Способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы

Авторы патента:

Рейс Альберт Борисович (RU)

Рейс Борис Альбертович (RU)

Соколова Татьяна Федоровна (RU)

Ершов Антон Валерьевич (RU)

G01N33/533 - с флуоресцентными метками

Владельцы патента RU 2578448:

государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ОмГМА Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, и может быть использовано для диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы. Для этого в крови больного определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14⁺/HLA-DR⁺ методом проточной цитометрии и статистического ROC-анализа. При содержании CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85% диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы. Использование данного способа позволяет диагностировать нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы, что позволяет определять тактику ведения таких больных и осуществлять выбор оперативного вмешательства. 2 пр., 1 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии.

Известны критерии диагностики постнекротической псевдокисты поджелудочной железы: по уровню глутатиона, мочевой кислоты, малонового диальдегида в эритроцитах и плазме, содержанию олигопептидов в эритроцитах и плазме (Морозов С.В. Клинико-патогенетическое обоснование диагностики, лечения и прогнозирования при остром панкреатите и его осложнениях (клинико-экспериментальное исследование). - Дисс. докт. мед. наук. - Омск, 2006).

Известны лабораторные критерии диагностики при нагноившейся постнекротической псевдокисте поджелудочной железы: изменения субпопуляционного состава лимфоцитов, содержания провоспалительных цитокинов, некроза опухоли (THF-α), который увеличивается в крови при нагноении постнекротической кисты (Тропина И.В. Клинико-патофизиологические аспекты в диагностике и лечении больных с постнекротическими псевдокистами поджелудочной железы. - Автореф. канд. мед наук. - Омск, 2007; Морозов С.В., Полуэктов В.Л., Долгих В.Т., Рейс А.Б., Ершов А.В., Рейс Б.А. Иммунные нарушения у больных с постнекротическими кистами поджелудочной железы //Антибиотики и химиотерапия. - 2012. - №11-12. - С. 22-25; Ершов А.В., Долгих Т.И., Морозов С.В., Рейс А.Б., Тропина И.В. Прогнозирование инфекционных осложнений постнекротических псевдокист поджелудочной железы // Омский научный вестник. - 2013. - №1(118). - С. 57-59 (прототип изобретения)

Недостатком известного способа диагностики нагноения постнекротической псевдокисты поджелудочной железы является то, что он не достаточно точен, не характеризует активность фагоцитов, с которыми непосредственно связаны инфекционные, гнойные осложнения.

Задача изобретения - повышение точности, эффективности диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы.

Поставленная задача достигается тем, что способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы осуществляют путем исследования в крови больного лейкоцитов и отличается тем, что с целью повышения точности диагностики, методом проточной цитометрии на приборе «CYTOMICS FC-500», определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14⁺/HLA-DR⁺, используют современный точный статистический метод ROC-анализ, и если содержание CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85%, диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

В контрольной группе практически здоровых лиц (20) уровень клеток, экспрессирующих CD 14⁺/HLA-DR⁺ составил 88,4±2,2%.

Способ осуществляют следующим образом. У больного с постнекротической псевдокистой поджелудочной железы производят забор пробы крови, в которой на проточном питометре «CYTOMICS FC-500» определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD14⁺/HLA-DR⁺.

Оценку маркеров клеточной дифференцировки проводили на проточном цитометре (CYTOMICS FC 500, Beckman Coultr, США) с использованием видоспецифических моноклональных антител (Beckman Coulter, США). Определяли количество CD 14⁺/HLA-DR⁺ клеток в крови.

Определение субпопуляционного состава лимфоцитов на проточных цитометрах является наиболее точным и современным методом диагностики. С помощью проточной цитометрии определяют активность фагоцитов по плотности, однако при уменьшении или отсутствии молекул HLA-DR на поверхности мембран моноциты не могут выполнять свою антиген-презентутощую функцию и не обладают способностью продуцировать воспалительные медиаторы в ответ на соответствующие стимулы (Wolk К. Comparison of monocyte functions after LPS- or IL-10-induced reorientation: importance in clinical immunoparalysis // Pathobiology. - 1999. - Vol.67. - P. 253- 256; Pitton С.Different regulation TNF-a and IL-1 ra synthesis in LPS-tolerant human monocytes // Prog. Clin. Biol. Res. - 1995. - Vol.392. - P. 523-528).

Для оценки эффективности диагностики используют референтные данные. Вычисляют следующие расчетные показатели.

Чувствительность (Se) - определяется как доля больных, у которых выявляется снижение содержания CD14⁺/HLA-DR⁺. Чем выше процент чувствительности, тем лучше тест для диагностики изучаемого критерия.

Специфичность (Sp) - это частота отсутствия изменений данного показателя у здоровых людей. Чем больше процент специфичности изучаемого теста, тем выше уровень доказательности для более качественной диагностики изучаемой величины (Власов В.В. Введение в доказательную медицину // М.: Медиа Сфера, 2001. - 392 с.; Власов В.В. Что такое ежегодный справочник «Доказательная медицина» и как им пользоваться // Междунар. журнал медицинской практики. - 2002. - №1. - С. 5-8).

В настоящее время наиболее полным и современным методом оценки информативности и точности диагностического теста является ROC-анализ (Receiver Operating Characteristic analysis) - характеристическая кривая взаимной зависимости чувствительности и специфичности тестов с использованием взвешенной линейной регрессии. Информативность диагностического теста определяется тем, насколько высоко лежит его характеристическая кривая. Чем ближе площадь под кривой (AUC) к площади квадрата (условно принятую за 1), тем эффективнее диагностический тест. Чем ближе кривая к диагонали, тем ниже эффективность диагностического метода (О.Ю. Реброва. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. - Издательство Медиа Сфера, 2006).

Если содержание CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85%, то диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

Пример 1. Больной М., при поступлении клинический диагноз: постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. У больного производят забор пробы крови, который помещают в контейнер проточного цитометра «CYTOMICS FC-500» и определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD 14⁺/HLA-DR⁺. В данном случае оно составило 89%, что исключает диагноз нагноившаяся постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. Больному была проведена трансгастральная цистогастростомия на наружном дренаже из мини-доступа. Выписан в удовлетворительном состоянии через 14 дней.

Пример 2. Больной Ж., при поступлении клинический диагноз: постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. У больного производят забор пробы крови, который помещают в контейнер проточного цитометра «CYTOMICS FC-500» и определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD14⁺/HLA-DR⁺. В данном случае оно составило 84%, что соответствовало критерию нагноившейся постнекротической псевдокисты. Больному была выполнена операция: наружное дренирование псевдокисты поджелудочной железы. Выписана в удовлетворительном состоянии на 28 день.

Предложенным способом обследованы 20 практически здоровых пациентов (группа I), 25 больных с неосложненной постнекротической псевдокистой поджелудочной железы (подгруппа II₁) и 24 больных, у которых наблюдались нагноения (подгруппа II₂). Была построена ROC-кривая. Результаты представлены в таблице 1.

Согласно нашим данным использование в качестве критерия оценки нагноившейся кисты поджелудочной железы CD 14⁺/HLA-DR⁺ имеет высокую прогностическую силу (доверительный интервал AUC 0,9-1,0) (табл. 1).

Таким образом, диагностика нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы может осуществляться с высокой частотой положительных результатов с помощью такого показателя, как содержание в крови CD14⁺/HLA-DR⁺.

Технический результат: способ диагностики обладает высокой прогностической силой, позволяет более точно определять тактику ведения таких больных, осуществлять правильный выбор оперативного вмешательства.

Способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы включает исследование в крови больного лейкоцитов и отличается тем, что определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14⁺/HLA-DR⁺, при этом используют метод проточной цитометрии и статистический метод ROC-анализ, и если содержание CD14⁺/HLA-DR⁺ ниже 85%, то диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики пароксизмальной ночной гемоглобинурии. Для этого окрашивают исследуемый образец крови моноклональными антителами CD235a (FITC)/ CD59(PE)/CD71 (АРС).

Способ диагностики наследственной оптической нейропатии // 2566271

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для диагностики наследственной оптической нейропатии (НОН). Для этого проводят клинические и цитологические исследования и дополнительно из кожи пациента получают культуру фибробластов плотностью 5000-10000 клеток на см2, окрашивают митохондриальным потенциалзависимым флюоресцентным красителем TMRE до конечной концентрации 25 нМ.

Иммунологические исследования с использованием недисперсного хемилюминесцентного реактива // 2559581

Изобретение относится к медицине и описывает хемилюминесцентный реактив для определения присутствия и/или количества анализируемого вещества в образце с предполагаемым содержанием анализируемого вещества, при этом реактив является недисперсным и растворимым в водной среде и содержит партнера по связыванию для анализируемого вещества и хемилюминесцентную композицию, содержащую олефиновое соединение и хелат металла, где олефиновое соединение является соединением, которое способно реагировать с синглетным кислородом присоединением 2+2 с образованием диоксетана или которое способно реагировать с синглетным кислородом с циклоприсоединением 4+2 с диенами, и где металл или хелат металла представляет собой редкоземельный металл или металл Группы VIII, и где металл координирован с двумя или более атомами той же молекулы или хелирующего агента, где два или более атомов выбраны из группы, состоящей из кислорода, азота и серы.

Биомаркер для мониторинга пациентов // 2555340

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для определения еx-vivo эффективности лечения рака. Для этого после введения одной или более доз иммуногенной композиции субъекту измеряют уровень активированных Т-лимфоцитов (CD3+ CD69+) в организме.

Способ определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ммр9-1562 с>т (rs3918242) // 2548811

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для определения генотипа человека по полиморфизму в гене матриксной металлопротеиназы ММР9-1562 C>Т (rs3918242).

Способ определения биологической активности эмбрионированных яиц trichuris // 2540145

Изобретение касается способа определения биологической активности эмбрионированных яиц Trichuris. Охарактеризованный способ включает осуществление по меньшей мере 3-х анализов, выбранных из: - оценки и/или подтверждения стадии эмбрионального развития яиц с помощью метода количественной ПЦР с использованием пригодных маркерных последовательностей для определения количества копий геномной ДНК, - оценки метаболической активности эмбрионированных яиц с помощью биохимических и/или молекулярно-биологических методов, - оценки индуцибельности генной экспрессии в эмбрионированных яйцах, - оценки подвижности личинок Trichurs с помощью микроскопа в течение продолжительных периодов наблюдения после предварительной инкубации при повышенных температурах и/или - оценки коэффициента вылупляемости личинок Trichuris в организме лабораторного животного.

Способ прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у больных с хронической сердечной недостаточностью ишемической этиологии, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа // 2531947

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования риска сердечно-сосудистой летальности у пациентов с постинфарктной хронической сердечной недостаточностью, сочетающейся с сахарным диабетом 2 типа.

Способ дифференциальной диагностики злокачественной и доброкачественной патологии молочной железы // 2530557

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и клинической биохимии. Сущность способа заключается в том, что фиксированные клетки периферической крови обрабатывают первичными антителами к эстроген-связываюшему белку, специфически взаимодействующими с антигенами на поверхности сегментоядерных гранулоцитов, затем к полученному комплексу антиген-антитело добавляют вторичные антивидовые флуоресцентно-меченные антитела, и при наличии окрашивания поверхности сегментоядерных гранулоцитов диагностируют злокачественные новообразования, а при отсутствии окрашивания поверхности сегментоядерных гранулоцитов диагностируют доброкачественные новообразования.

Способ прогнозирования развития гематогенных метастазов после комбинированного лечения рака почки // 2528100

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования развития гематогенных метастазов после комбинированного лечения при раке почки.

Способ прогнозирования задержки внутриутробного роста плода // 2526178

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования задержки внутриутробного роста плода. Для этого в венозной крови женщины на ранних сроках беременности определяют относительное содержание CD3+CD16+56+-лимфоцитов, уровня С3-компонента комплемента и растворимого рецептора фактора некроза опухоли (sTNF-R).

Способ прогнозирования безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после проведения аутологичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток // 2580648

Изобретение относится к медицине, а именно к онкогематологии, и может быть использовано для прогнозирования развития безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после аутологической трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. Целью изобретения является упрощение способа прогнозирования безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после АТГСК. Способ прогнозирования безрецидивной выживаемости у больных множественной миеломой после аутологичной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток (АТГСК), включает проточную цитометрию и оценку относительного содержания одной из популяций лимфоцитов с использованием ее порогового значения. В предложенном способе после процедуры афереза, перед трансплантацией в продукте афереза больного определяют относительное количество CD45+CD19+ В-клеток, и при содержании CD45+CD19+ В-клеток более 2,5% прогнозируют более короткий период безрецидивной выживаемости после АТГСК, а при содержании CD45+CD19+ В-клеток менее 2,5% прогнозируют более продолжительный период безрецидивной выживаемости после АТГСК. 1 ил.

Способ оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов методом проточной цитофлуориметрии при специфической активации антигеном // 2582395

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии, и может быть использовано для оценки реакции бласттрансформации лимфоцитов. Для этого используют бруцеллин для специфической активации лимфоцитов. Детекцию бластных форм лимфоцитов проводят с помощью моноклональных антител к CD34 с последующим подсчетом клеток методом проточной цитофлуориметрии. Использование данного способа позволяет проводить учет активированных бруцеллином лимфоцитов в РБТЛ с использованием моноклональных антител CD34 у больных бруцеллезом и здоровых доноров. 1 табл.

Способ определения антител к аллогенным hla-g // 2585091

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для определения антител к аллогенным HLA-G в сыворотки крови. Для этого используют тест перекрестной совместимости (cross match) мононуклеаров донора с сывороткой реципиента. Проводят анализ субпопуляций мононуклеаров с помощью проточной цитофлуорометрии на связывание моноклональных антител HLA-G и оценивают степень экспрессии HLA-G на опытных и контрольных мононуклеарах донора. При этом значимыми являются субпопуляции CD3-HLA-G+ и CD3+HLA-G+, по которым рассчитывают коэффициент подавления (КП) в опытной постановке по отношению к контрольной по формуле: КП HLA-G = ( H L A − G О П − H L A − G К О Н Т ) H L A − G К О Н Т × 100, где HLA-Gоп - суммарное относительное число субпопуляций экспрессирующих HLA-G: (CD3-HLA-G++CD3+HLA-G+) в опытной постановке, %; HLA-Gконт - суммарное относительное число субпопуляций экспрессирующих HLA-G: (CD3-HLA-G++CD3+HLA-G+) в контрольной постановке, %. При этом наличие сенсибилизации к аллогенным HLA-G диагностируют при отрицательном значении КПHLA-G. Использование данного способа позволяет выявлять аллогенную сенсибилизацию к HLA-G с помощью проточной цитофлуориметрии, определяя субпопуляции CD3-HLA-G+ и CD3+HLA-G+. 3 пр., 3 ил., 2 табл.

Способ прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша // 2585244

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования рецидива угрожающего выкидыша. Для этого проводят иммунологическое исследование периферической венозной крови в 7-12 недель гестации у женщин с угрозой невынашивания беременности. После проведенного лечения угрозы прерывания беременности определяют относительное содержание CD45RA-CD62L- в популяции CD8+ лимфоцитов. При его значении более 23,9% прогнозируют возникновение угрожающего выкидыша во втором триместре у женщин с привычным невынашиванием в анамнезе. Использование данного способа позволяет прогнозировать рецидив угрожающего выкидыша во втором триместре гестации, что позволит выбрать правильную тактику ведения беременной женщины, позволит снизить частоту данного осложнения. 1 табл., 4 пр.

Способ контроля эффективности облучения донорской крови с помощью реакции активации лимфоцитов фитогемагглютинином // 2589281

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для контроля эффективности облучения донорской крови. Способ включает постановку реакции бласттрансформации клеток крови с митогеном фитогемагглютинином и учет результатов реакции путем определения индекса стимуляции лимфоцитов. Постановку реакции проводят в отношении облученной донорской крови, учет результатов выполняют с помощью проточного цитофлюориметра с использованием моноклональных антител, меченных разными флюорохромами, проведением гейтирования активированных лимфоцитов со сниженной экспрессией общелейкоцитарного маркера CD45 и определением среди них процента дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8-, при этом в качестве контроля берут необлученный образец той же крови. После чего определяют эффективность облучения по соотношению содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в проверяемой облученной и той же необлученной контрольной крови как Эоб=Сднтло-Сднтлк, где Эоб - эффективность облучения, Сднтло - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в опыте (в проверяемой облученной крови), Сднтлк - процент содержания дубль-негативных Т-лимфоцитов с иммунофенотипом CD3+CD4-CD8- в контроле (в необлученном образце той же крови). При разнице с контролем более чем в 50% делают вывод о функциональной неполноценности Т-лимфоцитов в облученной крови и иммунологической безопасности данного препарата крови для реципиента. Использование данного способа позволяет определять эффективность облучения донорской крови методом проточной цитометрии.

Способ прогнозирования угрожающего позднего выкидыша у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе // 2592241

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и позволяет прогнозировать угрожающий поздний выкидыш у беременных женщин. Для этого в сроке 5-12 недель гестации определяют относительное количество CD178+ моноцитов гестации в периферической венозной крови. При его значении равном 37,7% или менее в моноцитарном гейте прогнозируют угрожающий поздний выкидыш у женщин с угрозой прерывания беременности ранних сроков и привычным невынашиванием в анамнезе. Использование данного способа позволяет выбрать правильную тактику ведения беременности, провести комплекс лечебно-профилактических мероприятий и снизить риск развития осложнений и неблагоприятных исходов беременности в группе женщин с высоким риском невынашивания беременности. 3 пр., 1 табл.

Способ выбора тактики ведения беременных с плацентарной недостаточностью и синдромом задержки роста плода /сзрп/ // 2595884

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается выбора тактики ведения беременных с плацентарной недостаточностью и синдромом задержки роста плода (СЗРП). Для этого у пациенток с фетоплацентарной недостаточностью и ЗРП в сыворотке крови иммуноферментным методом определяют активность супероксиддисмутазы, содержание фактора роста плаценты, эндоглина и мелатонина. По этим показателям рассчитывают прогностический коэффициент П по формуле: П=(0,0001*COD+0,0255*Mel+0,1636*CD105+(-0,0487*PGF)-8,5389, где COD - супероксиддисмутаза, пг/мл, Mel - мелатонин, пг/мл, CD 105 - эндоглин, пг/мл, PGF - фактор роста плаценты, пг/мл. При величине П равной 0,64 и более прогнозируют высокий риск развития критического состояния плода в антенатальном периоде, что требует завершения беременности путем операции кесарево сечение в экстренном порядке в интересах плода. Способ обеспечивает повышение точности прогнозирования критического состояния плода антенатально, что позволяет своевременно выбрать адекватную тактику ведения пациентки. 2 пр.

Способ дифференциальной экспресс-диагностики острых вирусных и бактериальных инфекций // 2602677

Изобретение относится к области медицины, а именно к отоларингологии, и может быть использовано для дифференциальной экспресс-диагностики острых вирусных и бактериальных тонзиллитов у взрослых. Для этого проводят забор периферической крови и определяют относительное содержание субпопуляций нейтрофильных гранулоцитов, одновременно экспрессирующих CD16, CD11b на поверхностной мембране. Принимают за норму наличие субпопуляции CD16brightCD11bdimНГ% от 80 и до 99,9% с высокой плотностью экспрессии CD16 и низкой плотностью экспрессии CD11b. При условии выявления субпопуляции CD16brightCD11bbrightНГ или CD16dimCD11bbrightНГ в количестве от 40% и более определяют соответственно острую вирусную инфекцию или острую бактериальную инфекцию. Использование данного способа позволяет обеспечить точность дифференциальной диагностики острых вирусных и бактериальных тонзиллитов у взрослых. 3 пр., 1 табл.

Способ одновременного выявления представителей условных таксономических групп микроорганизмов и устройство иммунохроматографического анализа для его реализации // 2614689

Группа изобретений относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использована для одновременного выявления представителей условных таксономических групп микроорганизмов, патогенных для человека и животных. Характеризуется использованием как минимум пяти иммунохроматографических стрип-тестов, размещенных в едином корпусе. При этом в первом и втором каналах корпуса устройства находятся стрип-тесты для выявления токсинов, в третьем канале - стрип-тест для выявления вегетативных форм бактерий, в четвертом - споровых форм бактерий, а в пятом - стрип-тест для выявления питательной среды культивирования вирусов и риккетсий. Тестирование ведут путем укладки корпуса иммунохроматических стрип-тестов в теплоизолирующий цефленовый пакет, состоящий из двух слоев цефлена, с теплоизолирующей прокладкой из пористого теплоизолирующего материала между ними, а корпус иммунохроматографических стрип-тестов внутри пакета нагревают источником постоянного тепла, причем отверстие пакета закрывают механическим зажимом и считают этот момент началом тестирования. Также предложено устройство для иммунохроматографического анализа. Группа изобретений позволяет увеличить производительность иммунохроматографического анализа, расширить температурный диапазон иммунохроматографического анализа от минус 20 до плюс 50°C, сократить время получения результата до 10 мин по сравнению с анализом при комнатной температуре (20 мин), при условии достижения одинаковой чувствительности, повысить чувствительность анализа по сравнению с анализом, проводимым при комнатной температуре. 2 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 8 пр.

Способы и средства для мониторинга нарушения тканевого гомеостаза в организме // 2635767

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для ранней диагностики и мониторинга заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов. Способ включает этапы: a) обеспечения биологического образца для тестирования от указанного субъекта, причем указанный образец содержит циркулирующие тканевые макрофаги (СТМ); b) окрашивания указанных СТМ с использованием панели дифференциально меченых различных антител против опорных маркеров CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR с целью идентификации и подсчета различных субпопуляций СТМ; c) фиксации, пермеабилизации и окрашивания СТМ с использованием одного или нескольких антител для обнаружения против одного или более эпитопов по меньшей мере одного протеазо-индуцированного фрагмента белка, полученного в результате внутриклеточной деградации не принадлежащего СТМ белка, отдельными СТМ в тканях, из которых они происходят, тем самым идентифицируя по меньшей мере одну субпопуляцию циркулирующих тканеспецифических макрофагов (CTSM). Далее проводят анализ с применением многопараметрической проточной цитометрии указанных окрашенных СТМ и CTSM путем селективного пропускания по опорным маркерам CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR с целью определения количества сигналов каждого определенного меченого антитела, связанного с отдельными клетками. Определяют относительное и абсолютное количество отдельных клеток в каждой субпопуляции СТМ и каждой специфической субпопуляции CTSM, экспрессирующих каждый из измеренных внутриклеточных эпитопов. Расчет относительного и абсолютного количества клеток проводят в каждой субпопуляции СТМ и каждой специфической субпопуляции CTSM, каждое из которых происходит из различных нормальных и измененных тканей, что определяют с помощью оцениваемого набора отдельных протеазо-индуцированных фрагментов белка. Проводят определение количества связанного с антителами сигнала, ассоциированного с каждым отдельным оцениваемым внутриклеточным пептидом, с целью получения профиля окрашивания CTSM. А также сравнивают тестируемый профиль окрашивания CTSM с нормальным профилем окрашивания CTSM для каждой оцениваемой ткани, причем повышенное количество CTSM свидетельствует о наличии заболевания. Группа изобретений относится также к набору для ранней диагностики и мониторинга заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов. Использование данной группы изобретений позволяет проводить раннюю диагностику и мониторинг заболевания у субъекта с использованием циркулирующих тканевых макрофагов по опорным маркерам CD14, CD16, CD300e, CD36 и HLADR. 2 н. и 21 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр., 7 ил.