Н, дублет, J 11 Гц, 3-СН), 6,85 (1Н, синглет, CHPh₂ 9,53 (1Н, дублет, J 8 Гц, 7-Н).

Приготовление 21
CH₂I
IX-2 *Смесь Е и Z изомеров
Дифенилметил 7-[2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(Z)- этоксииминоацетамидо]-3-)3-иод-1-пропенил)-3-цефем-4-карбокси- лат (IX-2).

Смесь соединения VIII-2 (1,90 г, 3 ммоль) (из приготовления 20) и иодистого натрия (1,4 г, 9 ммоль) в ацетоне (20 мл) перемешивалась в течение 10 мин при комнатной температуре, а затем оставлялась стоять при 5^оС в течение 3 ч. Смесь упаривалась при пониженном давлении, разбавлялась этилацетатом (100 мл), промывалась 10% тиосульфатом натрия и водой и упаривалась при пониженном давлении. Растирание остатка с изопропиловым эфиром давало 1,82 г (84%) целевого продукта IX-2 в виде светло-коричневого аморфного порошка.

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3290, 1770, 1720, 1670, 1530, 1370, 1220.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (Е_1см^1%) 304 (199).

Приготовление 22.

CH=N
Дифенилметил 7-бензилиденамино-3-[(E)-3-(4-карбамоилпиридинио)-1- пропенил]-3-цефем-4-карбоксилат (XXI-H иодид) (Е изомер).

К охлаждаемому раствору 3-хлорпропенилцефема (XVII, Z изомера, 42,8 г, 90 ммоль) (из приготовления 16) в сухом диметилформамиде (80 мл), добавлялся иодистый калий (20 г, 120 ммоль) в виде одной порции, смесь перемешивалась при комнатной температуре. Реакция контролировалась по степени УФ абсорбции (Е_1см^1% (255 нм) Е_1см^1% (320 нм)). Когда степень становилась ниже 1,10 (спустя 45 мин), смесь разбавлялась 800 мл метиленхлорида, обрабатывалась активным углем (4 г), и фильтровалась. Осадок на фильтре промывался 100 мл метиленхлорида. К объединенному фильтрату и промывным добавлялся изоникотинамид (14, 64 Г), смесь концентрировалась при пониженном давлении. Концентрат хранился при комнатной температуре в течение 1,5 ч и промывался смесью толуола и н-гептана (1:1, 600 мл). Остаточное коричневое полутвердое вещество растворялось в метиленхлориде (100 мл), и раствор добавлялся по каплям к этилацетату (3 л) при энергичном перемешивании. После сушки над пятиокисью фосфора в вакууме получалось 57,37 г (88%) кватернизованного целевого продукта XXI-H в виде иодида. Желтый аморфный порошок. Т.пл. 150-155^оС (разл.). Данный продукт был идентичен продукту, полученному с помощью иодирования иодистым натрием (приготовление 17).

Приготовление 23.

HCl·H₂N
XVIII *Z
Дифенилметил 7-амино-3-(3-хлор-1-пропенил)-3-цефем-4-карбоксилат хлоргидрат (Z изомер (ZVIII, хлоргидрат).

25% раствор хлорацетальдегида (69 г, 0,22 ммоль) в хлороформе добавлялся к раствору соединения XVI (80 г, 0,11 моль) в метиленхлориде (1,1 л), содержащему N, O-бис-(триметилсилил) ацетамид (16,2 мл, 0,06 моль) при -10^оС в виде одной порции, и смесь оставлялась стоять в течение ночи при 5^оС. Смесь концентрировалась до приблизительно 0,3 л, разбавлялась смешанным растворителем, состоящим из этилацетата и изопропилового эфира (1/2, 0,6 л), обрабатывалась силикагелем (Вакогель С-100, 60 г) и фильтровалась через декалитовый фильтр. Осадок на фильтре промывался той же системой растворителей (0,2 л). Объединенный фильтрат и промывные воды концентрировались до приблизительно 0,2 л, обрабатывались реактивом Жирарда Т (60 г, 0,26 моль) и 4 н. HCl (220 мл), и затравливались несколькими кристаллами хлоргидрата XVIII. После перемешивания в течение 3 ч получающиеся в результате кристаллы собирались с помощью фильтрования, промывались водой (0,5 л) и этилацетатом (0,5 л) и сушились в вакууме, давая 37 г (70%) целевого соединения хлоргидрата XVIII, плавящегося при температуре выше 185^оС (разл.). Бледно-желтые иглы. Данный продукт был идентичен продукту, полученному в примере приготовления 12.

Приготовление 24
CH₂-Cl
XVIII *Z
Хлоргидрат дифенилметил 7-амино-3-(3-хлор-1-пропенил)-3-цефем-4- карбоксилата (Z изомер) (XVIII, хлоргидрат).

К раствору хлорацетальдегида (25% раствор в хлороформе, 628 мг, 2 ммоль) в метиленхлориде (10 мл) добавлялись N,O-бис-(триметилсилил) ацетамид (0,135 мл, 0,5 ммоль) и XVI (728 мг, 1 ммоль) последовательно при 5^оС. Смесь оставлялась стоять в течение ночи при 5^оС. Смесь упаривалась и разбавлялась смесью этилацетата и изопропилового эфира (1/2, 10 мл). Нерастворимые вещества удалялись с помощью фильтрования, и фильтрат концентрировался приблизительно до 5 мл. Концентрат обрабатывался 4 н. HCl (2 мл), затравливался хлоргидратом XVIII и перемешивался в течение 1 ч при комнатной температуре. Кристаллы собирались фильтрованием, промывались этилацетатом (10 мл) и водой (10 мл) и сушились в вакууме, давая 384 мг (80%) целевого соединения хлоргидрата XVIII, плавящегося при выше 185^оС (разл.). Бледно-желтые иглы. Данный продукт был идентичен продукту, полученному по примеру приготовления 12.

Приготовление 25. Хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- (пропен-3-ило-ксиимино) ацетилхлорида (III-3 в виде хлоргидрата его хлорангидрида кислоты).

А. Метил 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- пропен-3-илоксиимино) ацетат.

Смесь 685 мг (3,37 ммоль) N-(пропен-3-илокси) фталимида (полученного согласно процедуре описанной авторами E.Grochosaki J.Jurczak, Synthesis 1976 682) и 175 мг (3,35 ммоль) гидразингидрата в 5 мл этанола перемешивалась в течение 1 ч при комнатной температуре. Получающийся в результате осадок отфильтровывался, и фильтрат и промывные воды объединялись. К раствору добавлялось 967 мг (3,37 ммоль) метил 2-(5-трет- бутоксикарбонил-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-оксоацетата, и смесь оставлялась стоять в течение 1 ч при комнатной температуре и концентрировалась с помощью вращающегося испарителя. Остаток очищался с помощью хроматографии на силикагеле. Колонка элюировалась смесью н-гексан-этилацетат (4:1), и фракции, содержащие главный продукт, объединялись и упаривались при пониженном давлении. Выход 514 мг (46%). Т.пл. 83-86^оС.

ИК: ν_макс. (KBr), см-1: 3100, 1745, 1710, 1610.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 223 (9700), 242 (10000).

ЯМР: δ (CDCl₃), млн.дол. 1,55 (9Н, синглет, ВОС-Н), 4,40 (2Н, дублет, J 5 Гц, О-СН₂), 5,21 (2Н, мультиплет, C=CH), 5,90 (1Н, мультиплет, -C=CH), 9,50 (1Н, широкий синглет, NH).

В. 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(пропен 3-илоксиимино)уксусная кислота (J.Csendes и др. Anthibiotics, 36, 1020 (1983)).

Раствор 770 мг (2,3 ммоль) метил 2-(5-трет-бутоксикарбониламино- 1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(пропен-3-илоксиимино) ацетата и 3,5 мл 2 н. раствора гидроокиси натрия (7,0 ммоль) в 15 мл метанола нагревалась с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционная смесь концентрировалась в вакууме и разбавлялась 10 мл смеси этилацетат-вода (1:1). Водный слой отделялся, подкислялся до рН 26 н. HCl и экстрагировался этилацетатом (10 мл х 2). Этилацетатный раствор сушился над сульфатом магния и концентрировался с помощью ротационного испарителя, давая 596 мг (81%) целевого соединения. Т.пл. 134-135^оС (т.пл. 135-136^оС).

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 3150, 1745, 1710, 1550.

УФ: λ_макс. (этанол), нм (ε ) 223 (11000), 242 (11300).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 1,55 (9Н, синглет, ВОС-Н), 4,77 (2Н, дублет, J 5 Гц, О-СН₂), 5,22 (2Н, мультиплет, C=CH), 6,0 (1Н, мультиплет, C=CH₂).

С. 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(пропен-3-илоксиимино)- уксусная кислота (III-3) [3]
Раствор 570 мг (1,74 ммоль) 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-(пропен-3-илоксиимино) уксусной кислоты в 6 мл трифторуксусной кислоты оставлялся стоять в течение 1 ч при температуре окружающей среды. Упаривание с последующим растиранием с 30 мл изопропилового эфира дало 376 мг (95%) целевого соединения. Т.пл. 109^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 3180, 1710, 1545, 1460
УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 245 (13500).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 4,77 (2Н, дублет, J 5 Гц, О-СН₂), 5,20 (2Н, мультиплет, C=CH), 6,0 (1Н, мультиплет, C=CH₂).

D. Хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-(пропен-3-ил- оксиимино)-ацетилхлорида.

Раствор 350 мг (1,54 ммоль) III-3 и 410 мг (1,97 ммоль) пятихлористого фосфора в дихлорметане (5 мл) перемешивался в течение 1 ч при 25^оС. Реакционная смесь выливалась в 60 мл н-гексане, и осадок отфильтровывался. Выход 323 мг.

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 1765.

Приготовление 26.

Хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-3- пропаргилоксииминоацетил-хлорида (III-4 в виде его хлоргидрата хлорангидрида кислоты).

А. Метил 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- пропаргилоксииминоацетат.

Суспензия 870 мг (4,32 ммоль) N-пропаргилоксифталимида и 200 мг (4,0 ммоль) гидразингидрата в 5 мл этанола перемешивалась при 25^оС в течение 1 ч и фильтровалась. К объединенному фильтрату и промывным водам добавлялся 1,0 г (3,86 ммоль) метил-2-(5-трет- бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-оксоацетата. (J.Csendes и др. I.Anthibrotics, 36, 1020 (1983)). Раствор оставлялся стоять в течение 1 ч и концентрировался при пониженном давлении. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с последующим упариванием давала 319 мг (27%) целевого продукта. Т.пл. 72-75^оС.

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3200, 2380, 1745, 1710, 1610.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 235 (12200).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 1,56 (9Н, синглет, ВОС-Н), 3,55 (1Н, триплет, J 2 Гц, C≡CH), 4,85 (2Н, дублет, J 2 Гц, -CH₂C≡CH), 8,9 (1Н, шир. синглет, NH).

В. 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- пропаргилоксииминоуксусная кислота.

Раствор 490 мг (1,4 ммоль) метил 2-(5-трет-бутоксикарбониламино- 1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-пропаргилоксииминоацетата и 2,2 мл 2 н. водного раствора гидроокиси натрия (4,4 ммоль) в 14 мл метанола нагревался с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционная смесь концентрировалась при пониженном давлении, к раствору добавлялось 10 мл смеси этилацетата и воды (1: 1). Отделенный водный слой подкислялся до рН 2 с помощью 6 н. HCl и экстрагировался этилацетатом (2 х 10 мл). Сушка над сульфатом магния с последующим упариванием органического слоя дала 149 мг (89%) целевого продукта. Т.пл. 135^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 3350, 1720, 1670, 1550.

УФ: λ_макс. (этанол), нм (ε ) 233 (11500).

ЯМР: δ (ДМСО-D₆), млн.дол. 1,55 (9Н, синглет, ВОС-Н), 3,55 (1Н, триплет, J 2 Гц, C≡CH ), 4,89 (2Н, дублет, J 2 Гц, CC≡CH), 9,0 (1Н, синглет, NH).

С. 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-пропаргилоксииминоуксусная кислота (III-4) [3]
Раствор 410 мг (1,26 ммоль) 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-пропаргилоксииминоуксусной кислоты в 5 мл трифторуксусной кислоты оставлялся стоять в течение 1 ч при 25^оС. Упаривание с последующим растиранием остатка с 25 мл изопропилового эфира дали 204 мг (72%) целевого соединения. Т.пл. 156-158^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 3300, 1480, 1730, 1610.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε ) 234 (12000).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 3,52 (1Н, триплет, J 2 Гц, C≡CH), 4,86 (2Н, дублет, J 2 Гц, CC≡CH), 8,10 (2Н, шир. синглет, NH₂).

D. Хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- пропаргилоксииминоацетил-хлорида.

Смесь 175 мг (0,07 ммоль) III-4 и 182 мг, (0,88 ммоль) пятихлористого фосфора в дихлорметане (2 мл) перемешивалась в течение 1 ч при -5^оС. Реакционная смесь выливалась в 30 мл н-гексана, и осадок отфильтровывался. Выход 65 мг (34%).

ИК: λ_макс. (нуйол), см^-1: 1770.

Приготовление 27. Хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- циклопентилоксииминоацетилхлорида (III-5 в виде хлоргидрата его хлорангидрида кислоты).

А. Метил 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- циклопентилоксииминоацетат.

Суспензия 860 мг (3,7 ммоль) N-(циклопентилокси) фталимида и 185 мг (3,7 ммоль) гидразингидрата в 5 мл этанола перемешивалась в течение 1 ч при температуре окружающей среды и фильтровалась. Фильтрат и промывные воды объединялись и добавлялись к 1,06 г (3,7 ммоль) метил 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол- 3-ил)-2-оксоацетата. Раствору давали возможность стоять в течение 1 ч при комнатной температуре и его концентрировали в вакууме. Остаток очищался с помощью хроматографии на силикагеле. Элюирование смесью н-гексана и этилацетата (4:1) с последующим упариванием дали целевой продукт. Выход 906 мг (81%).

Т.пл. 115-118^оС.

ИК: ν_макс.(KBr), см^-1: 3200, 1745, 1710, 1550.

УФ: λ_макс. (этанол), нм (ε) 217 (1800), 252 (7600).

ЯМР: δ (CDCl₃), млн. дол. 1,51 (9Н, синглет, ВОС-Н), 1,60 (8Н, шир. синглет, H ), 3,88 (3Н, синглет, ОСН₃), 4,90 (1Н, шир. синглет, ), 8,70 (1Н, шир. синглет, NH).

В. 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- циклопентилоксииминоуксусная кислота.

Раствор 500 мг (1,34 ммоль) метил-2-(5-трет-бутоксикарбонил-амино 1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2-циклопентилоксииминоацетата и 2 н. раствора гидроокиси натрия (2 мл, 4 ммоль) в 15 мл метанола нагревался с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционная смесь упаривалась, и к раствору добавлялось 10 мл смеси этилацетата и воды (1:1). Водный слой отделялся, подкислялся до рН 26 н. HCl и экстрагировался этилацетатом (10 мл х 2). Органический слой промывался солевым раствором, сушился над сульфатом магния и концентрировался при пониженном давлении, давая 377 мг (78%) целевого соединения. Т.пл. 185^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 3160, 1710, 1550.

УФ: λ_макс.(этанол), нм: (ε) 238 (13300).

ЯМР: δ (ДМСО), млн.дол. 1,51 (9Н, синглет, ВОС-Н), 1,70 (8Н, шир. синглет, H ), 4,82 (1Н, мультиплет ).

С. 2-(5-Амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- циклопентилоксииминоуксусная кислота (III-5, Z изомер) (известно).

Раствор 348 мг (0,97 ммоль) 2-(5-трет-бутоксикарбониламино-1,2,4- тиадиазол-3-ил)-2-циклопентиоксииминоуксусной кислоты в 2 мл трифторуксусной кислоты оставлялся стоять в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционная смесь концентрировалась при пониженном давлении. Остаток растирался с 5 мл изопропилового эфира и 10 мл гексана, давая 215 мг (86%) целевого соединения. Т.пл. 162-165^оС (разл.) (лит.): т.пл. 160-165^оС (разл.)).

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 3290, 3200, 1710, 1615, 1600.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (ε) 238 (13300).

ЯМР: δ (ДМСО-d₆), млн.дол. 1,17-2,10 (8Н, мультиплет), 4,60-4,98 (1Н, мультиплет), 8,22 (2Н, синглет).

D. Хлоргидрат 2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3-ил)-2- циклопентилоксииминоацетилхлорида.

Раствор 190 мг (0,74 ммоль) III-5 и 219 мг (1,0 ммоль) пятихлористого фосфора в дихлорметане (5 мл) перемешивался в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционная смесь выливалась в 50 мл н-гексана. Получающийся осадок собирался фильтрованием. Выход 122 мг (60%).

ИК: ν_макс. (нуйол), см^-1: 1760.

Приготовление 28. Бензотриазол-1-ил-2-(5-амино-1,2,4-тиадиазол-3- ил)-2-метоксииминоацетат.

Смесь 1-оксибензотриазола (2,7 г, 20 ммоль) и дициклогексилкарбодиимида (4,12 г, 20 ммоль) в 65 мл ДМФ перемешивалась при комнатной температуре. Через 15 мин к перемешиваемой смеси при 0^оС добавлялось соединение III-I (4,04 г, 20 ммоль), и перемешивание продолжалось в течение 3 ч. Реакционная смесь фильтровалась для удаления нерастворимой мочевины, и осадок на фильтре промывался небольшим объемом ДМФ. Фильтрат и промывные воды объединялись и выливались в 800 мл ледяной воды. Осадок собирался с помощью фильтрования, давая 5,24 г (82%) целевого соединения в виде светло-серого порошка. Т.пл. 189-192^оС (разл.).

ИК: ν_макс. (KBr), см^-1: 1815, 1620, 1540, 1415, 1090, 1060, 1005, 945, 865, 740.

УФ: λ_макс. (этанол), нм: (Е_1см^1%) 246 (580), 283 плечо (228).

Формула изобретения

1. Производные цефалоспорина общей формулы I

где R¹ - метил, этил, пропенил, пропинил, циклопентил;
группа представляет собой четвертичную аммониогруппу, выбранную из группы, содержащей



где Y - водород, амино, карбамоил, аминометил, оксиметил, N-метилкарбамоил, карбокси, карбоксиметил, формиламино или карбоксиметилтиогруппа,
или их фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли.

2. Способ получения производных цефалоспорина общей формулы

где R¹ - метил или этил;
группа представляет собой четвертичную аммониогруппу, определенную в п.1 формулы
или их фармацевтические приемлемых кислотно-аддитивных солей, отличающийся тем, что соединение общей формулы II

где R¹ имеет указанные значения;
B - защитная дифенилметильная группа;
Z - хлор, иод, подвергают взаимодействию с третичным амином формулы III
N≡Qʹ,
где N≡Qʹ, имеет значения, соответствующие указанным значениям для группы или в случае, когда Y - амино, карбокси или карбоксиметил, третичный амин содержит защитную группу по вышеназванным группам,
при (-5)^oC или комнатной температуре в среде органического растворителя с последующим удалением защитных групп и выделением целевого соединения в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой кислотноаддитивной соли.

3. Способ получения производных цефалоспорина общей формулы 1в

где R¹ - этил, пропенил, пропинил, циклопентил;
группа означает группу формулы

или их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей,
отличающийся тем, что гидрохлорид производного аминоцефема общей формулы IV

где группа имеет указанное значение,
подвергают взаимодействию с гидрохлоридом производного тиазола общей формулы V

где R¹ имеет указанные значения,
с последующим выделением целевого соединения в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2