Способ выделения гемокультур сальмонелл брюшного тифа и паратифов

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, в часжности к микробиологической диагностике брюшноГо тифа и паратифов. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа. Способ |9ключает взятие крови из вены больного в стерильный флакон с раствором цитрата натрия. К цитратной крови добавляют 100 мп расплав-т ленной и остуженной до 40-50 0 nuTai тельной среды следующего состава, . г/л: гидролизат-Хоттингера 100,0- IЗO,Oi маннит.9, сульфат нат рия 0,03-0,05; гипрсульфат натрия 0,07-0,09; сульфат железа 0,09- 0,11; агар-агар 4,8-5,2; вода дистиллированная - остальное. Содержимое флакона перемешивают и разливают в стерильные чашки, посевы ..инкубируют при 37 С. При наличии в исследуемой крови возбудителей брюшного тифа или паратифов через 24 ч инкубации в глубине или на поверхности среды в чалхах вырастают колонии черного или темно-серого цвета диаметром 0,5-3,0 см. 2 тавп. (Л

(19) (1И

A I

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ к дато скомм свидетелм

ГОСУДАРСТВЕННЬЮ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И (7ЩРЦЩ ЯМ (1РИ ННТ СССР (46) 15.09,90.Бюл. 9 34 (21) 4241118/28" 13 (22) 07.05. 87 (7l) Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии и Таджикский научно-исследователь-, ский институт,эпидемиологии и гигиены (72) N.È,Ëaòèíñêèé, Г.И.Герок, И,С,Молочаева, Д.Х.Каримова и В,Р,Бобоева (53) 576.8.093.1 (088.8) (56) Методические указания по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями, М., МЗ СССР, !984. (54) СПОСОБ ВЬЩЕЛЕНИЯ ГЕМОКУЛЬТУР

САЛЬМОНЕЛЛ БРЮШНОГО ТИФА И ПАРАТИФОВ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к микробиологической диагностике брюш. ного тифа и паратифов. Цель изобретения - ускорение и упрощение спосоJ

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается выделения возбудителей брюшного тифа и пар атнфов .

Цель. изобретения — ускорение и упрощййие способа, Способ осуществляется следующим образом. Кровь, взятую из вены боль" ного в количестве 5-10 мп, стерильно вносят во флакон с 5-10 мп 6%-ного . раствора цнтрата.натрия и доставляют в лабораторию. К цнтратной кропи добавляют 100 кп расплавленной и,остуженной до 40-50 С среды следующего состава, r/ë:.I (51)5 С 12 Я !/04 // (С !2 Q 1/04, С !2 R 1:42) ба. Способ включает взятие крови иэ вены больного в стерильный флакон с раствором цитрата натрия. К цитратной крови добавляют 100 мп расплав.-. ленной и остуженной до 40-50 C пита. тельной среды следующего состава, г/л: гидролизат..Хоттингера 100,0130,0 маинит..9,0-11„0; сульфат нат-. рия 0,03-0,05; гнпосульфат натрия

0,07-0,09; сульфат железа 0,090,11; агар-агар 4,8-5,2; вода дистиллированная " остальное. Содержимое флакона перемешивают и разливают в стерильные чашки, госевы ..инкуби- руют при 37 С. При наличии в исследуемой крови возбудителей брюшного тифа или паратифов через 24 ч инкубации в глубине или на поверхности среды в чаи -az вырастают колонии черного или темно-серого цвета диа" метром 0,5-3,0 см. 2 табл.

Гидролизат

Хоттингера 100,0-130 О

Маянит 9,0-11,0

Сульфат натрия 0,03-0,05

Гипосульфат натрия 0,07-0,09

Сульфат железа 0,09-О,II

Агар-агар 4,8-5,2

Вода дистиллированная До 1 л.

После добавления к крови расплавленной и остуженной среды содержимое .флакона перемешивают и разливают н 4 стерильные чашки Петри (по 2530 мл и каждую чашку) и закрывают нх крышками. После застывая IR среды з l45924 чашки помещают в териоствт (крышкаию вверх) при 37 С на 3 сут н ежедневно просматривают посевы..lips наличии в исследуемой. крови воэбу дителей брюшного тифа или паратифов, через 24 ч инкубацин в глубине или на поверхности среды в чашках вырастают характерные колонии черного илн темно-серого цвета диаметром 10

0,5"3,0 см. В процессе дальнейшей инкубацин колонии увеличиваются в диаметре. Идентификацию выросших культур производят обычными методами.

Результаты определения представле- 1а ны в табл.l и 2.

Для осуществления способа используют питательную среду, приготозле" ние-которой описывается .в примерах

l-3. 20

Пример l. Готовят нввеску среды, для этого берут (г/л) гидро". лизатаХоттингера 100,0; ианнита 9,0; сульфата натрия 0,031 гипосульфнта натрия 0,07;, сульфата железа 0,09; 26 агар-агара 4,8, воды дистиллированной до 1000,0 ил. Среду разливают по

100 ип во флаконы, стерилнзуют нри

0,5 ати 30 мин, рй среды ..7,2-7,4, Перед употреблением среду расплавляют на водяной бане. .

Пример 2. Готовят навеску среды, которую готовят как и s иримере 1 ° но берут (г/л) гидролизата

Хоттингера 115,0; мвннита 10,0; сульфата натрия 0,04; гнпосульфита 0,081 сульфата железа, 0,10; агар — а|врв

5,0;.воды диотиллироввнной до

1000,0 ип, П р и и е р 3. Готовят нввеску 40 среды квк в примере l, но берут. (г/л) гидролнзата Хоттингера 130,0; маннита 11,0 сульфата натрия,.0,05; гипосулюфита натрия 0,09; сульфата железа 0,11; агар - агарв 5,2; до . 45

1000 0 .ип воды дистиллированной, Данные табл.! свидетельствуют о тои, что три варианта питательной

4 среды с мннимальныи, оптимальным и максимальным содержаниеи коипонентов обладают примерно одинаковой, достаточно высокой чувствительностью при обнаружении возбудителей брюшного тифа и паратифов А .и В.

Иэ таба. 2 видно, что способ выделения гемокультур ие уступает по эффективности общепринятому, Все отрицательные результаты исследования при предлагаемом спосебе получены на 6 дней, а положительные на

1-3 дня раньше, чем при общенрнйя» том способе, что свидетельствует о существенном сокращении сроков. получения результатов исследований, а исключение стадии .накопления культуры сокращает число этапов способа сокращает расход питательных сред.

Формула и э о б р е т е н и я

Способ выделения гемокультур саль- монелл брюшного тифа и паратифов, предусматривающий забор исследуемой крови, посев и инкубироввние с использованием питательной среды, с последуницим учетом выросших колоний, о т л и ч в ю шийся тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, исследуемую кровь непосредственно смешивают с расплавленной и остуженной питательной средой, содержащей, г/л:

Гидролиэат Хоттингерв 100-130

Мвннит 9-11

Сульфат натрия 0,03-0,05

Гипосульфнт натрия 0,07-0,09Сульфат железа 0,09-0, 11

Агар " агар 4,8-5,2

Вода дистиллнро" ванная До1л, полученную смесь разливают в чашки, инкубируют в течение 1-3 дней и отбирают колонии черного нли темносерого цвета, выросшие нв поверхности и в толще среды.

1459247 .

° ВФЮ

Среднее число ю в@в юю е аю ю

Врщ бактерий

Варианты срейы ее сло евов бактерий,,внесенных

is образци крови колоний, выросаик на 4 чашках Петри и глубине еды на поверхности среФ

0,9

ИинимальНый

0,7 .!

13

ОлтимальНЫй

0 á

ИаксимальНЫй

О,б.! 0

13

0,8

Оптималь-

НЫй

0,9

13

МаксимапьНый!

1,3

S. paratyphi В 6

9 1,3

0,9

0,7

МаксимапьНый

0,8

1,4

Юю

Число неуче нык ютаммов .. бактерий

iSilmonel- 8

1а суй

8:parаtyphi А. 4

12 Мииималь- 14

НЫй

18 Мииимапь- 1

Hbt!!

Онтималь" 11

НЫй

Таблица !

Средние размеры колоний, см

Саесеб ввщеаеиивв куаату

Ю ВВ ЧЮ4ЮИВВ ФВ М46Ф ЮФВфф фйф(94ф фО а тем чщ.ие г

ОееМе амнвеееь

« «Ю

«Ю Ю ФЭНОВ,24 17.7

1:.f9 . 17 2

2 26 37 9

Всего 339 2l 3

° а юной««4ВВ .Ю

4вее«««в »»«ею«««е««»юав«юавр

«Ваф ° Ф

Составитель А.Завадская

Техред N.Õîäàíè÷ Корректор M.Ïoæî

Редактор В.Трубченко

Ю Ма «»»

«»»«» ««««

««««

Заказ 3326 Тираж 489 Подписное

ЭЙИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

313035, Иосква, Ж-35, Раувская наб., д. 4/5

Преиеводственно-издательский комбинат "Патент", г.уагород, ул. Гагарина, 10) Иредаегее- l 539 - 20 . З

l4CN

Лрототии, Я9 }5 3 щючив аиъ нонеллы

OPHITE вре34е ио да собеми только

ДМИИ

9, ФЯО обои