Ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа, высвобождающий оксид азота

Изобретение относится к соединению формулы (I) или (II) или его стереоизомеру или фармацевтически приемлемой соли, где R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу: -C(O)-(O-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂, где y равен 1 или 0; р равен 1 или 0; q равен 1 или 0; m равен целому числу от 1 до 10; n равен целому числу от 1 до 6; R₂ представляет собой этил или н-пропил; R₃ представляет собой метил или этил; при условии что, когда в формуле (I) R₂ представляет собой этил, тогда R₃ представляет собой метил, или когда R₂ представляет собой н-пропил, тогда R₃ представляет собой этил. Изобретение также относится к офтальмологической композиции, обладающей активностью ингибитора фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5), на основе соединения формулы (I) или (II). Технический результат – получены новые соединения и офтальмологическая композиция на их основе, которые могут найти применение в медицине для лечения глазного состояния, ассоциированного с повышенным внутриглазным давлением, такого как глазная гипертензия, глаукома или ретинопатии. 2 н. и 15 з.п. ф-лы, 7 табл., 31 пр.

 

Данное изобретение относится к ингибиторам фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5), высвобождающим оксид азота. В данном изобретении также предложены композиции и способы лечения глазного состояния, ассоциированного с повышенным внутриглазным давлением, такого как глазная гипертензия и глаукома.

Глаукома представляет собой прогрессирующее заболевание, которое приводит к повреждению зрительного нерва и, в конечном счете, к полной потере зрения. Поскольку существует хорошая корреляция между контролем внутриглазного давления и профилактикой/уменьшением глаукоматозного повреждения у пациентов с POAG (первичная открытоугольная глаукома), было разработано несколько терапевтических агентов для лечения глазной гипертензии (Heijl A. et al. Arch Ophthalmol. 2002; 120: 1268-1279; Garway Heath et al. The Lancet 2015; 385: 1295-1304; Heijl A. The Lancet 2015; 385: 1264-1266).

Известно, что повышенное внутриглазное давление можно по меньшей мере частично контролировать введением лекарственных средств, которые либо увеличивают отток внутриглазной жидкости из глаза, таких как аналог простагландина (такой как латанопрост, биматопрост), либо уменьшают выработку внутриглазной жидкости в глазу, таких как бета-блокаторы (такие как тимолол, бетаксолол, левобунолол) и ингибиторы карбоангидразы (такие как ацетазоламид, дорзоламид или бринзоламид).

К сожалению, многие из лекарственных средств, обычно используемых для лечения глазной гипертензии, имеют ряд побочных эффектов. Например, терапия простагландинами вызывает раздражение глаз и гиперемию различной степени тяжести и продолжительности. Бета-блокаторы вызывают серьезные легочные побочные эффекты, депрессию, усталость, спутанность сознания, импотенцию, выпадение волос, сердечную недостаточность и брадикардию.

Побочные эффекты, ассоциированные с ингибиторами карбоангидразы, включают усталость, анорексию, депрессию, парестезии и нарушения электролитного баланса сыворотки крови.

Известно, что оксид азота (NO) играет важную роль во многих физиологических процессах; в частности, в глазу оксид азота играет важную роль в физиологической регуляции внутриглазного давления, облегчая отток внутриглазной жидкости из трабекулярной сети шлеммова канала (Cavet et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2014, 5005-5015).

Несколько исследований показали, что доноры NO снижают внутриглазное давление за счет увеличения трабекулярной сети и оттока внутриглазной жидкости из шлеммова канала.

На клеточном уровне оксид азота связывается с растворимым ферментом гуанилатциклазой (sGC) и увеличивает продукцию циклического гуанозинмонофосфата (cGMP) в трабекулярной сети и в тканях шлеммова канала, где он активирует ряд механизмов, облегчающих обычный дренаж внутриглазной жидкости для окончательного снижения внутриглазного давления (Cavet et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2014, 5005-5015).

Например, в патенте США No. 4590207 раскрыт офтальмологический раствор, содержащий мононитрат изосорбида в качестве активного ингредиента для лечения и/или предупреждения глазной гипертензии и глаукомы.

В ЕР 2993172 В1 раскрыты высвобождающие оксид азота аналоги карнозина для применения в лечении и/или профилактике глаукомы и глазной гипертензии. Результаты исследований на животных моделях показали, что высвобождающие оксид азота аналоги карнозина обладают более сильным эффектом снижения IOP (внутриглазного давления) по сравнению с мононитратом изосорбида (5-ISMN) и что эффект снижения IOP сохраняется вплоть до приблизительно 2 часов после местного введения.

В WO 2014/063923 раскрыты соединения-доноры оксида азота на основе хиноновой структуры и их применение в лечении и/или профилактике глаукомы и глазной гипертензии.

В целом, однако, соединения-доноры NO, которые не требуют активации эндогенными ферментами, как правило, быстро высвобождают оксид азота; в результате быстрой скорости высвобождения оксида азота трудно доставлять достаточные количества NO в ткани-мишени в течение длительных периодов времени.

Один из потенциальных методов обеспечения продолжительной эффективности требует многократного введения донора NO; однако, этот метод лечения подвергает пациентов потенциально более высокой предрасположенности побочным эффектам по сравнению со схемой однократного глазного введения. Избыток NO может вызывать нежелательные эффекты, включая окислительный стресс и биосинтез маркеров воспаления (Colasanti & Suzuki, Trends Pharmacol Sci. 2000 21:249-252).

Другим потенциальным методом обеспечения непрерывной долговременной активности является снижение разложения циклического гуанозинмонофосфата (cGMP) ингибитором фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5).

В предшествующем уровне техники предполагается использование комбинации циклического ингибитора фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5) и донора оксида азота (NO) для лечения глаукомы или глазной гипертензии; например, в US 2002/0168424 раскрыто местное лекарственное средство для лечения глаукомы, которое содержит смесь донора оксида азота (NO), такого как нитровазодилататоры миноксидил, нитроглицерин, L-аргинин, изосорбида динитрат или нитропруссид, и ингибитора фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5), такого как силденафила цитрат. Эта комбинация усиливает циркуляцию крови к зрительному нерву и обладает глазной гипотензивной активностью.

В US 2002/0168424 не раскрыто никаких экспериментальных данных, связанных с активностью этих комбинаций в снижении внутриглазного давления, и не предложено эффективных доз используемых индивидуальных соединений.

В WO 2017/085056 раскрыты агенты двойного фармакологического действия NO-высвобождающие ингибиторы PDE5, которые полезны в лечении ряда заболеваний, где происходит нарушение баланса cGMP и/или ингибирование PDE считается полезным, в частности, для лечения пациентов с сахарным диабетом; глаукома упоминается в перечне большого количества предпочтительных заболеваний.

В данных агентах двойного фармакологического действия NO-высвобождающих ингибиторах PDE5 предшественником оксида азота является нитрооксигруппа (ONO2), которая непосредственно связана с гидроксильной группой (нитроэфир) молекул ингибиторов PDE5.

В WO 2017/085056 раскрыты in vitro исследования на аортальных кольцах крыс, показывающие что NO-высвобождающие ингибиторы PDE5 способны активировать растворимую гуанилатциклазу и обладают более высокой ингибирующей PDE5 активностью по сравнению с известным ингибитором PDE5 силденафилом. Однако в WO 2017/085056 не раскрыто никаких экспериментальных данных, относящихся к активности снижения внутриглазного давления NO-высвобождающими ингибиторами PDE5.

Относительно ингибиторов фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5), также для этого класса соединений в предшествующем уровне техники предполагается их потенциальное терапевтическое применение в лечении глаукомы, например:

в US 4975428 раскрыто применение ингибитора PDE бемаринона в качестве агента для снижения внутриглазного давления;

в WO 01/60825 раскрыт ряд производных пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-она в качестве РОЕ5-ингибиторов; глаукома упоминается как одно из потенциальных терапевтических применений для этих соединений;

в ЕР 0463756 раскрыт ряд производных пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-она в качестве PDE5-ингибиторов как антиангинальных средств; глаукома упоминается среди ряда потенциальных терапевтических применений для этих соединений;

в ЕР 1074258 раскрыт способ лечения глаукоматозной невропатии зрительного нерва, ассоциированной с хронической глаукомой, хронической (идиопатической) открытоугольной глаукомы и дегенерации желтого пятна (сухой формы) путем системного (перорального или парентерального) введения PDE5-ингибиторов и, в частности, силденафила цитрата.

Таким образом, существует постоянная потребность в соединениях для использования в терапевтическом лечении глазных заболеваний, ассоциированных с повышенным внутриглазным давлением.

В настоящем изобретении предложены новые ингибиторы фосфодиэстеразы 5 типа, высвобождающие оксид азота (NO-PDE5), в которых предшественником оксида азота является NO-высвобождающая молекула (донор NO), связанная с ингибитором PDE5 посредством ферментативно расщепляемой связи.

Эти ингибиторы фосфодиэстеразы 5 типа, высвобождающие оксид азота (NO-PDE5), показали лучшую эффективность и более длительную продолжительность действия относительно либо сравнительного PDE5-ингибитора, либо NO-донора, о чем свидетельствует более высокое значение E_max (определяемое как эффект максимального снижения внутриглазного давления при данной дозе) и E_480min (снижение IOP в последний из анализированных моментов времени), наблюдаемое для NO-PDE5 и NO-донора, соответственно. Таким образом, ингибиторы фосфодиэстеразы 5 типа (NO-PDE5), высвобождающие оксид азота, как ожидается, обеспечат альтернативное лечение различных заболеваний и состояний, при которых желательно снижение внутриглазного давления, например, глаукомы, глазной гипертензии и других состояний, ассоциированных с повышенным глазным давлением.

Согласно данному изобретению предложены соединения формулы (I), их стереоизомеры или соли:

где:

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(O)-(O-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

где:

у равен 1 или 0;

р равен 1 или 0;

q равен 1 или 0;

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6;

n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2;

R₂ представляет собой этил или н-пропил;

R₃ представляет собой метил или этил;

при условии что когда R₂ представляет собой этил, тогда R₃ представляет собой метил, или когда R₂ представляет собой н-пропил, тогда R₃ представляет собой этил.

Когда у равен 0, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

Когда у равен 1, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (I), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где:

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(O)-(O-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

у равен 1 или 0;

р равен 1 или 0;

q равен 1 или 0;

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6;

n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2;

R₂ представляет собой н-пропил, и R₃ представляет собой этил.

Когда у равен 0, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

Когда у равен 1, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (I), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где:

R₂ представляет собой н-пропил, и R₃ представляет собой этил;

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(O)-(O-CH₂)_y(CH₂)_m-[О-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

у равен 0, и R₁ выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (I), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где:

R₂ представляет собой н-пропил, и R₃ представляет собой этил;

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

у равен 1, и R₁ выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (I), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где:

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

у равен 1 или 0;

р равен 1 или 0;

q равен 1 или 0;

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6;

n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2;

R₂ представляет собой этил, и R₃ представляет собой метил.

Когда у равен 0, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

Когда у равен 1, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (I), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где:

R₂ представляет собой этил, и R₃ представляет собой метил;

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

у равен 0, и R₁ выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (I), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где:

R₂ представляет собой этил, и R₃ представляет собой метил;

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

у равен 1, и R₁ выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (II), их стереоизомеры или соли

где R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

у равен 1 или 0;

р равен 1 или 0;

q равен 1 или 0;

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6;

n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2;

когда у равен 0, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

Когда у равен 1, R₁ предпочтительно выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (II), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

у равен 0, и R₁ выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (II), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

у равен 1, и R₁ выбран из группы, состоящей из:

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), стереоизомеры или соли указанных соединений, имеющие формулу

где:

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

у равен 1 или 0;

р равен 1 или 0;

q равен 1 или 0;

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6;

n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2;

R₂ представляет собой этил или н-пропил; R₃ представляет собой метил или этил;

при условии что, когда R₂ представляет собой этил, тогда R₃ представляет собой метил; когда R₂ представляет собой н-пропил, тогда R₃ представляет собой этил; и

при условии что, когда R₂ представляет собой этил и R₃ представляет собой метил, у равен 0, р и q равны 0, тогда m не равен 2.

Когда у равен 0, предпочтительные соединения формулы (Ib) представляют собой такие соединения, в которых R₁ выбран из группы, состоящей из радикалов формул (IIIa)-(IIIh):

Когда у равен 1, предпочтительные соединения формулы (Ib) представляют собой такие соединения, в которых R₁ выбран из группы, состоящей из радикалов формул (IVa)-(IVh):

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где R₁, у, р, q, m и n являются такими как определено выше, R₂ представляет собой этил, и R₃ представляет собой метил.

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), их стереоизомеры или соли

где:

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

у равен 1;

р равен 1 или 0;

q равен 1 или 0;

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6; n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2; R₂ представляет собой этил или н-пропил; R₃ представляет собой метил или этил;

при условии что, когда R₂ представляет собой этил, тогда R₃ представляет собой метил, и когда R₂ представляет собой н-пропил, тогда R₃ представляет собой этил.

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где р, q, m и n являются такими как определено выше, R₂ представляет собой этил, R₃ представляет собой метил, и R₁ выбран из группы, состоящей из радикалов формул (IIIa)-(IIIh), как определено выше.

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где р, q, m и n являются такими как определено выше, R₂ представляет собой этил, R₃ представляет собой метил, и R₁ выбран из группы, состоящей из радикалов формул (IVa)-(IVb), как определено выше.

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где R₁, у, р, q, m и n являются такими как определено выше, R₂ представляет собой н-пропил, и R₃ представляет собой этил.

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где р, q, m и n являются такими как определено выше, R₂ представляет собой н-пропил, R₃ представляет собой этил, и R₁ выбран из группы, состоящей из радикалов формул (IIIa)-(IIIh), как определено выше.

В еще одном воплощении данного изобретения предложены соединения формулы (Ib), их стереоизомеры или соли, как определено выше, где р, q, m и n являются такими как определено выше, R₂ представляет собой н-пропил, R₃ представляет собой этил, и R₁ выбран из группы, состоящей из радикалов формул (IVa)-(IVh), как определено выше.

В еще одном воплощении данного изобретения предложено соединение формулы (I) или (Ib) или его стереоизомеры или их фармацевтически приемлемые соли, выбранные из группы, состоящей из следующих соединений:

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-[2,3-бис(нитроокси)-пропокси]пропаноат (Соединение (1))

2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-2-(2-(нитроокси)этокси)ацетат (Соединение (2))

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)гексаноат (Соединение (3))

2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)гексаноат (Соединение (4))

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)гексилкарбонат (Соединение (5))

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)-гексилкарбонат (Соединение (6))

2-{4-[4-этокси-3-(5-метил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-1Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)бензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-5,6-бис(нитроокси)-гексаноат (Соединение (7)

2-{4-[4-этокси-3-(5-метил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-1Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)бензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-6-(нитроокси)гексаноат (Соединение (8))

2-{4-[4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)бензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-5,6-бис(нитроокси)-гексаноат (Соединение (7b))

2-{4-[4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)бензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-6-(нитроокси)гексаноат (Соединение (8b))

2-{4-[4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)бензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-3-[2,3-бис(нитроокси)-пропокси]пропаноат (Соединение 15)

В еще одном воплощении данного изобретения предложено соединение формулы (II) или его стереоизомеры или фармацевтически приемлемые соли, где указанное соединение формулы (II) выбрано из следующих соединений:

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноат (Соединение (9))

[(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)-метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-5,6-бис(нитроокси)-гексаноат (Соединение (10))

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-2-(2-(нитроокси)этокси)ацетат (Соединение (11))

[(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)-метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-3-[2,3-бис(нитроокси)-пропокси]пропаноат (Соединение (12))

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексилкарбонат (Соединение (13)

((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-5,6-бис(нитроокси)гексилкарбонат (Соединение (14))

В еще одном воплощении данного изобретения предложено соединение формулы (I), (Ib) или (II), выбранное из группы, состоящей из следующих соединений:

[(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)-метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-(5S)-5,6-бис(нитроокси)-гексаноат (Соединение (10)-(5S));

[(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)-метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)-пропокси]пропаноат (Соединение (12)-(2S));

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (9));

(S)-((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(5S)-5,6-бис(нитроокси)гексаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (10)-(5S));

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-2-(2-(нитроокси)этокси)ацетата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (11));

((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-3-((S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси)-пропаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (12)-(2S));

(S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-[2,3-бис(нитроокси)пропокси]-пропаноата цитрат (цитратная соль Соединения (1)-(2S));

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)гексаноата цитрат

(цитратная соль Соединения (4));

2-{4-[3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксибензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-[2-(нитроокси)этокси]ацетат 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновой кислоты (цитратная соль Соединения (2));

(S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)гексаноата цитрат (цитратная соль Соединения (3)-(5S));

(S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-(2,3-бис(нитроокси)пропокси)-пропаноата дигидрохлорид (HCl соль Соединения (1)-(2S));

((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(8)-5,6-бис(нитроокси)гексилкарбонат (Соединение (14)-(5S));

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексилкарбоната 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (13));

(S)-2-(4-((4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)фенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(S)-5,6-бис(нитроокси)-гексаноат (Соединение (7b)-(5S));

(S)-2-(4-((4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)фенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(S)-3-(2,3-бис(нитроокси)-пропокси)пропаноат ((S)-изомер Соединения (15));

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата фумарат (фумаратная соль Соединения (9));

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)-пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата малеат (малеатная соль Соединения (9)).

В еще одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение формулы (I), или формулы (Ib), или формулы (II) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в способе лечения заболевания или состояния, ассоциированного с повышенным внутриглазным давлением. Предпочтительно указанное заболевание или состояние выбрано из глазной гипертензии или глаукомы, включая открытоугольную глаукому, нормотензивную глаукому, пигментную глаукому или псевдоэксфолиативную глаукому, или вызванную приемом лекарственного средства глаукому.

В еще одном воплощении настоящего изобретения предложено соединение формулы (I), или формулы (Ib), или формулы (II) или его фармацевтически приемлемая соль для применения в способе лечения ретинопатии, включая ретинопатию беременных, окклюзию вены сетчатки или диабетический отек желтого пятна.

В еще одном воплощении настоящего изобретения предложены офтальмологические фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I), или формулы (Ib), или формулы (II) или его стереоизомер или фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый эксципиент и/или носитель. Офтальмологические фармацевтические композиции представлены в форме раствора, суспензии, геля, крема или эмульсий.

Некоторые конкретные соединения по настоящему изобретению могут быть преобразованы в кислые соли. Таким образом, соединения по настоящему изобретению могут существовать в виде солей. Примеры таких солей представляют собой соли с соляной кислотой, бромоводородной кислотой, серной кислотой, фосфорной кислотой, азотной кислотой и им подобными; или с органической кислотой, такой как, например, уксусная, гидроксиуксусная, пропановая, молочная, пировиноградная, малоновая, фумаровая кислота, малеиновая кислота, щавелевая кислота, винная кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, аскорбиновая кислота, бензойная кислота, дубильная кислота, памовая кислота, лимонная, метилсульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, муравьиная кислота и им подобные.

В объем настоящего изобретения включены индивидуальные энантиомеры соединений формулы (I), формулы (II) или формулы (Ib), а также их диастереоизомеры, рацемические и нерацемические смеси.

Другое воплощение настоящего изобретения относится к композиции, содержащей соединение формулы (I) или формулы (Ib) или соединение формулы (II) и по меньшей мере еще один активный агент, выбранный из следующих классов лекарственных средств:

бета-адренергические антагонисты, выбранные из: картеолола, левобунолола, метипранолола или тимолола;

аналоги простагландинов, выбранные из: латанопроста, травопроста, тафлупроста или биматопроста, или их соответствующие NO-донорные производные;

адренергические агонисты, выбранные из: эпинефрина бората, эпинефрина гидрохлорида, дипивефрина или апраклонидина;

ингибиторы карбоангидразы, выбранные из: ацетазоламида, дихлорфенамида, метазоламида, бринзоламида или дорзоламида;

холинергические агонисты, выбранные из: карбахола, пилокарпина гидрохлорида, пилокарпина нитрата или пилокарпина;

стероиды, выбранные из: флуоцинолола, флутиказона пропионата, триамцинолона или дексаметазона;

ингибиторы холинэ стер азы, выбранные из: демекария, эхотиофата или физостигмина;

растворимые активаторы гуанилатциклазы (sCG активаторы), причем предпочтительно sCG активаторы представляют собой соединения, раскрытые в WO 2016/001875, более предпочтительно sCG активатор представляет собой (+)-1-(6-(3-((4-(1-(циклопропанкарбонил)пиперидин-4-ил)-2-метилфенил)амино)-2,3-дигидро-1Н-инден-4-ил)пиридин-2-ил)-5-метил-1Н-пиразол-4-карбоновую кислоту (MGV-354), раскрытую в WO 2016/001875;

ингибиторы Rho-киназы, включающие нетарсудил, рипасудил, фасудил, веросудил, дигидрохлорид (+)-(R)-транс-4-(1-аминоэтил)-N-(4-пиридил)-циклогексанкарбоксамида (Y-27632) или (R)-(+)-N-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-4-(1-аминоэтил)бензамид, раскрытый в US 2012/0288428;

sGC активатор цинацигуат.

Вышеуказанные композиции, содержащие соединение формулы (I), или соединение формулы (Ib), или соединение формулы (II) и по меньшей мере еще один активный агент, выбранный из бета-адренергических антагонистов, аналогов простагландинов, адренергических агонистов, ингибиторов карбоангидразы, холинергических агонистов, стероидов, ингибиторов холинэстеразы, растворимых активаторов гуанилатциклазы или ингибиторов Rho-киназы, могут быть приготовлены в одной лекарственной форме, содержащей соответствующую пропорцию смеси двух активных соединений, или в виде набора для одновременного или последовательного введения двух активных соединений, которые приготовлены в раздельных лекарственных формах.

В еще одном воплощении данного изобретения предложена композиция, которая представляет собой набор, содержащий лекарственную форму для местного глазного введения, содержащую соединение формулы (I), или соединение формулы (Ib), или соединение формулы (II) или их соли и еще одну лекарственную форму для местного введения, содержащую активный агент, выбранный из следующих классов лекарственных средств: аналоги простагландинов, бета-адренергические антагонисты, ингибиторы карбоангидразы, холинергические агонисты, стероиды, ингибиторы холинэстеразы, растворимые активаторы гуанилатциклазы или ингибиторы Rho-киназы или sGC-активатор цинацигуат.

В еще одном воплощении предложено применение композиций, содержащих соединение формулы (I), или соединение формулы (Ib), или соединение формулы (II) и по меньшей мере еще один активный агент, упомянутый выше, для применения в способе лечения заболевания или состояния, ассоциированного с повышенным глазным давлением. Предпочтительно указанное заболевание или состояние выбрано из глазной гипертензии или глаукомы, включая открытоугольную глаукому, нормотензивную глаукому, пигментную глаукому, псевдоэксфолиативную глаукому или вызванную приемом лекарственного средства глаукому.

В еще одном воплощении предложено применение композиций, содержащих соединение формулы (I), или соединение формулы (Ib), или соединение формулы (II) и по меньшей мере еще один активный агент, упомянутый выше, для применения в способе лечения ретинопатии, включая ретинопатию беременных, окклюзию вены сетчатки или диабетический отек желтого пятна.

В композициях для местного введения концентрация соединений по изобретению в общем составляет от 0,0001% до 3% (масс./об.) или от 0,003% до 3% (масс./об.), предпочтительно от 0,03% до 2% (масс/об.) и наиболее предпочтительно от 0,3% до 1% (масс./об.).

В еще одном воплощении данного изобретения предложены 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановая кислота (соединение (IIIg)-OH) или 6-(нитроокси)гексановая кислота (соединение (IIIa)-ОН) для применения в качестве агентов, снижающих повышенное внутриглазное давление, для лечения глазных заболеваний или состояний, ассоциированных с повышенным внутриглазным давлением.

В еще одном воплощении данного изобретения предложены 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановая кислота (соединение (IIIg)-OH) или 6-(нитроокси)гексановая кислота (соединение (IIIa)-ОН) для применения в способе лечения ретинопатии, включая ретинопатию беременных, окклюзию вены сетчатки или диабетический отек желтого пятна.

В еще одном воплощении данного изобретения предложена офтальмологическая композиция, содержащая соединение 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановую кислоту ((IIIg)-OH) или соединение 6-(нитроокси)гексановую кислоту ((IIIa)-ОН) и по меньшей мере фармацевтически приемлемый эксципиент и/или носитель.

В еще одном воплощении данного изобретения предложена офтальмологическая композиция, содержащая соединение 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановую кислоту ((IIIg)-OH) или соединение 6-(нитроокси)гексановую кислоту ((IIIa)-ОН) и по меньшей мере еще один активный агент, выбранный из следующих классов лекарственных средств: бета-адренергические антагонисты, аналоги простагландинов, адренергические агонисты, ингибиторы карбоангидразы, холинергические агонисты, стероиды, ингибиторы холинэстеразы, растворимые активаторы гуанилатциклазы, ингибиторы Rho-киназы или цинацигуат.

Композиция может быть приготовлена в одной лекарственной форме, содержащей подходящую пропорцию смеси двух активных соединений, или в виде набора для одновременного или последовательного введения двух активных соединений, которые приготовлены в раздельных лекарственных формах.

Общий синтез

Соединения формулы (I) и формулы (II)

где:

R₁ представляет собой -C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

у равен 0,

р равен 1 или 0,

q равен 1 или 0,

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6,

n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2,

R₂ представляет собой н-пропил и R₃ представляет собой этил, или R₂ представляет

собой этил и R₃ представляет собой метил, могут быть получены путем взаимодействия

соединения формулы Al, А2 или A3

с соединениями формулы B1

HO-C(О)-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

B1,

где p, q, m и n являются такими, как определено выше; взаимодействие осуществляют в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF или CH₂Cl₂, в присутствии агента сочетания, такого как N,N'-дициклогексилкарбодиимид (DCC), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимида (EDC), гексафторфосфат 0-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (HBTU) или гексафторфосфат 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида (HATU), в присутствии вариабельного количества DMAP при температуре в диапазоне от -0°С до 80°С.

Альтернативно, соединения формулы (I) могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы A1, А2 или A3 с соединениями формулы В2:

X-C(О)-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В2,

где р, q, m и n являются такими, как определено выше, и X представляет собой -Cl, пара-нитрофенокси, пентафторфенокси или 2,5-пирролидиндион-1-окси;

когда X представляет собой -Cl, взаимодействие осуществляют в присутствии основания, такого как DMAP, пиридин или триэтиламин или K₂CO₃, Cs₂CO₃, в апротонном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF или CH₂Cl₂, при температуре в диапазоне от -20°С до 60°С.

Когда X выбран из пара-нитрофенокси, пентафторфенокси или 2,5-пирролидиндион-1-окси, взаимодействие осуществляют в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF или CH₂Cl₂, в присутствии DMAP, в присутствии или в отсутствие катализатора, такого как трифлат скандия, при температуре в диапазоне от 0°С до 80°С.

Соединение A1 известно из литературы как мироденафил. Соединения А1 и А2 раскрыты в US 6962911.

Соединение A3 известно из литературы как аванафил, его синтез раскрыт в US 6656935.

Соединение формулы В2 в общем получают из соединений В1 способами, известными из литературы.

Соединения В1 известны в данной области техники или могут быть получены известными способами из известных соединений: например, соединения В1 могут быть получены из соответствующих спиртов формулы В3

HO-CH₂-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В3,

где m, n, р и q являются такими, как определено выше, путем окисления с использованием известных агентов, таких как 2,2,6,6-тетраметилпиперидинилокси (TEMPO) или оксид рутения (IV)/перйодат натрия.

Примеры синтеза соединений (В1) описаны в WO 2009/098113 или в WO 2016/155906.

Соединения формулы (I) и формулы (II)

где:

R₁ представляет собой -C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

у равен 1,

p равен 1 или 0,

q равен 1 или 0,

m равен целому числу от 1 до 10; предпочтительно m равен от 1 до 6,

n равен целому числу от 1 до 6; предпочтительно n равен 1 или 2,

R₂ представляет собой н-пропил и R₃ представляет собой этил, или R₂ представляет собой этил и R₃ представляет собой метил, могут быть в общем получены путем взаимодействия соединения формулы А4, А5 или А6

с одним или более чем одним эквивалентом соединений формулы В3

HO-CH₂-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В3,

где р, q, и n являются такими, как определено выше, в присутствии органического или неорганического основания, такого как DMAP, TEA, DIPEA, в присутствии или в отсутствие катализатора, такого как Sc(OTf)₃, в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF, CH₂Cl₂, при температурах в диапазоне от -20°С до 100°С, согласно способам, хорошо известным из литературы.

Соединения формулы А4, А5 и А6 получают из соединений Al, А2 и A3, соответственно, способами, известными в данной области техники.

Альтернативно, соединения (I) и (II) могут быть получены путем взаимодействия соединений A1, А2 или A3 с соединениями формулы В4

pNO₂-C₆H₄-C(О)-О-CH₂-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В4,

где р, q, и n являются такими, как определено выше, в присутствии органического или неорганического основания, такого как DMAP, TEA, DIPEA, в присутствии или в отсутствие катализатора, такого как Sc(OTf)3, в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF CH₂Cl₂, при температурах в диапазоне от -20°С до 100°С, согласно способам, хорошо известным из литературы.

Соединения формулы В4 легко получить из соединений В3 способами, известными в данной области техники.

Соединения формулы (Ib)

где:

R₁ представляет собой -C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

у равен 0,

р равен 1 или 0,

q равен 1 или 0,

m равен целому числу от 1 до 10; n равен целому числу от 1 до 6;

R₂ представляет собой н-пропил и R₃ представляет собой этил, или R₂ представляет собой этил и R₃ представляет собой метил, могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы A1b, A2b

с соединениями формулы B1

HO-C(О)-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

B1,

где p, q, m и n являются такими, как определено выше; взаимодействие осуществляют в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF или CH₂Cl₂, в присутствии агента сочетания, такого как М,М'-дициклогексилкарбодиимид (DCC), гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)-карбодиимида (EDC), гексафторфосфат O-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония (HBTU) или гексафторфосфат 1-[бис(диметиламино)метилен]-1Н-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксида (HATU), в присутствии вариабельного количества DMAP при температуре в диапазоне от -0°С до 80°С.

Альтернативно, соединения формулы (Ib) могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы A1b или A2b с соединениями формулы В2:

X-C(О)-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В2,

где р, q, m и 11 являются такими, как определено выше, и X представляет собой -Cl, пара-нитрофенокси, пентафторфенокси или 2,5-пирролидиндион-1-окси;

когда X представляет собой -С1, взаимодействие осуществляют в присутствии основания, такого как DMAP, пиридин или триэтиламин или K₂CO₃, Cs₂CO₃, в апротонном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF или СН₂Сl₂, при температуре в диапазоне от -20°С до 60°С.

Когда X выбран из порт-нитрофенокси, пентафторфенокси или 2,5-пирролидиндион-1-окси, взаимодействие осуществляют в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF или CH₂Cl₂, в присутствии DMAP, в присутствии или в отсутствие катализатора, такого как трифлат скандия, при температуре в диапазоне от 0°С до 80°С.

Соединения A1b и A2b раскрыты в ЕР 0463756. A2b известно как лоденафил.

Соединения формулы В2 известны из литературы, и в общем их получают из соединений В1 способами, известными из литературы.

Соединения В1 известны в данной области техники или могут быть получены известными способами из известных соединений; например, соединения В1 могут быть получены из соответствующих спиртов формулы В3

HO-CH₂-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В3,

где т, n, р и q являются такими, как определено выше, путем окисления с использованием известных агентов, таких как 2,2,6,6-тетраметилпиперидинилокси (TEMPO) или оксид рутения (IV)/перйодат натрия.

Примеры синтеза соединений (В1) описаны в WO 2009/098113 или в WO 2016/155906.

Соединения формулы (Ib)

где:

R₁ представляет собой -C(О)-(О-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

у равен 1,

p равен 1 или 0,

q равен 1 или 0,

m равен целому числу от 1 до 10; n равен целому числу от 1 до 6;

R₂ представляет собой н-пропил и R₃ представляет собой этил (A5b), или R₂ представляет собой этил и R₃ представляет собой метил (A4b), могут быть в общем получены путем взаимодействия соединения формулы A4b или A5b

с одним или более чем одним эквивалентом соединений формулы В3

HO-CH₂-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В3,

где m, р, q и n являются такими, как определено выше, в присутствии органического или неорганического основания, такого как DMAP, TEA, DIPEA, в присутствии или в отсутствие катализатора, такого как Sc(OTf)₃, в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF, CH₂Cl₂, при температурах в диапазоне от -20°С до 100°С, согласно способам, хорошо известным из литературы.

Соединения формулы A4b и A5b получают из соединений A2b и A1b, соответственно, способами, известными в данной области техники.

Альтернативно, соединения (Ib) могут быть получены путем взаимодействия соединений Alb или A2b с соединениями формулы В4

pNO₂-C₆H₄-C(О)-O-CH₂-(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂

В4,

где m, р, q и n являются такими, как определено выше, в присутствии органического или неорганического основания, такого как DMAP, TEA, DIPEA, в присутствии или в отсутствие катализатора, такого как Sc(OTf)₃, в апротонном полярном/неполярном растворителе, таком как THF, DMF, CH₂Cl₂, при температурах в диапазоне от -20°С до 100°С, согласно способам, хорошо известным из литературы.

Соединения формулы В4 получают из соединений В3 способами, известными в данной области техники.

Сокращения

ACN: ацетонитрил

АС₂О: уксусный ангидрид

DCC: дициклогексилкарбодиимид

DCM: дихлорметан

DIPEA: N,N-диизопропилэтиламин

DMF: N,N-диметилформамид

DMSO: диметилсульфоксид

DMAP: 4-диметиламинопиридин

EtOAc: этилацетат

Et₂O: этиловый эфир

EtOH: этанол

iPrOH: изопропанол

NBS: N-бромсукцинимид

МТВЕ: метил-трет-бутиловый эфир

TEA: триэтиламин

TEMPO: 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил

THF: тетрагидрофуран

PhP₃: трифенилфосфин

Пример 1

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноат (Соединение (9))

К раствору аванафила (1,00 г, 2,07 ммоль) в безводном DCM (15 мл) добавляли DMAP (252 мг, 2,07 ммоль), DCC (512 мг, 2,48 ммоль) и 6-(нитроокси)гексановую кислоту (440 мг, 2,48 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водный слой экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические экстракты сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,1% муравьиной кислоты, от 70:30 до 40:60).

Остаток переносили в DCM и этот раствор промывали насыщенным водным раствором NaHCO₃. Затем водный слой экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 1,23 г целевого продукта (Соединение (9)) (выход: 93,0%).

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.19 (s, 1Н), 8.81 (m, 1H), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 2H), 8.54 (m, 1H), 7.50-7.14 (m, 3H), 7.06 (s, 1H), 4.54 (m, 4H), 4.37-3.90 (m, 3H), 3.81 (s, 3H), 3.59-3.39 (m, 4H), 2.32 (t, J=7,l Гц, 2H), 2.09-1.73 (m, 4H), 1.66-1.52 (m, 4H), 1.32 (dt, J=5,2, 7,5 Гц, 2H).

Пример 2

[(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)-метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-(5S)-5,6-бис(нитроокси)гексаноат ((5S)-изомер Соединения (10))

К раствору аванафила (120 мг, 0,248 ммоль) в безводном DCM (1,5 мл) добавляли DMAP (30 мг, 0,248 ммоль), DCC (56 мг, 0,273 ммоль) и (5S)-5,6-бис(нитроокси)гексановую кислоту (65 мг, 0,273 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,01% муравьиной кислоты, от 70:30 до 40:60).

После очистки к остатку добавляли DCM и насыщенный раствор NaHCO₃. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 165 мг целевого продукта ((5S)-изомер Соединения (10)) (выход: 94,5%).

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.16 (t, J=6,0 Гц, 1Н), 8.79 (m, 1H), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 2H), 8.54 (s, 1H), 7.38 (t, J=4,9 Гц, 1H), 7.34-7.23 (m, 1H), 7.19 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7.05 (t, J=9,8 Гц, 1H), 5.41 (m, 1H), 4.91 (m, 1H), 4.71 (m, 1H), 4.54 (m, 4H), 4.16 (m, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.50 (m, 2H), 2.38 (t,.7=6,7 Гц, 2H), 1.92 (m, 4H), 1.79-1.51 (m, 4H).

Пример 3

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-2-(2-(нитроокси)этокси)-ацетат (Соединение (11))

К раствору аванафила (160 мг, 0,331 ммоль) в безводном DCM (1,5 мл) добавляли DMAP (40 мг, 0,327 ммоль), DCC (82 мг, 0,397 ммоль) и 2-(2-(нитроокси)-этокси)уксусную кислоту (82 мг, 0,497 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение выходных при комнатной температуре и затем разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,01% муравьиной кислоты, от 90:10 до 65:35).

После очистки к остатку добавляли DCM и насыщенный раствор NaHCO₃. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 109 мг целевого продукта (Соединение (11)) (выход: 52%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.16 (t, J=6,0 Гц, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 2Н), 8.54 (s, 1H), 7.38 (t, J=4,9 Гц, 1H), 7.24 (m, 1H), 7.06 (s, 1H), 4.70 (m, 2H), 4.54 (m, 4H), 4.26 (dd, J=10,5, 3,4 Гц, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.78 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 2.02-1.79 (m, 4H).

Пример 4

[(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)-метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноат ((2S)-изомер Соединения (12))

К раствору аванафила (160 мг, 0,331 ммоль) и 4-нитрофенил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноата (82 мг, 0,497 ммоль) в безводном DCM (1,5 мл) добавляли DMAP (40 мг, 0,327 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение выходных при комнатной температуре, затем разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,01% муравьиной кислоты, от 85:15 до 55:45).

После очистки к остатку добавляли DCM и насыщенный раствор NaHCO₃. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 227 мг целевого продукта ((2S)-изомер Соединения (12)) (выход: 95,0%).

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.16 (t, J=6,0 Гц, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 1Н), 8.53 (s, 1H), 7.38 (t, J=4,9 Гц, 1Н), 7.34-7.16 (m, 1H), 7.05 (t, J=9,4 Гц, 1Н), 5.55 (q, 1H), 4.89 (d, J=12,9 Гц, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.54 (m, 4Н), 4.41-3.93 (m, 3Н), 3.80 (s, 3Н), 3.78-3.63 (m, 4Н), 3.51 (m, 2Н), 2.57 (t, J=6,1 Гц, 2Н), 1.92 (m, 4Н).

Синтез 4-нитрофенил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноата

Стадия 1: Синтез (S)-4-(аллилоксиметил)-2,2-диметил-1,3-диоксолана

NaH (60%) (3,4 г; 85,54 ммоль) суспендировали в безводном THF (140 мл) вместе с S(+)-1,2-изопропилиденглицерином (5,65 г; 42,75 ммоль) и 15-Краун-5 (0,9 г; 4,28 ммоль).

Эту смесь охлаждали до 0°С и добавляли по каплям аллилбромид (7,2 мл; 85,54 ммоль). Суспензию перемешивали в течение 6 ч при комнатной температуре, затем добавляли по каплям при 0°С насыщенный раствор NH₄CI (100 мл) и затем эту смесь экстрагировали Et₂O (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали один раз рассолом и осторожно концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (прибор Biotage SP4, колонка SNAP 100, изократическая элюция Et₂O/циклогексан 1:9) с получением 5,8 г (выход 78,5%) указанного в заголовке соединения ((S)-4-(аллилоксиметил)-2,2-диметил-1,3-диоксолан).

¹H ЯМР (300 МГц, Хлороформ-d) δ 6.00-5.78 (m, 1H), 5.35-5.13 (m, 2Н), 4.35-4.21 (m, 1H), 4.11-3.98 (m, 3Н), 3.73 (m, 1H), 3.57-3.40 (m, 2Н), 1.51-1.32 (m, 6Н).

Стадия 2: Синтез (S)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)пропан-1-ола

К перемешиваемому раствору (S)-4-(аллилоксиметил)-2,2-диметил-1,3-диоксолана (2,0 г, 10,64 ммоль) в безводном THF (180 мл), охлажденном при 0°С, добавляли по каплям 0,5М 9BBN (241,8 мл, 121 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 30 минут при 0°С и в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали при 0°С и добавляли 2 н. NaOH (84 мл) вместе с 30% Н₂О₂ (58 мл). Эту смесь разбавляли Et₂O (100 мл) и 1 н. NaOH (100 мл). 2 фазы разделяли и водный слой экстрагировали Et₂O (3×120 мл). Объединенные органические слои промывали один раз рассолом, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (прибор Biotage SP4, колонка SNAP 100, EtOAC в циклогексане, от 30% до 80% за 10 объемов колонки (с.v.) с получением 6,4 г (выход: 100%) указанного в заголовке соединения ((S)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)пропан-1-ол).

¹H ЯМР (300 МГц, Хлороформ-d) δ 4.35-4.20 (m, 1H), 4.11-4.01 (m, 1H), 3.85-3.63 (m, 5Н), 3.58-3.46 (m, 2Н), 1.97-1.80 (m, 2Н), 1.45 (s, 3Н), 1.38 (s, 3Н).

Стадия 3: Синтез (S)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)-пропановой кислоты

К раствору (S)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)пропан-1-ола (2,03 г; 10,51 ммоль) в ацетоне (50 мл), охлажденном при 0°С, добавляли насыщенный раствор NaHCO₃ (56 мл), NaBr (0,45 г, 4,20 ммоль) и TEMPO (0,34 г, 2,10 ммоль). Затем порциями добавляли трихлоризоциануровую кислоту (4,91 г, 21,02 ммоль). Эту смесь оставляли достичь комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч. Смесь затем охлаждали при 0°С и медленно добавляли изопропанол (20 мл). Эту смесь перемешивали при 0°С 30 минут. Наблюдалось образование белого твердого вещества. Осадок отфильтровывали и растворитель концентрировали. К остатку добавляли 2 н. NaOH (рН=12) и водный раствор промывали дважды EtOAc. К водной фазе добавляли 1 н. HCl до достижения рН 2-3 и ее экстрагировали EtOAc (5×50 мл). Объединенные органические фазы сушили над Na₂SO₄ и затем упаривали с получением 0,82 г (выход: 38%) указанного в заголовке соединения ((S)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-метокси)пропановая кислота).

¹H ЯМР (300 МГц, Хлороформ-d) δ 4.34-4.16 (m, 1H), 4.11-3.97 (m, 1H), 3.85-3.68 (m, 3Н), 3.63-3.42 (m, 2Н), 2.74-2.55 (m, 2Н), 1.41 (s, 3Н), 1.35 (s, 3Н).

Стадия 4: Синтез (S)-4-нитрофенил-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)-метокси)пропаноата

К раствору (S)-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)пропановой кислоты (0,82 г, 4,02 ммоль), DCC (0,83 мг, 4,02 ммоль) и DMAP (0,1 г, 0,80 ммоль) в DCM (15 мл) добавляли порциями 4-нитрофенол (0,56 г; 4,02 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем осадок отфильтровывали и растворитель выпаривали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (прибор Biotage SP4, EtOAc в циклогексане от 5% до 50% за 12 CV) с получением 0,97 г указанного в заголовке соединения ((S)-4-нитрофенил-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)пропаноат) (выход: 74%).

¹Н ЯМР (300 МГц, Хлороформ-d) δ 8.33-8.21 (m, 2Н), 7.37-7.20 (m, 2Н), 4.37-4.20 (m, 1H), 4.09-4.00 (m, 1Н), 3.96-3.84 (m, 2Н), 3.80-3.66 (m, 1H), 3.63-3.47 (m, 2Н), 2.96-2.78 (m, 2Н), 1.42 (s, 3Н), 1.36 (s, 3Н).

Стадия 5: Синтез (R)-4-нитрофенил-3-(2,3-дигидроксипропокси)пропаноата

К перемешиваемому раствору (S)-4-нитрофенил-3-((2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метокси)пропаноата (0,97 г, 2,97 ммоль) в THF (10 мл) добавляли 3 н. HCl (2 мл) и этот раствор перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре. Затем добавляли EtOAc (5 мл) и Н₂О (5 мл) и эти две фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические слои промывали рассолом, сушили над Na₂SO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 0,89 г указанного в заголовке соединения ((R)-4-нитрофенил-3-(2,3-дигидроксипропокси)пропаноат), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 6: Синтез 4-нитрофенил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]-пропаноата

К раствору Ас₂О (0,76 мл, 8,07 ммоль) в DCM (5 мл) при -40°С добавляли по каплям дымящую HNO3 (0,38 мл, 9,32 ммоль). Затем добавляли по каплям раствор (R)-4-нитрофенил-3-(2,3-дигидроксипропокси)пропаноата (0,89 г, 3,11 ммоль) в DCM (7 мл). Эту смесь оставляли достичь 0°С и перемешивали в течение 4 часов. Смесь затем вливали в лед и добавляли порциями NaHCO₃. Две фазы разделяли и водную фазу промывали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над Na₂SO₄ и концентрировали с получением 0,56 г указанного в заголовке соединения (4-нитрофенил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноат) (выход за две стадии: 38%).

¹Н ЯМР (300 МГц, Хлороформ-d) δ 8.35-8.22 (m, 2Н), 7.35-7.22 (m, 2Н), 5.48-5.34 (m, 1H), 4.88-4.73 (m, 1H), 4.73-4.56 (m, 1H), 3.94-3.85 (m, 2Н), 3.85-3.77 (m, 2Н), 2.88 (t, 2Н).

Синтез 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановой кислоты (Соединение (IIIg)-OH)

Раствор 4-нитрофенил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноата (Стадия 6) (500 мг, 1,33 ммоль) в 5 мл смеси 1/1 (об/об) EtOH/THF охлаждали до 0°С. Затем к этому перемешиваемому раствору добавляли по каплям через 45 минут 1,33 мл (2,66 ммоль) 2 н. раствора NaOH.

Эту смесь оставляли при перемешивании в течение 1 ч. Затем органические растворители удаляли в вакууме и добавляли EtOAc (25 мл) и воду (25 мл). Органическую фазу удаляли и рН водной фазы доводили до 1 с использованием 2 н. HCl. Водную фазу экстрагировали DCM (2×15 мл), сушили над сульфатом натрия и упаривали в вакууме.

Полученный неочищенный продукт очищали на картридже 4g 25μ С18 с использованием градиента (ACN)/(H₂O+0,1% НСООН) от 5/95 до 30/70 в течение 30 минут.

Фракции, содержащие очищенный продукт, объединяли и лиофилизировали с получением 210 мг указанного в заголовке соединения (3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)-пропокси]пропановой кислоты в виде прозрачного масла) (выход 61%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ м.д. (миллионные доли) 2.43-2.48 (m, 2Н) 3.61-3.78 (m, 4Н) 4.76 (dd, J=12,89, 6,54 Гц, 1H) 4.92 (dd, J=12,89, 2,93 Гц, 1Н) 5.54-5.59 (m, 1H) 12.23 (brs, 1Н).

Пример 5

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (9))

К раствору соединения (9), полученного как описано в Примере 1 (100 мг, 0,155 ммоль), в метаноле (1,5 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (33 мг, 0,155 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали МТВЕ. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 125 мг целевого продукта (цитратная соль Соединения (9)) (выход неочищенного вещества: 96,6%).

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 12.39-12.36 (m, 3Н), 9.19 (s, 1H), 8.80 (m, 1H), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 2H), 8.53 (m, 1H), 7.42-7.15 (m, 3Н), 7.06 (m, 1H), 4.65-4.38 (m, 6H), 4.37-4.11 (m, 3H), 3.80 (s, 3H) 3.59-3.39 (m, 2H), 2.75 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.65 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.32 (m, 2H), 2.05-1.80 (m, 4H), 1.47-1.08 (m, 4H), 1.32 (q, 2H).

Пример 6

((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(5S)-5,6-бис(нитроокси)-гексаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль (5S)-изомера Соединения (10))

К раствору (5S)-изомера соединения (10), полученного как описано в Примере 2 (165 мг, 0,234 ммоль), в метаноле (1,5 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (49 мг, 0,233 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и остаток промывали диэтиловым эфиром. Твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 205 мг целевого продукта (цитратная соль (5S)-изомера Соединения (10)) (выход неочищенного вещества: 97,8%).

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 12.37 (s, 3Н), 9.18 (s, 1H), 8.85-8.70 (m, 3Н), 8.53 (m, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.34-7.15 (m, 1H), 7.10-7.01 (m, 1H), 5.41 (m, 1H), 4.91 (d, J=12,4 Гц, 1H), 4.70 (m, 1H), 4.63-4.42 (m, 4H), 4.38-3.92 (m,3H), 3.81 (s, 3H), 3.51 (m, 2H), 2.75 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.66 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.38 (m, 2H), 1.92 (m, 4H), 1.79-1.58 (m, 4H).

Пример 7

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(го1римидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-2-(2-(нитроокси)этокси)-ацетата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (11))

К раствору Соединения 11, полученного как описано в Примере 3 (109 мг, 0,173 ммоль), в метаноле (1,0 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (36 мг, 0,171 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и остаток промывали диэтиловым эфиром. Твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 139 мг целевого продукта (цитратная соль Соединения (11)) (выход неочищенного вещества: 97,6%).

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 12.36 (s, 3Н), 9.18 (s, 1H), 8.85-8.72 (m, 3Н), 8.53 (m, 1H), 7.41-7.35 (m, 2Н), 7.34-7.15 (m, 1H), 7.06 (m, 1H), 4.70-4.64 (m, 2Н), 4.62-4.46 (m, 4Н), 4.40-3.99 (m, 5Н), 3.80 (s, 3Н), 3.78 (m, 2Н), 3.58-3.43 (m, 2Н), 2.75 (d, J=15,4 Гц, 2Н), 2.66 (d, J=15,4 Гц, 2Н), 1.93 (m, 4Н).

Пример 8

((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-3-((S)-2,3-бис(нитроокси)-пропокси)пропаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль (2S)-изомера Соединения (12))

К раствору (2S)-изомера соединения 12, полученного как описано в Примере 4 (227 мг, 0,315 ммоль), в метаноле (2 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (66 мг, 0,315 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и остаток промывали диэтиловым эфиром. Твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 280 мг целевого продукта (цитратная соль (2S)-изомера Соединения (12)) (выход неочищенного вещества: 97,4%).

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 12.35 (s, 3Н), 9.18 (s, 1H), 8.77 (m, 2Н), 8.55 (m, 1H), 7.46-7.33 (m, 1H), 7.34-7.17 (m, 1H), 7.06 (dd, J=16,6, 8,3 Гц, 1H), 5.55 (s, 1H), 4.81 (m, 4Н), 4.63-4.42 (m, 4Н), 4.38-3.96 (m, 3Н), 3.81 (s, 3Н), 3.71 (m, 2Н), 3.57-3.42 (m, 2Н), 2.75 (d, J=15,4 Гц, 2Н), 2.65 (d, J=15,4 Гц, 2Н), 2.57 (t, J=5,9 Гц, 2Н), 1.92 (m, 4Н).

Пример 9

(S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-[2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноата цитрат (цитратная соль (2S)-изомера Соединения (1))

К раствору мироденафила (500 мг, 0,940 ммоль) и 4-нитрофенил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноата (см. Пример 4) (423 мг, 1,128 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли DMAP (115 мг, 0,940 ммоль).

Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов, затем ее разбавляли DCM и водой. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,01% муравьиной кислоты, от 70:30 до 20:80).

После очистки к остатку добавляли DCM и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 540 мг (S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-(3-нитро-2-(нитроокси)пропокси)пропаноата (соединение (1), выход: 75,0%).

Соединение (1) (295 мг, 0,384 ммоль) снова растворяли в метаноле (1,5 мл) и добавляли моногидрат лимонной кислоты (81 мг, 0,384 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали диэтиловым эфиром. Твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 361 мг указанного в заголовке соединения (цитратная соль (2S)-изомера Соединения (1)) (выход неочищенного вещества: 98%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 2.30 (bs, 1H), 7.89 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 7.80 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 7.38 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 5.53 m, J=10,3, 6,7, 3,9 Гц, 1Н), 4.88 (dd, J=12,8, 3,0 Гц, 1H), 4.72 (dd, J=12,9, 6,5 Гц, 1H), 4.37 (q, J=7,1 Гц, 2H), 4.10 (dt, J=11,4, 6,0 Гц, 4H), 3.77-3.58 (m, 4H), 2.90 (s, 4H), 2.75 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.65 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.61-2.52 (m, 10Н), 1.80-1.58 (m, 4H), 1.36 (t, J=7,1 Гц, 3Н), 0.97 (t, 3Н), 0.94 (t, 3Н).

Пример 10

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3H-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)гексаноата цитрат (цитратная соль Соединения (4))

К раствору мироденафила (500 мг, 0,940 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли DMAP (115 мг, 0,940 ммоль), DCC (233 мг, 1,128 ммоль) и 6-(нитроокси)-гексановую кислоту (200 мг, 1,128 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водный слой экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические экстракты сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,1% муравьиной кислоты, от 70:30 до 20:80).

После очистки к остатку добавляли DCM и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 450 мг 2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)-гексаноата (соединение (4), выход: 69,0%).

К раствору Соединения (4) (200 мг, 0,290 ммоль) в метаноле (1,5 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (61 мг, 0,290 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали диэтиловым эфиром. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 253 мг указанного в заголовке соединения (цитратная соль Соединения (4)) (выход 98,8%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11.67 (s, 1H), 7.90 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 7.80 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 7.38 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.47-4.32 (m, 4H), 4.09 (dt, J=11,3, 6,0 Гц, 4H), 2.90 (s, 4H), 2.75 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.65 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.55 (ddd, J=11,8, 8,4, 4,7 Гц, 8H), 2.26 (t, J=7,3 Гц, 2H), 1.81-1.69 (m, 2H), 1.69-1.55 (m, 4H), 1.50 (m, 2H), 1.39-1.33 (m, 3H), 1.29 (q, 2H), 0.94 (m, 6H).

Пример 11

2-{4-[3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксибензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-[2-(нитроокси)этокси]-ацетат 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновой кислоты (цитратная соль Соединения (2))

К раствору мироденафила (500 мг, 0,940 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли DMAP (115 мг, 0,940 ммоль), DCC (233 мг, 1,128 ммоль) и [2-(нитроокси)этокси]уксусную кислоту (186 мг, 1,128 ммоль).

Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч, затем ее разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,1% муравьиной кислоты, от 70:30 до 40:60).

После очистки к остатку добавляли DCM и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 338 мг 2-{4-[3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксибензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-[2-(нитроокси)этокси]ацетата (соединение (2), выход: 53,0%).

К раствору Соединения (2) (172 мг, 0,253 ммоль) в метаноле (1,5 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (53 мг, 0,276 ммоль). Эту смесь перемешивали 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали диэтиловым эфиром. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 220 мг указанного в заголовке соединения (цитратная соль Соединения (2)) (выход неочищенного вещества: 99,8%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11.68 (s, 1H), 7.90 (t, J=5,8 Гц, 1H), 7.80 (m, 1H), 7.38 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.67-4.59 (m, 2Н), 4.45-4.27 (m, 2Н), 4.20-4.04 (m, 6Н), 3.78-3.71 (q, 2Н), 2.90 (s, 4Н), 2.75 (t, J=15,4 Гц, 2Н), 2.65 (t, J=15,4 Гц, 2Н), 2.61-2.52 (m, 8Н), 1.81-1.55 (m, 4Н), 1.36 (t, J=7,1 Гц, 3Н), 0.94 (t, 6Н).

Пример 12

(S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3H-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)гексаноата цитрат (цитратная соль (5S)-изомера Соединения (3))

К раствору мироденафила (500 мг, 0,940 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли DMAP (115 мг, 0,940 ммоль), DCC (233 мг, 1,128 ммоль) и (5S)-5,6-бис(нитроокси)гексановую кислоту (270 мг, 1,128 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,1% муравьиной кислоты, от 70:30 до 40:60).

После очистки к остатку добавляли DCM и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 550 мг (S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)гексаноата (Соединение (3), выход: 77,8%).

К раствору Соединения (3) (207 мг, 0,275 ммоль) в метаноле (1,5 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (58 мг, 0,302 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали диэтиловым эфиром. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 254 мг указанного в заголовке соединения (цитратная соль (5S)-изомера Соединения (3)) (выход: 97,8%).

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11.67 (s, 1H), 7.89 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.80 (dd, J=8,8, 2,5 Гц, 1H), 7.38 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 5.38 (m, J=13,1, 5,9, 2,6 Гц, 1H), 4.89 (dd, J=12,9, 2,6 Гц, 2H), 4.70 (m,, 2H), 4.37 (q, J=7,1 Гц, 2H), 4.09 (dt, J=11,3, 6,0 Гц, 4H), 2.90 (s, 4H), 2.75 (t, 2H), 2.65 (d, J=15,4 Гц, 2H), 2.61-2.52 (m, 8H), 2.32 (t, J=7,1 Гц, 2H), 1.82-1.55 (m, 8H), 1.36 (t, J=7,1 Гц, 3Н), 0.94 (t, 6H).

Пример 13

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)-гексилкарбонат (Соединение (5))

Стадия 1: 2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(4-нитрофенил)карбонат

К раствору мироденафила (290 мг, 0,545 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли 4-нитрофенилхлорформиат (121 мг, 0,600 ммоль) и DMAP (74 мг, 0,600 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем ее разбавляли DCM и водой. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (циклогексан:EtOAc:МеОН 5:5:0,1%). Затем фракцию собирали и сушили при пониженном давлении с получением 310 мг указанного в заголовке соединения (2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(4-нитрофенил)-карбонат) (выход: 81,7%) в виде бесцветного масла.

Стадия 2: 2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин 2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитр оокси)гексилкарбонат

К раствору 2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(4-нитрофенил)-карбоната (150 мг, 0,21 ммоль) в безводном DCM (1 мл) добавляли DMAP (30 мг, 0,24 ммоль) и 6-гидроксигексилнитрат (39 мг, 0,24 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем ее разбавляли DCM и водой. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,1% муравьиной кислоты, от 90:10 до 20:80). После очистки к остатку добавляли дихлорметан и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Затем эту фракцию собирали и сушили при пониженном давлении с получением 150 мг указанного в заголовке соединения (Соединение (5)) (выход: 97%) в виде клейкого масла.

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 11.65 (s, 1H), 7.89 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 7.80 (dd, J=8,8, 2,4 Гц, 1H), 7.38 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.47 (t, J=6,6 Гц, 2Н), 4.37 (q, J=7,1 Гц, 2Н), 4.13 (t, J=5,9 Гц, 2H), 4.00 (t, J=6,6 Гц, 2H), 2.88 (t, 2H), 2.60-2.51 (m, 8H), 1.79-1.70 (m, 2H), 1.68-1.57 (m, 4H), 1.56-1.48 (m, 2H), 1.36 (t, J=7,2 Гц, 3Н), 1.33-1.22 (m, 4H), 0.97 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 0.92 (t, J=7,3 Гц, 3Н).

Пример 14

(S)-5,6-бис(нитроокси)гексил-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этилкарбонат (Соединение (6))

К раствору 2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(4-нитрофенил)-карбоната, полученного как описано в Примере 13, Стадия 1 (200 мг, 0,29 ммоль), в безводном DCM (2 мл) добавляли DMAP (39 мг, 0,32 ммоль) и 6-гидроксигексан-1,2-диилдинитрат (72 мг, 0,32 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем ее разбавляли DCM и водой. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,1% муравьиной кислоты, от 85:15 до 20:80). После очистки к остатку добавляли дихлорметан и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Затем эту фракцию собирали и сушили при пониженном давлении с получением 150 мг целевого продукта (Соединение (6)) (выход: 73,5%) в виде клейкого масла.

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 11.66 (s, 1H), 7.88 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.80 (dd, J=8,8, 2.5 Гц, 1H), 7.38 (d, J=8,9 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 5.38 (dt, J=6,2, 4,3 Гц, 1H), 4.90 (dd, J=12,9, 2.6 Гц, 1H), 4.67 (dd, J=12,9, 6,1 Гц, 1H), 4.37 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4.20-3.96 (m, 6H), 2.75 (m, 6H), 2.62-2.51 (m, 8H), 1.82-1.52 (m, 8H), 1.46-1.29 (m, 3H), 0.94 (t, J=7,4 Гц, 6H).

Пример 15

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)-гексилкарбонат (Соединение (13))

Стадия 1: (S)-(1-(4-((3-хлор-4-метоксибензил)амино)-5-((пиримидин-2-илметил)карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(4-нитрофенил)-карбонат

К раствору аванафила (500 мг, 1,033 ммоль) в безводном DCM (10 мл) добавляли 4-нитрофенилхлорформиат (416 мг, 2,066 ммоль) и пиридин (184 мкл, 2,346 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, затем разбавляли DCM и водой. Эти две фазы разделяли и водный слой экстрагировали дважды DCM с получением 1,02 г целевого продукта ((S)-(1-(4-((3-хлор-4-метоксибензил)амино)-5-((пиримидин-2-илметил)карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(4-нитрофенил)карбонат).

Стадия 2: (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-ил-метилкарбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)-гексилкарбонат

К раствору (S)-(1-(4-((3-хлор-4-метоксибензил)амино)-5-((пиримидин-2-ил-метил)карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(4-нитрофенил)карбоната (1,02 г, 1,57 ммоль) в безводном DCM (20 мл) добавляли DMAP (211 мг, 1,73 ммоль) и 6-гидроксигексилнитрат (282 мг, 1,73 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем ее разбавляли DCM и водой. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (DCM/iPrOH от 100:0 до 90:10). Затем эту фракцию собирали и сушили при пониженном давлении с получением 405 мг указанного в заголовке соединения (Соединение (13)) (выход: 38%) в виде клейкого масла.

¹H ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 9.17 (t, J=6,0 Гц, 1H), 8.79 (m, 1H), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 2H), 8.55 (m, 1H), 7.45-7.15 (m, 3H), 7.04 (d, J=8,3 Гц, 1H), 4.61-4.43 (m, 6H), 4.29 (m, 3H), 4.05 (t, J=6,4 Гц, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.56-3.42 (m, 2H), 2.05-1.80 (m, 4H), 1.60 (m, 4H), 1.32 (t, 4H).

Пример 16

(S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-(2,3-бис(нитроокси)пропокси)пропаноата дигидрохлорид (дигидрохлоридная соль Соединения (1)-(2S))

К раствору Соединения (1), полученного в Примере 9 (72 мг, 0,094 ммоль), в метаноле (1,0 мл) добавляли 3М метанольный раствор HCl (63 мкл, 0,188 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали Et₂O. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 68 мг указанного в заголовке соединения (дигидрохлоридная соль Соединения (1)-(2S)) (выход: 86%).

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 11.73 (s, 1H), 11.05 (s, 1H), 8.07-7.76 (m, 2H), 7.42 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7.32 (s, 1H), 5.59-5.52 (m, 1H), 4.90 (dd, J=12,8, 2,8 Гц, 1H), 4.75 (dd, J=12,8, 6,5 Гц, 1H), 4.38 (q, J=7,1 Гц, 3Н), 4.14 (t, J=6,3 Гц, 2H), 3.77-3.66 (m, 6H), 2.60-2.49 (m, 14H), 1.80-1.72 (m, 2H), 1.69-1.60 (m, 2H), 1.36 (t, J=7,2 Гц, 3Н), 0.97 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 0.93 (t, J=7,3 Гц, 3Н).

Пример 17

((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(S)-5,6-бис(нитроокси)-гексилкарбонат ((5S)-изомер Соединения (14))

К раствору (S)-(1-(4-((3-хлор-4-метоксибензил)амино)-5-((пиримидин-2-ил-метил)карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(4-нитрофенил)карбоната (полученного как описано в Примере 15, Стадия 1) (758 мг, 1,167 ммоль) в безводном DCM (10 мл) добавляли DMAP (157 мг, 1,284 ммоль) и (2S)-6-гидроксигексан-1,2-диилдинитрат (288 мг, 1,284 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водный слой экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (DCM/iPrOH от 100:0 до 90:10) и затем посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN от 100:0 до 0:100) с получением 334 мг целевого продукта ((5S)-изомер Соединения (14)) (выход: 39%) в виде клейкого твердого вещества.

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 9.17 (d, J=5,5 Гц, 1H), 8.79 (m, 1Н), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 2H), 8.55 (s, 1H), 7.44-7.16 (m, 3Н), 7.04 (d, J=7,7 Гц, 1H), 5.41 (m, 1H), 4.92 (d, J=12,8 Гц, 1H), 4.69 (dd, J=12,7, 6,0 Гц, 1H), 4.64-4.42 (m, 4H), 4.39-4.14 (m, 3H), 4.06 (m, 2H), 3.81 (m, 3H), 3.49 (m, 2H), 1.92 (m, 4H), 1.66 (m, 4H), 1.42 (m, 2H).

Пример 18

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)-гексилкарбоната 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (13))

К раствору (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексилкарбоната (Соединение (13)), полученного как описано в Примере 15 (218 мг, 0,324 ммоль), в метаноле (1,0 мл) добавляли моногидрат лимонной кислоты (68 мг, 0,324 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали МТВЕ. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 265 мг целевого продукта (цитратная соль Соединения (13)) (выход неочищенного вещества: 94,5%).

¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 9.19 (t, J=5,8 Гц, 1Н), 8.80 (m, 1Н), 8.75 (d, J=4,9 Гц, 2Н), 8.54 (m, 1H), 7.38 (t, J=4,9 Гц, 1H), 7.35-7.15 (m, 2Н), 7.06 (s, 1H), 4.64-4.43 (m, 6Н), 4.29 (m, 3Н), 4.05 (t, J=6,5 Гц, 2Н), 3.81 (s, 3Н), 3.49 (t, J=7,1 Гц, 2Н), 2.76 (d, J=15,4 Гц, 2Н), 2.65 (d, J=15,4 Гц, 2Н), 2.06-1.81 (m, 4Н), 1.61 (m, 4Н), 1.33 (m, 4Н).

Пример 19

2-{4-[4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)бензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-6-(нитроокси)-гексаноат (Соединение (8b))

К раствору лоденафила (400 мг, 0,793 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли DMAP (97 мг, 0,793 ммоль), DCC (196 мг, 0,951 ммоль) и 6-(нитроокси)-гексановую кислоту (168 мг, 0,951 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем ее разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,01% муравьиной кислоты, от 90:10 до 20:80). После очистки к остатку добавляли дихлорметан и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 150 мг целевого продукта (Соединение (8b)) (выход: 69,0%).

1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12.17 (s, 1H), 7.81 (m, 2Н), 7.36 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 4.43 (t, J=6,6 Гц, 2Н), 4.19 (q, J=6,9 Гц, 2Н), 4.14 (s, 3Н), 4.03 (t, J=5,7 Гц, 2Н), 2.86 (bs, 4Н), 2.75 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 2.58-2.37 (m, 5Н), 2.23 (t, J=7,3 Гц, 2Н), 1.72 (dd, J=14,9, 7,4 Гц, 2Н), 1.63-1.53 (m, 2Н), 1.53-1.40 (m, 2Н), 1.35-1.20 (m, 6Н), 0.92 (t, J=7,4 Гц, 3Н).

Пример 20

(S)-2-(4-((4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)фенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(S)-5,6-бис(нитроокси)-гексаноат((5S)-изомер Соединения (7b))

К раствору лоденафила (400 мг, 0,793 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли DMAP (97 мг, 0,793 ммоль), DCC (196 мг, 0,951 ммоль) и (5S)-5,6-бис(нитроокси)гексановую кислоту (226 мг, 0,951 ммоль). Эту смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем ее разбавляли DCM и водой. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,01% муравьиной кислоты, от 85:15 до 10:90). После очистки к остатку добавляли дихлорметан и насыщенный раствор МаНСО₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 150 мг целевого продукта ((5S)-изомер Соединения (7b)) (выход: 78,0%).

¹Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 12.17 (s, 1Н), 5 7.85-7.76 (m, 2H), 7.36 (d, J=8,7 Гц, 1H), 5.36 (m, J=6,0, 3,4 Гц, 1H), 4.87 (dd, J=12,9, 2,6 Гц, 1H), 4.65 (dd, J=12,9, 5,9 Гц, 1H), 4.26-4.12 (m, 5H), 4.02 (t, J=5,7 Гц, 2H), 2.87 (bs, 4H), 2.75 (t, J=7,6 Гц, 2H), 2.59-2.41 (m, 3Н), 2.30 (t, J=7,1 Гц, 2H), 2.08 (s, 2Н), 1.78-1.33 (m, 7Н), 1.32 (t, J=6,9 Гц, 3Н), 0.92 (t, J=7,4 H).

Пример 21 - (Сравнительный пример) - нитроэфирный ингибитор PDE5

2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этилнитрат

Нитроэфир мироденафила получали из мироденафила согласно методике, описанной в WO 2017/085056 (Пример 29): гидроксильную группу мироденафила сначала превращали в соответствующий бромид известным способом (PPh₃/NBS) и затем нитровали нитратом серебра в ацетонитриле.

¹H ЯМР (600 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ м.д. 10.71 (br s, 1H) 7.80 (dd, J=8,65, 2,49 Гц, 1Н) 7.15 (d, J=8,80 Гц, 1Н) 5.30 (s, 1H) 4.41-4.55 (m, 5Н) 4.25 (t, J=6,45 Гц, 3Н) 3.11 (br s, 5Н) 2.72 (t, J=7,48 Гц, 4Н) 2.53-2.69 (m, 5Н) 2.00-2.09 (m, 3Н) 1.74 (sxt, J=7,39 Гц, 4Н) 1.48 (t, J=7,19 Гц, 5Н) 1.20 (t, J=7,33 Гц, 5Н) 1.00 (t, J=7,33 Гц, 5Н).

Пример 22

Эффект снижения внутриглазного давления (IOP) у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией

В данном исследовании оценивали эффективность соединения формулы (Ia), цитратной соли соединения (1)-(2S) (раскрытого в Примере 9), NO-донора 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановой кислоты ((IIIg)-OH) и сравнительного ингибитора PDE5 (мироденафила) в снижении внутриглазного давления у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией.

Методика эксперимента

Цитратную соль Соединения (1)-(2S) (0,48 мкмоль/глаз, эквивалентно 1,59% масс./об., 30 мкл), мироденафил (0,48 мкмоль/глаз, эквивалентно 1% масс./об., 30 мкл), NO-донор ((IIIg)-OH - 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановая кислота; 1,17 мкмоль/глаз, эквивалентно 1% масс./об., 30 мкл) или носитель (фосфатный буфер рН 6, кремофор EL 5% масс./об., DMSO 0,3% масс./об., хлорид бензалкония 0,02% масс./об.) вводили в маске приматам, не представляющим собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией. Противоположный глаз не подвергали обработке.

Внутриглазное давление измеряли в выбранные моменты времени с использованием пневмотонометра (Model 30™ Reichert, Depew, NY, USA) до глазного введения (базальный уровень) и в выбранный момент времени после глазного введения. Перед каждым измерением внутриглазного давления в глаз вносили одну каплю 0,13% пропаракаина HCl.

Результаты

Данные записывали в виде среднего значения ± SEM (стандартная ошибка среднего) от n=13 (число экспериментов). Эффективность (Е) в виде изменения IOP рассчитывали в сравнении с базовым уровнем и значениями для носителя, используя следующее уравнение: (IOP_drug - IOP_{basal drug}) - (IOP_veh - IOP_{basal veh}) - Записанные значения относятся к максимальному изменению IOP (E_max) и эффекту снижения IOP, обнаруживаемому в момент времени 300 мин после введения дозы (E_300min).

Эти результаты продемонстрировали, что высвобождающий оксид азота ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа по изобретению (цитратная соль соединения (1)-(2S)) показал более высокий эффект максимального снижения внутриглазного давления (E_max) и более длительное действие по сравнению с однократными введениями соединения (IIIg)-OH (NO-донор) и мироденафила (сравнительный ингибитор PDE5). Следует отметить, что NO-донор (IIIg-OH) был введен в дозах, которые в 2,4 раза выше, чем для соединения по изобретению ((1)-(2S)-цитратная соль).

Пример 23

Эффект снижения внутриглазного давления (IOP) у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией

В независимых экспериментах оценивали эффективность соединения формулы (II), цитратной соли Соединения (9) (раскрытой в Примере 5), и NO-донора 6-(нитроокси)гексановой кислоты) ((IIIa)-ОН) в снижении внутриглазного давления у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией.

Методика эксперимента

Цитратную соль Соединения (9) (0,79 мкмоль/глаз, эквивалентно 2,2% масс./об., 30 мкл), или NO-донор ((IIIa)-ОН - 6-(нитроокси)гексановая кислота (0,79 мкмоль/глаз, эквивалентно 0,47% масс./об., 30 мкл), или носитель (фосфатный буфер рН 6, кремофор EL 5% масс./об., DMSO 0,3% масс./об., хлорид бензалкония 0,02% масс./об.) вводили приматам, не представляющим собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией. Противоположный глаз не подвергали обработке.

Внутриглазное давление измеряли с использованием пневмотонометра (Model 30™ Reichert, Depew, NY, USA) до глазного введения (базальный уровень) и в выбранный момент времени после глазного введения. Перед каждым измерением внутриглазного давления в глаз вносили одну каплю 0,13% пропаракаина HCl.

Результаты

Эффективность (Е) в виде изменения IOP рассчитывали в сравнении с базовым уровнем и значениями для носителя, используя следующее уравнение: (IOP_drug - IOP_{basal drug}) - (IOP_veh - IOP_{basal veh}), где значения IOP взяты в моменты времени 30, 60, 180, 300 и 480 минут после введения дозы.

Результаты, приведенные в Таблице 2, продемонстрировали, что высвобождающий оксид азота ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа по изобретению (цитратная соль соединения (9)) показал более высокий эффект максимального снижения внутриглазного давления (сравните E_max соединения (IIIa)-ОН, составляющее -5,2±1,0 мм Hg в момент времени 60 мин, с E_max соединения (9)-цитратная соль, составляющим -6,0±2,1 в момент времени 480 мин) и более длительное действие (сравните Е₄₈₀ соединения (IIIa)-ОН, составляющее -2,7±1,5 мм Hg, с таковым для цитратной соли соединения (9), составляющим -6,0±2,1 мм Hg в тот же самый момент времени).

Приведенные данные представляют собой средние значения ± SEM от трех независимых экспериментов, каждый из которых осуществлен на n=8 глаз для соединения 6-(нитроокси)гексановой кислоты ((IIIa)-ОН), и средние значения ± SEM от одного эксперимента, осуществленного на n=8 глаз для цитратной соли соединения (9).

Пример 24

Эффекты снижения внутриглазного давления (IOP) у Новозеландских белых кроликов с нормальным внутриглазным давлением

В данном исследовании оценивали эффективность NO-донора, представляющего собой соединение 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановую кислоту ((IIIg)-OH) (раскрытую в Примере 4), и сравнительного ингибитора PDE5 (мироденафила) в снижении внутриглазного давления у Новозеландских белых кроликов с нормальным внутриглазным давлением.

Методика эксперимента

Самцам Новозеландских белых (NZW) кроликов осуществляли местное введение (50 мкл) носителя (фосфатный буфер рН 6, кремофор EL 5% масс./об., DMSO 0,3% масс./об., хлорид бензалкония 0,02% масс./об.), 0,5 мкмоль/глаз, эквивалентно 0,63% масс./об., мироденафила (доза 50 мкл), 0,5 мкмоль/глаз, эквивалентно 0,26% масс./об., соединения (IIIg-OH) (доза 50 мкл), в отдельности или совместно с 0,5 мкмоль/глаз мироденафила (доза 50 мкл).

Внутриглазное давление измеряли с использованием пневмотонометра (Model 30™ Reichert, Depew, NY, USA) до глазного введения (базальный уровень) и в выбранный момент времени после глазного введения. Перед каждым измерением внутриглазного давления в глаз вносили одну каплю 0,4% NOVESINA (приобретенного в Thea Pharma).

Результаты

Данные записывали в виде среднего значения ± SEM от n=6-9. Эффективность (Е) в виде изменения внутриглазного давления (IOP) рассчитывали в сравнении с базовым уровнем и значениями для носителя, используя следующее уравнение:

Значения IOP брали при максимальном эффекте и в момент времени 300 мин после введения дозы.

Результаты, приведенные в Таблице 3, продемонстрировали, что совместное введение капель мироденафила (сравнительный ингибитор PDE5) с соединением (3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановой кислотой ((IIIg)-OH) не показало какого-либо улучшения в эффекте снижения внутриглазного давления в сравнении с введением каждого соединения в отдельности; фактически, эффективность (E_max) мироденафила сравнима с эффективностью совместного введения капель мироденафила и соединения (IIIg)-OH.

Пример 25

Эффекты снижения внутриглазного давления (IOP) у Новозеландских белых кроликов с нормальным внутриглазным давлением

В данном исследовании оценивали эффективности соединения по изобретению (1)-(2S)-цитратная соль (раскрытого в Примере 9), которое представляет собой NO-высвобождающее производное мироденафила, и нитроэфира мироденафила, в котором нитрооксигруппа (ONO₂) непосредственно связана с гидроксильной группой молекулы мироденафила (PDE5-нитроэфир, раскрытый в Сравнительном примере 21) в снижении внутриглазного давления у Новозеландских белых кроликов с нормальным внутриглазным давлением.

Методика эксперимента

Самцам Новозеландских белых (NZW) кроликов осуществляли местное введение (50 мкл) носителя (фосфатный буфер рН 6, кремофор EL 5% масс./об., DMSO 0,3% масс./об., хлорид бензалкония 0,02% масс./об.), 0,5 мкмоль/глаз, эквивалентно 1% масс./об., (1)-(2S)-цитратной соли (доза 50 мкл), 0,5 мкмоль/глаз, эквивалентно 0,6% масс./об., PDE5-нитроэфира соединения (IIIg-OH) (доза 50 мкл).

Внутриглазное давление измеряли с использованием пневмотонометра (Model 30™ Reichert, Depew, NY, USA) до глазного введения (базальный уровень) и в выбранный момент времени после глазного введения. Перед каждым измерением внутриглазного давления в глаз вносили одну каплю 0,4% NOVESINA (приобретенного в Thea Pharma).

Результаты

Данные записывали в виде среднего значения ± SEM от n=6-9. Эффективность (Е) в виде изменения внутриглазного давления (IOP) рассчитывали в сравнении с базовым уровнем и значениями для носителя, используя следующее уравнение:

Значения IOP брали в моменты времени 30, 60 и 180 минут после введения дозы.

Результаты, приведенные в Таблице 4, продемонстрировали, что высвобождающий оксид азота ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа по изобретению (соединение (1)-(2S)-цитратная соль) показал более высокую эффективность в снижении внутриглазного давления (сравните E_max соединения (1)-(2S)-цитратная соль с соответствующим E_max PDE5-нитроэфира) и более длительное действие (сравните изменение IOP в момент времени 180 мин для соединения (1)-(2S)-цитратная соль с таковым для PDE5-нитроэфира) по сравнению с соответствующим PDE5-нитроэфиром.

Пример 26

Эффект снижения внутриглазного давления (IOP) у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией

В данном эксперименте оценивали эффективность соединения формулы (II), фумарата соединения (9) (раскрытого в Примере 29), в снижении внутриглазного давления у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией.

Методика эксперимента

Фумарат Соединения (9) (2,0% масс./об., 30 мкл) или носитель (фосфатный буфер рН 6, кремофор EL 5% масс./об., DMSO 0,3% масс./об., хлорид бензалкония 0,02% масс./об.) вводили приматам, не представляющим собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией. Противоположный глаз не подвергали обработке.

Внутриглазное давление измеряли с использованием пневмотонометра (Model 30™ Reichert, Depew, NY, USA) до глазного введения (базальный уровень) и в выбранный момент времени после глазного введения. Перед каждым измерением внутриглазного давления в глаз вносили одну каплю 0,13% пропаракаина HCl.

Результаты

Эффективность (Е) в виде изменения IOP рассчитывали в сравнении с базовым уровнем и значениями для носителя, используя следующее уравнение: (IOP_drug - IOP_{basal drug}) - (IOP_veh - IOP_{basal veh}), где значения IOP взяты в моменты времени 30, 60, 300, 480 и 1440 минут после введения дозы.

Результаты, приведенные в Таблице 5, продемонстрировали, что фумаратная соль соединения (9) показала эффективность максимального снижения внутриглазного давления E_max, составляющее -4,1±2,7 мм Hg, в момент времени 300 мин. Более того, эффект снижения IOP для фумаратной соли соединения (9) сохранялся в момент времени 24 часа после введения дозы, в который изменение IOP все еще составляло -2,8±2,0 мм Hg.

Приведенные данные представляют собой средние значения ± SEM от одного эксперимента, осуществленного на n=8 глаз.

Пример 27

Эффект снижения внутриглазного давления (IOP) у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией

В данном эксперименте оценивали эффективности цитратной соли соединения (1)-(2S) (раскрытой в Примере 9), NO-донора 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)-пропокси]пропановой кислоты (соединение (IIIg)-OH, раскрытое в Примере 4), сравнительного ингибитора PDE5 (мироденафила) и совместного введения мироденафила и NO-донора 3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропановой кислоты в снижении внутриглазного давления у приматов, не представляющих собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией.

Методика эксперимента

Цитратную соль Соединения (1)-(2S) (0,31 мкмоль/глаз, эквивалентно 1,0% масс./об., 30 мкл), мироденафил (0,31 мкмоль/глаз, эквивалентно 0,63% масс./об., 30 мкл), (IIIg)-OH (0,31 мкмоль/глаз, эквивалентно 0,26% масс./об., 30 мкл), мироденафил, дозируемый совместно с (IIIg)-OH, или носитель (фосфатный буфер рН 6, кремофор EL 5% масс./об., DMSO 0,3% масс./об., хлорид бензалкония 0,02% масс./об.) вводили в маске приматам, не представляющим собой человека, с вызванной лазером глазной гипертензией. Противоположный глаз не подвергали обработке.

Внутриглазное давление измеряли в выбранные моменты времени с использованием пневмотонометра (Model 30™ Reichert, Depew, NY, USA) до глазного введения (базальный уровень) и в выбранный момент времени после глазного введения. Перед каждым измерением внутриглазного давления в глаз вносили одну каплю 0,13% пропаракаина HCl.

Результаты

Данные записывали в виде среднего значения ± SEM от n=13. Эффективность (Е) в виде изменения IOP рассчитывали в сравнении с базовым уровнем и значениями для носителя, используя следующее уравнение: (IOP_drug - IOP_{basal drug}) - (IOP_veh - IOP_{basal veh}). Записанные значения относятся к максимальному изменению IOP (E_max) и эффекту снижения IOP, обнаруживаемому в момент времени 300 мин после введения дозы (E_300min).

Результаты, приведенные в Таблице 6, продемонстрировали, что высвобождающий оксид азота ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа по изобретению (цитратная соль соединения (1)-(2S)) показал более высокий эффект снижения внутриглазного давления по сравнению с эквимолярными дозами NO-донора ((IIIg)-OH), мироденафила и комбинации мироденафила с NO-донором в большинстве из проанализированных моментов времени.

Пример 28

(S)-2-(4-((4-этокси-3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)фенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-(S)-3-(2,3-бис(нитроокси)пропокси)пропаноат ((S)-изомер Соединения (15))

К раствору лоденафила (400 мг, 0,794 ммоль) и 4-нитрофенил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноата (см. Пример 4) (226 мг, 0,951 ммоль) в безводном DCM (5 мл) добавляли DMAP (97 мг, 0,794 ммоль).

Эту смесь перемешивали в течение выходных при комнатной температуре, затем ее разбавляли DCM и водой. Две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством обращенно-фазовой хроматографии (H₂O/CH₃CN с 0,01% FA, от 80:20 до 20:80). После очистки к остатку добавляли дихлорметан и насыщенный раствор NaHCO₃. Эти две фазы разделяли и водную фазу экстрагировали дважды DCM. Объединенные органические фазы сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении с получением 170 мг целевого продукта ((S)-изомер Соединения (15)) (выход: 30,0%).

¹Н ЯМР (600 МГц, dmso) δ 12.19 (s, 1Н), 7.83 (dt, J=8,7, 2,4 Гц, 2H), 7.38 (d, J=8,8 Гц, 1H), 5.53 (m, 1H), 4.88 (dd, J=12,8, 3,0 Гц, 1H), 4.72 (dd, J=12,8, 6,5 Гц, 1H), 4.21 (q, 2H), 4.16 (s, 3H), 4.06 (t, 2H), 3.77-3.59 (m, 4H), 2.89 (bs, 4H), 2.77 (t, 2H), 2.55 (m, 8H), 1.74 (dd, J=14,9, 7,4 Гц, 2H), 1.33 (t, J=6,9 Гц, 3Н), 0.94 (t, J=7,4 Гц, 3Н).

Пример 29

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата фумарат (фумаратная соль Соединения (9))

К раствору соединения (9), полученного как описано в Примере 1 (100 мг, 0,155 ммоль), в метаноле (1,5 мл) добавляли фумаровую кислоту (18 мг, 0,155 ммоль). Эту смесь перемешивали 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали МТВЕ. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 103 мг (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензил-амино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата фумарата (фумарат Соединения (9), выход: 87%).

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 13.13 (m, 2Н), 9.17 (m, 1H), 8.76 (m, 3Н), 8.54 (m, 1Н), 7.38 (m, 1H), 7.24 (m, 2H), 7.04 (m, 1H), 6.63 (s, 2H), 4.52 (m, 5H), 4.20 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.52 (m, 2H), 3.32 (m, 2H), 2.31 (m, 2H), 1.92 (m, 4H), 1.64 (m, 2H), 1.50 (m, 2H), 1.32 (m, 2H).

Пример 30

(S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата малеат (малеатная соль Соединения (9))

К раствору соединения (9), полученного как описано в Примере 1 (100 мг, 0,155 ммоль), в метаноле (1,5 мл) добавляли малеиновую кислоту (18 мг, 0,155 ммоль). Эту смесь перемешивали 10 минут при комнатной температуре, затем концентрировали и твердое вещество промывали МТВЕ. Это твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением 113 мг (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метокси-бензиламино)-5-(пиримидин-2-илметилкарбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)-метил-6-(нитроокси)гексаноата 2-малеата (малеат Соединения (9), выход: 96%).

¹Н ЯМР (600 МГц, DMSO-d₆) δ 12.35 (m, 3Н), 9.18 (m, 1H), 8.77 (m, 3Н), 8.54 (s, 1H), 7.38 (m, 2H), 7.22 (m, 1H), 7.04 (m, 1H), 4.55 (m, 6H), 4.20 (m, 3H), 3.98 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.49 (m, 2H), 2.75 (m, 2H), 2.65 (m, 2H), 2.31 (m, 2H), 1.92 (m, 4H), 1.56 (m, 4H), 1.32 (m, 2H).

Пример 31

Эффекты снижения внутриглазного давления (IOP) у Новозеландских белых кроликов с нормальным внутриглазным давлением

В данном исследовании оценивали эффективности соединения по изобретению (12)-(2S)-цитратная соль (раскрытого в Примере 8) в снижении внутриглазного давления у Новозеландских белых кроликов с нормальным внутриглазным давлением.

Методика эксперимента

Самцам Новозеландских белых (NZW) кроликов осуществляли местное введение (50 мкл) носителя (фосфатный буфер рН 6, кремофор EL 5% масс./об., DMSO 0,3% масс./об., хлорид бензалкония 0,02% масс./об.) или (12)-(2S)-цитратной соли в концентрации 1%.

Внутриглазное давление измеряли с использованием пневмотонометра (Model 30™ Reichert, Depew, NY, USA) до глазного введения (базальный уровень) и в выбранный момент времени после глазного введения. Перед каждым измерением внутриглазного давления в глаз вносили одну каплю 0,4% NOVESINA (приобретенного в Thea Pharma).

Результаты

Данные записывали в виде среднего значения ± SEM от n=6-9. Эффективность (Е) в виде изменения внутриглазного давления (IOP) рассчитывали в сравнении с базовым уровнем и значениями для носителя, используя следующее уравнение: (IOP_drug - IOP_{basal drug}) - (IOP_veh - IOP_{basal veh}) - Значения IOP брали в моменты времени 30, 60 и 120 минут после введения дозы.

Результаты, приведенные в Таблице 7, продемонстрировали, что высвобождающий оксид азота ингибитор фосфодиэстеразы 5 типа по изобретению (цитратная соль соединения (12)-(2S)) эффективно снижал IOP в нескольких из проанализированных моментов времени после введения дозы.

1. Соединение формулы (I) или (II) или его стереоизомер или фармацевтически приемлемая соль

где

R₁ представляет собой остаток молекулы, высвобождающей оксид азота, имеющий следующую формулу:

-C(O)-(O-CH₂)_y(CH₂)_m-[O-(CH₂)_n]_p-(CH-ONO₂)_q-CH₂-ONO₂,

где:

y равен 1 или 0;

р равен 1 или 0;

q равен 1 или 0;

m равен целому числу от 1 до 10;

n равен целому числу от 1 до 6;

R₂ представляет собой этил или н-пропил;

R₃ представляет собой метил или этил;

при условии что когда в формуле (I) R₂ представляет собой этил, тогда R₃ представляет собой метил, или когда R₂ представляет собой н-пропил, тогда R₃ представляет собой этил.

2. Соединение формулы (I) или (II) по п. 1, где m равен от 1 до 6.

3. Соединение формулы (I) или (II) по п. 1, где n равен 1 или 2.

4. Соединение формулы (I) или (II) по любому из пп. 1-3, где y равен 0.

5. Соединение формулы (I) или (II) по п. 4, где R₁ выбран из группы, состоящей из:

6. Соединение формулы (I) или (II) по любому из пп. 1-3, где y равен 1.

7. Соединение формулы (I) или (II) по п. 6, где R₁ выбран из группы, состоящей из:

8. Соединение формулы (I) по любому из пп. 1-7, где R₂ представляет собой н-пропил и R₃ представляет собой этил.

9. Соединение формулы (I) по любому из пп. 1-7, где R₂ представляет собой этил, R₃ представляет собой метил.

10. Соединение формулы (I) по п. 1, выбранное из группы, состоящей из следующих соединений:

- 2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-(2,3-бис(нитроокси)пропокси)-пропаноат (Соединение (1));

- 2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-2-(2-(нитроокси)этокси)ацетат (Соединение (2));

- 2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)гексаноат (Соединение (3));

- 2-(4-((3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенил)сульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)гексаноат (Соединение (4));

- 2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)гексилкарбонат (Соединение (5));

- 2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)гексил-карбонат (Соединение (6)).

11. Соединение формулы (II) по п. 1, выбранное из группы, состоящей из следующих соединений:

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноат (Соединение (9));

- [(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-5,6-бис(нитроокси)-гексаноат (Соединение (10));

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-2-(2-(нитроокси)этокси)ацетат (Соединение (11));

- [(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-3-[2,3-бис(нитроокси)-пропокси]пропаноат (Соединение (12));

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексилкарбонат (Соединение (13));

- ((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-5,6-бис(нитроокси)гексилкарбонат (Соединение (14)).

12. Соединение формулы (I) или (II) по п. 1, выбранное из группы, состоящей из следующих соединений:

- [(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-(5S)-5,6-бис(нитроокси)гексаноат (Соединение (10)-(5S));

- [(2S)-1-(4-{[(3-хлор-4-метоксифенил)метил]амино}-5-{[(пиримидин-2-ил)метил]карбамоил}пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил]метил-3-[(2S)-2,3-бис(нитроокси)пропокси]пропаноат (Соединение (12)-(2S));

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (9));

- ((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(5S)-5,6-бис(нитроокси)гексаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (10)-(5S));

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-2-(2-(нитроокси)этокси)ацетата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (11));

- ((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-3-((S)-2,3-бис(нитроокси)-пропокси)пропаноата 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (12)-(2S));

- (S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-[2,3-бис-(нитроокси)пропокси)]пропаноата цитрат (цитратная соль Соединения (1)-(2S));

- 2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-6-(нитроокси)-гексаноата цитрат (цитратная соль Соединения (4));

- 2-{4-[3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксибензол-1-сульфонил]пиперазин-1-ил}этил-[2-(нитроокси)этокси]ацетат 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновой кислоты (цитратная соль Соединения (2));

- (S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-5,6-бис(нитроокси)гексаноата цитрат (цитратная соль Соединения (3)-(5S));

- (S)-2-(4-(3-(5-этил-4-оксо-7-пропил-4,5-дигидро-3Н-пирроло[3,2-d]пиримидин-2-ил)-4-пропоксифенилсульфонил)пиперазин-1-ил)этил-3-(2,3-бис(нитроокси)пропокси)пропаноата дигидрохлорид (НСl соль Соединения (1)-(2S));

- ((S)-1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-(S)-5,6-бис(нитроокси)-гексилкарбонат (Соединение (14)-(5S));

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексилкарбоната 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (цитратная соль Соединения (13));

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата фумарат (фумаратная соль Соединения (9));

- (S)-(1-(4-(3-хлор-4-метоксибензиламино)-5-(пиримидин-2-илметил-карбамоил)пиримидин-2-ил)пирролидин-2-ил)метил-6-(нитроокси)гексаноата малеат (малеатная соль Соединения (9)).

13. Соединение формулы (I) или формулы (II) по любому из пп. 1-12 для применения в качестве лекарственного средства для лечения заболевания или состояния, ассоциированного с повышенным внутриглазным давлением.

14. Соединение формулы (I) или (II) по любому из пп. 1-12 для применения в способе лечения заболевания или состояния, ассоциированного с повышенным внутриглазным давлением.

15. Соединение формулы (I) или (II) для применения по п. 14, где заболевание или состояние выбрано из глазной гипертензии, глаукомы, открытоугольной глаукомы, нормотензивной глаукомы, пигментной глаукомы, псевдоэксфолиативной глаукомы и вызванной приемом лекарственного средства глаукомы.

16. Соединение формулы (I) или (II) по любому из пп. 1-12 для применения в способе лечения ретинопатии, ассоциированной с повышенным внутриглазным давлением.

17. Офтальмологическая фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора фосфодиэстеразы 5 типа (PDE5), высвобождающего оксид азота, содержащая соединение формулы (I) или формулы (II) по любому из пп. 1-12 в качестве активного агента и фармацевтически приемлемый эксципиент или носитель.