Способ получения производных циклофосфатиазенового ряда

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ЦИКЛОФОСФАТИАЗЕНОВОГО РЯДА Общей формулыB-Avvx -b . где R - фтор, хлор, фенил, бутокси-, фенокси-,морфолино-,пипери t диногруппа или азури.цинил; R - водород или метил; АЗ - азиридинил, отличающийся тем, что циклофосфатиазеновое производное общей формулы a.Ji N Ay j( ii i СП где R - фтор, хлор, фенил; подвергают взаимодействию с азиридином или метилазир дином, взятым в 8-20-кратном мольном избытке на соединение формулы II, в среде диэтилового эфира при (-75). с последующим выделением или превращением соединения формулы Г1, в котором R - хлор,в соответствующее бутокси-, фенокси-,морфолиноили пиперидиносо производное взаимодействием с бута (Г нолом, фенолом, морфолином или пиперидином при (-2Q)°C, ИЙ N( ел

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК )(51) С 07 F 9/65

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

yg Q

Ъ-л,-з, ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

r)O ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И, ОТКРЫТИЙ (21) 2940708/23-04 (22) 01.07. 80 (31) 7917336 (32) 04.07.79 (33) Франция (46) 30.08.83. Бюл. 9 32 (72) Жан-Франсуа Лябарр, Франсуа Сурии (Франция), Йохан Ван Де Грампель и Адриан Ван Дер Юйэен (Нидерланды) (71) Ажанс Насьональ де Валоризасьон ° де ля Решерш (Анвар)(Франция) (53) 547.341.26 118.07(088.8) (56) 1. Гамбицкий П.A. и др. Химия этиленимина, 1966, с. 76-84, 191194.

2 ° European Journal of Cancer., ).-Г. pabarre и др. Antitumour Acti-:

vity of Some CycEophosphazenes, Vof. 15, У 5, р. 637-643, 1979 (май) .

3. Rec. trav. Chim. (Netherlands)

91, 935-941, 1972. (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОД-

НЫХ ЦИКЛОФОСФАТИАЗЕНОВОГО РЯДА общей.

Формулы

З -А Аз-, где R - фтор, хлор, фенил, бутоксифенокси-,морфолино-,пипериа диногруппа или азиридннил;

R — водород или метил; (A g — азириди нил, отличающийся тем, что циклофосфатиаэеновое производное общей формулы где R — фтор, хлор, фенил; подвергают взаимодействию с азиридином или метилазирйдином, взятым в .8-20-кратном мольном избытке íà соединение формулы II, в среде диэтилового эфира при (-75) -20 C с последующим выделением или превращением соединения формулы II в котором

R — хлор, в соответствующее бутокси-, фенокси-,морфолино- или пиперидинопроизводное взаимодействием с бутанолом, фенолом, морфолином или пиперидином при (-20) С.

1039446

Изобретение относится к способу получения новых производных циклофосфатиаэенового ряда, которые обладают противопухолевыми свойствами и могут быть использованы в фармакологических препаратах.

Известно,что аэиридин (этиленамин) и его производные проявляют ши- рокий спектр биологического воздействия на живой организм и его эффект весьма напоминает действие проникаю-. 1О щей радиации, в связи с чем эти вещества получили название радиометрических соединений.

Биологический эффект азирндиновых производных широко используется в 15 различных областях. Азиридин очень ядовит (смертельная доза 15 мг/кг), он оказывает воздействие на половую функцию, вызывает мутацию и проявляет цитостатическую (противоопухолевую) активность. Учитывая высокую токсичность азиридина исследовательские работы ведут в области синтеза веществ,,содержащих азиридиновый заместитель, но имеющих сниженную токсичность.

П7 .. ПР

Р» л я лр

«р ,г «

Jltr.< ЛР (Oil>15) А А

Аз ) . Аз к А ГАзЦФ) 11 й. Ñ1

Р

50 где R — хлор, фтор., фенил, подвергают взаимодействию с азиридином или метилазиридином, взятым в 8 — 20-кратном мольном избытке. на соединение формулы II, в среде

60 диэтилового эфира при (-75) †(+20) С с последующим выделением или превращением соединения формулы II в котором R — хлор, в соответствующее бутокси-, фенокси-, морфолино- или

65 пиперидино-производное взаимодейст Р-у

Известны представители Я циклофосфатиазенового ряда, например пентахлорциклофосфатиазен следующей структуры: который проявляет противоопухолевую активность..

Цель изобретения — разработка нового способа получения новых за-. мещенных циклофосфатиазенового ряда, проявляющих противоопухолевую активность.

Поставленная цель достигается новым способом получения производных циклофосфатиазенового ряда общей формулы 1:

Получение азиридиновых производных ведут с учетом характера свойств азиридинового кольца, который не стабилен при нагревании и в присутствии сильных кислот. Ацилирование ведут в среде органического растворителя в присутствии акцептора сильной кислоты, выделяющейся в ходе реакции, при пониженной температуре flj .

Среди азиридиновых замещенных известны соединения $2) циклофосфаэе-. ) нового ряда: гексаэиридиноциклотрифосфазен (ГАзЦФ), октазиридиноциклотетрафосфазен (ОАзЦФ), октапирролидиноциклотетрафосфазен (ОПрЦФ), которые проявляют противоопухолевую активность в отношении лейкомии

P 388, лейкомии 1210 и опухоли меланомы В 16. Их токсичность несколько ниже самого азиридина

ГАзЦФ ЬРО= 40 мг/кг

ОАзЦФ ЬР<»=- 75 мг/кг

ОПрЦФ ЬРр= 20 Mr/кг

Их структура следующая: где R — фтор, хлор, фенил, бутокси-, фенокси-, морфолино-, пиперидиногруппа или аэиридинил;

А.» — азиридинил, R — водород или метил, заключающийся в том, что циклофосфатиаэеновое производное общей формулы 11:

1039445 вием с бутанолом, фенолом, морфолином или пиперидином при .(-20) а С.

Предлагаемь:е соединения могут быть использованы для обработки твердых и мягких опухолей, например сарком, карцином, а также других подобных опухолей.

Дозы зависят от типа опухоли и вида введения: для инъекций или мазей, или суппозиториев, предпочтительно составы могут содержать от 1 10 до 20 вес.% активного вещества.

Растворимость этих соединений находится в пределах 20 г/л.

Пример 1. Раствор 48 0 ммоль свежеперегнанного азипиридина в 15

40 мл сухого диэтилового эфира прибавляют по каплям в течение 1 ч к эфирному раствору 3 ммоль соединения формулы II, где R представляет .

Р собой фтор, охлажденному до -75 С . -у смесью ацетона и жидкого азота.

Процесс ведут при интенсивном перемешивании, а после окончания добавления реагентов смесь медленно нагревается до комнатной температуры,.25 и при этой температуре и перемешива- . нии реакционную смесь выдерживают

17 ч.

Раствор декантируют и остаток, состоящий преимущественнб из поли-. мерных продуктов, экстрагируют тремяпорциями по 20 мл сухого диэтилового. эфира. Затем маточный раствор и экстракты объединяют и отгоняют растворитель в вакууме. Полученный неочиценный продукт снова экстрагируют:: З5 тремя порциями по 80 мл сухого диэтилового эфира. После перекристаллизации, т.е. частичной отгонки раст ворителя и охлаждения раствора, получают кристаллический продукт с Тп . 40

111-1120С и выходом 62Ъ.

Элементный .анализ.

Найдено,.Ъ: С. 28,20; 28,16; Н 4,7у

4,72; М 28,75; 28,68; Я 9,49; 9,68

С Н(Ь N7Pg SOF 45

Вычислено, Ъ: С 28, 32; Н 4,75;

N S 9,45

ИК-спектр (см ) в области 400-:

1400 см-"(в нуйоле):

1320 сильный, 1273 очень сильный, 1234 очень сильный, 1167 плечо, 1122 средний, 1096 средний (960;.

942) очень сильный, 881 средний, 848 средний, 811 средний, 708 силь« ный, 669 сильный, 690 очень сильный, 525 средний.

Масс-спектр: м/с 339 (М (13%, 297 М-А 100%.

ЯМР— P3 (в растворе CDC8 ):

P 3" 35,7 р.р.т. (по отношению к

85%-ной H PO4) 3(P-F) 3,7 гц, 60

При использовании монометилазиридина вместо азиридина получают соединение формулы I где R . — метил.

Пример 2. Процесс ведут аналогично примеру 1, но, используют 65

90 ммоль азиридина в 40 мл сухого эфира и 4,5 ммоль соединения формулы II, где R представляет собой хлор, в 40 мл сухого эфира. После перекристаллизации получают с выходом 57Ъ и Т„ 86-87 С продукт, имеющий следующий элементный анализ.

Найдено,Ъ: С 33,02; 33,13;

Н 5,64; 5 68; N 30,53; 30,49; S 8,71

С(g Н N7PgSO

Вычислено,Ъ: С 33,15; Н 5,56;

N 30,93; S 8,85

ИК-спектр/см (таблетка КВч в области 400-1400 см ):

1265 сильный, 1222 очень сильный, 1182 средний, 1151 средний, 1116 средний, 1083 средний, 937 очень сильный, 914 средний, 875 сильный, 842 средний, 811 средний, 770 сильный, 646 сильный, 577 средний.

Масс-спектр: м/с 362 (М )6Ъ, 320 (М-Л,,Д+ 100%.

ЯМР— P (в растворе CDCP>):

P " 35,4 р.р.т. (по отношению к 85%ной Н)РО4) °

В этом случае происходит образование продукта с температурой плавления 104оС для которого результа- ты элементного анализа и масс-спектра а также ЯМР-Р совпадают с проР

О дуктом с Тпу, 86-87 С.

Однако данные ИК-спектра (таблетка КВч в области 400-1400 см " ) несколько отличаются: 1265 сильный, 1226 очень сильный, 1170 плечо, 1153 сильный, 1084 сильный, 942 сильный и широкий, 912 средний, 882 средний, 867 средний, 766 средний, 711 сильный, 646 и 638 очень сильный, 542 средний,, т.е. полученный второй продукт представляет собой другую кристаллическую форму и обладает одинаковой активностью по-отношению к опухолевым заболеваниям..

Пример 3 . Процесс ведут аналогично примеру 1, но используют

144 ммоль свежеперегнанного азиридина в 40 мл сухого диэтилового эфира и 9 ммоль соединения формулы II„ где R представляет собой фенил. Экстракцию ведут тремя порциями по

120 мл сухого эфира, а после перекристаллизации получают продукт с выходом 50Ъ и Т „ 108-109 С.

Элементный анализ.

Найдено,Ъ: С 42,74; 42,48;

Н 5,34; 5,45; N 24.,,72; 24,56: S 8,16

С (4H)) Ng Pg SO

Вычислено,Ъ: С 42,32; Н 5,33;

N S 8,07

ИК-спектр/cM < в области 4001400 см " (в нуйоле):

1267 сильный, 1247 очень сильный, 1210 очень сильный, широкий, 1150 очень сильный, 1085 сильный, 939 очень сильный, широкий, 878 средний, 842 средний, 777 средний, 711 и 702

1039445

500

200

\ 50

Опухоль

Количество инъекций, соединение Доза, ИЛС, Ъ мг/кг/сут

1210

1 инъекция D+1, SOF

3 инъекции Q 3D

27

25

P-388

1 инъекция Р+1; S0F

3 инъекции Q 4D

50

10

118

28

100

1 инъекция D+1, SO A

1210

48

3 инъекции Q 3D

100

35

1 инъекция D+1; SO A

P 388 сильный, 648 сильный, 579 сильный, 534 средний.

Масс-спектр: м/с 597 iM ) 100Ú.

ЯМР— P3 в растворе СРС(:1.. Р

34,1 р.р.т. (ло отношению к В5Ъ-ной

НЗР04)5

Пример 4. Процесс ведут как в примере 1, но используют 80 ммоль свежелерегнанного азиридина в растноре сухого эфира 40 мл и раствор соединения 11, в котором R представ- 10 ляет собой хлор, 10,0 ммоль в 40 мл сухого эфира. Реакционную смесь фильтруют лри (-20) с, а оставшийся раствор вводят в реакцию с ?О ммоль пилиридина в эфиРном Растворе при )5 (-20) С. Полученный липеридиноэамещенный продукт идентифицируют ло его масс-спектру.

Предлагаемым способом синтезируют, исходя иэ морфолина, бутанола и фенола соответствующие замещенные продукты. йктивность свойств определяют следующим образом.

Для приготовления физиологически приемлемых препаратов ислользуют, ! мг:

Соединение, описанное в примере 2 50

Солевой физиологический раствор До 10

Полученный раствор помещают в ампулы.

На одну капсулу используют, мг:

Соединение, описанное в примере 2

Лактоза

Картофельный крахмал

Кристаллическая целлюлоза 109

Стеараr магния 1

Состав на 1000 гранул, мг:

Соединение, описанное в примере 3 100

Лактоэа 550

Кукурузный крахмал 330

Гидроксилропилцеллюлоэа 20

Состав для суппози=ориев — вес на 1 гр, мг:

Соединение, описанное в примере 2

Витепсол, изготовлен фирмой Динамит Нобель Ко 500

Состав мази, r:

Соединение, описанное в примере 1 2

Белый вазелин 23

Стеариловый спирт 22

Пропиленгликоль 12

Лаурилсульфат натрия 1,5

Этил-П-гидроксибензоат 0,025

Очищенная вода До 100

Противоопухолевую активность ис-. следуют на мышах швейцарской породы

ДБА/2 для следующих видов опухолей: лейкомии P 388 и лейкомии Л 1210, и на мышах породы В ас1 С57 для опухоли вида меланома В 16.

Испытайия проводят либо лри одиночных инъекциях при различных дозах в день (D+1) в зависимости от типа прививки опухоли, или же при многократных инъекциях (D-представляет собой день, в который проводилась прививка опухоли).

Полученные результаты представлены в таблице.

1039445

Продолжение таблицы

Доза, мг/к г/сут

ИЛС, Ъ

Количество инъекций, соединение

Опухоль

100

134

150

188

175

4/10

200

3 инъекции Q 4D

50

196

100

2/10

150

2 инъекции Q 4D

1 инъекция; SO A

50

В 16

100

64150

113

200

P 388

1 инъекция D+1; SO Ph

ИЛС пРедставляет собой результат, вычисленный по формуле:

ИЛС, В

С где Т (в сутках) представляет собой средний период жизни мышей, 35 прошедших обработку;

С (в сутках) представляет собой средний период жизни мышей в контрольном эксперименте;

QD — (в сутках) представляет собой количество суток П, приходящихся на 1 инъекцию, начиная с g +1, таким образом, что 3 инъекции Q 4D обозначают 1 инъекцию в Q +1, 1,инъекцию в 2 +5 и 1 инъекцию в g +9; и 4

G0F — соединение, описанное в примере 1, L Do 50 мг/кг;

50А>- ооединение, полученное в приме- ре 2, L33o = 210 мг/кг;

50Ph- соединение, полученное в примере З,LР = 250 мг/кг;

Соединение :BOA вылечивает лейкомию при однократной инъекции. Значение ИЛС (196%), полученное для случая введения трех инъекций 04D при 3 ° 100 мг/кг, в три раза превышает значение (73%), полученное при однократной инъекции в 100 мг/кг, произведенной B D+1 позволяет сделать предположение, что это соединение обладает активностью не только по отношению к лейкомии P 388 на ранней стадии, но и к лейкомии Р 388, на поздней стадии.

На чертеже показан график воздействия на раковые заболевания. Как видно из характера кривой значение

ИЛС (от дозы введения для лейкомии

P 388 экспотенциально увеличивается, стремясь с пределу — 200 мг/кг.

1039445

ИЛС %

200

1ХО

Дояа, 2Х ХО 75 100 12Х 1ХО 17Х 200 мГ/кг

Заказ 6251/61

Тираж 387 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, г, Ужгород, ул. Проектная, 4

Составитель Г. Андион

Редактор Н. Ковалева Техред А.Бнбинец Корректор А. Ильин