Способ количественного анализа фитина в растительных кормах

 

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения фитина в растительных кормах методом жидкостной хроматографии. Цель изобретения - повьшение чувствительности и сокращение времени анализа. Фитин экстрагируют из растительных кормов соляной кислотой и отделяют экстракт от нерастворимого осадка центрифугированием. Полученный экстракт пропускают через хроматографическую колонку с сильнокислотным компонентом, содержащим 0,1-1 мг-экв железа в 1 г катионита. В качестве элюент.а используют 0,4- 0,8 М раствор соляной кислоты. Определяют фитин спектрофотометрически в УФ-спектре по светопоглощению фитинового комплекса с железом. 2 з.п. ф-лы, 2 табл. i (Л с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (19) (И1 (594001 N 30 4

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

- - ®ВАМ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ -„;",,„„13

3 »

К А BTOPCHOlVIV СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4224075/24-25 (22) 07.04.87 (4б) 23.10.88. Бюл. 1(- 39 (71) Научно-исследовательский институт животноводства Лесостепи и Полесья УССР (72) Н.A. Романов, С.G Варчук, В.В. Мирось и И.Г. Федотов (53) 543.544(088.8) (56) Ярош Н.П. Определение веществ, содержащих фосфор или серу. — В кн.

Методы биохимического исследования растений.-M.: Колос, 1972, с.320322.

Ellis К., Morris Е., Philpot С.

Auantitative Determination of Phytate

in the Presence of High Inorganic

Phosphate. — Analytical Biochemistry, 1977, ч. 77, п. 536-539. (54,) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО АНАЛИЗА

ФИТИНА В РАСТИТЕЛЬНЫХ КОРМАХ (57) Изобретение относится к аналитической химии и может быть испбльзовано для определения фитина в растительных кормах методом жидкостной хроматографии. Цель изобретения— повышение чувствительности и сокращение времени анализа. Фитин экстрагируют из растительных кормов соляной кислотой и отделяют экстракт от нерастворимого осадка центрифугированием.

Полученный экстракт пропускают через хроматографическую колонку с сильнокислотным компонентом, содержащим

0,1-1 мг-экв железа в 1 г катионита.

В качестве элюента используют 0,40,8 М раствор соляной кислоты.

Определяют фитин спектрофотометрически в УФ-спектре по светопоглощению фитинового комплекса с железом.

2 з.п. ф-лы, 2 табл.

1 1432399 2

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения фитина в растительных кормах методом жидкостной хроматографии.

Цель изобретения — повышение чувствительности и сокращение времени анализа.

Способ осуществляют следующим образом, Экстрагируют фитин из растительных кормов соляной кислотой и отделяют экстракт от нерастворимого осадка центрифугпрованием. Полученный экстракт пропускают через хроматографическую колонку с сильнокислотным катпонитом, например полистирольным катионитом КУ-2, содержащим

0,1-1,0 мг-зкв железа в 1 r катионита. В качестве элюента используют 0,4-0,8 И раствор соляной кислоты. "

0nределяют фптин спектрофотометрически в УФ-спектре по светопоглощению фитпнового комплекса с железом. В 25 качестве раствора сравнения используют элюент, пронущенный через колонку перед введением экстракта.

Пример 1. Определение фитипа в искусственных растворах. 0,5- 30

5 мл исходного раствора фитина в

0,33 И соляной кислоте вводят в хроматографическую колонку с катионитом, содержащим 0,1-1,0 мг-экв железа в

1 г катионита. Образовавшийся в колонке фитиновый комплекс с железом элюируют 0,4-0,8 М соляной кислотой; отбирают фракцию фитинового комплекса с железом по времени выхода из колонки и спектрофотометрируют в УФ-спек40 тре при 240 нм. Расчет содержания фитина ведут по величине светопоглоще— ния фитинового комплекса с железом.

Результаты определения фитина в искусственных растворах представлены 45 в табл.

Как видно из представленных в табл. 1 данных, чувствительность определення фитина в искусственных растворах равна 0,0015Х. Относи- 50 тельное стандартное отклонение не превышает 0,05. Определению фитина не мешают более, чем 60-кратные избытки неорганических фосфатов.

Пример 2 ° Определение фитина в растительных кормах. Навеску корма 0,2-1,0 заливают 0,35 M соляной кислотой, экстparируют фитин в течение 120 мин и отделяют экстракт фитина.

О, 5-5 мл экстракта фитина в в одя т в хроматографическую колонку с катионитом, содержащим 0,1-1,0 Mr-экв железа в 1 г катионита. Образовавшийся в колонке фитиновый комплекс с железом элюируют 0,4-0,8 M соляной кислотой, отбирают фракцию, содержащую фитиновый комплекс с железом, по времени выхода из колонки и спектрофотометрируют в УФ-спектре при 240 нм. Расчет фитина ведут по величине светопоглощения фитинового комплекса с железом.

Результаты определения фитина в растительных кормах представлены в табл ° 2.

Аналогично определяют фитин в других растительных кормах, при этом относительное стандартное отклонение f не превышает 6,05.

Формула изобретения

1. Способ количественного анализа фитина в растительных кормах, включающий экстракцию фитина соляной кислотой, отделение экстракта от нерастворившегося осадка центрифугированием и определение фитина, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности и сокращения времени анализа, экстракт после центрифугирования пропускают через хроматографическую колонку с сильнокислотным катионитом, содержащим 0,1-1,0 мг-экв железа в 1 r катионита, элюируют фитиновый комплекс с железом из колонки 0,40,8 малярной соляной кислотой и определяют фитин спектрофотометрически в УФ-спектре по светопоглощению фитинового комплекса с железом.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю шийся тем, что в качестве сильнокислотного катионита используют полистирольный катионит КУ-2.

3. Способ по и. 1, о т л и ч а ющ и Й с я тем, что перед введением экстракта через колонку пропускают элюеит, используемый в качестве раствора сравнения.

1432399

Таблица 1 концентрация фитина, %

Найдено фитина, %

0,05

0,05

0,04

0,04.

0,02

0 04

0,02

10 Определение фитина ведут в присутствии 0,1% неоргани" ческого фосфата из растительного корма от нерастворившегося осадка центрифугированием

Т а блица 2

Объем

Введено фитина, % на абс.

Найдено фитина, % на абс. сухое вещество сухое вещество

0,04

0,012

0,023

Без добавки 10

О, 010 10

Люцерна

0,05

Листья и стебли кукурузы

0,04

0,022

0,040

0,265

0,586

Без добавки

О, 020

0,05

Без добавки

0,03

Зерно кукурузы

0,05

0,300

Зерно пшеницы

0,285

0,582

0,272

0,581

0,05

Без добавки 10

0.,300 10

Без добавки 10

0,300 10

0,02

0,04

Зерно овса

0,03

ВН1111П11 Заказ 5418/36 Тираж 847 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

О, 00150

О, 00150

0,00300

0,01200

0,06000

0,10000

0,17000

0,0014

0,0016

0,0031

О, 0124

О, 0580

0,1030

0,1725