Способ прогнозирования тяжелого течения увеальной меланомы


G01N1/28 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2705417:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Для прогнозирования тяжелого течения увеальной меланомы проводят патоморфологическое исследование микроокружения опухоли энуклеированного глаза. При выявлении в нем 6 и более тучных клеток и наличии опухолевых клеток в просвете хотя бы одного эмиссария прогнозируют тяжелое течение увеальной меланомы. Способ обеспечивает повышение точности определения тяжести течения увеальной меланомы за счет проведения патоморфологического исследования. 2 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно, к офтальмологии и предназначено для прогнозирования тяжелого течения увеальной меланомы.

Увеальная меланома (УМ) - злокачественная опухоль нейроэктодермального происхождения, часто встречающаяся среди людей трудоспособного возраста и склонная к раннему метастазированию [Офтальмоонкология. Под ред. Бровкиной А.Ф. М: Издательство Медицина; 2002., Офтальмология. Клинические рекомендации. Под ред. Нероева В.В. ГЭОТАР-Медиа, 2019]. В РФ частота УМ колеблется от 6,2 до 8 новых случаев на 1 млн. населения в год [Офтальмоонкология. Под ред. Бровкиной А.Ф. М.: Издательство Медицина; 2002.].

Среди разнообразных направлений исследований в фундаментальной онкологии в последние два десятилетия большое внимание уделяют изучению микроокружения (МО) опухолей [Бережная Н.М. Роль системы иммунитета в микроокружении опухоли. I. Клетки и цитокины - участники воспаления. Онкология.2009; 11 (1): 6-17; Борисов К.Е., Сакаева Д.Д. Опухолевое микроокружение как мишень терапии злокачественных глиом. Диагностика и лечение опухолей. 2015; (4): 14-23]. По мнению отечественных и зарубежных ученых МО принимает активное участие в жизнедеятельности опухоли, обеспечивая рост, пролиферацию и миграцию злокачественных клеток [Mantovani Д., Romero P., Palucka А. К., Marincola F.M. Tumour immunity: effector response to tumour and role of the microenvironment. Lancet. 2008; 371 (9614): 771-83.]. Большинство разработок в области таргетирования опухолевого МО находятся на ранних стадиях, однако новые тенденции изменения парадигмы противоопухолевого лечения с обязательным включением в него препаратов, воздействующих не только на собственно опухоль, но и на клетки МО, начинают приобретать все большее значение [Fidler I.J., Kim S.J., Langiey R.R. The role of the organ microenvironment in the biology and therapy of cancer metastasis. J. Cell Biochem. 2007; 101 (4): 927-36.].

Тучные клетки (TK) - популяция, впервые описанная P. Erlich в 1877 г., являются одним из компонентов опухолевого МО [Ehrlich P. Beitrag zur Kenntnis der Anilinfar-bungen und ihrer Verwendung in der mikro-skopischen Technik. Arch. mikr. Anat. 1877; 13: 263]. TK происходят из костномозговых предшественников - стволовых клеток CD34, которые мигрируют из крови в ткани под влиянием фактора роста стволовых клеток при участии адгезивных молекул и прикрепляются к сосудистой стенке. Это обеспечивает им контакт с нервными окончаниями и эндотелием капилляров [Бережная НМ, Сепиашвили РИ. Тучные клетки. Иммунология и аллергология. 2003; 4 (3): 29-38]. В нормальных тканях ТК дифференцируются в коже, серозных полостях, являются обязательным компонентом соединительной ткани, располагаясь преимущественно вокруг мелких артериальных и лимфатических сосудов. Клетки могут быть округлыми, овальными, иногда веретеновидными при расположении между коллагеновыми волокнами и редко отростчатой формы. Ядро - округлое или овальное, часто гиперхромное. Важнейшей особенностью тучных клеток является множественность продуктов их секреции и многонаправленность действия, что создает в целом их полифункциональность. В цитоплазме определяются эозинофильно окрашивающиеся гранулы, которые, по данным исследований некоторых ученых, содержат гепарин, гистамин, серотонин, протеолитические ферменты, простагландины [Быков В.Л. Секреторные механизмы и секреторные продукты тучных клеток. Морфология. 1999; 2:64-72].

По мнению одних авторов, ТК могут стимулировать рост опухолей, усиливать их ангиогенез за счет своих медиаторов (гепарина, интерлейкина-8, сосудистого эндотелиального фактора роста), которые выделяются в результате клеточной дегрануляции [Ribatti D., Crivellato Е., Roccaro A.M., Ria R., Vacca A. Mast cell contribution to angiogenesis related to tumour progression. Clin Exp Allergy. 2004; 34 (11): 1660-4. https://doi.org/10.1111365-2222.2004.02104.x]. При этом происходит расщепление коллагена базальной мембраны за счет протеаз и металлопротеиназ, что облегчает перемещение эндотелиальных клеток при образовании новых сосудов. Кроме того, усилению ангиогенеза может способствовать аденозин, рецепторы к которому экспрессируют ТК [Feoktistov I., Goldstein А.Е., Ryzhov S., Biaggioni I. Mast cell-mediated stimulation of angiogenesis: cooperative interaction between A2B and A3 adenosine receptors. Circ. Res. 2003; 92 (5): 485-92. https://doi.org/10.1161/01.RES.0000061572.10929.2D].

Гепарин TK обладает антикоагулянтными свойствами, предотвращает образование тромбов в сосудах, активирует металлопротеиназы и является активатором плазминогена, что способствует процессу метастазирования [Ch'ng S., Wallis R., Yuan L., Davis P., Tan S.T. Mast cells and cutaneous malignancies. Mod Pathol. 2006; 19 (1): 149-59. https://doi.org/149-59. 10.1038/modpathol.3800474]. Кроме того, взаимодействие секрета ТК с клетками опухоли, вызывает увеличение продукции IL-17, обладающего иммуносупрессивным действием [Bi Y., Liu G., Yang R. Th17 cell induction and immune regulatory effects. J. Cell Physiol. 2007; 211 (2): 273-8. https://doi.Org/10.1002/jcp.20973].

Инфильтрация TK характерна для многих опухолей: меланомы, нейросаркомы, карциномы легкого, яичника и многих других [Ribatti D., Ennas M.G., Vacca A., Ferreli Р., Nico В., Orra S., Sirigu P. Tumor vascularity and tryptase-positive mast cells correlate with a poor prognosis in melanoma. Eur. J. Clin. Invest. 2003; 33 (5): 420-5. https://doi.org/10.1046/j.1365-2362.2003.01152.x]. В настоящее время количество работ, посвященных изучению ТК в микроокружении УМ, единичны [Bronkhorst I.H.G., Jager M.J. Inflammation in uveal melanoma. Eye (Lond). 2013; 27(2):217-23], а для прогноза течения заболевания их наличие и количество не оценивали.

Известны способы прогнозирования течения увеальной меланомы по уровню показателей сыворотки крови и слезной жидкости: интерферона-гамма (RU 2157998, 20.10.2000); фактора некроза опухоли альфа (RU 2193200, 20.11.2002); по иммуногистохимическому анализу клеток удаленной опухоли с определением процента иммунопозитивных клеток, экспрессирующих рецептор Flt в ядре (RU 2193200, 20.11.2002). Однако эти способы являются довольно трудоемкими и дорогостоящими.

Известен способ прогнозирования течения увеальной меланомы на основе данных ультразвукового исследования в В-режиме с биометрическим определением элевации опухоли, в режиме цветового картирования или энергетической допплерографии - степени васкуляризации меланомы, в режиме спектральной допплерографии - средней величины периферического сосудистого сопротивления в новообразованном русле с вычислением суммарной кодовой величины по определенной формуле (RU 2280410, 27.07.2006). Данный способ принят за ближайший аналог.

Задачей настоящего изобретения является разработка прогнозирования тяжелого течения УМ на основе патоморфологических исследований.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности определения тяжести течения увеальной меланомы за счет патоморфологического исследования для выбора дальнейшей тактики лечения.

Технический результат достигается за счет проведения патоморфологического исследования и выявления наличия тучных клеток в микроокружении УМ в сочетании с распространением опухолевых клеток в просветах эмиссариев склеры.

Нами были изучены 43 энуклеированных глаза с УМ (260 гистологических препаратов). Возраст пациентов составил от 35 до 65 (в среднем 54±2,7) лет. Определен патоморфологический тип УМ: эпителиоидноклеточная (n=9; 20,9%), веретеноклеточная тип АВ (n=15; 34,9%), смешанноклеточная (n=19; 44,2%). Проминенция опухоли составила от 1,5 до 7,1 мм (в среднем 4,7±1,3), диаметр основания от 1,5 до 16,5 мм (в среднем 13,5±3,3). При этом опухоли T1N0M0 (6 глаз) локализовались юкстапапиллярно с вовлечением диска зрительного нерва, что потребовало энуклеации. По локализации опухолевого узла значительно преобладали опухоли хориоидеи (n=40; 93%), опухоли иридоцилиохориоидальной зоны наблюдались только у трех пациентов (n=3; 7%). По степени пигментации выделяли слабо пигментированные (n=16; 37,2%), умеренно пигментированные (n=7; 16,3%), густо пигментированные (n=20; 46,5%) опухоли. Все 43 пациента, глаза которых исследовали после энуклеации, до операции лечения не получали.

ТК в микроокружении УМ морфологически представляли собой полиморфные клетки округлой и овальной формы, с округлым гиперхромным ядром, с наличием розовых цитоплазматических гранул. При окрашивании специфическим красителем толуидиновым синим ТК проявлялись ярко-синим цветом, ткань меланомы - зеленым. Они локализовались не только непосредственно вокруг опухолевого узла, но и на некотором отдалении от него в строме хориоидеи.

По результатам исследования в зависимости от числа ТК в микроокружении УМ мы выделили две степени их накопления: 1-я степень -1-5 клеток, 2-я степень - 6 и более клеток. И при 2-й степени накопления ТК и наличия опухолевых клеток в просвете хотя бы одного эмиссария отмечали склонность к метастазированию, то есть тяжелое течение УМ.

Патоморфологическое исследование проводили следующим образом. Энуклеированные глаза фиксировали в 10% забуференном формалине. После вскрытия глазного яблока центральную колодку и кусочек опухоли из боковой колодки пускали в проводку в автоматический тканевой процессор для проведения обезвоживания и затем заключали в парафин с использованием современной станции для заливки в парафин с микропроцессорным управлением (фирма Leica, Germany). После микротомии парафиновые срезы (5-6 мкм) окрашивали гематоксилин-эозином и пикрофуксином по методу Ван-Гизона. Кроме того, проводили специальное окрашивание срезов специфическим красителем для выявления ТК - толуидиновым синим Гистологические исследования проводили с помощью микроскопической системы фирма Leica, Germany с увеличением от 50 до 630 раз.

Способ осуществляют следующим образом

Проводят патоморфологическое исследование микроокружения опухоли энуклеированного глаза. При выявлении в нем 6 и более тучных клеток и наличии опухолевых клеток в просвете хотя бы одного эмиссария прогнозируют тяжелое течение увеальной меланомы.

Пример 1. Пациент В., 57 лет обратился с жалобами на появление искажения формы предметов перед правым глазом.

Проведенные офтальмологические исследования:

Визометрия: Visus OD - 0,5 н.к.,

VisusOS - 1,0.

Тонометрия: ВГД OD -16 мм. рт.ст., OS - 16 мм. рт.ст.

Биомикроскопия: OD - спокоен, среды прозрачны,

Прямая офтальмоскопия:

OD - На глазном дне - ДЗН бледно-розовый, границы четкие. Юкстапапиллярно с распространением на ДЗН зоне по меридианам с 11 до 13 часов определяется проминирующее образование аспидного цвета, с нечеткими, неровными границами, гладкой поверхностью. Вторичная отслойка сетчатки.

OS - ДЗН бледно-розовый, границы четкие. В макулярной зоне - рефлекс четкий. На периферии очаговой патологии не выявлено. Эхография:

OD - «+» - ткань с проминенцией 2,5 мм, диаметром основания 10 мм,

OS - «+» - ткань не определяется.

В связи с папиллярной локализацией опухоли независимо от ее размеров по данным УЗИ, проведена энуклеация правого глаза.

Проведены патоморфологические исследования. Выявлен смешанноклеточный тип УМ, в микроокружении опухоли диагностировано 6 и более ТК с выявлением опухолевых клеток в просвете эмиссария, что свидетельствовало о дальнейшем тяжелом течении УМ. Наблюдение за больным показало, что через 3 года после энуклеации появились метастазы в печени.

Пример 2. Пациент П., 46 лет обратился с жалобами на появление искажения формы предметов перед правым глазом.

Проведенные офтальмологические исследования:

Визометрия: Visus OD - 0,2 н.к.,

VisusOS - 1,0.

Тонометрия: ВГД OD - 18 мм. рт.ст., OS - 18 мм. рт.ст.

Биомикроскопия: OD - спокоен, среды прозрачны,

Прямая офтальмоскопия:

OD - На глазном дне - ДЗН бледно-розовый, границы четкие. Юкстапапиллярно с распространением на зону ДЗН по меридианам с 12 до 15 часов определяется проминирующее образование аспидного цвета, с нечеткими, неровными границами, гладкой поверхностью. Вторичная отслойка сетчатки над опухолью и в нижних отделах глазного дна.

OS - ДЗН бледно-розовый, границы четкие. В макулярной зоне - рефлекс четкий. На периферии очаговой патологии не выявлено.

Эхография:

OD -«+»- ткань с проминенцией 4,5 мм, диаметром основания 16 мм,

OS -«+» - ткань не определяется.

В связи с папиллярной локализацией опухоли независимо от ее размеров по данным УЗИ, проведена энуклеация правого глаза.

Проведены патоморфологические исследования. Выявлен смешанноклеточный тип УМ, в микроокружении опухоли диагностирована 1 тучная клетка с выявлением опухолевых клеток в просвете эмиссария. Наблюдение за больным в течение 3 лет показало, что метастазы в печени отсутствовали, что указывает на адекватность прогнозирования тяжести течения УМ предложенным способом.

Полученные данные указывают на необходимость проведения прогнозирования тяжелого течения УМ для выбора соответствующей тактики лечения.

Таким образом, способ позволяет более точно оценить течение УМ с целью прогнозирования заболевания.

Способ прогнозирования тяжелого течения увеальной меланомы, отличающийся тем, что проводят патоморфологическое исследование микроокружения опухоли энуклеированного глаза и при выявлении в нем 6 и более тучных клеток и наличии опухолевых клеток в просвете хотя бы одного эмиссария прогнозируют тяжелое течение увеальной меланомы.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и представляет собой способ определения тактики ведения пациенток с умеренными диспластическими изменениями шейки матки, заключающийся в том, что выполняют прицельную точечную биопсию шейки матки, проводят иммуногистохимическое исследование с определением экспрессии маркеров Ki-67 и CK7, затем по формуле рассчитывают принадлежность пациентки к нижней или верхней подгруппе группы CIN 2: где ƒ1(ai)=0,266⋅Х1+0,067⋅Х2-12,519; ƒ2(ai)=0,134⋅Х1+0,019⋅Х2-3,472; Х1 – значение Ki-67; Х2 – значение CK7; «0» – верхняя подгруппа CIN 2; «1» – нижняя подгруппа CIN 2; пациенткам верхней группы CIN 2 прогнозируют прогрессию изменений до более тяжелой степени CIN 3 и CIS и рекомендуют выполнение эксцизии шейки матки, пациенткам нижней группы CIN 2 прогнозируют регресс изменений до более легкой степени CIN 1 и рекомендуют наблюдение в течение 18 месяцев с последующим решением о целесообразности выполнения эксцизии шейки матки.

Область использования изобретения - исследования физических свойств снежного покрова. Сущность изобретения заключается в том, что выполняют закладку снежного шурфа прямоугольного сечения, затем с помощью жесткой прямоугольной темной пластины-экрана, высотой выше исследуемого снежного покрова, на расстоянии не более 5 см от края фронтальной стенки шурфа, вертикально отделяют снежный блок in situ.

Изобретение относится к области контроля загрязнений окружающей среды и представляет собой способ определения соединений антихолинэстеразного действия в воде и водных экстрактах, включающий измерение скорости ферментативного гидролиза бутирилтиохолина, согласно изобретению при приготовлении проб используют ферментный препарат, на основе совместно иммобилизованных бутирилхолинэстеразы и индикатора на тиоловую группу 5,5'-дитио-бис(2-нитробензойную кислоту), в качестве растворителя – дистиллированную воду, выдерживают обе пробы в течение 30-300 секунд в присутствии 18-20 единиц активности α-амилазы, запускают реакцию раствором S-бутирилтиохолина-I (S-BuCh-I), причем соотношение объемов раствора S-BuCh-I в концентрации 2 мМ и контрольного или анализируемого раствора составляет 1:10, измеряют скорость ферментативного гидролиза субстрата, при этом критерием наличия ингибиторов бутирилхолинэстеразы в анализируемой пробе является снижение на 20% и более величины скорости ферментативного гидролиза бутирилтиохолина по сравнению с данным параметром в контрольной пробе.

Группа изобретений относится к ускоренному и высокочувствительному способу обнаружения бактериальных патогенов. Раскрыт способ обнаружения бактерий, включающий обеспечение одной или более чем одной суспензии, причем каждая содержит по меньшей мере один вид меченых тестируемых бактериофагов, которые специфично связываются с видом бактерий, подлежащим обнаружению; добавление образца, подлежащего проверке на наличие по меньшей мере одного вида бактерий; фильтрацию полученной реакционной смеси; обнаружение комплексов бактерии-бактериофаги в концентрате; обнаружение несвязанных бактериофагов в фильтрате; обработку полученных сигналов, сгенерированных в результате обнаружения, и вывод результатов обнаружения пользователю.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу определения антагонистической активности штаммов бактерий в отношении Pseudomonas aeruginosa, включающему культивирование Pseudomonas aeruginosa и тестируемых штаммов на питательных средах, отличающемуся тем, что выявление антагонистической активности тестируемых штаммов осуществляют путем оценки продукции оксифеназинов P.
Изобретение относится к области медицины, в частности к дерматовенерологии, и предназначено для прогнозирования риска развития атопического дерматита у детей. В сыворотке крови определяют уровень эндотелина-1 и при его содержании более 0,62 фмоль/мл прогнозируют высокий риск развития атопического дерматита.

Изобретение может быть использовано при контроле включений и выделений, присутствующих в металлических материалах. Для извлечения частиц соединения металла из металлического материала путем травления металлического материала в электролитическом растворе используют электролитический раствор на основе неводного растворителя, содержащий реактив, который образует содержащий металл M' комплекс.

Изобретение относится к космической технике, в частности к инструментам и приспособлениям, используемым космонавтом в процессе внекорабельной деятельности, а также в наземных условиях оператором в обычной одежде для широкого спектра объектов.
Изобретение относится к медицине, в частности стоматологии, морфологии, гистологии, и может применяться для морфологических исследований эмали зубов в пределах поверхностного слоя в атомно-силовом и инвертированном микроскопах.

Изобретение относится к области иммунологии, биотехнологии и клинической лабораторной диагностики и может найти применение для определения индивидуальных рисков возникновения заболеваний, связанных с воздействием химических канцерогенов окружающей среды.

Изобретение относится к области медицины, в частности кардиологии, лучевой диагностике и может быть применено для прогнозирования риска развития атеросклеротических изменений сосудов.

Изобретение относится к области медицины, в частности кардиологии, лучевой диагностике и может быть применено для прогнозирования риска развития атеросклеротических изменений сосудов.

Изобретение относится к медицине, а именно к обработке данных для специальных применений. Предъявляют информацию в текстовой, аудио, видео форме.

Изобретение относится к ветеринарии, акупунктуре и онкологии и может быть использовано для лечения неопластических процессов, диагностированных ранее в органах собаки или кошки, проходящей или не проходящей в настоящее время другое лечение.

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, дерматовенерологии и иммунологии и может быть использовано для лечения урогенитального кандидоза. Для этого осуществляют орошение области влагалища, шейки матки и вульвы ультраозвученным 0,9% раствором хлорида натрия температурой 37°С, амплитудой акустических колебаний - 25 мкм, частотой акустических колебаний - 29 кГц, временем воздействия 5 минут.

Изобретение относится к области медицины, в частности кардиологии, лучевой диагностике, и может быть использовано для прогнозирования риска развития атеросклеротических изменений сосудов.

Изобретение относится к системе для медицинского вмешательства с контролем изображений. Система контроля изображений, сконфигурированная для поддержания объединенных процедур биопсии и лечения, используя контроль изображения для доставки иглы из некоторого определенного местоположения до заданного конечного местоположения в исследуемом субъекте, причем система контроля изображений содержит систему медицинской визуализации, сконфигурированную для получения медицинских изображений исследуемой области в исследуемом субъекте, причем медицинские изображения используются для определения текущего положения заданного конечного местоположения, систему наведения иглы, сконфигурированную для задания положения иглы в пространстве и тем самым контроля заданного местоположения и сконфигурированную для наведения иглы для биопсии и иглы для лечения в исследуемой области, блок калибровки для определения параметров калибровки и тем самым согласования системы наведения иглы с медицинскими изображениями до биопсии, систему пользовательского интерфейса, сконфигурированную для поддержания и процедуры биопсии, и процедуры лечения так, чтобы размещение пациента выполнялось только однажды для обеих процедур.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и лучевой терапии, и может быть использовано для лечения базально-клеточного рака кожи. Для этого осуществляют визуальный осмотр пациента.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, гинекологии и рефлексотерапии, и может быть использовано для коррекции ангиогенного дисбаланса у женщин с ановуляторным менструальным циклом, обусловленным персистенцией преовуляторного фолликула.

Изобретение относится к области медицины, а именно урологии, онкоурологии, и может быть использовано для предоперационного планирования и определения объема интраоперационной кровопотери при проведении органосохраняющих операций при опухолях паренхимы почек.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии. Для прогнозирования тяжелого течения увеальной меланомы проводят патоморфологическое исследование микроокружения опухоли энуклеированного глаза. При выявлении в нем 6 и более тучных клеток и наличии опухолевых клеток в просвете хотя бы одного эмиссария прогнозируют тяжелое течение увеальной меланомы. Способ обеспечивает повышение точности определения тяжести течения увеальной меланомы за счет проведения патоморфологического исследования. 2 пр.

Наверх