Способ определения активности ферментов печени

 

Изобретение относится к биохимии и медицине, касается гепатологии. Цель изобретения - повьшение точнос- Tif и селективности способа. Для этого пункционно берут биопсию печени под-общим в/в тиопентал-натриевым наркозом с применением миорелаксантов (для избегания травмирования ренхимы печени, связанного с дыханием больного). Внутреннюю иглу с биоптатом после прокола печени извлекают, а оставленную наружную иглу (канюлю) соединяют со шприцем, заполненным стерильным физраствором и быстро (в 3-5 с) вводят в печень 4-5 мл стерильного физраствора. Вытекающую обратно жидкость (3 мл) собирают в пробирку и определяют ферментативные активности. Затем в канюлю вводят электрод, покрытий изоляционным полихлорвиниловым слоем, кроме дистального участка, на 1 см выступающего из капкши. Электрод подключают к электрокоагулятору5и, извлекая его вместе с канюлей, постепенно электрокоагулируют пункционный канал для исключения послепунк1щоннь1х кровотечений . 2 табл. (Л

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН дi 1 G 01 N 33/48

АССР ;(ЩЯ ". - "Я

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 4014380/28-14 (22) 21,01. 86 (46) 07.05.88. Бюл. Р 17 (71) Вильнюсский государственный университет им. В.Капсукаса (72) И.Й. Крикштопайтис, Г.К.Грибаускас и Ю.К. Калибатас (53) 612.015(088.8) (56) Грибаускас Г. и др. Исследование некоторых ферментов и их клиническая интерпретация ° Методические рекомендации. Каунас, 1974, с.33. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕН1И АКТИВНОСТИ

ФЕРМЕНТОВ ПЕЧЕНИ (57) Изобретение относится к биохимии и медицине, касается гепатологии.

Цель изобретения — повышение точности и селективности способа. Для этого пункционно берут биопсию печени под обцим в/в тиопентал-натриевым наркозом с применением миорелаксантов (для избегания травмирования па ренхимы печени, связанного с дыханием больного). Внутреннюю иглу с биоптатом после прокола печени извлекают, а оставленную наружную иглу (канюлю) соединяют со шприцем, заполненным стерильным физраствором и быстро (в 3-5 с) вводят в печень 4-5 мл стерильного физраствора. Вытекаюцую обратно жидкость (3 мл) собирают в пробирку и определяют ферментативные активности. Затем в канюлю вводят электрод, покрытий изоляционным полихлорвпниловым слоем, кроме дистального участка, на 1 см выступаюцего из капюли. Электрод подключают к электрокоагулятору.,и, извлекая его вместе с канюлей, постепенно электрокоагулируют пункционный канал для исключения послепункционных кровотечений. 2 табл.

1394 t 32

Пзобретение относится к биохимии

,и медицине, касается гепатологии, 1

Цель изобретения — повышение точности и селективности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Забор печеночных ферментов проводят во время пункционной биопсии печени. Пункционную биопсию печени 10 производят под общим внутривенным тиопентал-натриевым наркозом с применением миорелаксантов короткого действия, что позволяет избежать возможное травмирование паренхимы 15 печени связанное с дыханием больноЭ го. Прокол печени делают на уровне

1 средней подмышечной линии в IX — Х межреберьи двойной иглой, состоящей ! из наружной иглы (канюли), которую 20 оставляют в печени, и внутренней иглы для взятия биоптата печени, которая на 1,5 см длиннее наружной и легко вталкивается в просвет наружной иглы, Внутреннюю иглу с биоптатом извлекают 25 из печени, а оставленную наружную иглу (канюлю) соединяют со шприцем, заполненным стерильным физиологичес-. ким растворогл, после чего быстро (35 с) впускают в печень 4-5 мл сте- 30 рильпого физиологического раствора.

Вытекающую обратно жидкость в количестве 3 мп собирают в пробирку и определяют ферментативные активности.

Затем B канюлю вставляют электрод, который по всей длине, за исключением его дистального участка, на 1 см Bblc тупающего из канюли, покрыт изоляционным полихлорвиниловым слоем. Электрод подключают к электрокоагулятору 40 и, постепенно извлекая его вместе с канюлей, производят эпектрокоагуляцию пункционного канала. Зто исключает возможность послепункционных кро" вотечений.. 45

Пример. У 20 лиц производился забор крови из кубитальной вены с последующим установлением активности основных ферментов, отражающих функциональное, состояние печени — ала-.

i0

HHH аминотрансферазы (АлАТ), аспарагин аминотрансферазы (АсАТ), щелочной фосфатазы (Г1Ф) . Параллельно во время произведения многоступенчатой пункционнои биопсии печени предлагаеMlM способом определяли внутриклеточные печеночные ферменты путем промыlibïøï пункционного Këíÿëà физиологическим раствором с последующим установлением активности вышеуказанных ферментов в физиологическом растворе.

Сопоставительные данные методов приведены в таблице, в которой даны цифровые значения активности ферментов в периферической веноэной крови, полученной путем пункции вены и взятия крови шприцем, и активность ферментов, полученных по предлагаемому способу.

Как видно из представленных в табл.1. данных, по предлагаемому способу в полученной жидкости из печени устанавливается высокая активность печеночных внутриклеточных ферментов, что позволяет более точно делать выводы о степени поражения печени, по сравнению с активностью данных ферментов в периферической венозной крови, так как в общее кровяное русло попадают вышеуказанные ферменты из многих органов, например повышение активности АсАТ может служить показателем не только поражения печеночных клеток, но и сердца, а повышение концентрации ЦФ может указывать не на печепочный холестаз, а на воспалительный процесс в суставах. Поэтому определение внутриклеточных печеночных ферментов по предлагаемому способу является точным и селективным;

Для подтверждения увеличения точности и селективности способа определения активности ферментов печени у пяти больных проведены сопоставительные исследования активности трансаминаз в периферической венозной крови, в получаемом экстракте (по предложенному способу),и в печеночном гомогенате.

Печеночный гомогенат получают из юмм биоптата печени, который заливают 4 мл физиологического раствора, /(анные представлены в табл,2.

Как видно из представленных в табл.2 данных, в получаемой внутриклеточной жидкости активность ферментов более близка к таковой, которая установлена в печеночном гомогенате.

Более того, соотношение АлАТ и АсАТ установленное в экстракте, соответствует соотношению активности исследуемых трансаминаэ в печеночном гомогенате и резко отличается

ot соотношения этих трансаминаэ в периферической крови.

1394132

Таблица 2

Активность ферментов, ммоль/л ч

Экстракт (внеклеточ- Гомогенат печени ная жидкость) Кровь

АсАТ

АлАТ АсАТ

АЛАТ АсАТ

АлАТ

0,.49

2,54

Составитель Н. Гуляева

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор О.Кундрик

Редактор Г. Волкова

Заказ 22 15/4 1 . Тираж 847 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

0 14

0,14

0,07

0,56

0,04

0,07

0,04

0,07

0,32

0,98

0,88

0,56

2,56

4,52

0,22

0,12

0,42

О, 82

1,84

3,84

3,58

4,7

6,78

0,77

0,92

0,45

0,85

1,47