Способ получения антительного диагностикума

 

Союз Советскин

Социалистическнк

Республик

О П И С А Н И Е < 889002

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт, свид-ву (22) Заявлено 28. 03. 80 (21) 2914166/28-1 3 (g () К я

А 61 К 39/00 с присоединением заявки М

3Ъаударстмнный квинтет

СССР

h0 делам нзаеретеннй н открытнй (23) Приоритет

Опубликовано 15.12.81 Бюллетень М46

Дата опубликования описания 18. 12. 81 (53) УДК д 6)6

-097 (088. 8) (54) . СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИТЕЛЬНОГО ДИАГНОСТИКУМА

Изобретение относится к медицине, а частности к получению диагностических препаратов, и может быть использовано в иммунологии и микробиологии.

Известен способ получения антительного диагностикума путем сенсибилизации эритроцитов иммунной сывороткой в присутствии связующего агента-Cr CR с последующей экспозицией и отмыванием эритроцитов P ).

Однако известный способ не обес"

1О печивает высокой чувствительности обнаружения специфических антигенов и требует использования концентрированных препаратов иммунных сывороток.

Целью изобретения является повышение чувствительности диагностикума.

Эта цель достигается тем, что способ получения антительного диагностикума осуществляется путем сенсибилизации эритроцитов иммунной сывороткой в присутствии связующего агента с последующей экспозицией и отмыванием эритроцитов, в качестве связую2 щего агента используют 0,4-0,44/-ный раствор амидола и сенсибилизацию эритроцитов проводят в течение 2030 мин при 50-55 С.

Смешивают 1 объем 20",;-ной взвеси фиксированных эритроцитов,0,5 объема иммунной сыворотки (в соответствующем рабочем разведении) и 0,5 объема

0,4-0,44 -ного водного раствора амидола. Смесь выдерживают 20-30 мин при

50-55 С, затем эритроциты трижды ото мывают не менее чем 20-кратным (по отношению к осадкам эритроцитов) объемом 0,853-ного раствора NaC3, содержащего нормальную лошадиную или кроличью сыворотку (в разведении

1:150-200) или 0,06-0,083 желатины, рН 7,2.

Пример. Смешивают 2 мл

20 ь-ной взвеси эритроцитов, 1 мл иммунной брюшнотифозной сыворотки в разведении 1:40 и 1 мл свежеприготовленного водного 0,43 -ного раствора

889002 амидола. Смесь встряхивают и выдержи вают 30 мин при 55 С при периодическом встряхивании. Затем эритроциты трижды отмывают 0,85":,-ным раствором

NaC8, содержащим 0,061 желатины, рН 7,2 (по 8 мл на отмывание). К осадку отмытых сенсибилизированных эритроцитов добавляют 8 мл этого же растворителя и консервируют 9,14-ным

Способ

Иммунные сыворотки-сенЧувствительность индикации антигенов в Pfll A npu разведении иммунной сыворотки-сенситина сенсибили1

1:2 1:4 1:8 1:40 1:50 1:80 зации ситины

Брюшнотифозная, серия 222 ч

30000,0 30000 Р

120,0

НО,О

480,0

+60,0

Сп. Аг.

Яндл и

СимЗонне, серия 166 85,0

+12,0

85,0 360,0 30000,0 30000,0

+12,0 +74 0 моне (100,0 (100,0 (100,0 (100,0 (100,0

Брюшнотифозная, серия 222

80,0

+8,0

80,0

+8,0

210,0

+16,0

Сп.Лг. Сп.Аг, Сп.Аг.

40,0

7,0

40,0

7,0

160,0

14,0

Сп.Аг. Сп.Ar.

Сп. At-.

Зонне, серия 166

Предлагаемый

Против поверхностного антигена гепатита В (НВз -Ag) 4600 560

+0,012 + 0,010

+ 0,011

Сп. Аг. Сп.дг.

Сп.Аг.

П р и м е ч а н и е. 1, Сп.Аг. — Спонтанная агглютинация эритроцитов.

2. + — Минимальная выявляемая концентрация возбудителя (тыс. клеток/мл).

3. — Средний геометрический титр сыворотки, содержащей поверхностный HBs-антиген гепатита 8.

Формула изобретения

Использование предложенного способа обеспечивает высокую чувствительность обнаружения специфических возбудителей и антигенов и позволяет в

10-20 раз скоратить расход иммунной сыворотки.

Против поверхностного антигена гепатита

B(HBs-Ag) азидом натрия. Получают 54-ный диагностикум.

Предложенный диагностикум обладает высокой чувствительностью (см. табл.).

Сравнительные данные по изучению чувствительности диагностикумов, изготовленных по предложенному способу и известному приведены в таблице.

Способ получения антительного диагностикума путем сенсибилизации эритроцитов иммунной сывороткой в присутствии связующего агента с по889002

Составитель В. Крюкова

Редактор Л. Плисак Техред С.Мигунова Корректор Л. ФеРенц

Тираж 690 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д 4/5

Заказ 10801/9

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 следующей экспозицией и отмыванием эритроцитов, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности диагностикума, в качестве связующего агента используют 0,40,443-ный раствор амидола и сенсибилизацию эритроцитов проводят в течение 20-30 мин при 50-55ОC.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Jandl J., Simmons R. The agglutination and sens t1sation of red

cells by metallic cations Interaction

beween multivalent metals and the red

cell membrane. Brit. J. Haematol., 1957, ч. 3, 11 1, 19.