Способ определения кватерона в фармацевтических препаратах

 

А. Х. Лаипанов и Е. В. Баркалая

Курский государственный медици и "и

I (7I } Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КВАТЕРОНА

В ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ilPEflAPATAX

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности к технике определения кватерона в фармацевтических препаратах.

Известен способ определения кватег

5 рона в фармацевтических препаратах путем обработки пробы неорганическими агентами с последующим колориметрированием полученного цветного раствора 1.1 ).

Известный способ предусматривает обработку пробы препарата раствором гидроксиламина в едком натре. Через

30 мин в реакционную смесь добавляют раствор соляной кислоты и раствор хлорида окисного железа. В-результате реакции образуется операционный гидроксилат железа. Количественное содержание четвертичного амина определяют, рв измеряя оптическую плотность. окрашенного продукта реакции на фотоэлектро" колориметре. Относительная ошибка метода 1,091.

Однако известный способ анализа требует выполнения пяти аналитичес" ких операций, предшествующих фотометрированию, продолжительностью 5060 мин. Недостаточно высокая socflpo изводимость, реакция требует строгого соблюдения температурного режима.

Способ характеризуется малой специфичностью, так как реакцию образова-. ния гидроксамовых кислот и последующего получения окрашенных гидроксаматов железа дают многие другие соединения, не являющиеся солями четырех- ° замещенного аммония (третичные амины, антибиотики и т.п.) .

Цель изобретения — повышение спе". цифичности и ускорения способа .

Указанная цель достигается тем, что, согласно способу определения кватерона в фармацевтических препаратах путем обработки пробы неоргани4ескими с последующим колориметрмрованием полученного цветного раствора, пробу обрабатывают оксипроизводным хлор938150

3 анила при рН 11,4 - 11,6, затем добавляют в реакционную смесь хлороформ, хлороформный слой отделяют и колориметрируют.

Способ осуществляется следующим образом.

Водный ра ст во р чет верт ич ного амина кватерона обрабатывают раствором хлоранила при рН 11, 4-11, 6, поддерживают добавлением гидроокиси натрия. tp

При добавлении к хлороформному раст" вору хлоранила водного раствора щелочи образуется диоксипроизводное соединение хлоранила, переходящее в водный слой. При последующем добавлении в реакционную смесь четвертичного амина в водном слое происходит образование нового интенсивно окрашенного в фиолетовый цвет комплексного соединения четвертичного амина и хлор- анила,, которое извлекается хлороформом при рН 11,4-11,6.

Интенсивность окрашенного хлороформного слоя, содержащего продукт реакции, прямо пропорциональна содер- gg жанию четвертичного амина.

Количественное определение четвертичного амина- кватерона проводят фотометрическим методом по предварительно построенному калибровочному графику. Оптическую плотноств окрашенного раствора измеряют на фотоэлектроколориметре (ФЭК вЂ” 561) в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, светофильтр У 6 (Л =540+10 нм). В качестве

35 раствора сравнения применяют хлороформ (слепой опыт) .

Построение калибровочного графика осуществляют следующим образом.

Из точно приготовленного 0,14-ного !

О раствора препарата в воде готовят серию стандартных растворов 1 - 4 и

5 мл исходного 0,13-ного раствора ква-. терона переносят в делительные ворон-. ки с 5 мл 0,1ь-ного хлороформного

45 раствора реактива, обработанным 0,8l,0 мл 0,1 н раствора едкого натра.

Общий объем водной фазы доводят до

6 мл дистиллированной водой.

Образующийся окрашенный комплекс кватерона с аци-формой хлоранила из-. влекают хлороформом дважды по 10 мл.

Экстракт переносят в мерную колбу емкостью 25 мл и доводят общий объем окрашенного раствора хлороформом до метки. Измерение оптической плотности раствора хлороформом до метки. Измерение оптической плотности растворов стандартной серии проводят с поф мощью фотоэлектроколори етра ФЭК-56М в кювете с толщиной рабочего слоя

20 мм на фоне хлороформа (слепой опыт) . По результатам измерения оптической плотности строят калибровочный график и рассчитывают уравнение калибровочного графика: Д 4,0 Х С +

+ О, 0075.

П р и м .е р 1. Количественное определение кватерона при рН 11,4 в нижней области графика. Содержание кватерона 1 мг в пробе.

Навеску 0,5 г препарата растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе 10 мл и доводят водой до метки, 1 мл приготовленного раствора вносят в делительную воронку с 5 мл реактива, обработанным 0,8 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем родной фазы доводят до 6 мл водой. Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом по 10 мл. Экстракт собирают в мерную колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом.

Оптическую плотность окрашенного ра» створа измеряют с помощью фотоэлект-, роколориметра (ФЭК-56И) в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре М 6 Л = 540 нм, на фоне хлороформа (слепой опыт).

Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочного графика, построенного методом наимень. ших квадратов.

Результаты количественного определения приведены в табл. 1.

Пример 2. Количественное оп-. ределение кватерона при рН 11,4 в оптимальной области графика. Содер жание кватерона 3 мг в пробе.

Навеску 0,05 г препарата растворяют в дистиллированной воде в первой колбе 50 мл и доводят водой до метки, 3 мл приготовленного раствора вносят в делительную воронку с 5 мл реактива, обработанным 0,8 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы. доводят до 6 мл водой.

Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом по 10мл. Экстракт собирают в первую колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с по" мощью фотоэлектроколориметра (ФЭК56И) в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре и 6

3. = 540 мм, на Фоне хлороформа (слепой опыт).

938150 6

ro графика,,построенного методом наи" меньших квадратов.

Результаты количественного определения кватерона приведены в табл. 4.

Пример 5. Количественное определение кватерона при рН 11,6 в оптимальной области графика. Содержание кватерона 3 мг в пробе.

Навеску 0,05 г препарата растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе 50 мл и доводят водой до метки, 3 мл приготовленного раствора вносят в делительную воронку с 5 мл реакти . ва, обработанным 1 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл водой. Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом до 10 мл. Экстракт собирают в мерную колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-56М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре У 6 Х = 540 нм, на фоне хлороформа (слепой опыт) .

Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочного графика, построенного методом наименьших квадратов.

Результаты количественного определения кватерона приведены в табл. 5. с

Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочного, графика, построенного методом наименьших квадратов.

Результаты количественного опреде- 5 пения кватерона приведены в табл. 2.

Пример 3. Количественное определение кватерона при рН 11,4 в верхней области графика. Содержание кватерона 5 мг в пробе.

Навеску 0,05 г препарата растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе 50 мп и доводят водой до метки.

5 мл приготовленного раствора вносят в делительную воронку с 5 мл реактива 15 обработанным 0,8 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл водой. Окрашенный комплекс извлекают дважды хлорофор" мом по 10 мл. Экстракт собирают в мер-го ную колбу 25 мл и добавляют общий объем раствора до метки хлороформом.

Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-56М в кювете с тол- л5 щиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре У E Л = 540 нм, на фрне хлоро. формного раствора (слепой опыт).

Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочного зо графика, построенного методом наименьших квадратов.

Результаты количественного определения кватерона приведены в табл. 3.

Пример 4. Количественное определение кватерона при рН 11.,6 в нижней области графика. Содержание кватерона 1 мг в пробе.

На веску О, 05 г прела рата ра ст воря- 4о ют в дистиллированной воде в мерной колбе 50 мл и доводят водой до метки

1 мл и ри го товленного ра створа внос ят в делительную воронку с 5 мл реакти ва, обработанным 1 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фа зы доводят до 6 мл водой. Окрашенный

:комплекс извлекают дважды хлорофор:мом до 10 мл . Экстракт собирают в мерную колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом.

Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-56 М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре У 6 Х = 540 нм", на фоне хлороформа (слепой опыт ).

Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочноП р и и е р 6. Количественное определение кватерона при рН 11,6 в верхней области графика. Содержание кватерона 5 мг в пробе.

Навеску 0,05 г препарата, растворяют в дистиллированной воде в мерной колбе емкостью 50 мл и доводят водой до метки. 5 мп приготовленного раствора вносят в делительную воронку с

5 мл реактива, обработанный 1мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы вводят до 6 мл водой.

Окрашенный комплекс извлекают дважды хлороформом по 10 мл.. Экстракт собирают в мерную колбу 25 мп и доводят общий объем раствора до метки хлороформсм. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-56 М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при светофильтре N 6 3 = 540 нм, на фоне хлороформа (слепой опыт).

Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочно- го графика, построенного методом наименьших квадратов.

7 93&15

Результаты количественного определения кватерона приведены в табл.6.

П р и и е р g. Количественное определение кватерона, при рН 11,6 в верхней области графика, Содержание ,кватерона 5 мг в пробе.

Навеску 0,05 r препарата растворя. ют в дистиллированной воде в мерной колбе емкостью 50 мл и доводят водой до метки,5 мл приготовленного раствора О вносят в делительную воронку с 5 мл реактива, обраоотанным 1 мл 0,1 н раствора едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл водой.

Окрашенный комплекс извлекают хлоро" is формом дважды по 10 мл. Зкстракт собирают в мерную колбу 25 мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЗК-56 M в кювете с толщиной рабочего слоя

20 мл, при светофильтре У 63=540 нм, на фоне хлороформа (слепой опыт).

Дальнейшее определение кватерона проводят по уравнению калибровочного графика, построенного методом наименьших квадратов.

Результаты количественного определения кватерона приведены в табл. 7.

Пример 8. Количественное определение кватерона при рН 11,5 в 0,63 раствора, 0,5 мл исследуемого раствора вносят в делительную воронку с +seesaw ce

-

ОИ

08

1 молярных серий и насыщения. В химическом отношении хлоранил в данной реакции ведет себя, как одноосновная кислота, способная образовывать окрашенные комплексные типа хлораниламинов с бесцветными растворами препаратов производными четырехзамещенного аммония. Спектрофотометрические исслегде Х - галоген или органическая кислота, радикал.

Химическими и физико-химическими методами установлено, что реакция между четвертичным амином кватероном и хлоранилом в условиях ее проведения протекает в молярном отношении

1:1, что подтверждено методами изо0 &

5 мл реа кт ива, обработанным О, 9 мл

0,1 н раствором едкого натра. Общий объем водной фазы доводят до 6 мл . водой. Окрашенный комплекс извлекают хлороформом дважды по 10 мл. Зкстракт собирают в мерную колбу емкостью25мл и доводят общий объем раствора до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколоринетра фЗК-56М в кювете с толщиной рабочего слоя

20 мм, при светофильтре У 6 jl =540нм на фоне хлороформа (слепой опыт).

Определение кватерона проводят по уравнению калибровочного графика.

Результаты количественного опре" деления кватерона в лекарственной форме 0,64-ном растворе, приведены .в табл. 8.

Как видно из приведенных в таблицах данных количественного определе" ния кватерона в укаэанном интервале концентрация линейной зависимости, относительная погрешность анализа чистого препарата в оптимальной области не превышает + 0,504 и в случае анализа лекарственной формы - +1, 053.

Зкстракция хлороформом позволяет выделить только окрашенный продукт реакции, исклочает влияние на оптическую плотность исходных продуктов реакции, а также промежуточных соединений, образующихся в результате реакции по схеме.

938150 10 дования окрашенного продукта покаэы- Предлагаемый способ прост, обладавают, что максимум светопоглощения ок ет высокой точностью, селективностЬ, рашенного раствора препарата находит- обеспечивает снижение числа трудоемся в области 540 нм, хлоранил s дан ких аналитических операций и повыше ной области абсорбционной способнос g ние в Z раза точности определения. тью не обладает. Оптическая плотность окрашенного хлороформного извлечения стабильная в течение 5-6 ч. Для извле чения окрашенного продукта на 5 мл водной фазы достаточно 1-2 кратной экстракции по 1 мл хлороформом или дихлорэтаном.

Найдено мг/мл в пробе мг 3

Метрологические данные

Соде ржание в про бе,мг/мл (на 25мл) Навеска, Г

Взято на анализ, мг

О, 173 О, 0414 1, 0350 l 00, 49

6„= 0.35

Зр= 0,97

О, 1 76 О, 0421 1, 0525 99, 48

0,168 0,0401 1,0025 98,67

М = 99,52+0,97

А = «+0,974

Таблица 2

Иетрологические данные

Найдено мг/мл в пробе мг 4

На вес ка, г

Содержание в пробе,мг/мл (на 25 мл) Взято на анализ, мг

99,623

0,493 0,1214 3,0350 99,97

0,1214

О, 0506

3, 0360

О, 0485

0,0510

О 470 0 1156 2 8900 99 31

О, 495 0,.1219 3, 0475 99. 59

0,41

0,18

О, 1164

О, 1224

2,91 00

3,0600

0 50

0,485 0,1194 2,9850 100,10

0,512 0,1261 3в1525 99,14

0,0497 . 2,9820

О 1193

0,1272

0, 0530

3,1800

99,6220,50

ТО 5И Т аблица 3

Иетрологические данные

Найдено мг/мл в пробе

Ml 4

Содержание в пробе,мг/мл (на 25 мл) Взято на. анализ, мг

Навеска, r

0,1981 4,9525

1,2056 5, 1400

0,2081 5,2025

0 2006 5,0150

0,2076 5,1900

99,45

100 39

99,10

99,70

100,19

0,800

0,830

0,840

G,8l 0

0,838

4 9800

5, 1200

5,2500

5.0300

5 l800

0,1992

0,2048

0,2100

0,2012

0,2072

О, 0512

0,0502

0,0515

О, 0529

О, 0508

О, 0498

О, 0512 О, 0525

О, 053 0, 0618

1, 0240

1,0040

1, 0300

1, 0580

1, 0160

О, 0410

0,0402

0,0412

0,0423

0,0406

Предлагаемый способ может быть использован в практике контрольноаналитических лабораторий, на фармаto цевтических заводах, биохимических, судебно-химических лабораторий и.других аптечных учреждениях.

Таблица!

0,170 0,0406 1,0150 99,12 Х = 99,5.24

0,168 0,0401 l,0025 99,85 . б = 0,70

99,77Ф

0 53

0,24

0,67

99,77+0,67

«+0.673

938150

Таблица 4

Иетрологические данные

Навеска, г

Взято на анализ, мг

ЬЙИЮ мг/мл в пробе мг

Содержание s пробе,мг/мл (на 25мл) -- °вЂ”

1, 0100

99,54

О, 9850

Ь„= 0,38

3p= 1, 05

М = 99,54+1,05

А = +1,05

Таблица5

Найдено мг/мл в пробе мг Ф

На веска, Метрологические данные °

Содержание в пробе,мг/мл (на 25мл) Взято на анализ, мг

99,56

0,39 б„= 0,17 ар= 0,47

99,56+0,47

«+0, 473

М =

А =

Таблицаб

Навеска, г

Взято на

Иетрологичес-, кие данные

Найдено мг/мл в пробе мг

Соде ржание в пробе,мг/мл (на 25мл) анализ, мг

99 56

0,39

1р= 0,47

М = 99 56 0,47

А = +0,471

О, 0505

О 0499

0,0489

0,0512

0, 0520

О, 0509

О, 0475

О, 0492

О, 0525

О, 0507

О, 0509

0,0485

О 0492

0, 0525 . О, 0507

О 9780

1, 0240

1, 0400

3,0540

2,8500

2 9520

3,1500

3,0420

3, 0540

2,8500

2 9520

3,1500

3,0420

О, 0404

О, 0398

О, 0391

О, 0410

О, 0416

0,1222

0,1140

О, 1181

0,1260

0,1217

О, 1222

0,1140

О, 1181

О, 1260

0,1217

0,170 О, 0406 1,0150 100,50

0,163 0,0389 0,9725 98;63 6 = -0,86

0,163 О, 0389 0,9725 99,44

0172 О 0411 О 0275 10034

0,172 О, 0411 1, 0275 98,80

0 495 О 1219 3,0475 99,79

0,460 0,1131 2,8275 99,21

О, 480 О, 1181 2,9525 1 00, 02

О, 51 О О, 1256 3, 1400 99, 68

0,490 0,1206 3,0150 99 11

0,495 0,1219 3,0475 99,79

0,460 0,1131 2,8275 99,21

0,480 0,1181 2 9525 100,02 6 = 0 17

0,510 0,1256 3,1400 99,68

О 490 0 1206 3 0150 99 11

14

938150

Таблица g

Мет рологичес" кие данные

Навеска, r

Взято на

Соде ржание в пробе,мг/мл (на 25мл) Найдано мг/мл в пробе мг 3 анализ, мг

0,828 0,2051 5,1275 99 56

0,2060

99,69ь

0,2088 0,845 0,2094 5,2350 100,29

0,55 х 0,25

О, 793 О, 1964

98 99

4 9100

4,8900

3Р= 0,69

0,790 0,1956

100,20

0830 0 2056 5 1400 99 42

М = 99,69+0,69

А = +0,691.Таблица 8

Взято на анализ

0,6ь"ного раствора, мл

Зюга мг/мл в пробе мг

Мет ролог ическ ие данные

99,47

О, 485 2,9850 О, 11 94 99,50

0,480 2,9525 0,1181 98,42

0,490 3, 0150 О, 1206 100,5,О 5

o,86

О 5

О 5

6,= о,38

О 5

0,482 2,9650 0,1186 98,83

1,05

О, 488 3, 0025 О, 1201 1 00, 08

+1,063

99,47+1 05

О 5 формула изобретения

Способ определения кватерона в фармацевтических препаратах путем обработки пробы неорганическими, 40 агентами с последующим колориметрированием полученного цветного раствора, о т л и ч а ю щ и й. с я тем, что, с целью повышения специфичности и

I ускорения способа, пробу обрабатываютСоставитель А.. Бражникова

Редактор А. Коэориз Техред Е.Харитоичик Корректор У. Пономаренко

Заказ 4450/66 . Тираж 887 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий филиал llflfl "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

О, 0515

О, 0522

О, 0496

О, 0488

О, 0517

5,1500

5 2200

4 9600

4,8800

5,1700

0, 1984

О, 1952

О, 2068 оксипроизводным хлоранила при рН 11,411,6, затем добавляют в реакционную смесь хлороформ, хлороформный слой отделяют и колориметрируют.

ИСТО чники инфО рма ции .принятые во внимание при экспертизе

1 Êðàìàðåíêî В. ф., Попова В. И. фотометрия в, фармацевтическом анали3е. Киев, 1972, с. 96-97.