Способ получения стерильной натриевой соли днк

 

Изобретение относится к способам получения биологически активных веществ и может найти применение в химико - фармацевтической промышленности. Цель изобретения состоит в получении нативной натриевой соли ДНК с гиперхромным эффектом не менее 37%. Для этого раствор нативной Na - ДНК фильтруют через стерилизующий фильтр при температуре 30 - 60^oС, давлении 0,3 - 1,4 ати, ионной силе поддерживающего электролита 0,007 - 0,15. 1 табл.

Изобретение относится к способам получения биологически активных веществ, а именно стерильной нативной натриевой соли ДНК с мол.м. 0,06-0,60 х 10⁶ дальтон, который может найти применение в химико-фармацевтической промышленности. Цель изобретения состоит в получении нативной ДНК с гиперхромным эффектом не менее 37% Проводят фильтрацию раствора Na ДНК через стерилизующий фильтр при температуре 30-60^оС, ионной силе 0,007-0,015 и давлении 0,3-1,4 ати. П р и м е р 1. 1 кг замороженных молок осетровых рыб измельчают, гомогенизируют в цитратно-солевом растворе (ССЦ), содержащем 0,15 М раствор хлористого натрия, 0,015 М цитрата натрия, и трижды промывают ядерный материал ССЦ. Затем ядерный материал помещают в реактор, куда добавляют ССЦ, 6% -ный раствор додецилсульфата натрия, выдерживают при температуре 60^оС в течение 1,5 ч, добавляют равный объем 5М NaCl и инкубируют 1,5 ч при температуре 60^оС при перемешивании. Затем смесь охлаждают до температуры 12-16^оС, добавляют в нее кизельгур (1 мас.ч. кизельгура на 20 об.ч. реакционной смеси), перемешивают и отделяют выпавший осадок балластных веществ от раствора Na-ДНК на нутч-фильтре. Из фильтрата этиловым спиртом-ректификатом в соотношении 1:1 (на 1 объем фильтрата 1 объем спирта) высаживают нативную Na-ДНК с мол. м. 12,7 х 10⁶ дальтон и гиперхромным эффектом 45% Полученный осадок Na-ДНК суспендируют в 2 л воды и получают суспензию нативной высокополимерной Na-ДНК с концентрацией Na-ДНК 0,8% Суспензию озвучивают в магнитно-стрикционном излучателе ЦМС-18 в течение 20 мин и получают раствор нативной Na-ДНК с мол. м. 0,6 х 10⁶ дальтон и гиперхромным эффектом 43% Озвученный раствор последовательно фильтруют через систему фильтров с диаметром пор 1,2, 0,65 и 0,45 мк. Затем добавлением 2,5 М NaCl доводят ионную силу поддерживающего электролита до 0,100 и полученный раствор фильтруют через стерилизующий фильтр с диаметром пор 0,22 мк при температуре 60^оС и давлении 0,3 ати. В результате получают стерильную натриевую соль ДНК с мол.м. 0,6 х 10⁶ дальтон и гиперхромным эффектом 43% Примеры проведения стерилизации нативной натриевой соли ДНК представлены в таблице.

Формула изобретения

Способ получения стерильной натриевой соли ДНК путем стерилизации растворов ДНК, отличающийся тем, что, с целью получения нативной ДНК с гиперхромным эффектом не менее 37% стерилизацию проводят с помощью фильтрации раствора ДНК через стерилизующий фильтр с диаметром пор не выше 0,22 мкм, при температуре 30 60^oС, ионной силе 0,007 0,15 и давлении 0,3 1,4 ати.

РИСУНКИ

Рисунок 1