Иммуносупрессивная композиция и способ ее получения

 

Использование: в медицине при пересадке органов (сердца, печени, почек, костного мозга, легких и др.). Сущность изобретения: фармацевтическая композиция иммуносупрессивного действия в виде эмульсии или раствора содержит в качестве активного начала соединение формулы I, приведенной в тексте описания. Композиция содержит целевые добавки - эмульгатор и липофильный агент. Эмульгатор - вещество из группы, включающей лецитин яичного желтка, соевый лецитин, продукты их гидрогенизации, фосфатизилхолин, фосфатизилсерин, сфингомицелин, гуммиарабик, желатину, касторовое масло, отвержденное полиоксиэтиленом, сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты, сложный эфир полиоксиэтилена и жирной кислоты, моно- или диглицериды жирных кислот с цепочкой средней длины и полиоксиэтилированный глицерид. Липофильный агент из группы: соевое, кунжутное, хлопковое, саффлоровое, кукурузное, рапсовое, арахисовое масла, триглицериды жирных кислот с цепочкой средней длины и жидкие углеводороды. Содержание соединения I - 0,05-50 мг/мл, липофильного агента - 5-20 мас. %, массовое соотношение эмульгатор: липофильный агент - 065-400: 100. Композиция может содержать дополнительно органический растворитель в количестве 0,002-2 мл, предпочтительно 0,01-1 мл или 0,02-0,5 мл на 1 мг соединения I, и представлять собой раствор. Композиция может быть эмульсией типа "масло в воде" и содержать дополнительно воду. Композицию получают смешением компонентов. 2 с и 9 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение касается фармацевтического состава, содержащего соединение (или его фармакологически приемлемую соль) общей формулы I, расшифрованной ниже, характеризующееся проявлением иммуносупрессивной активности. В частности, это изобретение касается состава эмульсии, сохраняющей стабильное эмульсионное состояние в физиологическом солевом растворе для инъекций, содержащем глюкозу, в воде, фруктовом соке и подобной среде, и тем самым допускающей применение посредством внутривенной или внутримышечной инъекции, путем местного назначения, например, в виде глазных капель, а также при различных других формах назначения, включая прием через глотание и через прямую кишку, или же оно касается указанного состава в виде фармацевтически приемлемого раствора на органическом растворителе, т. е. раствора, который сам по себе, являясь стабильной жидкостью, создает меньше затруднений при назначении рецептур, для приема глотанием и удовлетворительно всасывается через ткани пищеварительного тракта.

Соединение приведенной ниже формулы I и его фармацевтически приемлемая соль уже известны как вещества, проявляющие иммуноподавляющую активность( см. выложенные заявки Японии 61(1976)-148181 и Европейского патентного бюро N 0323042). Для указанного соединения и его соли ожидалось применение в различных областях медицины, включая пересадку таких органов, как сердце, печень, почки, костный мозг, кожа, роговица глаза, легкие, поджелудочная железа, кишечник, мышцы, нервы, конечности где каждая соседняя пара радикалов R¹ и R², R³ и R⁴, R⁵ и R⁶ независимо может: а) представлять собой два независимых атома водорода; б) образовывать вторую связь между соседними атомами углерода, к которым они присоединены: в дополнение к сказанному выше R² может представлять собой группу алкила.

R⁷ представляет собой водород, гидроксигруппу или алкоксигруппу или же (в сочетании с R) оксогруппу; R⁸ и R⁹ независимо представляют собой водород или группу гидроксила; R¹⁰ представляет собой водород, группу алкила, группу алкила, замешенную одной или более группами гидроксила, а также группу алкенила; группу алкенила, замешенную одной или более группами гидроксила, или же группу алкила, замешенную оксогруппой; X означает оксогруппу, сочетание "атом водорода, гидроксигруппа", сочетание "атом водорода, атом водорода" или -CH₂O-; I означает оксогруппу, сочетание "атом водорода, гидроксигруппа", сочетание "атом водорода, атом водорода" или N-NR¹¹ R¹² или же N-OR¹³; R¹¹ и R¹² независимо представляет собой атом водорода, группу алкила, арила или тозила;
R¹³, D¹⁴, R¹⁵, R¹⁶R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, R²², и R²³ независимо представляют собой атом водорода или группу алкила;
R²⁰ и R²¹ независимо представляют собой оксогруппу или же они могут независимо представлять собой сочетания "R²⁰а, атом водорода" и "R²¹а, атом водорода" соответственно: R²⁰а и R²¹а независимо представляют собой гидроксигруппу, алкоксигруппу или группу OCH₂OCH₂CH₂OCH₃, или же R²¹a защищенная гидроксигруппа;
кроме того, R²⁰a и R²¹a могут вместе представлять собой атомы кислорода в эпоксидном кольце;
n принимает значения 1, 2 и 3;
Y, R²⁰ и R²³ дополнительно к радикалам, упомянутым выше, могут быть вместе с атомами углерода, к которым радикалы с этими обозначениями присоединены, представлять собой насыщенное или ненасыщенное 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, содержащее N-, S- или O-, которое может быть замещено одной или более группами, выбранными среди групп алкила, гидрокси-, алкила, замещенного одной или более гидроксильными группами, алкилокси-, бензила и CH₂Se(C₆H₅).

Указанное соединение I и его фармацевтически приемлемую соль получают точно так же, как это описано в двух патентных заявках, упомянутых выше, в частности, из макролидов, получаемых ферментацией микроорганизмов Streptomyces tsukubaensis N 9993 (FERM BP-927) или Streptomyces hydroscopicus Subsp. yakushimaensis N 7238 (FERM BP-928), пронумерованных как FR-90056, FR-900520, FR-900523, FR-900525.

Соединение формулы I и его фармацевтически приемлемая соль (ниже термин "соединение I" представляет их обоих) с трудом растворяются в воде и, следовательно, при их использовании в виде фармацевтического раствора рекомендуется улучшать их растворимость при помощи обычного водорастворимого агента, способствующего растворению (такого как этиловый спирт или полиэтиленгликоль).

Однако в фармацевтическом растворе, полученном вышеупомянутым способом, иногда происходит кристаллизация соединения I во время разбавления назначенной дозировки жидкостной средой организма, что приводит к снижению биэффективности соединения I.

Изобретение разработано с учетом приведенного обстоятельства. Предмет изобретения состоит в предложении фармацевтического состава, в частности состава эмульсии или состава раствора на органическом растворителе, которые не приводят к кристаллизации соединения I при контактировании последнего с жидкостной средой организма.

Предложенный фармацевтический состав содержит в качестве активного ингредиента соединение I, а кроме того, он содержит фармацевтически приемлемый эмульгатор, а также ингредиент масляной фазы; в частности, он представляет собой водно-масляную эмульсию или же состав в виде раствора в органическом растворителе. ния.

Ниже приведено подробное описание изобретения.

Используемый в описании изобретения термин "низший" означает, если не оговорено иное, группу, содержащую 1-6 атомов углерода.

Предпочтительные примеры "групп алкила" представляет собой остатки алифатического углеводорода с прямой или разветвленной цепочкой, например, такие, как группа низшего алкила; метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, пентил, неопентил, гексил и т.п.

Предпочтительные примеры "групп алкенила" представляют собой остатки алифатического углеводорода с прямой или разветвленной цепочкой, имеющего одну двойную связь, например, такие, как группа низшего алкенила: винил, пропенил, бутенил, метилпропенил, пентенил, гексенил и т.п.

Предпочтительные примеры "групп арила" включают, например, фенил, толил, ксилил, бутенил, метилпропенил, пентенил, гексенил и т.п.

Предпочтительные защитные группы в "защищенных гидроксигруппах" включают такие группы, как группа 1 (низший алкилтио) низшего алкила, в том числе группа низшего алкилтиометила, например группа метилтиометила, этилтиометила, пропилтиометила, изопропилтиометила, бутилтиометила, изобутилтиометила и гексилтиометила, предпочтительнее (C₁-C₄) алкилтиометила, еще лучше группа метилтиометила, тризамещенную группу силила, такого как три(низший) алкилсилил (например, триметилсилил, триэтилсилил, трибутилсилил, а также трет.бутилдиметилсилил и тритрет.бутилсилил) или низший алкилдиарилсилил, например метилдифенилсилил, этилдифенилсилил, пропилдифенилсилил и трет.бутилдифенилсилил, предпочтительнее такие, как группа три(C₁-C₄)алкилсилила и группа (C₁-C₄) алкилдифенилсилила, лучше всего группа трет.бутилдиметилсилила и группа трет.бутилфенилсилила; или же группа ацила, например группа алифатического или ароматического ацила, производная от карбоновой кислоты, сульфокислоты или карбоминовой кислоты, или же группа алифатического ацила, замещенная ароматической группой.

Примерами групп алифатического ацила являются такие, как группа низшего алканоила, имеющая (необязательно) один или более подходящих заместителей, таких как карбоксигруппа, например формил, ацетил, пропионил, бутирил, изобутирил, валерил, изовалерил, пивалоил, гексаноил, карбоксиацетил, карбоксипропионил, карбоксибутирил и карбоксигексанил;
группа цикло(низш. )алкокси (низш. )алканоила, имеющая (необязательно) один или более подходящих заместителей, таких как низший алкил, например циклопропилоксиацетил, циклобутилоксипропионил, циклогентилоксибутирил, метилоксиацетил, метилоксипропионил, метилоксибутирил, метилоксипентаноил и метилоксигексаноил;
группа камфаросульфонила или группа низшего алкилкарбамоила с одним или более заместителями, такими как карбоксигруппа или защищенная карбоксигруппа, например группа карбокси низшего алкилкарбамоила: карбоксиметилкарбамоил, карбоксиэтилкарбамоил, карбоксипропилкарбамоил, карбоксибутилкарбамоил, карбоксипентилкарбамоил и карбоксигексилкарбамоил; защищенная группа карбокси (низшего) алкилкарбамоила, такая как группа тринизший алкилсилил-низший алкоксикарбонил-низший алкилкарбамоила, например: триметилсилилметоксикарбонилэтилкарбамоил, триметилсилилэтоксикарбонидпропилкарбамоил, триэтилсилилэтоксикарбонилпропилкарбамоил, трет.бутилдиметилсилилэтоксикарбонилпропилкарбамоил, триметилсилилпропоксикарбонилбутилкарбамоил и т.п.

Примерами групп ароматического ацила являются группа ароила, имеющая (необязательно) один или более подходящих заместителей, таких как нитрогруппа, например бензоил, толуоил, ксилоил, нафтоил, нитробензоил, динитробензоил и нитронафтоил; или группа аренсульфонила, имеющая (необязательно) подходящие заместители, такие как галогены, например бензолсульфонил, толуолсульфонил, ксилолсульфонил, нафталинсульфонил, фторбензолсульфонил, хлорбензолсульфонил, бромбензолсульфонил, иодбензолсульфонил.

Примеры групп алифатического ацила, замещенных ароматической группой, включают группу ар-низшего алканоила, имеющую (необязательно) один или более заместителей, таких как низшая алкоксигруппа или группа тригало-низшего алкила, например фенилацетил, фенилпропионил, фенилбутирил, 2-трифторметил-2-метокси-2-фенил-ацетил, 2-эоил-2-трифторметил-2-фенилацетил, а также 2-трифторметил-2-пропокси-2-фенилацетил.

Среди перечисленных групп ацила предпочтительны: группа алканоила C₁-C₄, имеющая (необязательно) карбоксигруппу, группу цикло(C₅-C₆)алкокси(C₁-C₄) алканоила с двумя радикалами алкила C₁-C₄ в циклоалкильной составляющей молекулы; группа камфорсульфонила; группа карбокси (C₁-C₄)алкилкарбамоила, группа три-(C₁-C₄)алкилсилил (C₁-C₄)алкоксикарбонил (C₁-C₄)-алкилкарбамоила;
группа бензоила, имеющая (необязательно) одну или две нитрогруппы; группа бензолсульфонила, содержащая галоген, или группа фенил(C₁-C₄) алканоила, содержащая (C₁-C₄)-алкоксирадикал, а также группа тригало (C₁-C₄)алкила. Среди перечисленных наиболее предпочтительны, например, ацетил, карбоксипропионил, метилоксиацетил, камфорсульфонил, бензоил, нитробензоил, динитробензоил, иодобензолсульфонил, а также 2-трифторметил-2-метокси-2-фенилацетил.

Предпочтительные примеры "гетероциклических групп" в насыщенном или ненасыщенном 5- или 6-членном кольце, содержащем азот, серу и/или кислород, включают группы пирролила и тетрагидрофурила.

Фармацевтически приемлемые соли соединения формулы I включают обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые соли неорганических или органических кислот, например соль щелочного металла, а именно: натриевую соль или калиевую, соль щелочно-земельного металла, например кальциевую или магниевую соль, а также соль аммония, или амина, например триэтиламиновую или N-бензил-N-метиламиновую соль.

Согласно настоящему изобретению соединение формулы I может иметь одного или более "близнецов" или входить в стереоизомерические пары оптических или геометрических изомеров вследствие наличия асимметричного атома углерода и двойной связи, причем подобные "близнецы" или изомеры также относятся к области настоящего изобретения.

В качестве эмульгатора предпочтительно использовать один из природных или синтетических эмульгаторов. Среди них можно использовать различные эмульгаторы животного или растительного происхождения. Типичные их представители могут включать, например, лецитин яичного желтка или соевый лецитин, а также продукты их гидрогенизации, фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, сфингомиелин, гуммиарабик и желатин без каких-либо особых ограничений. В качестве синтетического эмульгатора можно применять любые катионные, анионные, неионные и подобные поверхностно-активные вещества (ПАВ). В особенности предпочтительно неионное ПАВ, типичные примеры которого могут включать ПАВ типа касторового масла, предпочтительно в виде касторового масла, отвержденного полиоксиэтиленом, причем наиболее предпочтительно масло марок HCO-60, HCO-50, HCO-40, производство фирмы "Никко кемиклз Ко" (Nikko Chemicals Co) с точки зрения длительной хранимости продукта. Дополнительно к сказанному выше допускается возможность применения производного сложного эфира полиоксиэтиленсорбината и жирной кислоты, например, полисорбата-80, производного сложного эфира глицерина и жирной кислоты, такого как монокаприлат глицерина, а также производного сложного эфира полиоксиэтилена и жирной кислоты, такого как моностеарат полиоксиэтилена 40; моно- или диглицериды жирной кислоты с цепочкой средней длины, например моно- или диглицериды с 6-12 атомами углерода, такие как моноглицерид или диглицерид каприловой кислоты, дигли-церид капроновой кислоты, а также полиоксиэтилированный глицерид, такой как полиоксиэтилированный глицерид масляной кислоты.

Каждый из описанных выше эмульгаторов применяют в виде так называемого первичного эмульгатора. Использование (необязательное) вспомогательного эмульгатора также относится к области данного изобретения. На вид вспомогательного эмульгатора никаких особых ограничений не налагается, поэтому можно использовать, например, такие типичные представители эмульгаторов, как холестерол, агар, гидроксид магния, метилцеллюлозы и пектин. В случаях как первичного, так и вспомогательного эмульгаторов каждый из приведенных эмульгаторов можно также применять в сочетании с другим.

Что касается используемого согласно настоящему изобретению ингредиента, представляющего собой масляную фазу, то можно применять любые фармацевтически приемлемые ингредиенты, типичные примеры которых включают без особых ограничений растительные масла (соевое, кунжутное, хлопковое, оливковое, подсолнечное, кукурузное, рапсовое, кокосовое и т.п.), триглицериды жирных кислот с цепочкой средней длины, например триглицериды жирных кислот с 6-12 атомами углерода (каприловой, капроновой и лауриновой кислот), таких как препарат марок Panasate 800, 810, 1000, 1200, производство фирмы "Ниппон Юси Ко" (Nippon Yushi Co) а также жидкие углеводороды, например жидкий парафин, сквален и сквалан, причем все эти вещества можно использовать в сочетаниях.

Фармацевтический состав, отвечающий настоящему изобретению, содержит ингредиенты, перечисленные выше. В частности, тонкодисперсную эмульсию можно приготовить, используя лецитин, яичный желток в качестве эмульгатора и осевое масло в качестве ингредиента масляной фазы, что позволяет получить весьма стабильный фармацевтический состав, содержащий соединений I.

С другой стороны, при приготовлении состава в виде раствора на органическом растворителе в качестве фармацевтического состава, отвечающего настоящему изобретению, можно использовать любой из органических растворителей лишь бы в нем растворялось соединение и он сам был бы фармацевтически приемлемым, причем предпочтителен этиловый спирт. В данном случае предпочтительный эмульгатор может представлять собой касторовое масло, отвержденное полиоксиэтиленом, например масло марки HCO-60, или синтетический эмульгатор, такой как полиоксиэтилированный глицерид, например полиоксиэтилированный глицерид масляной кислоты. Предпочтительным ингредиентом масляной фазы может служить упомянутый ранее триглицерид жирной кислоты с цепочкой средней длины. В этом случае соединение I растворяют в смешанном растворителе, содержащем органический растворитель и триглицерид жирной кислоты с цепочкой средней длины. Или же соединение I сначала растворяют в органическом растворителе, после чего к раствору добавляют триглицерид жирной кислоты с цепочкой средней длины, а затем вводят синтетический эмульгатор и осуществляют перемешивание до полной гомогенности. В отношении синтетического эмульгатора предполагается, что триглицерид жирной кислоты с цепочкой средней длины образует эмульсию, контактируя с "распускающим" раствором, и это улучшает поглощение соединений I раствором. Триглицерид жирной кислоты с цепочкой средней длины обладает превосходной способностью растворять соединение I по сравнению с триглицеридом жирной кислоты с длинной цепочкой (например, оливковым маслом), однако он не смешивается с синтетическим эмульгатором и не позволяет получить гомогенный фармацевтический раствор. С учетом изложенного в раствор вместе с другими ингредиентами вводят органический растворитель, причем предпочтителен этиловый спирт, что способствует получению гомогенной смеси триглицерида жирной кислоты (с цепочкой средней длины) и синтетического эмульгатора, а также снижению вязкости раствора в целом, благодаря чему обеспечивается гибкость назначения (облегчающая применение) фармацевтического состава.

В дополнение к ингредиентам, указанным выше, можно также применять вместе с ними агент, регулирующий осмотическое давление, согласно соответствующей характеристике живого организма, в который вводят предлагаемый состав. Такой вариант также относится к области настоящего изобретения. Упомянутый агент, регулирующий осмотическое давление, может также включать, например, сахарный спирт, такой как глицерин, сорбитол, инозитол, ксилитол и маннитол. Кроме того, в состав можно подмешать, если это потребуется, антисептики, например хлорид бензалкония, те или иные виды параоксибензоатов, хлоридную соль бензотония и хлорбутанола.

Как было указано выше, состав, отвечающий настоящему изобретению, представляет собой фармацевтический состав, содержащий соединение I, эмульгатор и ингредиент масляной фазы в качестве главных компонентов. Ниже даны пояснения относительно содержания каждого из главных ингредиентов. Содержание соединения I желательно варьировать в зависимости от дозировки, в которой применяют предложенный состав. Рекомендуется содержание соединения I 0,05-50 мг/мл для внутривенной инъекции, 1-50 мг/мл для внутримышечной инъекции, 0,1-50 мг/мл для глазных капель, 0,1-50 мг/мл для назначения через глотание. Данный ингредиент можно разбавлять водными средами, например водой, физиологическим солевым раствором, раствором для инъекции, содержащим глюкозу, фруктовым соком или молоком согласно дозировке, в которой применяют предлагаемый раствор, так что по сравнению с приведенными выше значениями концентрация соединения I снижается.

Конкретное ограничение относительного количества ингредиента масляной фазы, подмешиваемого к фармацевтического составу, не устанавливается, однако предпочтительно подмешивать ингредиент масляной фазы в виде эмульсии, содержащей 5-50% (мас. доли), предпочтительно 5-20% указанного ингредиента.

Содержание эмульгатора в случае состава для инъекций или глазных капель предпочтительно составляет 0,5-50% (мас. доли), предпочтительнее 1-30% а еще лучше 2-20% от массы используемого ингредиента масляной фазы.

В случае микстуры для приема внутрь это содержание составляет 10-400 мас. долей, предпочтительнее 50-200 мас. долей, а еще лучше 80-120 мас. долей на 100 мас. долей ингредиентов масляной фазы.

Кроме того, в случае состава в виде раствора на органическом растворителе этот растворитель применяют в количестве 0,002-2 мл, предпочтительнее 0,01-1 мл, а еще лучше 0,02-0,5 мл на 1 мг соединения I.

Фармацевтический состав можно также получить с использованием соединений, описанных в следующих документах: в Европейской патентной заявке EP-A-353678, патентной заявке Японии N 2-74330, 1990, международной патентной заявке PCT/GB90/01262 (Великобритания), Европейской патентной заявке EP-A-413532, международной патентной заявке PCT/JP91/00314 (Япония), патентных заявках Великобритании N 9012963.6, 9014136.7, 9014136.7, 9014681.2, 9014880.0, 9014881.8, 9016115.9, 9016115.9, 9016693.5, Европейских патентных заявках N EP-A 32865, EP-A-349061, EP-A-358508, EP-A-364031, EP-A364032, EP-A-378317, EP-A-378320, EP-A-378321, EP-A-388153, EP-A-396399, EP-A-396400, EP-A-399579, EP-A-43242, EP-A-428365, EP-A-356399, EP-A-402931, EP-A-427680, заявке Великобритании N 2225576 А.

Пример 1.

В качестве соединения I применяли соединение, в котором:
R¹, R², R⁸, R²³ представляют собой водород;
R⁷, R⁹ группы гидроксила;
R¹⁰ группа аллила;
R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, R²² группы метила;
R²⁰ сочетание R²⁰a и H, где R²⁰a метоксигруппа;
R²¹ сочетание R²¹a и H, где R²¹a группа гидроксила;
X, Y кислород; n 2;
R³ и R⁴ образуют вторичную связь между соседними атомами углерода, к которым они присоединены.

Перечисленные символы графически соединены сплошными линиями, тогда как пунктирные линии означают двойные связи. Данное соединение применяли в свободном виде. Оно обладает превосходной иммуносупрессивной активностью и далее обозначено как FK 506.

Соединение FK 506 в количестве 0,5 г смешивали с 200 г соевого масла и 24 г лецитина яичного желтка. Смесь нагревали при 80^oC до получения гомогенного раствора.

Пример 2.

Воду в количестве 1,6 л, содержащую 2,5% глицерина, вводили в условиях нагревания при 70-80^oC в гомогенный раствор, полученный в примере 1. Из этой смеси готовила эмульсию перемешиванием в течение 30 мин с частотой 600 1/мин в смесителе-гомогенизаторе ТК, производство фирмы "Токусю Кика Коге Ко", Япония (Tokushu Kika Kogyo Co), поддерживая температуру 70-80^oC. Далее приготовление эмульсии продолжали при 75-80^oC с использованием гомогенизатора "Мэнтон Гаурин" (Manton Gaurin), производство одноименной фирмы, США, под давлением 4500 фунт/кв. дюйм и 10-кратном числе проходов. После охлаждения эмульсии до комнатной температуры добавляли дистиллированную воду с целью доведения количества раствора до 2 л.

Пример 3.

После размешивания соединения FK 506 в количестве 0,5 г в 100 мл имеющейся в продаже жирной эмульсии для внутривенной инъекции, торговая марка "Интралипид (Intralipid) 10% ", производство фирмы "Опука Сэйяку" (Otsuka Seiyaku), в течение ночи при комнатной температуре смесь фильтровали через фильтр с просветом ячеек 9,45 мкм, производство фирмы "Микропор Ко" (Micropore Co), с целью получения жирной эмульсии (для внутривенной инъекции), содержащей соединение FK 506 в концентрации 0,293 мг/мл.

Пример 4.

Были приготовлены и подвергнуты сравнению на переносимость при закапывании в глаз крысы раствор (сравнительный пример), суспензия (сравнительный пример) и эмульсия (пример 3 осуществления изобретения). Полученные результаты представлены в табл. 1.

Как показано в таблице, эмульсия примера 3 характеризуется превосходной переносимостью при закапывании в глаз крыс. Был сделан вывод о том, что в эмульсии, отвечающей настоящему изобретению, активный ингредиент не выпадает в осадок при контактировании с жидкостью организма. Условия назначения: 5 капель по 10 мкл. В табл. 1 приведены концентрации в ткани каждого вида через 1 ч после назначения (n 4 среднее значение + стандартное отклонение).

Пример 5.

Эмульсию соединения FK506, полученную в примере 3, и суспензию, содержащую 30 г донкодисперсного порошка FK 506 в 100 мл физиологического солевого раствора (размеры частиц в суспензии FK 506: 10,3 мкм), назначали каждой крысе внутрь через глотание, после чего оценивали поглощение FK 506 при поступлении в организм через глотание.

Эксперименты по поглощению проводили по следующей методике.

Крыс (самцы серийной линии SD возрастом 8 нед. и массой тела 300 г), некормленых с предшествующих суток, закрепляли в положении лежа на спине и вводили им через пасть пробу состава из расчета 1 мг на 1 кг живого веса через зонд (одна проба расходовалась на 4 крыс). Через установленные промежутки времени 1/2, 1, 2, 4, 8 и 24 ч из бедренной аорты животных при помощи прикрепленного устройства (cannula) отбирали пробы крови по 0,2 мл, которые после добавления 1% гепарина хранили в холодильнике. После их оттаивания концентрацию FK 506 во всех пробах крови определяли методом энзимного иммуноиспытания.

Было установлено, что в случае эмульсии, отвечающей настоящему изобретению, пик поглощения для FK 506 появлялся быстрее и при более высоких концентрациях препарата в крови по сравнению со случаем назначения суспензии.

Пример 6.

FK 506 2 мг
HCO-60 100 мг
Этиловый спирт 062 мл
Триглицерид жирной кислоты со средней длиной цепочки,торговая марка "Мигриол 812" (Migriol 812), производство фирмы "Гулс АГ" (Huls AG) До 1 мл
Пример 7.

Была изучена стабильность полученного в примере 6 состава, представляющего собой раствор на этиловом спирте, при хранении (см. табл. 2)
Значения в скобках показывают величину pH раствора, разбавленного в 5 раз водой.

По данным табл. 2, можно сделать вывод о возможности длительного хранения полученного в примере 6 состава в виде раствора на этиловом спирте.

Пример 8.

FK 506 2 мг
Полиоксиэтилированной глицерид масляной кислоты, "Лабрафил" (Labrafil), M1944CS, производство фирмы "Гатт фассе Ко" (Gatte fasse Co) 420 мг
Глицерид жирной кислоты со средней длиной цепочки 400 мг
Этиловый спирт До 1 мл
Состав, содержащий указанные выше ингредиенты и способный при использовании образовывать эмульсию, готовили как обычно.

Пример 9.

FK 506 1 мг
Моноглицерид каприловой кислоты 0,2 мл
Триглицерид жирной кислоты со средней длиной цепочки 0,6 мл
Этиловый спирт До 1 мл
Состав, содержащий указанные выше ингредиенты и способный при использовании образовывать эмульсию, готовили как обычно.

Эффект настоящего изобретения.

Так как фармацевтический состав, отвечающий настоящему изобретению, не приводит к кристаллизации активных ингредиентов при контактировании с жидкостью организма, то был сделан вывод о том, что состав отличается превосходной стабильностью. Кроме того, такой фармацевтический состав имеет то преимущество, что он по вкусу детям, причем дозировку можно легко регулировать.

Фармацевтическая рецептура, отвечающая настоящему изобретению, благодаря фармацевтической активности трициклического соединения I пригодна для лечения и профилактики заболеваний, связанных с расстройством иммунитета, например, при пересадках органов тканей: сердца, почек, печени, костного мозга, кожи, роговицы, легких, поджелудочной железы, кишечника, конечностей, мышц, нервов, и в случаях аналогичных расстройств, связанных с антагонизмом собственных тканей с прививаемыми, например, при пересадке костного мозга; автоиммунных расстройств, таких как ревматоидный артрит, системный туберкулез кожи (эритематоз), тироидит Хасимото (Hashimoto), множественный склероз, тяжелая миастения; диабет, тип. 1 и т.п. а также иных заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами.

Кроме того, трициклические соединения I пригодны также для лечения и профилактики воспалительных и гиперпролиферативных заболеваний кожи, а также кожных проявлений заболеваний, вызванных иммунными расстройствами, таких как псориаз, атопический дерматит, контактный дерматит и другие экзематические дерматиты, себоррейный дерматит, Lichen planus, пузырчатка кожи, буллоидные разновидности пузырчатки (bullous Pemphigoid), эпидермологическая буллоза, уртикария (ueticaria), анжедема (angioedemas), сосудистые заболевания, эритема, кожный осинофилиаз, эритематозная волчанка, прыщи и очаговое облысение;
различных глазных заболеваний, в том числе автоиммунных заболеваний, включая такие, как, например, кератоконъюктивит, "ячмень", увеит, связанный с болезнью Бесета (Behcet), кератит, герпетический кератит, конусообразная роговица, вырождение эпителия роговицы, лейкома роговицы, глазная пузырчатка, язва Мурена (Mooren), склерит, офтальмопатия Грейвса (Graves), синдром Фогта-Коянаги-Харады (Vogt-Koyanagi-Harada), саркоидоз и т.п.

заболеваний, затрудняющих дыхание, включая такие, как астма, например бронхиальная астма, аллергическая астма, астма при вдохе, астма при выдохе, пылевая астма; в особенности хроническая или застарелая астма, например возрастная, а также повышенная раздражимость верхних дыхательных путей; бронхиты и т.п.

воспалений слизистых оболочек и кровеносных сосудов, включая такие, как язва желудка, повреждения сосудов, вызванные ишемическими заболеваниями и тромбозом, ишемические кишечные заболевания, воспалительные кишечные заболевания, энтероколит с омертвлением тканей, поражения кишечника, вызванные тепловыми ожогами, заболевания, обусловленные лейкотриеном B;
кишечных воспалений и разновидностей аллергии, таких как болезнь Целиака (Coeliac), проктит, эоснофильный гастроэнтерит, мастоцитоз, болезнь Крона (Crohn) и язвенные колиты;
пищевых аллергических заболеваний с симптоматическими проявлениями далеко за пределами желудочно-кишечного тракта в виде мигрени, ринита и экземы;
почечных заболеваний, таких как межтканевый нефрит;
синдрома Гудпесчура (Goodpasture), гемолитическо-уремического синдрома и диабетической нефропатии;
заболеваний нервной системы, таких как множественный миозит (myositis), синдром Гиллена-Барре (Guillain-Barre), болезнь Меньера (Meniere% и радикулопатия;
эндокринных заболеваний, таких как гипертероидизм и базедова (Bazedow) болезнь;
заболеваний крови, таких как аплазия чистых (pure) красных кровяных телец, анемия, вызванная аплазией, гипопластическая анемия, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (purpura), автоиммунная гемолитическая анемия, агранулоцитоз и анеритроплазия;
костных заболеваний, таких как остеопороз;
заболеваний дыхательных путей, включая такие как саркоидоз, "волокнистое легкое" и идиопатическая внутритканевая пневмония;
других заболеваний кожи, помимо упомянутых выше, включая дерматомиозит, обычную лейкодермию, обычный ихтиоз, аллергическую светораздражимость и кожную T-клеточную лимфозу;
заболеваний кровеносной системы, таких как аритериосклероз, атеросклероз, аортитный синдром, узловатый полиартрит и миокардоз;
коллагенных заболеваний, таких как склеродерма, гранулома Уэдженера (Wegener) и синдром Сьогрена (Sjogren);
адипоза;
эосинофильного фашиита;
цынготных заболеваний, таких как повреждения десен, выпадение зубов, крошение зубов, повреждение надкостницы и зубной костной ткани;
нефротического синдрома: гломерулонефрита и т.п.

облысения мужского типа и старческого облысения;
мышечной дистрофии;
пиодермы и синдрома Сезари (Sezary);
заболеваний, обусловленных активным кислородом, в том числе повреждений органов ишемического характера, например поражений тканей сердца, печени, почек, пищеварительного тракта при их хранении и пересадке, а также ишемических заболеваний, например тромбоза, инфаркта миокарда;
внутрикатневых заболеваний, таких как эндотоксиновый шок, псевдомембранный колит, вызванный приемом лекарства или облучением;
почечных заболеваний: острой ишемической почечной недостаточности, хронической почечной недостаточности;
легочных заболеваний, включая токсиноз, вызванный кислородом в легких или же таким лекарством, как паракорт (paracort), блеомицины (bleomycins); рак легких, эмфизему легких;
глазных заболеваний (помимо упомянутых выше): катаракта, сидероз, ретинит, пигментоз, старческое макулярное вырождение, стекловидное рубцевание, щелочное жжение роговицы (Corneal alkali burn);

Формула изобретения

1. Иммуносупрессивная композиция, содержащая трициклическое соединение формулы I

где каждая пара соседних радикалов R¹ и R², R³ и R⁴, R⁵ и R⁶ независимо представляют собой два соседних атома водорода или образуют двойную связь между соседними атомами углерода, к которым они присоединены;
R² может представлять алкильную группу;
R⁷ водород, гидроксигруппа, защищенная гидрокси- или алкикосигруппа или в сочетании с R¹ оксогруппа;
R⁸ и R⁹ независимо водород или гидроксигруппа;
R¹⁰ водород, алкильная группа, алкильная группа, замещенная одной или более гидроксильными группами, алкенильная группа или алкенильная группа, замещенная одной или более гидроксильными группами, или алкильная группа, замещенная оксогруппой;
Х оксогруппа, сочетание атом водорода и гидроксигруппа, сочетание атом водорода и атом водорода или -СН₂О-;
Y оксогруппа, сочетание атом водорода и гидроксигруппа, сочетание атом водорода и атом водорода или N-R¹¹R¹², или N-OR¹³;
R¹¹ и R¹³ независимо атом водорода, алкильная группа, арильная или тозиальная группа;
R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, R²² и R²³ независимо атом водорода или алкильная группа;
R²⁰ и R²¹ независимо оксогруппа, или же они могут незовисимо представлять собой сочетания ( R²_a⁰ и атом водорода) и ( R²_a¹ и атом водорода) соответственно;
R²_a⁰ и R²_a¹ независимо гидроксигруппа, алкоксигруппа или группа OCH₂OCH₂CH₂OCH₃ или же R²_a¹ - защищенная гидроксигруппа; кроме того, R²_a⁰ и R²_a¹ могут вместе представлять собой атомы кислорода в эпоксидном кольце;
n 1, 2 или 3,
в дополнение к значениям, указанным выше, Y, R¹⁰ и R²³ вместе с атомами углерода, в котором они присоединены, могут составлять 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, содержащее N-, S- или О-, которое может быть насыщенным или ненасыщенным и которое может быть замещено одной или более группами, выбранными из алкила, гидрокси, алкила, замещенного одной или более гидроксильными группами, алкоксигруппы, бензила и CH₂ Se (C₆ H₅), или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемые целевые добавки, отличающаяся тем, что в качестве целевых добавок она содержит эмульгатор, выбранный из группы, включающей лецитин яичного желтка, соевый лецитин, продукт их гидрогенизации, фосфатизилхолин, фосфатизилсерин, сфингомиелин, гуммиарабик, желатину, кастороео масло, отвержденное полиоксиэтиленом, сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты, сложный эфир глицерина и жирной кислоты, сложный эфир полиоксиэтилена и жирной кислоты, моно- или диглицериды жирных кислот с цепочкой средней длины и полиоксиэтилированный глицерид, и липофильный агент, выбранный из группы, включающей соевое, кунжутное, хлопковое, саффлоровое, кукурузное, рапсовое, арахисовое масла, триглицериды жирных кислот с цепочной средней длины и жидкие углеводороды, при содержании соединения I 0,05 50 мг/мл, липофильного агента 5 20 мас. и массовом соотношении эмульгатор липофильный агент 0,5 400 100.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она представляет собой эмульсию или раствор.

3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит фармацевтически приемлемый органический растворитель в количестве 0,002 2 мл, предпочтительно 0,01 1 мл или 0,02 0,5 мл, на 1 мг соединения I и представляет собой раствор.

4. Композиция по п.3, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит воду и представляет собой эмульсию типа масло в воде, в которой "маслом" является раствор по п.3.

5. Композиция по пп.3 и 4, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемым органическим растворителем является этанол.

6. Композиция по пп. 1 5, отличающаяся тем, что в трициклическом соединении I каждая пара соседних радикалов R³ и R⁴, R⁵ и R⁶ может образовывать еще одну связь между атомами углерода, к которым присоединены; R⁸ и R²³ независимо атомы водорода;
R⁹ гидроксигруппа;
R¹⁰ метил, этил, пропил или алкил;
X сочетание из двух атомов водорода или оксогруппа;
Y оксогруппа;
каждый из радикалов R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹ и R²² метильная группа; R²⁰ и R²¹ независимо сочетания R²_a⁰ и атом водорода или R²_a¹ и атом водорода, в которых R²_a⁰ и R²_a¹ соответственно гидрокси- или алкоксигруппы, или R²_a¹ защищенная гидроксигруппа;
n 1 или 2.

7. Композиция по пп.1 6, отличающаяся тем, что в трициклическом соединении I R⁷ атом водорода, гидроксигруппа или защищенная гидроксигруппа;
X оксогруппа, R²_a⁰ - метоксигруппа, R²_a¹ - гидроксигруппа или защищенная гидроксигруппа.

8. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что трициклическое соединение I представляет собой 17-аллил, -1, 14-дигидрокси-12- [2-(4-гидрокси-3-метоксициклогексил)- 1- метил-винил] -23,25-диметокси-13,19,21,27-тетраметил-11,28- диокса-4-азатрицикло(22,3,1,0^4,9)- октакоз-18-ен-2,3,10,16-тетраон или 17-этил-1,14-дигидрокси-12- [2-(4-гидрокси -3- метоксициклогексил)-1-метилвинил] 23,25, диметокси-13,19,21, 27-тетраметил-11,28-диокса-4-азатрицикло (22,3,1,0^4,9)-октакоз-18-ен-2,3,10,16-тетраон.

9. Способ получения иммуносупрессивной композиции, включающий смешение трициклического соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли с фармацевтически приемлемыми целевыми добавками, отличающийся тем, что в качестве целевых добавок используют эмульгатор и липофильный агент по п.1 и смешение осуществляют при соотношении компонентов, указанных в п.1.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что в качестве целевой добавки дополнительно используют фармацевтически приемлемый органический растворитель.

11. Способ по п.9 или 10, отличающийся тем, что полученные композиции смешивают с водой с образованием эмульсий.

РИСУНКИ

Рисунок 1

RH4A - Выдача дубликата патента Российской Федерации на изобретение

Дата выдачи дубликата: 27.02.2006

Наименование лица, которому выдан дубликат:
ФУДЗИСАВА ФАРМАСЬЮТИКАЛ КО., ЛТД (JP)

Извещение опубликовано: 20.04.2006        БИ: 11/2006

---