Способ определения резистентности эритроцитов

 

Союз Советскик

Социалистические

Ресттубяик

ИСАНИЕ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву(22)Заявлено 06.06.79(21) 276690у28-1Ç с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 30. 04. 32. Бюллетень М16 (5l)M. Кл.

A 61 В 10/00

9вударстеопвй кенктет

СССР ве аелем кзоЬретеккй и открытий (53) ЛК612. 1 (088. 8) Лата опублмковаиня описания р2. 05. 82 (72) Авторы изобретения

В. И. Шепотиновский, 3. И. Микашинович и 1И. В, Фирсова

1

1 ь

Ростовский государственный медицинск и институт (Vl ) Заявитель (S4) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РЕЗИСТЕНТНОСТИ

ЭРИТРОЦИТОВ

Изобретение относится к медицине, а именно к гематологическим лабораторным исследованиям, и может быть использовано для диагностики при токсикозах, бронхопневмойиях, туберку- лезе, лейкемии, лимфогрануломатозе, циррозе печени, при различных гемолитических заболеваниях.

Известен способ определения резистентности эритроцитов путем их разрушения с последующим определением гемоглобина fll.

Однако на проведение исследования

1известным способом затрачивается большое количество времени, при этом спо" соб обладает низкой чувствительностью, что затрудняет диагностику.

Цель изобретения - повышение чувствительности и ускорение способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу определения ре"

20 зистентности эритроцитов путем их разрушения с последующим определением гемоглобина эритроциты разрушают;

2 ультразвуком с возрастающей интенсивностью от 0,05 до 0,6 Вт/см при частоте 880-890 кГц.

Способ осуществляют следующим образом. .В центрифужную приборку с каплей гепарина производят забор 0,5 мл крови из любой сосудистой зоны (из пальца или вены) . В предварительно подготовленные четыре центрифужные пробирки, содержащие 1,9 мл физиологического раствора хЛористого натрия, вносят 0 1 мл крови. Содержимое пробирок осторожно перемешивают. Пробы озвучивают; например, на ультразвуковом приборе "Ультразвук Т-5". Рабочая частота высокочастотных колебаний составляет 880+8,8 кГц.

Озвучивание производят путем соприкосновения ультразвуковой головки поверхностью 1 см с поверхностью физиологического раствора, содержащего эритроциты. Режим озвучивания:

0,05 Вт/см (1-я пробирка); 0,2 Вт/см

92352

3 .(2-я пробирка); 0,4 Вт/см . (3-я пробирка); 0,6 Вт/см (4-я пробирка).

Время озвучивания 3 мин. Все пробирки центрифугируют 10 мин при 2000аб/мин

B надосадочном растворе хлористого натрия, содержащем разрушенные эрит1" роциты, определяется уровень гемоглобина. Для этого из каждой пробирки отбирают по 0,3 мл надосадочной жидкости и помещают в соответствующее 1ф количество пробирок, содержащих

2,7 мл M/OH (1 мм концентрированного NH

Концентрацию гемоглобина определяют по формуле: К = ОП,22, где К " концентрация гемоглобина в грамм ь;

ОП - оптическая плотность на регистрирующем приборе. В тех случаях, когда определение ведется в крови при патологических процессах, сопровождающихся изменением количества эритроцитов, например; при кровопотери, необходимо делать поправку на гема" токрит. И в расчетной формуле используется гематокритный показатель:

0Il 22 н, где H - гематокритная величина, Полученные значения гемоглобина на каждом режиме суммируют и получают величину гемоглобина, свидетельствую- щую о гемолизе эритроцитов при обработке их ультразвуком. Увеличение выхода гемоглобина по сравнению с нормой указывает на снижение резистивности эритроцитов, уменьшение выхода гемоглобина на повышение резистивнос- ° ти.

Пример. больной Г., 45 лет.

В течение двух последних лет страдает приступами стенокардии. При пос- ® туплемии в стационар снята ЭКГ, проведено определение в крови комплекса . биохимических показателей, подтверждающих наличие хронической ииемической болезни. У больного произведен забор крови с каплей гепарина иэ вены. Для определения реэистентности эритроцитов отобрано О, 5 мл. После озвучивания получены результаты, представленные s табл. 1. S5

5 1

Таким образом, у больного Г. выход гемоглобина составляет 5,76 r / при норме 15,6 g 0,67 r 1, что свидетельствует о повышенной резистивности эритроцитов.

C целью сравнения предлагаемого способа с известным у 5 кроликов моделировалась острая кровопотеря (654 объема крови) и определялась резис" тентность эритроцитов в исходном состоянии и через 2 ч после потери крови.

Для выражения полученных результатов использовали известный способ .показатель средней клеточной хрупкости,. т.е, резистентности, соответствующую тому процейту раствора хлористого натрия, при котором гемоливует" ся 503 клеток.

Изменение процента раствора, при котором гемолиэуется 504 клеток, отражает изменение резистентности эритроцита.

Показатели резистентности эритроцитов 7 кроликов в исходном состоянии и через 2 ч после тяжелой (653) кровопотери известным и предлагаемым способами приведены в табл. 2.

Как видно иэ табл. 2, исследование резистентности эритроцитов известным способом показало, что у интактHbIx животных 50<о клеток гемолизуется при 0,47 растворе NaCl. После острой кровопотери 504 клеток гемолизируется также при 0,473 растворе NaC1, что является свидетельством того, что резистентность эритроцитов через 2 ч после массивной потери крови не изменена.

При использовании предлагаемого способа выход гемоглобина с учетом гематокритной величины увеличился на

2И по сравнению с исходным фоном, ! что свидетельствует о снижении реэистентности эритроцита по сравнению с данными интактных кроликов.

Таким образом, предлагаемый способ является более чувствительным и позволяет выявить функциональные изменения эритроцитов уже в первые часы развития патологического процесса, не выявляемого известным спосо бом.

923525

Т а б л и в а 1

Пробирки,ф Режим озвучи- Выход гемогло- Состояние резисвания,,Вт/см бина, грамм Ъ тентности й

««ее е е е «« е е ее «е «еееее«ее««««

0,05

0,0

0,2

0,0

0,4

0,98

0,.6

4,8

Сумма

5,76

Выаена

Табяи в2

Воздействие уяьтраэвумом различной интенсивности предяакаемвм способом ее

После кровопвтерм

Исход>пай.фон

Исходный фом

1 т «

« гюютокрмт

1 а«нанна» r ф гемолмза Й NaC1 Ф гемолмэ ре3094 оэ вучмванмя токрит а ф

О 0 37 Оа.22

0,47

0,47

0,05

50

1 033

0,2

1,25

0,4

2,09

3а63

0,4

2,86

L 5,36

%6,6 и а н н.а а н а. С оонаавноа на ганатонана -а —" 16аф,.

6 6.100

37 а

22

24 г Ф.

Формула изобретения

Составитель Jl. Соловьев

Редактор А. Мотыль Техрел И.Гергель Корректор А. еРенц

Заказ 2657/8 Тираж 717 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва а-35 Рамшская наб. а. 4/5

Фипиап ППП "Патейт", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Воздействие путем изменения осмотяческой конвентрецмм раствора млермстого мат@иапо известному способу е» еееееаае «ее

После кровопотерм .

Способ определения резистентности эритроцитов путем их разрувения с

$ последующим определением гемоглоби" на, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и ускорения способа, эритроциты pa3" руша»т ультразвуком с возрастающей интенсивность» от 0,05 до 0,6 Вт/см при частоте 880-890 к-Гц.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Руководство по клиническим лабораторным исследованиям. Под ред.

Смирновой и Кост, 1960, с. 99-100.