Способ приготовления антигельминтного препарата тетрамизола2,3,5,5-тетрагидро-6-фенил-имидазо -/2,1-в/- тиазола
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистичесних
Ресиубиин
К ПАТЕНТУ (8l) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 21;0674 (21) 2046507/30-15 (23) Приоритет — (32) 22.06.73 (51) М. Кл.
A 61 К 31/425
Государственный комитет
СССР ио делам изобретений и открытий (31) Р2331793.3 (33) ФРГ
Опубликовано 250Ь80.Бюллетень ¹ 11 дата опубликования описания 2503.80 (53) УДК619:.615. .012 (088.8) Иностранцы
Ханс Петер Шульц и Герберт Феге (ФРГ) (72) Авторы изобретения
Иностранная фирма Бай ер АГ . (ФРГ) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ АНТИГЕЛЬМИНТНОГО
ПРЕПАРАТА ТЕТРАМИЗОЛА-2,3,5,5-ТЕТРАГИДРΠ†-ФЕНИЛИМИДАЗΠ†(2,1-Ъ) -ТИАЗОЛА
Изобретение относится к ветеринарии, в особенности к получению известиoro противоглистного средства те трами зола- 2, 3, 5, 6-те тра гидро- 6-фенилимидазо- (2, 1-b) тиаэола.
Известен способ приготовления жидких препаратов в ветеринарии (1) .
В качестве жидких препаратов приме няют, например, такие эфиры Фосфорных кислот, как руэлен, трихлорфон, фентион и другие, которые наряду с противоглистной активностью обладают и сильной инсектицидной активностью, Однако противоглистная активность. 1о .жидких препаратов, содержащих активное вещество трихлорфон или фентион, незначительная, и заметно меньше, при нанесении на кожу животных, чем при введении через рот или при под- ® кожном введении. Кроме того, при применении фентиона только у части крупного рогатого скота, подвергнутого лечению путем нанесения на кожу, можно было установить действие против ленточных глистов (DictyocauIus).
Применяют руэлен в виде жидкого препарата нанесением на кожу для лечения животных, пораженных эндопаразитными глистами. Однако, дости гаемое при этом противоглистное действие обычно недостаточно для практических целей. Противоглистное дей- ствие препарата при введении через рот или впрыскивании обычно значительно сильнее, чем при нанесении
его на поверхность кожи.
Известен также способ приготовления антигельминтного препарата, тетрамизола-2,3,5,5-тетрагидро-б-фенилимидаэо-(2,1-b)-тиазола смеши-. ванием его с минеральным маслом и изопропанолом (2).
Хотя при известном способе приготовления антигельминтного препарата тетрамизола и достигают высокой эффективности препарата, однако она все же недостаточна,и препарат сложно применять, так как необходимо вводить его внутрь через рот или инъецировать.
Цель изобретения — повышение активности препарата при нанесении его на кожу животным .
Для этого согласно предлагаемому способу тетрамизол-2,3,5,1-тетрагидро-б-фенилимидазо-(2,1-b)-тиазол используют в виде 3-изомера, в качестве минерального масла используют веретенное,масло, а компонену»
724077 ты смешивают с изопропанолом сооТветстненно в соотношении 10:10:80.
Было найдено, что известное †противоглистное вещество тетрамизол н виде смеси его d и 2 — изомеров, н виде чисто .С-формы (ленамизол) или в виде кислотноаддитивного продукта при налйчании в виде жидкого препарата обладает притивоглистным действием, сравнимым с действием при аналогичном лечении с введением ,препарата через рот или нпрыскиванием.
Тетрамизол в виде жидкого препарата проявляет протиноглистное дейстние, сравнимое с действием при лечении с введЕяием через рот или впрыскиванием обычно применяемого препарата, содержащего то же самое активное нещестно„ тогда <ак другие противоглистные средства, например, руэлен или трихлорфон, при введении их через рот или впрыскивании, проявляют значительно большую активность, чем при налинании ° предлагаемые жидкие препараты для нанесения на кожу получают следующим образом. Тетрамиэол в виде чистого 3-изомера(ленамизол) или в виде кислотноаддитивного соедине ния, например н виде хлсргидрата, " растворяют, эмульгируют или суспендируют в подходящем, хорошо переносимом кожей растворителей или смеси растворителей, и н случае неОбкодимости добавляют дополнительные вспомогательные вещества, Пригодными растворителями являются все органические и неорганические растворители, которые н достаточном количестве поглощают активное веще" ство — тетрамизол или соль тетрамизола, например гидрохлорид, и обеспечивают достаточное поглощение активного вещества кожей без повреждения тканей.
К предлагаемым препаратам относятся жидкие препараты, которые наряду с нетоксичными, инертными, фармацевтически приемлемыми носителями содержат активное вещество тетрамизол в виде чистой 8.-формы (ленамизол) или н виде смеси его
d и Р-.изомерон, в виде кислотноаддитивной соли, например гидрохлорида, или жидкие препараты для нанесе: йия на" кожу н определенных дозированных .количестнах, содержание активного вещества в которых соответстнует определенной доле или кратному разовой дозы. Эта доэиронка может быть равна, например, 1,2,3 и 4-разовым дозам или 1/2 и 1/3 или 1/4- разоной дозы. Разовая дозасодержит предпочтительно то количество активного вещества, которое наносится в один прием и соответствует обычно половине 1/3 или 1/4 суточной дозы. Под нетоксичными, инертными, фармацентически приемле/ мыми носителями следует понимать твердые, полутнердые или жидкие раэбавители, наполнители и всякого рода вспомогательные средства для получения препаратов.
Предпочтительны фармацевтические препараты в виде растворов, суспензий, эмульсий и распыливаемых жидкостей. Фармацевтические препараты могут содержать активное вещестно тетрамизол вместе с обычными носителями, например, вещестнами, обеспечйвающими прилипание: карбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза и другие производные целлюлозы и крахмала, полиакрилаты, альгинаты, желатины, гуммиарабик, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт, сополимеры иэ метилвинилового эфира и ангидрида малеиновой кислоты, полиэтиленгликоли, парафины, масла, носки, силикон,1, коллоидальная кремневая кислота или смеси из указанных веществ., В растнорах и эмульсиях, кроме активного вещества тетрамиэола,могут
25 содержаться обычные носители, например растворители: вода, этиловый cIIYpT изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензилоный спирт, бензилбенэоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленглйколь, масла, в частности хлопковое масло, арахисовое масло, кукурузное масло, оливковое масло, касторовое масло и кунжутное масло, триглицерид каприл/-каприловой кислоты, изопропил35 миристат Олеиноный эфир ОлеинОВОй кислоты, этиловый эфир молочной кислоты, воскообразные эфиры жирных кислот, например жир, выделяемый железой копчика утки, глицерин, глицеринформаль, тетрагидрофурфуриловый
40 спирт и полиэтиленгликоли; другими пригодными растворителями являются, например, неразветнленные и/или разветвленные одноатомные и/или
Многоатомные — спирты, ароматические
45 и/или алифатические углеводОРоды, эфиры карбононых кислот, хлорированные углеводороды, кетоны, например ацетон и метилэтилкетон, а также такие вещества, как диметилсульфоксид, диметилацетамид, диметилформамид, N.-метилпирролидон, диоксан,2-диметил-4-оксиметил-l,Ç-диоксалан; поверхностные вещества (т.е. эмульгаторы, смачиватели и часто вещества, содейстнующие поглощению), например анионоактинные вещестна) лаурилсульфат натрия, сульфаты простых эфиров спиртов жирного ряда, моноэтаноламиносоль, моно/диалкилполигликолевого эфира
40 и эфира ортофосфорной кислоты,катионоактинные вещества, например хлористый ацетилтриметиламмоний; амфолитические вещества, например, ди-Na-N-лаурил- Д -иминодипропионат ф5 или лецитин; неионогенные вещества, .724 077
Животные 5-10
Овца
Крупный рогатый
5 скот
Собака
Свинья
5-15
8-12
10-20, Метод применения
I
Минимальная доза активного вещества, ! мг/кг
25 неэффективен при 250
Наливание
Изопропанол
Н О
Подкожно
Изопропанол +
ЛГВМ* (10Ъ) неэффекти10 но при 250
Наливание
* ЛГВМ вЂ” легкое гидроочищенное веретенное масло. например полиоксиэтилированное касторовое масло, полиоксизтилиро- ванный моноолеат сорбитана, моностеарат сорбитана, этиловый спирт, моностеарат глицерина, стеарат полиоксиэтилена, алкилфенолполигликолевый эфир.
Распыливаемые жидкости могут наряду с активным веществом, тетрамизолом, содержать обычные вспомогательные вещества, например вещест-. ва, обеспечивающие прилипание, растворители и эмульгаторы (причем важное значение имеют галоидированные углеводороды). Кроме того, распыляемые жидкости могут содержать обычные газовытеснители, например хлорфтористые углеводороды или бутан.
Суспензии могут наряду с активным веществом тетрамизолом содержать такие обычные носители, как жидкие разбавители, например вода, этиловый спирт, пропиленгликоль, масла; поверхностно-активные вецества, например сложный эфир полиоксиэтиленсорбитана, моностеарат гдицерина; загустители, например коллоидальная кремневая кислота, метилцеллюлоэа, моностеарат алюминия, производные полиакриловых кислот, микрокристаллическая целлюлоза.
Для получения хороших .результатоь в общем оказалось целесообразным нанести приблизительно 1-20 мг тетр6мизола на 1 кг веса в день, При применении жидкого препарата хлоргидрата тетрамизола для наливания оказалось также целесообразным нанести приблизительно от 1 до
20 мг хлоргидрата тетрамизола на 1 кг веса в день. Для животных. особенно эффективными оказались следующие дозы тетрамизола.
B жидких препаратах для наливания
1Q активное вещество, тетрамизол,должно содержаться предпочтительно в количестве приблизительно от О, 1 до 99,5% а еще лучше приблизительно от 0,5 до 95% от веса общей смеси.
Кроме активного вещества тетрамизола и/или кислотноаддитивного продукта его„ указанные выше жидкие, препараты для наливания могут содержать и другие фармацевтические активные вещества, в частности вещества, обладающие противоглистным действием. Эти препараты получают известными, обычными методами, например путем смешивания активного вещества с носителем или носителяMH °
П р и М е р 1, Глисты Strongyloides ratt1
ГЬдопытных животных (крыс), котоЗО рые были в экспериментальных условиях. заражены глистами Strongyloides ratti по окончании инкубационного периода паразитов подвергают лечению. Активное вещество наливают в виде раствора.
З5 . Эффективность препарата, определяют тем,что после вскрытия подсчитывают оставшихся в подопытном животном глистов,сравнивают с контрольными животными, которых не подвергали лечению, и из этого рассчитывают активность
4О (в процентах) .
В табл.1 и 2 указаны растворитель, метод применения и минимальные дозы предлагаемого и известного (трихлорфона) активных веществ, обеспечиваю45, щие изгнание более 90% глистов.
Та блица 1
724077
Таблица 2
t Метод Минимальная эффективприменения 1ная доза активного вещества, мг/кг
Растворитель
Полиэтиленгли- Наливание коль- 200l0
Неэффективен при 250
Этиленгликоль То же
То же
Те тра гидрофурбу-, риловый спирт
Циклогексанон
Изопропанол н о.
Изопропанол+
+ЛГВМ" (10% ) Подкожно
Наливание 10
I ляют тем, что после вскрытия подсчитывают.оставшихся в подопытном животном глистов, сравнивают с контрольными животными, которых не подвергали лечению, и из этого рассчитывают активность! в процентах. сравнительные результаты эффективности активных веществ. предлагаемого и известного (трихлорфона! представлены в табл. 3 и 4.
Таблица 3 — т
Метод Минимальная эффек. Раствори тель применения :тивная доза, мг/кг тетрами- трихлорфона
Наливание Неэффективен
Бу тилгликоль
Пропилгликоль
Изопропанол
То же! !
То же
Неэффективен при 250
50 н о Изопропанол +
ЛГВМ (10%) Подкожно 25
Наливание 50
Пример 2. Глисты Nippostron- 25
gyIus muris.
Подопытных животных (крыс), которые были в экспериментальных условиях заражены глистами Nippo trongyIuh
muris, по окончании инкубационного периода паразитов, подвергают лечению.
Активное вещество наливают в виде раствора.
Эффективность препарата опредеI
100 .25.
724077
Таблица 4
Неэффективен при 250
Полиэтиленгли коль-200 Наливание
50
То же
25! °
Циклогексанон
Изопропанол
Н20
Подкожно
Таблица 5
Растворитель Минимальная эффектив ная доза, мг/кг
25 не эффективен при 250
Изопропанол
Изопропанол+
+10% ЛГВМ
25 То же
Этилгликоль То же !
Тетрагидрофурфуриловый спирт
Пример 3, Личинки Ascar1s
suum °
Подопытных животных (крыс), которые были в экспериментальных услОвиях заражены глистами Ascar1s suum, через 1-3 дня после заражения, подвергают лечению. Активное вещество наливают в виде раствора. Эффективность препарата определяют тем, что после вскрытия на 7-й день пос- !
При применении тетрамизола- НС1 в качестве активного вещества, растворенного, например, в полиэтиленгликоле-200, этиленгликоле, циклогексаноне и изопропаноле, минимальная доза составляет 50 мг/кг (изгнание глистов более 90 ). ле заражения, подсчитывают в под.опытном животном гЛистов, сравнивают с контрольными животными, кото- рые не подвергались лечению, и из
? этого рассчитывают активность, в процентах.
В табл. 5 даны результаты сравнения эффективности предлагаемого
30 и известного активных веществ.
В табл.б показаны скорости поглощения предлагаемых активных веществ методом наливания (при применении
$p растворов этих веществ на коже крыс не наблюдалось местной непереносимости) ° ат тееюч а
7.24077
Та блица 6
Бутилгликоль
Пропилгликоль
Изотзопанол
Хорошее
То же
Сразу
3-5
1-2
1-2
Полиэтиленгликоль-200
Плохое
Хорошее
То же
10-15
10-15
Этилгликоль
Циклогексанон
Тетрагидрофурфу-. риловый спирт
Плохое а 7
Препарат П етод при- Доза Выдеменения мг/кг ление
10 вес.Ъ левамизола в изопропаноле +
lG вес.Ъ ЛГВМ Наливание 10
7,,5
99
Левамизол Подкожно 5
tI p и м е р 4. Опыт с легочными глистами у крупного рогатого скота.
Крупный рогатый скот, который был в эксперйментальных или естественных условиях заражен глистами.
D1ctyocauIus, подвергают лечению наливанием раствора активного вещества на, спину или впрыскиванием под кожу.
Эффективность определяют при
Пример 5. Опыт С глистами, поражающими желудочно-кишечный тракт у крупного рогатого скота (контролируемый опыт со взрослыми глистами) .
Крупный рогатый скот, который был s экспериментальных условиях заражен глистами Haemonehus, Соорег1а и Oesophagostcmum, подвергают лечению наливанием на спину раствора активного. вещества. подсчете личинок. легочных глистов, выделяемых с калом до и после лече. ния. Выделение меньшего количества лйчинок после лечения означает, что глисты были умерщвлены или повреждены настолько, что они не могут больше
30 образовать личинок.
В табл.7. даны результаты сравнения эффективности предлагаемого и известного (левамизола) препарата.
Эффективность препарата определяют тем, что после вскрытия подсчитывают оставшихся в подопытном животном глистов, сравнивают с контрольными животными, которых не подвергали лечению, и из этого рассчитывают активностье
Результаты сравнения эффективнос ти предлагаемого и известного (леваd0 мизола) препаратов даны в табл.8.
724077
Таблица 8
Препарат
3 99 б 100
8 100
5,4 100
100
100
100
Левамиэол
Через рот
100
100
Пример б. Опыт с глистами, поражающими желудочно-кишечный тракт у крупного рогатого скота (контролируемый опыт с личинками в стадии развития), .30
Крупный рогатый скот, который был в Экспериментальных условиях заражен глистами Haemonchus Ссореria и Oesophagostomum,. подвергают лечению наливанием раствора активного вещества на спину или впрыскиванием
Метод Доза, применения мг/кг
Препарат
,93
100.81
Левамиэол.6,5
Подкожно
Через рот
53
100
Пример 7. Опыт с глистами, поражающими желудочно-кишечный тракт, у крупного рогатого скота (выделение яиц).
Крупный рогатый скот, который был в экспериментальных или естественных 60 условиях заражен разными видами глистов, поражающих желудочно-кишечный тракт (Cooperia, Osterfagia, TrichostrongyIus, Baccostomum 0esophagostomum ), по окончании инкубацион- 65
10 вес.% левамизола в изопропаноле + 10 вес.%
ЛГВМ Наливание
l0 sec % левамизола в изопропаноле + Наливание
10 вес.% ЛГВМ под кожу. Время лечения выбирают так, чтобы личинки находились на четвертой стадии развития.
Эффективность препаратов определяют тем, что после вскрытия подсчитывают оставшихся в подопытном животном глистов, сравнивают с контрольными животными, которых не подвергали лечению, и из этого рассчитывают их активность. (см.табл.9).
Т а б л и ц а 9
Изгнание глистов в % по отношению к группе контрольных животных, которых не подверггали лечению,Haemonchus Cooperia!Oesophago s tomum
Э ного периода паразитов подвергают лечению наливанием на спину раствора активного вещества.
Эффективность определяют тем, что подсчитывают количество выделяемых с калом яиц глистов до и после лечения. Выделение меньшего количества яиц после лечения оэйачает, что глисты были изгнаны или повреждены настолько, что они не могут болыае образовать яиц (см.табл.10).
724077
16
Таблица 10
Те трами зол в изопропа- Наливаноле " ние
87
10
Те трамиэ ол в изопропаноле+ЛРВМ То же
99
10
Левамиэол в иэопропа- заливание ноле+ЛгВМ
Левамизол
Через рот
Таблица 11
Выделение яиц в В,. Метод Доза,, применения мг/кг
Препарат
Haemonchus Соорег1а
) 25
2,5
98
84
97
99
/
Пример 8. Опыт с глистами, поражающими желудочно-кишечнйй тракт, у" овец.
Овец, которые были в экспериментальных условиях заражены глистами
Haemonchus или Соорег1а, по окончании инкубационного периода паразитов, подвергают лечению наливанием раствора активного вещества на спину.
1 0 н ес . Ъ лев амиэола, в изопропаноле + 10 нес. Е Наливание
ЛГВМ
Пример 9. Опред®тесне уров-ня активного вещества в крови.
Определение уровня активного вещества в крови дает возможность более простым по сравнению с опытами с глистами методом проверить поглощение активного вещества тетрамизола при наливании. Определяют уровень активного нещества в крови рогатого скота, получившего 20 мг ленамизола/ кг.
Лечение налинанием (левамизол н разных растворителях) сравиивают с введением через рот (2В-йый водный раствор левамизола) и с подкожным введением (10% левамиэола в 0,9Ъ-ном ,водном растворе NaC Р) .
Методика.
Выделение активного вещества из крови производят методом Холброкка
Зффективнос ь определяют тем, что подсчитынаьт выделяемые с калом яйца глистов до и после лечения.
Выделение меньшего количества яиц после лечения означает, что
25 глисты были изгнаны или повреждены настолько,, что они больше не образуют яиц (см. табл.ll). и Скэльса. Количественный анализ осуществляют спектрофотометрическим методом путей измерения снетопоглощения при длине волн н 215 мм.
При нанесении наливанием можно достигнуть более высоких уровней
50 активного вещества н крови, чем нри введении через рот и н подкожном введении. Только через дна часа после применения препарата подкожное введение дает более высокие
5$ уровни, чем налинание. Высокие уровни актинного вещества н крови, т.е. хорошее поглощение активного вещества являются предпосылкой для проявления его противоглистного действия. В табл.12 приведены результаты определения уровня активного вещества в крови животных после налинания 20 мг/кг препарата.
724077
18
Таблица 12
10 r левамиэола +, 10 г ЛГВМ, и иэопропанол до получения всего 100 мп
0,79 0,70 0,59
27-29
10 r левамиэола + 10 r ЛГВМ, и хлороформ до получения, всего 100 мл
0,97 0,86 0,71
10% левамизола + 20% поликсиэтилированного касторового масла + изопропилмиристат
064 0 72 0 76
10% левамизола + 7,5% моноолеата сорбитина + 10% CHC1> + изопропилмиристат 1,26 1,42 1,17
10% левамизола + 7,5% лецитина +
+ 10% СНСР + изопропилмиристат
1,00 1,20 0,96
10% л ев амКз ола + 10% ЛГВМ + хлористый метилен
1,00 1,89 0,85
10% левамизола + моноолеат сорбитана + декалин
0,67 1,16 0,94
10% левамиэола + 15% моноолеата сорбитана + бутиловый эфир фталевой кислоты
0 99 1 02 0 88
3, 8-9
10% левамиэола + 25% диметил сульфоксида + изопропанол
0,25
2, 5 6
0,94 0,29
10% левамизола в метилэтилке тоне
8-9
0,77 0,58 0,43
10% левамизола + 20% метилэтилкетона + иэопропилмиристат
2r07 2,13 1,65
8-9
10% левамиэола + 20% диметилсульфоксида + 7,5% полиоксиэтилированного касторового масла +
+ 8,54% метилэтилкетона +
+ изопропилмиристат
0,65 0,65 0,49
10% левамизола + 7, 5% лецитина
+ 20% СН СР . + нэопропилмиристат
1,75 2,44 1,91
10% левамизола + 7,5% полиоксиэтипированного касторового масла +
20% СН С2 + изопропилмиристат 3
2,11 1,91 1,50
10% левамизола + 7,5% полиоксиэтилированного касторового масла +
10% СНС В + изопропилмиристат
1,45 2,85, 2,60
20
724077
Продолжение табл,12
Число Число опре Уровни активного вещества в крови, мг/мл, ч е р е з! живот-делений ных,уровня активного вещества в крови
Препарат для наливания
+ 7,5% полиоксикасторового масла + иэопропилмиристат 3. 1,17 1,80
1,83
+ 1,5% полиоксикасторового масла + изопропилмирис тат
8-9
1,48 2,10 1,81
5% левамизола + 7,5% полиоксиэтилированного касторового масла +
+ 20% СН С 8 + изопропилмиристат 3
5% левамиэола + 7,5% полиоксиэтилированного касторового масла +
+ 303 СН СГ иэопропилмиристат 3
2,3 2 2,22 1,58
8-9
2,73
2,35 1,61
8-9
1,80 1,36
1,01
Состав вводят через рот
Формула изобретения
Способ приготовления антигельминтного препарата тетрамиэола-2,3,5,5-тетрагидро-б-фенилимидазо-(2,1-b)-тиазола смешиванием его с минеральным маслом изопропанолом, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения активности препарата при нанесении его на кожу животным, тетрализол используют в виде В-изомера, в качестве минерального масла
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Непоклонов А. Химические сред40 ства защиты животных. Россельхоэиздат, М., 1971, с.47-50.
2. Патент США 9 3364112, кл . 242-270, 1967 (прототип) .
Составитель Л.Мурая
Техред М,Кузьма Корректор Ю.Макаренко
Редактор В.Дибобес
)аказ 472/45 Тираж 673 )одписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4
10% левамизола этилированного
+ 20% СИ СР +
10% левамизола этилированного
+ зов СН,СЕ +
2%-ный годный раствор левамизола* используют веретенное масло, а смешивание этих компонентов с изопро-. панолом проводят соответственно в соотношении 10:10:80.
