Способ приготовления бактериального препарата ацидофильных культур

 

1. СГОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА АЦИДОФИЛЬНЫХ . КУЛЬТУР, предусматривающий приготовление питательной среды на основе осветленной молочной сьшоротки с добавлением биостимуляторов и солевых добавок , нейтрализацию среды и поэтапное раскисление ее в процессе культивирования закваски ацидофильной культуры с установлением заданной величины рН среды, охлаждение, отделение бактериальной массы, смешивание с защитной средой, содержащей сахарозу, желатину и воду, замораживание и сушку , отличающийся тем, что, с целью ускорения роста бактерий, повьшения их антибиотической активности и выживаемости бактерий при сушке, в качестве солевых добавок используют фосфорнокислый и сернокислый аммоний, нейтрализацию питательной среды осуществляют газообразным аммиаком, причем при последнем раскислении одновременно проводят и подкормку среды 40%-ным раствором глюкозы в Количестве 0,8-1,2 мае.% и сернокислым марганцем в количестве 0,016-0,017 мас.%. В защитную среду (П добавляют 0,75-1,0 мае. % йодистого калия или молибденовокислого аммония, при используют закваску ацидофильной культуры бактерий штамма 126. 2. Способ по .п. 1, отличающий с я тем, что в качестве биостимулятора используют 2-3 мас.% натуральной молочной сьгооротки.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) SU

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕЧИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3492638/28-13 (22) 08.06.82 (46) 15.12.84. Бюл. ¹ 46 (72) Т.E.Øèëoâñêàÿ и О.В.Чаблин (71) Северо-Кавказский филиал Всесоюзного научно-исследовательского института маслодельной и сыродельной промышленности (53) 637.13(088.8) (56) 1. Авторское свицетельство СССР № 604207, кл. С 12 N 1/20, 1976.

2. Авторское свидетельство СССР № 581701, кл. А 23 С .9/12, 1976. (54) (57) 1. СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА АЦИДОФИЛЬНЫХ

КУЛЬТУР, предусматривающий приготовле( ние питательной среды на основе осветленной молочной сыворотки с добавлением биостимуляторов и солевых добавок, нейтрализацию среды и поэтапное раскисление ее в процессе культивирования закваски ацидофильной культуры с установлением заданной величины рН среды, охлаждение, отделение 3(SD А 23 С 9/12// С 12 N 1/20, бактериальной массы, смешивание с защитной средой, содержащей сахарозу, желатину и воду, замораживание и сушку, отличающийся тем, что, с целью ускорения роста бактерий, повышения их антибиотической активности и выживаемости бактерий при сушке, в качестве солевых добавок используют фосфорнокислый и сернокислый аммоний, нейтрализацию питательной среды осуществляют газообразным аммиаком, причем при последнем раскислении одновременно проводят и подкормку среды 40Х-ным раствором глюкозы в количестве 0,8-1,2 мас.X и сернокислым марганцем в количестве

0,016-0,017 мас.X. В защитную среду добавляют 0,75-1,0 мас ° X иодистого калия или молибденовокислого аммония, при этом используют закваску ацидофильной культуры бактерий штамма 12б.

2. Способ по .п. 1, о т л и ч а юшийся тем, что в качестве биостимулятора используют 2-3 мас.X натуральной молочной сыворотки.

1 1128

Изобретение относится к микробиологии и касается способов приготовления сухих бактериальных концентратов, препаратов, применяемых в молочной промьппленности для производства продуктов и кормов.

Известен способ приготовления сухого бактериального препарата ацидофильных культур с повьппенной антибиотической активностью. !О

По данному способу питательную среду готовят из смеси обезжиренного молока и обезжиренного сухого молока с содержанием 18% сухих веществ, в которую вносят 4 г/л. лимон-, 15 нокислого натрия. Смесь стерилизуют, охлаждают до 40-50@С, вносят 2% ацидофильной культуры, перемешивают и культивируют 4-5 ч до кислотности 120-160 Т, добавляют З уксусно- 2б кислого натра, 1 сгущенного кукурузного экстракта, 0,0001 сернокислого марганца, 0,0003 витамина В,2 и продолжают культивирование 12-14 ч до о кислотности 480-550 Т. Затем в жид- 25 кий бакпрепарат вносят зимаэу и о охлаждают его до 8-10 С. Этот препарат смешивают с защитной средой, состоящей иэ раствора сахара и раствора уксуснокислого натра. Жидкий бакпре- 30 парат, содержащий продукты метаболизма бактерий, насьппают до 20 стерильным воздухом, разливают на лотки толщиной слоя 5-6 мм, замораживают, высушивают сублимационной сушкой.

Продолжительность сушки 20-24 ч j1J .

Недостатком данного способа является его сложность. Кроме того, применяемые ацидофильные культуры в указанном способе развиваются в молочной 4О сыворотке не активно, поскольку их выращивание .осуществляется на обезжиренном молоке с добавлением сухого обезжиренного молока и других компонентов.

Наиболее близким к предлагаемому является способ приготовления бактериального препарата ацидофильных культур, предусматривающий приготовление питательной среды на основе осветленной молочной сыворотки с добавлением биостимуляторов и солевых добавок, нейтрализацию среды и поэтапное раскисление ее в процессе культивирования закваски ацидофильной M культуры с. установлением заданной величины рН среды, охлаждение, отделение бактериальной массы, смешивание

890 2 с защитной средой, содержащей сахарозу,желатину и воду, замораживание и сушку (2) .

Недостаток способа заключается в том, что препарат не может дать высоких положительных результатов для использования при обогащении молочной сыворотки.

1 ель изобретения — ускорение роста бактерий, повьппение их антибиотической активности и выживаемости бактерий при сушке.

Поставленная цель достигается тем, что в способе приготовления бактериального препарата ацидофильных культур, предусматривающем приготовление питательной среды на основе осветленной молочной сыворотки с добавлением биостимуляторов и солевых добавок, нейтрализацию среды и поэтапное рас— кисление ее в процессе культивирова1ния закваски ацидофильной культуры с установлением заданной величины рН среды, охлаждение, отделение бактериальной массы, смешивание с защитной средой, содержащей сахарозу, желатину и воду, замораживание и сушку, в качестве солевых добавок используют фосфорнокислый и сернокислый аммоний, нейтрализацию питательной среды осуществляют газообразным аммиаком, причем при последнем раскислении одновременно проводят и подкормку среды 40 -ным раствором глюкозы в количестве 0,8-1 2 мас. и сернркислым марганцем в количестве 0,016-0,01? мас. . В защитную среду добавляют 0,75

1,0 мас.X йодистого калия или молибденовокислого аммония, при этом используют закваску ацидофильной культуры бактерий штамма 12б. В качестве биостимулятора используют 2-3 мас.% натуральной молочной сыворотки.

Способ осуществляют следующим .образом.

Пример 1. К обезжиренной молочной сыворотке добавляют молочную кислоту до рН 4,5, нагревают до температуры 100 С и выдерживают о

20 мин. Сыворотку осветляют отстаиванием. На 100 л осветленной сыворотки добавляют по 600. г фосфорнокислого и сернокислого аммония, 2 л не светленной сыворотки, аммиаком устанавливают рН среды 6,7.

Среду стерилизуют 15 мин при

1 ати и 120 С, а затем охлаждают до температуры культивирования 46 С.

1

; Титр антибиотической ! активности

Штаммы тест-микробов Зона угнетения роста

Escherichià coli

39-40

49-50

Staphilococcus aureus

445

10-15

10-15

64-128

48-64

5-12

10-15

48-64

64-128

ВНИИПИ Заказ 9264/3 ТиРаж 588 Попписное

Филиал ШШ «Па, r.Óæãoðoä« ул.Проектная, 4

Э 1128

В подготовленную питательную среду вносят 3 кг закваски ацидофильной культуры штамма 12б и культивируют при температуре 46 С. В процессе о культивирования проводят три раза раскисление аммиаком до рН 5,0. Одновременно с последним раскислением проводят подкормку внесением 2 л

40Х-ного раствора глюкозы и 0,016 кг сернокислого марганца. 10

После окончания инкубирования субстрат охлаждают до температуры о

10 С и отделяют бакмассу на суперцентрифуге. Степень отделения клеток от. среды контролируют по прозрачности осветленного центрифугата и микроскопией е

Бактериальную массу в количестве

1,7 кг извлекают в стерильном боксе в стерильную емкость и смешивают с щ

11 л 10Х-ного стерильного водного раствора сахарозы, 1Х желатины и

0,75Х молибденовокислого аммония. Полученную смесь разливают по флаконам замораживают и высушивают в субли- 25 мационной сушилке. Содержание сухих веществ в препарате — 96Х. В 1 r препарата содержится 600 млрд. клеток ацидофильных палочек.

Пример 2. Получают осветлен- 0 ную сыворотку. На 50 л этой сыворот1 . ки вносят по 300 г фосфорнокислого ,и сернокислого аммония, 1«5 л неосветленной сыворотки, газообразным аммиаком устанавливают рН 6,4.

Подготовленную среду стерилизуют

20 мин при 1 ати и 121оС, а затем охлаждают до 45 С.

В питательную среду вносят

1,5 л закваски ацидофильной культу40 ры штамма 12б. Культивирование проо водят при 43-45 С в течение 9 ч, Поддержание рН 5,8-6,5 осуществляют

4-кратным насыщением газообразным

890 4 аммиаком: При последнем раскислении вносят 1,5 л 40Х-ного раствора глюкозы и 8,5 г сернокислого марганца. После окончания процесса культивирования субстрат охлаждают до 10 С ° На о суперцентрифуге отделяют бакмассу в количестве 860 г, смешивают с 6 л стерильного раствора, содержащего

10 мас.Х сахарозы, 0,75 мас.Х желатины и 1 мас«Х иодистого калия. Полу-ченную смесь стерильно разливают по флаконам, замораживают и высушивают в сублимационной сушилке. Готовый препарат имеет 97Х сухих веществ.

В 1 г сухого препарата содержится

605 млрд. ацидофильных бактерий.

Предлагаемый бакпрепарат активен в молочной сыворотке.

Порция препарата равная 0,5-1 г, :повышаеT кислотность, например подсырной сыворотки, до 90 С за 6-9 ч.

Бакпрепарат может быть применен для приготовления кормовой добавки — сыворотки молочной обогащенной, для профилактики желудочно-кишечных заболеваний, повышает резистертность к этим заболеваниям и улучшает перевариваемость грубых кормов. Кроме того, бакпрепарат может использоваться в производстве других продуктов из сыворотки из расчета 1 флакон на 10 т сыворотки.

Исследовались на антибиотическую активность образцы обогащенной сыворотки, приготовленной с бакпрепаратом. Результаты представлены в таблице.

Наличие зоны угнетения свыше

10 мм и титра свыше 32 характеризует продукт с высокой антибиотической активностью.

Экономический эффект от использования предлагаемого способа составит (в среднем) 170-200 тыс. руб.