Способ определения содержания липидов в гистологических срезах надпочечников

 

(Ц кестен .

3, ОПИС Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к аат. саид-ву (22) Заявлено 19.0774 (21) 2038715/28-13 с присоединением заявки Мо (23) Приоритет—

К„г

А 61 В 10/00

G 01 Н 1 /28

Государственный комитет

СССР но девам изобретений н . открытий

Опубликовано 050679., Бюллетень М 2 1 (53) УДК 615.475 (088.8) Дата опубликования описания 0506.79 (72) Автар изобретения

Л. Н. Лаврентьев

Ленинградский научно-исследовательский институт радиационной гигиены (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ЛИПИДЙВ

В ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗАХ НАДПОЧЕЧНИКОВ

Изобретение относится к медици- не, а точнее к радиационной медици-. не, изучающей состояния надпочечников при воздействии на организм различных факторов внешней среды и раз- рабатывающей соответствующие меры защиты.

Известен способ определения содержания липидов в гистологических срезах надпочечников путем окрашивания их красителем (1). Содержание липидов в окрашенных средах оценивается на глаз, путем сравнения микрофотографий. Такой способ не дает точного определения количества липидов.

Целью изобретения является повышение точности определения.

Для этого параллельно ставят контрольные опыты, устанавливают время освещения негативов в опыте в контроле и по разнице времени освещения определяют процентное содержание липидов. 25

Способ осуществляют следующим образом.

Надпочечнйкн подопытных и контрольных животных (например по пяти животных иэ каждой группы) фиксируют в

15%-ном растворе формалина. Через

2 сутки после фиксации на заморажи- вающем микротоме изготавливают срезы надпочечников толщиной 7 мк. Полученные препараты промывают дистиллированной водой и переносят для окраски в 0,1%-ный спиртовый раствор черного судапа. Через 30 мин препараты вынимают из красителя, промывают дистиллированной водой, переносят на предметное стекло и заключают под .покровное стекло 16%-ным раствором поливинилового спирта.

В зависимости от содержания липи- дов препараты окрашиваются в различные оттенки черного цвета.

Далее с одинаковых анатомичвских участков препаратов делают негативйые изображения микрофотографий с увели чением 1 х 300. С негативов на одйо" типную фотографическую бумагу с использованием одинаковых фотореактивов печатают позитивные иэображения одинаковой средней плотности.

Для этого выбирают и устанавливают оптимальное время освещения негативов. При этом время экспозиции изме» ряется секундомером.

Процентное содержание липидов вы числяется только при сопоставлении величины экспозиций позитивных изобра5896

4ормула изобретения

3 66 жений одинаковой средней плотности срезов надпочечников, полученных от пОдопытных и кОНТРОльных жиВОтных

В основу расчета принято следующее: чем больше липидов содержится в надпочечнике, тем интенсивнее по плотно сТН и больше по протяженности

ОкРасившиеся участки среза и тем светлее будет изготовленный из него негатив микрофотографии. Для печатания на фотографическую бумагу с негативов при различном содержании липидов потребуется различная пд времени экспозиция. Она находится в обратнопропорциональной зависимости от количества содержащихся в срезе окрашенных липидов.

Величина экспозиций негативов окрашейных срезов надпочечников контрольных животных принимается за 1003-ное содержание липидов. Все дальнейшие расчеты содержания липидод ведутся на основании этого условия. Далее рассчитывают процентное содержание липидов в опыте и контроле путем сопоставления величины экспозиций при фотографическом печата- 25 нии с негативов, полученных от различных подопытных и контрольных животных. Для окончательного расчета берут;среднеарифметические показатеи экспозиций от всех пяти животных 30 на каждый срок исследования. Например, среднеарифметическая величина экспозиций в опыте равна 10 сек, а в контроле — 4 сек, что составит отношение 10:4 2,5 или в процентном исчи-35 слении 100:2,5=40. Следовательно, в данном случае в опыте липидов содержишься 40% по отношенйю к контролю. Аналогичные расчеты проводят по всем срокам исследований что дает

/ 40 возможность определять процентное содержание липидов в динамике. Полу-. ченные данные проведенных опытбв с

4 введением продуктов ядерного деления показали, что содержание липидов в надпочечниках подопытных животных в зависимости от дозы облучения колебалось от 12,5 до 97,5% по отношению к контрольным животным.

Предлагаемый способ повышает точность и объективность определения содержания количества липидов в надпочечниках животных, так как дает возможность определить их процентное содержание, Положительный эффект способа проявляется в повышении уровня научных исследований, направленных на разработку средств защиты

Организма от вредных воздействий внешней среды.

Этот способ не требует дорогостоящего оборудования и осуществляется параллельно с изготовлением обычных микрофотографий, необходимых при гистологических исследованиях надпочечников.

Способ определения содержания липи дов в гистологических срезах надпочеч-. ников путем окрашивания их красителем, изготовления негативов микрофотографий, отличающийся тем, что, с целью повышения точности определения, параллельно ставят контрольные опыты, устанавливают вреуя освещения негативов в опыте и контроле и по разнице времени освещения определяют процентное содержание липндов.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Чучукало A. И. Изменение содержания липоидов, холестерина и аскорбиновой кислоты в коре надпочечников, — Медицинская радиоло-. гия, 1960, т. 5, и. 3, с. 37-41.

I(op екто И. Муска

Подписное

CP

\ Проектная, 4

Составитель В . Головин

Р акто О. Иванова Тех ед И. Вабурка

Заказ 3026/4 Тираж 671

ЦНИИПИ Государственного комитета СС по делам изобретений и открытий — - .—

Ф

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул.