Способ получения энтомопатогенного материала гриба beauveria bassiana

 

3I353I

О П И СА Н И Е

И306РЕТ ЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства ¹

МПК А Oln 15/00

С 12d 7/00

Заявлено 25.V1.1970 (№ 1452041/30-15) с присоединением заявки №

П р;ио р итет

Опубликовано 071Х.1971. Бюллетень № 27

Дата опубликования описания 16.XI.1971

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

УДК 632.437.14(088.1) Авторы изобретения

Н. H. Кондратьев, О. А. Алешина, С. Н. Ильичева, А. Г. Периханова, Л. П. Синицына, А. А. Успенская и Е. М. Шагов

Всесоюзный научно-исследовательский институт микробиологических средств защиты растений и бактериальных препаратов

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭНТОМОПАТОГЕННОГО МАТЕРИАЛА

ГРИБА BEAUVERlA BASSIANA

Изобретение относится к производству микробиологических препаратов сельскохозяйственного назначения и может быть использовано для изготовления энтомопатогенного препарата боверина.

Известны три способа выращивания гриба

Beauveria bassiana для приготовления препарата боверина: поверхностный (получение конидиоспор), глубинно-поверхностный (получение мицелиальной массы глубинным методом с последующим разливом ее в кюветы для образования поверхностной пленки гриба с конидиоспорами) и глубинный метод (получение бластоспор и гонидий).

Первые два известных способа не могут иметь промышленного применения из-за потребности больших производственных площадей для поверхностного выращивания и трудности сбора полученного биоматер иала, а также засоренности воздуха, вызывающей аллергические заболевания. Третий способ выращивания гриба Beauveria bassiana позволяет получать энтомопатогенный материал в виде гонидий (куски мицелия) и бластоспор или эндоконидий (овальные, эллипсовидные образования). Он включает культивирование гриба Beauveria bassiana глубинным методом на аэрируемой жидкой питательной среде, которая содержит источники углерода, азота и минеральных солей. Культивировани ведут при определенной температуре и определенном значении рН среды. Однако полученные по этому способу гонидии и бластоспоры или эндоконидии быстро теряют жиз5 неспособность при высушивании существующи м и методами.

Цель изобретения — получение методом только глубинного культивирования более устойчивого к высушиванию и к другим внеш10 ним воздействиям энтомопатогенного материала, содержащего конидиоспоры гриба

Beauveria bassiana. Это достигается тем, что в питательную среду как обязательный компонент вводят соль хлористого кальция предпоч15 тительно в количестве 0,75 — 5,0 /o.

Полученный методом глубинного культивирования энтомопатогенный споровый материал по морфологическим признакам и вирулентности не отличается от энтомопатогенно20 го спорового материала, полученного при поверхностном и глубинно-поверхностном выращивании.

В результате применения предлагаемого способа выход сухой биомассы составляет око25 ло 4 г с 1 л культуральной жидкости, содержащей .конидиоспоры.

Пример. Посевной материал для инокуляции готовят в виде суспензии конидиоспор в питательной среде с добавкой для осажде30 ния и равномерного распределения спор в

313531

Предмет изобретения

Составитель И. Дранишников

Техред Л, В. Куклина Корректор Н. С, Шевченко

Редактор Д. Пинчук

Заказ 3259/2 Изд. № 1314 Тираж 473 Подписное

ЦИИИПИ Комитета по делам. изобретений и открытий при Совете Министров. СССР

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5.

Типография, пр. Сапунова, 2

3 жидкости Твина 80. Конидиоспоры предварительно получают выращиванием культуры гриба Beauveria bassiana на пшене или ячмене известным способом. Суспензию конидиоспор вносят стерильно в ферментер с предварительно простерилизова иной питательной средой в составе, г/л:

Сахароза 10,0 — 20,0

ИаМОз 3,0 — 6,0

Мд$04 7НаО 0,2 — 0,5

КНзР04 0,5 — 1,5

СаС12 6Н20 7,5 — 50,0

Выращивание культуры ведут при 25—

28 С, начальном значении рН, равном 4,2— зО

6,0 и аэрации, ран ной 0,5 — 2,0, с варьл/час ированием последней по мере роста и развития гриба.

Посевной материал и пробы .культуральной жидкости в,процессе ферментации проверяют на чистоту культуры и жизнеспособность получаемой споровой маасы.

Продолжительность ферментации iB зависимости от состава среды, режима, рооста культуры может варьировать от 80 до 104 час.

Биомассу отделяют от культуральной жидкоспи фильтрованием .на нутч-фильтре или фильтр-прессе. Технология последующей обра ботки пасты определяется формой применения препарата.

Использование глубинного метода получения энтомопатогенного материала гриба

Beauveria bassiana, содержащего конидиоспоры, открывает возможность для широкого промышленного производства препарата бовери10 на.

1. Способ получения энтомопатогенного ма15 териала гриба Beauveria bassiana путем культивирования последнего глубинным методом на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральных солей, при

25 — 28 С, начальном значении рН 4,2 — 6,0 и

20 аэрации среды, отличающийея тем, что, с целью получения энтомопатогенного материала, содержащего конидиоспоры, в питательную среду как обязательный компонент вводят хлористый кальций.

25 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что хлористый кальций вводят в количестве

0,75 — 5,0% (от веса среды) .