Способ выделения холерных вибрионов из жидких проб

 

СПОСОБ ВЬЩЕЛЕНИЯ ХОЛЕРНЫХ ВИБРИОНОВ ИЗ ЖИДКИХ ПРОБ пут-ем добавления питательных субстратов!, инкубации, пересева на жидкую накЬпи-тельную среду, подращивания с последунщим высевом на плотную среду, отличающийся тем, что, с, целью повышения высеваемости холерных вибрионбв, в пробу добавляют углеводородные дрояоти, хлористый натрий, углекислый натрий, далее инкубируют в среде, содержащей, г/л: сернистокислый натрий 0,4-0,6, хлористый натрий' 3,0-5,0, углекисльй безводный натрий 0,2-0,6, углеводородные дрожяон 20,0-25,0, пересевают на среду ТОРС же состава с добавлением 1-3% агар-агара.(Лс:

COlO3 СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2i) 2057158/28-13 (22) 06.08.74 (46) 28.02.85. Бюл. Р 8 (72) В.Н.Милютин, Л.Б.Елисова, М.С.Дрожевкина и Н.ф.Касаткин (71) Ростовский-на-Дону государствен1 ный научно-исследовательский противочумный институт (53) 616.932(088.8) (54)(57) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ХОЛЕРНЫХ

ВИБРИОНОВ ИЗ ЖИДКИХ ПРОБ путем до бавления питательных субстратов, инкубации, пересева на жидкую накопи %. Я0,, 497840 А

4(51). С 12 И 1/02 // С 12 Q 1/04 //, // С 12 К 1/63 тельную среду, подращивания с последующим высевом на плотную среду, отличающийся тем, что, с целью повышения высеваемости холерных вибрионов, в пробу добавляют углеводородные дрожжи, хлористый натрий, углекислый натрий, далее инкубируют в среде, содержащей, г/л: сернистокислый натрий 0,4-0,6, хлористый натрий 3,0-5,0, углекислый безводный натрий 0,2-0,6, углеводородные дрож- жи 20,0-25,0, пересевают на среду того же состава с добавлением 1-3% агар-агара.

497840

Корректор О.Билак

Заказ 561/4 Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Х<-35, Раушская наб., д.4/5

Филиал ППП "Патент", r.Óæãoðoä, ул.Проектная, 4

Из обр ет ение относится к медицинской микробиологии, а именно к методам диагностики холеры.

Известен способ обнаружения холерных вибрионов в воде открытых водоемов, сточных и канализационных водах и других объектах внешней среды путем- трехкратных последовательных пересевов в 17-ную пептонную воду с высевами через 6 ч на мясо-пептонный 1Р щелочной агар.

Цель изобретения — повышение высеваемости холерных вибрионов.

Для достижения зтой цели в пробу по предлагаемому способу добавляют 15 углеводородные дрожжи, хлористый натрий, углекислый натрий, далее инкубируют в среде, содержащей г/л: сернистокислый натрий 0,4-0,6, хлористый натрий 3,0-5,0, углекислый 2р безводный натрий 0,2-0,6, углеводородные дрожжи 20,0-25,0, пересевают на среду того же состава с добавлением 1-3Ж агар-агара.

Способ осуществляют следующим об- 2S разом.

Пример 1. В 1 л поступившей на исследование пробы воды из открытого водоема нестерильно всыпают сухой порошок дрожжей, взбалтывают и Зр инкубируют при 37 С. Через 5-6 час

О делают второй nepeces. В 5 мп накопительной дрожжевой среды (НДС-1) вносят одну петлю (диаметр 5 мм) материала, взятого с поверхности первого посева. Одновременно делают рысев на дрожжевой агар, разлитый по 20,0 мл в чашки Петри. Посевы выращивают при

37 .С. Через 5-6 час делают третий но0

Редактор С.Титова Техред Т.Маточка сев в накопительную дрожжевую среду и на чашки дрожжевого arapa из второго посева в НДС-1 описанным выше способом.

После 12 ч пребывания посевов на дрожжевом arape при 37 С их просматО ривают и выбирают подозрительные колонии,.

Углеводородные дрожжи применяют в виде сухого порошка следующего состава, г/л:

Углеводородные дрожжи 30

Хлористый натрий 10

Углекислый безводный натрий 2

Смесь расфасовывают в полиэтиленовые пакеты из расчета на 1 л исследуемого материала рН этого состава 9,2.

В посеве из второй накопительной дрожжевой среды на пластинке дрожжевого arapa выделяют культуру холерных вибрионов.

Пример 2. Воду берут из канализационного коллектора. Способ исследования тот же, что в примере 1.

Используя углеводородные дрожжи, холерные вибрионы выделяют в посеве из первой накопительной дрожжевой среды.

Использование углеводородных дрожжей для обнаружения холерных вибрионов во внешней среде ускоряет получение результатов на 3 ч и отличается большой чувствительностью.

Предлагаемый способ позволяет выделить холерные вибрионы из объектов, содержащих единичные клетки в тех случаях, когда пептонные и мясные среды их.не улавливают.