Способ определения сенсибилизации лейкоцитов

 

Изобретение относится к иммунологии о Цель изобретения - повьшгение чувствительности способа. Образцы крови с исследуемым аллергеном инкубируют . Затем готовят мазки крови, и окрашивают их Подсчитывают содержание измененных лейкоцитов в опытном и контрольном мазках и определяют индекс сенсибилизации лейкоцитов о Способ позволяет диагностировать аллергические процессы, связанные с инфекционными, неинфекционными и аутогенными аллергенами. Од ел 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

43 А1 (!9) (! !) (5!) 4 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н А BTGPCHGMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 4123968/28-14 (22) 11.07,86 (46} 15,12.87. Бюп„ Р 46 (71) Харьковский научно-исследовательский институт микробиологии, вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова (72) В,Д.Яковенко, И,Л.Дикий, В. В, Клочков, Е.M. Дикая, Е.Д. Федирко и Л,А,Попова (53) 615,375 (088,8 ) (56) Фрадкин В.А., Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови. М, 11едицина, 1985, с, 172, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ЛЕЙКОЦИТОВ (57) Изобретение относится к иммунологии. Цель изобретения — повышение чувствительности способа. Образцы крови с исследуемым аллергеном инкубируют, Затем готовят мазки крови: и окрашивают их. Подсчитывают содержание измененных лейкоцитов в опытном и контрольном мазках и определяют индекс сенсибилизации лейкоцитов.

Способ позволяет диагностировать аллергические процессы, связанные с инфекционными, неинфекционными и аутогенными аллергенами.

1359743

Н - Н

100

40 дует, что предлагаемый способ определения сенсибилизации лейкоцитов

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунодиагностике аллергических состояний.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

0,08 мл крови переносят стерильной пипеткой в две видалевские про" бирки, одна из которых служит контролем, а вторая — опытом. В опытную пробирку предварительно помещают

0,02- мл исследуемого аллергена на

5%-ном растворе цитрата натрия, а в контрольную — 0,02 мл 5%-ного раствора цитрата натрия (стандартные аллергены смешивают с антикоагулянтом—

25%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 4:1, нестандартные аллергены используются в дозах, соответствующих постановке тест-показателя повреждения нейтрофилов, Затем пробирки с исследуемыми образцами крови инкубируют в термостате при 45 о

46 С в течение двух часов, после чего готовят мазки и окрашивают их по Май-Грюнвальду Папенгейму или

Романовскому-Гимза. Учет реакции проводят путем подсчета процентного содержания измененных лейкоцитов в опытном (Н,) и контрольном (Н ) мазках. Индекс сенсибилиз ации лейкоцитов определяется по формуле

Оценка результатов: отрицательные— индекс Π— 0,05; положительные — индекс 0,06 — 0,3 резко положительные индекс более 0,3.

П.р и м е р. Больной Х, Диагноз хронический декомпенсированный тонзиллит, частые ангины в анамнезе.

Поступил в клинику ЛОР болезней для проведения тонзиллэктомии. В день поступления проведено определение сенсибилизации лейкоцитов крови к стрептококковому (КНИИЭМ) и тканево- му аллергенам, Кровь, полученную из пальца больного стандартным методом, переносили стерильной пипеткой в три видалевские пробирки по 0,08 мп, одна из которых служила контролем, две другие были опытными. В контрольную пробирку предварительно помещали 0,02 мл

5%-ного цитрата натрия, а в опытные—

13&

25 исследуемые аллергены (в первую—

0,02 мл стерптококкового аллергена на 5%-ном растворе цитрата натрия, во вторую — 0,02 мл тканевого аллергена на 5%-ном растворе цитрата натрия) .

Затем пробирки с исследуемыми образцами крови инкубировали в термостао те при 45 С в течение двух часов, после чего готовили мазки и окрашивали их по Май-Грюнвальду. При подсчете учитывали процентное содержание клеток с гомогенной базофильной цитоплазмой по отношению к лейкоцитам с неизменной цитоплазмой и ядром, В пробирке со стрептококковым аллергеном количество измененных лейкоцитов,составило 31%, в пробирке с тканевым аллергеном — 47%, в контролькой пробирке 5%. Индекс сенсибилизации лейкоцитов определяли по фор

Hi — Н муле †-- — — где Н вЂ” процентное

100 содержание измененных лейкоцитов в опытном мазке; Н вЂ” в контрольном.

Индекс сенсибилизации к стрептококковому аллергену составил 0,26, к тканевому — 0,42.

Таким образом, полученный резуль" тат характерен для больных декопенсированной формой хронического тон-. зиллита. Проведенный патоморфологический контроль подтвердил клинический диагноз.

Из результатов сравнительной оценки эффективности предлагаемого и известного (прототип) способов, полученных при исследовании; 3 групп больных по 20 человек в каждой, слеобладает существенно выраженными диагностическими преимуществами по сравнению с известным, обеспечивая при турбекулезе повышение индекса повреждения лейкоцитов с турбекулином в 2,16 раза (0,268+0,0835 ИСЛ по предлагаемому и 0,124+0,0317 по.прототипу), при непереносимости стрептомицина — 2,2 раза (0,10340,0294 и 0,047 -0,0122 соответственно), при непереносимости новокаина— в 1,35 раза (0,168 0,0509 и 0,124+

0,0373 соответственно).

Представленные данные показывают, что предлагаемый способ определения сенсибилизации лейкоцитов универсально пригоден для диагностики аллергических процессов, индуктивно связан1359743

Составител ь В,Литовченко

Редактор Т.Парфенова Техред Л.Сердюкова

Корректор В.Бутяга

Заказ 6151/48 Тираж 776

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, R-35, Раушская наб., д.4/5

Подпи сное

Производственно-полиграфическое предприятие, г,ужгород, ул. Проектная,4 ных с инфекционными, нейнфекционными и аутогенными аллергенами, характеризуется высокой степенью специфичности, выраженной диагностической чувствительностью, позволяет выявлять аллергические состояния не определяемые известными методами, Таким образом, к перимуществам предлагаемого способа определения сенсибилизации лейкоцитов относится: повышение диагностической чувствительности предлагаемого способа в сравнении с прототипом в 1,2-2,16 раза; упрощение методики оценки результатов реакции и обработки мазков крови, что делает доступным проведение исследования в клинических лабораториях, проведение методики постановки и оценки результатов реакции в соответствии с патогенетически ведущими факторами аллергического воспаления, протекающего в условиях повышенной температурной реакции, позволяет регистрировать все участвующие в определении аллергического статуса клетки вне зависимости от степени их специфичности.

Формула изобретения

Способ определения сенсибилизации лейкоцитов, включающий инкубацию лейкоцитов крови больных с аллергеном с последующим приготовлением мазков

15 крови и их окрашивание, о т л и ч аю щ и и с. я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, лейкоциты с аллергеном инкубируют при

45 -46 С, окраску мазков проводят

2р по Май-Грюнвальду и по наличию клеток с гомогенной базофильной окраской или их цитолиза определяют сенсибилизацию лейкоцитов,