Способ получения комплексных соединений платины

 

Изобретение касается комплексных соединений платины, в частности получения соединений общей ф-лы @ где A- C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">3</SB>-алкилен

R - H или отсутствует

X и Y -галоген или (X+Y) - -O-C(O) - @ -C(O)-O-

N, M=0 или при условии, когда N=1, то X и Y - галоген, которые проявляют противоопухолевую активность, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых более активных соединений указанного класса. Синтез ведут реакцией диамина ф-лы NH<SB POS="POST">2</SB>-(CH<SB POS="POST">2</SB>)<SB POS="POST">M</SB> -A-CH<SB POS="POST">2</SB>-NH с платина(2+)калийхлоридом(взятым лучше в эквимолярном количестве, в водной среде при комнатной температуре 3 ч или 1 день) с получением соединения с N=0 и X и Y - галоген, которое либо выделяют, либо при необходимости обрабатывают H<SB POS="POST">2</SB>O<SB POS="POST">2</SB> (взятой в избытке, в водной среде при комнатной температуре или при нагревании до 80°С 0,5 - 1ч) с получением соединения с N=1 и X и Y-галоген, либо обрабатывают нитратом серебра (лучше взятыми в молярном соотношении 1:2, при комнатной температуре в водной среде в течение 3 дней), либо динитрат обрабатывают циклобутан-1,1-дикарбоновой кислотой (взятой в эквимолярном количестве, при комнатной температуре в течение 4 дней) с получением соединения с N=0 и (X+Y) - -O- C(O) --C-C(O) - O -, которое в сравнении с известным соединением ф-лы @ обладает лучшей активностью в отношении Колон 26 карциномы (при дозе 40 мг/кг степень подавления развития оухоли повышается с 14 до 79%, а при дозе 80 мг/кг - с 45 до 98%). 4 з.п. ф-лы, 7 табл.

СО1ОЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (S1)S С 07 Р 15/00

Н llATEHYY жц, pt O-С(О) ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ CCCP

1 (21) 3955959/23-04 (22) 11.09.85 (31) 189655/84, 189656/84, 189657/84, 8383/85, 87615/85, 87616/85, 168559/85р 168560/85 (32) 12.09.84, 22,01,85, 25,04.85, 01,08.85 (зз) Ji

46) 07.06.90. Бюл. 11- 21

71) Чугаи Сейяку Кабусики Кайся (JT )

72) Иасамитсу Хонда, Кацуми Иорикава и Кохити Зндох (JP) (53) 547.259.2(088,8) (56) Патент CIA У- 4410544, кл. С 07 F 15/00, 1983. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОИПЛЕКСНЫХ

СОЕДИНЕНИЙ ПЛАТИНЫ (57) Изобретение касается комплексных соединений пла и-;ж, в частности получения соединений обшей формулы он)„ (СИ2 )В СН2-W2 Х

Р » — (ОН4 где А — С -С -алкилен; Н вЂ” Н или отсутствует; Х и Y — галоген или (X+Y)—

-O-С(0) — С вЂ” С(О)-О-; 2 2 ,п m= О или 1 при. условии, когда n=l, то Х и с — галоген, которые проявля- ют противоопухолевую активность, что может быть использована в медицине.

Цель — создание новых более активных соединений у-казанного класса, Синте."ведут реакпией диамина ф-лы

Л0„„ 1570649 А3

NH1-(CHy)t А-CH -NH с платина (2+) чиихлоридом (взятым лучше в эквимо лярном количестве, в водной среде при комнатног температуре 3 ч или

1 день) с получением соединения с п=0 - X н Y — галоген, которое либо выделяют, либо при необходимости обрабатывают Н О (взятой в избытке в водной среде при комнатной температуре или при нагревании до 80 С о

0,5-1 ч) с получением соединения с r=-! и X u Y — галоген, либо обрабатывают нитратам серебра (лучше взятыми в малярном соотношении 1:2, при комнатной температуре в водной среде в течение 3 дней), либо динитрат обрабатывают циклобутан-1,1-äèкарбоновой кислотой (взятой в эквимолярном количестве, при комнатной температуре в течение 4 дней) с получением соединения с п=0 и Х и Y— — О-С(0) — С вЂ” С(0) — Π—

СН2-СН вЂ” СН2 которое в сравнении с известным соединение ф-лы обладает лучшей активнастью в отношении Колон 26 карциномы (при дозе

40 мг/кг степень подавления развития опухоли повышается от 14 до 79Х а при дозе 80 мг/кг — от 45 до 98K).

4 з.п. ф-лы, 7 табл.

Изобретение относи" ся к сносе?бу получения новых соединений платины общей формулы

I pB ?? " С . --С,--ал?с????ен; I ./

Р - ВОдОрОд ИЛИ ОТСЛ. .:; ..-!

Х И ? — ГЯЛОГЕН ИЛИ ВМ-".: "". ГЕ . i :! P- :.З "i-ю т р адиеял фор?сеул:ы ,О 0- (,, „

О) сl ;..г (Д н 9 ?? -- 0 или 1 при услс в????.„:.:,,.- зя

?I=-I! i Х и ? — гялоген, ко::-о:. ые ь.агу. найти применение в меди?г?-=. -=.

Цель изобретения -- с- нтез новых соединений, проявляющих боле-.-: ?ь.са;—

КУЮ ПООТИВООПУХОПЕВУЮ g.."i,тн.-,ã! :-Ь ПО сравнению c:извест??ь?ми аналогами,. в H !;? е р 1 - К 33 с!.HÎО9 платина(тт)кзлийхлоря??В (, О моль ) В 1 00 и?! Воды цоос i?9?я„: 3,:! раствор 2- а миномет илпир р Олу?:---.: н-:: (! г, 0901 моль) в 10 мп воды, Ног;::ченн ую смесь перемешив ают В- т е ?е??ие дкя пр? Ко??м Г IQH 9 ем.. 1

p83oB8вшееся тB=.pÄÎs Веще ство -"Обира—

IoT фильтров9яние ":, промьгВяют зо пой и Бь?су?пивяют ?IpH 60 C ?." пони is яном давлении в течение 3 ч с получениеi!.

3 ?" Дихлор(2 -йминометилп ..?ррол?сдин ) платки?(ХХ), Выход 82%.„Т -, пл, 255=

279 C (с разложением),, Вычислено, %: С 6939: Н 3,3;-.

N 7 65, C НСЬ КРЬ

Найдено, %: С 1694„ Н 9926;.

N 795.

ИК спектр (™ ) 9 1 м(дг 9 см 3

3z3o, 31 0 (=нн).

К суслензин ОписяннОГО i?!90!?ук —;:! (3 г,, 0,0082 моль) в 300 мл Воды цс-бавляют нитрат серебра (29"18 Г-, 0,0164 моль). Долученну,с смес ° г?ер=" мешивают в темноте в течение дне

НрН кОмнатнОИ темперЯтуре, Вьь1авш Й бельФ| осадок хлорида серебра 1;даля

ЮТ фиЛЬТРОВЯН??ЕМ Ис??ОЛЬЗ.?Я МИ.?II!. iiристый фильтр (0,22 мкм), Флльт!?Ят. сс- держящьй непрО!9еяГировявший нитрат серебра, обрабать?аают водным раствором хлорида натрия, Образовавшийся хларид серебра удаляют фильтрованием,, а фильтрат упаривают при температуре ниже 40 С при пониженном давлении до 60 мл. К полученному раствору приОавляют д??натриевую сОль ЦиклобуТа» =-191--.дикарбоновой кислоты (1,54 г„

?О

0,008,.. моль ) при перемешивании и

e.:. есь выдерживают при комнатной температуре в течение 4 дней.

ОбРазовавшееся белое кристаллическое вещество выделяют фильтрова". 9 ни ем, с?ромыв яют ВОДОЙ и Высушивают

?pH 60 С и пониженном давлении в те- чение 3 ч с получением сухого циклобутан. — 1,1=дикярбоксилат(2-аминометилпирролидин)платинь?(Т?) в количестве

1,,86 г. Выход 527., т. пл, 235-255 С

I !,с разложением).

H.-.9числено, 7.: С 3092; Н 4,15;

N 6,4.

Найдено, %: С 30,0", Н 4,!1;

Г 6961., ИЕ--спектр (КВГ) ) >дс„к, см: 3080 (= kI) 9 1640, 1860 (=С=О), Полученный сухой продукт перекрис 9 "Ъ сяллизовывают из воды с получением в В.?де очищенного продукта 1,61 г

:iс?клобуган-1 -, 1-дикарбоксилат (2-аминг метилгирролидин)платины(ТГ) (соединенне 1), Общий выход 45%, т, пл, ;"5 215-220ОС (с разложением), Вычислено, %: С 30,2, Н 4,15; ч 6,L

С„Н,М О<Рс .!9?йцено., 7: С 30,02; Н 4,13; !О ?, б 43

ИК--спектр (КБс ), ) „д„., см 31009

9С = 1В ! =90, 1635 (=C=O)

П р и и е р 2, К раствору (Б)—

i ролика (25 г, 0,22 моль) и гидро-Й киси на срни i 8, 7 г, О, 22 моль) в 150 и?? вод?ы медленно добавляют раствор .".Янзилхлорформата (43,5 г, 0,26 моль) и гидроокиси натрия (!1i6 г, 0,29 моль) в 35 мл воды при

:-.0 перемешивянии и охлаждении льдом в ." ч;:??ис 30 мин после чего перемеluHHQill s гг!одолжают при той же тем-!

?spa?уре в т "::чение 15 мин., Избыток бензил: пс?рформата удаляют из реак;,ис,,—:.; ОЙ среды зкстрагированием 150 мл

-лороформа. Водный слой подкисляют

9 -, pàc :.Вором соляной кислоты и по:.ученнью маслянистый ?lppp5 кт зкстря

:нрр.лат хлороформом, Поче высушива5 15 ния раствора хлороформа над сульфатом магния хлороформ удаляют испарением с получением 52,2 г (S)-1-карбобензоксипирролидин-2-карбоновой кислоты в виде масла. Выход 967..

К раствору полученной (S, — 1 кар1 боб ензоксипирролидин-2-карб онов ой кислоты (52,2 г, 0,21 моль) и триэтиламина (21,2 г, О,?1 моль) в

525 мл хлороформа добавляют при перемешивании и охлаждении льдом иэобутилхлорформат (28, 7 г, О, 21 моль ), после чег о неремешивание продолжают

15 мин. В течение 1 ч в смесь пробулькивают сухой аммиак, затем повышают температуру до комнатной и ос— тавляют на ночь. Выпавший белый оса— док удаляют филь тров анием, а фильтрат испаряют при пониженном давле. нии, Остаток растворяют в 200 мл хлороформа и промывают разбавленной водной соляной кислотой и водой, высушивают над сульфатом магния, Хлороформ отгоняют с получением 45, 8 (S) -карбобенз оксипирролидин-2 — карбоксамида. Выход 88Х ($) — 1 -Карбобензоксипирролидин-2-карбокс а..ид (45, 8 г, О, 1 8 оль ) растворяют в 400 мл абсолютного метанола и восстанавливают каталитически обычным способом добавлением 10 г

10% палладия на угле в токе водорода. После завершения восстановления катализатор удаляют и растворитель отгоняют при пониженном давлении.

Остаток перекристаллизовывают из н-гексана и бензола, промывают н-гексаном с получением 18,8 г (Sl ïèððîлидин-2-карбоксамида B виде белого кристаллического вещества. Выход 897., т. пл. 85-90 С, К раствору (S)-пирролидин-2-карбоксамида (18 8 г, О, 16 моль) в 1 л сухого тетрагидрофурана при перемешивании и охлаждении льдом медленно добавляют литийалюминийгидрид (33,9 г, 0,89 моль), после чего смесь кипятят 48 ч. После охлаждения реак-. ционную смесь обрабатывают обычным способом водой и тетрагидрофураном с получением масла, Масло перегоняют при пониженном давлении с получением 6, 07 г (Б)-2-аминометилпирролидина в виде бесцветной жидкости. Выход 377, т. кип, 80-85 С (?0 мм Н ) . f

70649

1О !

6

На основ е (S ) 2-аминометилпирролидина по методике примера 1 получена (S)-цихлобутан -1, 1-дикарбоксилат (2-аминометилпирролидин)платина(Хт) (соединение 2), т, пл, 240255 С (с разложением), Вычислено, X: С 30,2; Н 4,15;

И 6,40.

C,öHt!!N2Ã Ã

Найдено, Х: С 30,14; Н 4,12;

Г .6,33.

ИК-спектр (КВг ), 1, к, см: 31 00, 3190 (=NH), 1590, 1635 (=С=О). )! +39,17 (Н 0), 1(р и м е р 3. На основе (R)-пролина по методике примера 2 получен (R) — 2-гминометилпирролидин, т.кип. 7985 С (20 мм Н,!), () — 8, 67 (Н 0), Ио методике примера 1 на основе (Я)-2-аминометилпирролидина получена (H ) -циклобутан-1, 1 — дика рбокс ила т(2аминометилпирролидин) платина(II) (соединение 3), т. пл. 248-257 (с разложением) °

Вычислено, 7.: С 30,2; Н 4,1 5;

N 6,4. (1Ь 2. <(Найдено, Е: С 30,08; Н 4,09;

И 6,37. —

ИК-спектр (KHr ) >4w>wc см: 3100, 31 90 (=Ж), 590, 1 635 (=С=О) .

<.,g" -40,! (H О)

Пример ы 4-!8, По методике, описанной в примере 1, получены различные соединения (соединения 4-18), приведенные в табл „1, Пример 19. К раствору платины(Т?)калийхлорида (4,15 г, 0,01 моль) в 60 мл воды прибавляют раствор 2-аминометилазетидина (0,86 r, О, 01 моль ) и полученную смесь перемешивают 3 ч при комнатной температуре, Образовавшееся твердое вещество собирают фильтрованием, промывают о, водой и сушат 3 ч при 60 С и пониженном давлении с получением 2,64 г дихлоро(2-аминометилазетидин)платиvs>(II) в виде белого твердого веще-. ства. Выход 75Х, т. пл. 215-235 С (с разложением).

К суспензии описанного продукта (1,76 г, 0,005 моль) в 3 мл воды при комнатной температуре и перемешивании добавляют 18 мл 317. †н водной перекиси водорода. Реакционную смесь выдерживают 30 мин при комнатной тем о пературе и 1 ч при 80 С. После охлаждения образовавшееся вещество со1570649 бирают фильтрованием, промывают водой, сушат 3 ч при 60 С и пониженном б давлении 1, 16 г цис — дихлоро — транс-дигидрокси(2-аминометилазетидин) платины(Г ) (соединение 19) в виде светло-коричневого вещества, Выход

60%, т, пл. 200-220 С (с разложением) .

Вычислено,: С 12р44р Н Зр Зр

N /,75, С,НС1. ИОР

Найдено, %: С 12.„61,", Н 3,16;

m 7,13.

2-Аминометилазетицик, использованный в примере 19 в качестве ис-ходного соединения, получен восстановлением азетидин-2-карбоксамида в тетрагидрофуране литийалюминийгидридом, Пример ы 20-27, По методике примера 19 получены соединения,. приведенные. в табл, 2 (соединения

20-27 ), Испытание 1, Испытание 1п v1v0 протиноопухо— левой актинности против ракового но-вообразования колон 26, Небольшие кусочки опухоли колон

26 (1 2 мм ) имплантируют подкожно

3 в боковой области живота мужским особям мьппей штамма CDF /Crj,воз-раст 6 недель). Через 4 цня после имплантации мьппи с почти одинаковым размером опухоли разделены на группы по 5-6 зверьков н каждой, и каждой мыши внутрибрюшкнко вводилось испытуемое соединение, Через 10 дней после начала приема соединения каж-дую мьппь умерщвляли, опухоль взвешивали для вычисления отношения ингибирования роста (ОИР) по следующему уравнению: л Т

ОИР (%) = ---;-- 100, (1) I 1 45 где С и Т вЂ” средняя масса опухоли соответственно контролькой и подвергнутой лечению группы.

Полученные результаты приведены

50 в табл. 3 — 7. Для сравнения использо-вано известное соединение цисплатин (11ДД1) и известное соединение ";o патенту США Ф 4410544.

Испытание 2.

Испытание 191 .1уо противоопухо= левой активности против ракового Но -" вообразования колон 26, Небольпгие кусочки опухоли колон

26 (1-2 мм ) импланти11уют подкожко в боковой области живота мужских особей мышей штамма CDF1 /Crj (возраст

7 недель). Спустя 4 дня после имплантации мыши с почти одинаковым размером опухоли разделяют на группы по 5-6 зверьков в каждой группе, и каждой мыши внутрибрюшинно вводят испытуемое соединение на 4, 6 и 8-й день после имплантации в дозировке 40 мг/кг в день, Через четырнадцать дней после имплантации каждую мьппь умерщвляют и взвешивают опухоль каждой мыши для подсчета ОИР по уравнению (1) о

Полученные результаты приведены н табл. 4.

Испытание 3.

Сравнение 1п -г 1го способности св яэын ать с я белками плазмы испытуемых соединений.

Раствор испытуемого соединения добавляют к плазме, полученной от крыс штамма HD в отношении по объему

1:19, что соответствует 5 мкг/мл Р1,. . Полученную смесь инкубируют в темноо те при 37 С. В заракее обусловленное время из смеси отбирают образцы, которые фильтруют через мембраны из молекулярных сит при центрифугиров анни, Соде ржание Pt н филь трат е (несвязанная Pt ) определяют с помощью атомной абсорбционной спектрофотометрии, Полученные результаты приведены в табл. 5,, 1

Испытание 4, Опрецеление побочных эффектон.

Мужским особям мышей штамма

BDF j /Cr j (возраст 6 недель) вводят ннутрибрюшинно испытуемое соединенке к спустя 1,3 и 5 дней после введения по 3 мыши умерщвляют с целью определения массы тела и уровня мочевинного азота н крови (сокращение КМА), Полученные результаты (масса тела и KMA) приведены в табл, 6.

Из результатон, пслученкых -н испытаниях 1 и 2 (табл, 3 и 4), можно видеть, чтс предлагаемые соединения проянляют более сильную противоопухо левую активность и они эффективны в более широком интервале дозировок по сравнению с теми же показателями дпя Щ17П. <роме того, несмотря на то, что комплексные соединения платины связы1570649

iU ваютс я белками пла змы с о бра зон анием неактивных форм, предлагаемые соединения проявляют значительно более низкую склонность к связыванию белками плазмы по сравнению с ЦЦДП, Предлагаемые соединения обладают пониженной токсичностью и высокой растворимостью в воде, и могут применяться в противоопухолевой терапии.

Результаты испытаний на противоопухолевую активность против колон 26 карциномы приведены в табл, 7, Из табл. 7 видно, что известное соединение обладает гораздо меньшей противоопухолевой активностью по сравнению с любым предлагаемым соединением, Кроме того, н связи с противоопухолевой активностью в дозировке, ° примерно равной МПД (максимально переносимая дозировка), каждое из предлагаемых соединений проявляет противоопухолевую активность, приближающуюся к 10ОХ, н то время как для известного соединения этот показатель равен менее 607..

Формула изобретения

Способ получения комплексных соединений платины общей Формулы I у (он)„ сн )„

- ., (ОН), ° 1-В

"-си где А — С -С >-алкилен;

R — водород или отсутствует;

X и У вЂ” галоген, или вместе образуют радикал формулы

Ф

- 0-(-

-О--С .

n, m — О или 1 при слонии, когда i

n=l, Х и Y — галоген, о т л и ч а ю шийся тем, что производное диамина формулы II

СЦ,-NH (2 (CH )

2 ГП

A ) 11 си, где А, R> m имеют укаэанные значения, подвергают взаимодействию платина(ХХ) калийхлоридом с получением соединения общей формулы (Ia), где n=0, Х

5 и Y — галоген, и выделением его или, в случае необходимости, обрабатывают его перекисью водорода, с получением целевого продукта (Ii5), где п=1, X u Y — галогенид, либо обрабатывают

10 соединение (Ia. нитратом серебра с последующей обработкой полученного динитрата циклобутан-1, 1-дикарбоно ной кислотой с получением целевого

f5 продукта общей формулы (Хв), где

n=0 Х и Y — вместе

О

-0-С

2, Способ по и. 1, î " л и ч а ю шийся тем, что производное диамина подвергают взаимодействию с эквимолярньи количеством платина(II) калийхлоридом н водной среде при комнатной температуре 3 ч или один день.

3, Способ по и. 1, о т л и ч а ю шийся тем, что соединение формулы (Ia) подвергают взаимодействию с избыткОм перекиси водорода н о водной среде при 20-80 С н течение

0,5 — 1 ч.

4. Способ по и. 1, о т л и ч а ю шийся тем, что соединение

35 формулы (а) подвергают взаимодействию с нитратом серебра н молярном соотношении 1:2 при комнатной температуре, в водной среде в .течение трех дней.

40 5. Способ по и. 1, о т л и ч а ю шийся тем, что динитрат под— нергают нзаимодействию с эквимолярным количеством дикарбононой кислоты в водной среде при комнатной тем45 пературе н течение четырех дней.

П р и о р и т е т и о п р и э накам:

l 2,09.84 при А — С -алкилен, Х.

50 О

— Q-С и Y — галоген †0 в

55 0

n — 1, 0;

m - О, 1; R-H или R — отсутствует.

22.01,85 при А — С,-алкилен, Х

"570649

12 и Y - -галоген, n — 1, m — - О, В -- водород.

25.04.85 при А — С -алкилен, X и Y - галоген, n — ш — О, R водород или Х и Y вместе образуют радикал формулы

n = m — 0 R — водород.

0l 08.85 при А — С -алкилен, X и У вместе образуют радикал формулы

m = n = О, R — водород.

l4!

570649 о

II о

/3 о

II и

/3 оо оо.о

lI йо

И /) „o

II оо /3

С!

О 44Ъ

Ch о ъ

Г Ъ с

Х О

It ос т сО

Г о ъ сч со с"Ъ оо

an сч со с Ъ оо т

4О

С \ о о

ГГЪ 441 со

РЪ о о т сс со с Ъ

СЧ С4

О О

Ф

О 4Ъ

СЧ Cta

О 44Ъ

Ф со со

an о о

° 4 В л с с 44а о со со

Cta с4

О сО

О ГЪ

С4 С4

О Ч!4

О О с 4 4Ъ со

С4 Ъ

o o О О сп

Ф л со CXI т т т

ЦЪ an

44Ъ О

Ф

С Ъ С"Ъ

44Ъ сЪ

Ф с Ъ с Ъ о с- о сч л ! O

A ° т т т т о о

СГЪ т т

СО

С Ъ С Ъ

О С т т т

О О л сЪ т т

С <Ч

Cta т ъ (Ч <Я

4О ГЪ с Ъ с Ъ

Ю

СО CQ

СЧ С4

С Ъ С Ъ

О4 л

C4 Cal т

44Ъ

Г.Ъ сЪ

Г Ъ СЪ

С 4 л

Cta CCt

С4

Стс со ст

СГЪ т

С! ГЪ

С \ С Ъ т л

44Ъ т

Ръ сп

Yl 44Ъ

С 4 СЧ

ОЪ Л

С\ С Ъ

СЪ СЪ

Ис о

С

Сс\ со

С4 с ъ со

44

I с о

С4

Э т л

С4

I т

О с4

СИ

44Ъ

С4

CI сч тс

aCl л сч

1 л

С 4

* л

С 4

С 4 т л

С 4 ! с л сч

Э

ОЪ

ГЪ

4 4 сч

I т

Г Ъ

Г 4 с3

I o

I ! с с

С 4 С4! Е-4 х и

Л:

С3

I х (1

/ Х о! !

o o

I o o

1 ! / — —

44 с с4

4 х и х о

I 1

X 44 I 4 = 1

I ! и

1

О

1 I" О х

Ql ! Г 44

С4 б

z

I X

Гс

1 х

1 4Д

I л !

Й

444

Ql о

Fl 1

1 1

1 1

1 I

I 1 !

1 !

1

I ! !

I — — !

Я

1 — (t !

1 ! с4 ! с-, I

I I

I I ! I ! I с; I

1 1! о э !.о

II и х

И /l о о о о

С О

Р.

С4 х

С4 х с4

О /С СC4

Фо о! — c х ъ

О

И оо т

4Ъ с \

Ф с

ы.о

44 х

С4 и

d о н сб

44 с

Ф о

« и съ

44 х с4

Х о

C о

II

С3

/1

Х СГЪ

И Ъ

II О

at о

44 х

« х

С3

t с с 4 к

«

«

44

О Х а

u u о

44

2 х

У о

ГЪ

С Ъ О. о

; 11 u 1 П

* ооо сна о

«сОсО с Ъ т о

« х

44 х

Ъ

o o и и

u u

/ о о

/ о с Ъ сО

-o

"-II о > ф /3

О О СЪ

Осо О

4О 4О

44Ъ г о

° 4 к г х

СС4 и f570649.

15 o

30 („,3

/) .О со И с 1 — /3

h о

/3

° о

g Oc о х И v о сО с0 о

>и

- /3

» о и

o = л сО ъ« ! !

Х О

Ф со

П

О С3 слс сСГ сО и

3 (оф

Ос

С 4 сс3

Г \ — о

С33

Х ф

33 оо . л сО м о сч х с 4

M 1! о о и с4

М M оо

Сас сО

Щ мии

31 и сО с \

1-—

A л и о

t и и сО ф О

Са

I х

Г и и\ с ъ

С 3

Ctf

Г 3

О

СО

Г \ л

-Ф

М с с 3 сО

С 3 л

Ф

С 3

Г с 4 сО

С4

СО с 4

С4

Ф

CO

С 4

1 и сО

С 4

Ф

CO О с 3

1 и

С4!

Г

Ис

С 3

О\ о

С3 х

О со с 4 ! .О

43 и

СО с4

1 и

СЧ

4J

О.

Ю с4

2: х

С..3

4-3 а .С

Ю

«4 к

О

С ) Ю с4 я х

Ф

О с х

С 3 о

+ х

СО о х

С3

L о

/ ж . 1, « » «(. 1

М )" /

1! с !!

II х

CJ с4 х

С3 х

О х и л 1! . !

1 I

f 1

О, 2

1 !" CI

I 3С

1 333! х!

1 сс! 1

1 Х 1

I! 1 !

1 Х I хаас

| !

1 Е4 1

1 Л 1

1 cd Х 1

Ц

X 333

Р Ц t

О О

I G X

L= т 1

1 Х 1

I 1

1 I

1 Х 333 1

333 и х и с 1 и и с"1 М и

С0 30

Ф сО 30

03

Ссс ф

С 1 М

Г

С 4 со со

СЧ С4 и

СО Г а сО сО

С4 Ol

Ol ф м с1

Г С I

СЧ С4 сО со

СЧ. с3

o o

П ll (.Э (.Э !

o o

/ а и о n V

И м /3 о о и

CO И С3 с о о о л со и со м

Ctl CO

С \ Сс л со

С 4 со сО

С4 С4

I

I

I Z

1 df

1 X

333

1 М

О х с3

O.

1 С3

1 !

1 X

1 Х

1 43

1 ! С3

1 cd !

О !

1 Ф х х

О

1-

Ф!

570649

1

1 а

Ю

Ю

1

О Х

1 1" U

О

СГС

СГ1 ю ч м

СГС

Ю л

Х

1 — — 1 м сч

Ссс л с4 О Ос л ГЛ а сО сО о о

O Oa

Л О

ГГС СГС а ч» О л О

-Ф сО

СЧ а

Ф Т

CO м

Ol

СО м

СГс

СО CO

С 1 С1

CO

Г м м л

ГС С 1 м с 1 л с а а

СЧ ГЧ м о л

СГс Ch

О1 Оа о а л сЧ

С 4

Г

Ос

Ю

СГС

Ос м

Г о

К) О

Ch Oa

Г

С 4

<:Ь м

СО М аО 1О а

О1 Оа л

4Г

an

Ос

C)

Сс сс

CO

С 1 сО

Сс

СЧ м с 4

I н

СЧ

С 1

СС н

О

СЧ

1 о

Cl

СЧ

Ф

О м

Ю

Э о

Ф

С4

aIc

О

СЧ

О\

О\

О о

Х и

l с ч

Ю с4 х

Ю ч х с4

-1 о х

Г О х сс

Г ) Х о

Ж

v !! - Д -с

0 G

/,Х>. (I

u u

/! — — х и

СС х и а

Х 41

< х

Gl Х

u x

ГО сО л

СЧ сЧ 1 м

СЧ

СЧ с4

C)

СЧ м

I

Cll

1 1

Гб I I

Х

cd

1 I

«я

Х

I dI 1 1

1 X I

I o

ch 1!

I cd

1 О Х

Г» р, 1 1- Х

Р

О, О

ГО Я

Ю с4 х ч

;-1

О х о

D с4 я с4 л! о х о с4

Ю

И с4

4 о х о

С4

Ю н я л и х

Ю о

ГГС О an

ОС СЧ С О О О сО сО

Г О ГС

С 4» СО Оа

Ф Ф сп м ч

Ю

М х с4 л о е3 х о ч

Ю ч Д

O х

ЕГС о

1570649

19

Таблица 3

Продолжение табл. 3

Соед

12О

160

40

70

60

80

88

120

120

160

160

Гибель

40

60

60

80

71

120

120

160

Гиб ель

)60

40

27

31

85

58

90

120

120

Гиб ель

160

l 6O

10

80

60

80

120

79

160

Гиб ель

60

ОИР, Z

20

Соединение

Таблица 4

77

1 570649 22

Продолжение табл.4

91

90

85

85

Таблица 5

Время инкубирования, ч

Соединение

Таблица 6

Дозировка соединения, мг/кг

Объект измерения

Контроль (†)

Соединение 2 (60) Соединение 3 (60) цДДИ (l 2)

Контроль (-) Соединение 2 (60) Соединение 3 (60)

ЦЦШЧ (1 2) «Р (G 05.

"«Р а 0,01, Масса тела, r (средние стандартные отклонения) КМА, мг/к г (средние стандартные отклонения) 1 2 9

20 9 7

26 12 10

1ЩП 1 6 62

14 38

11 15

3 14

86 93

Дни после введения

23,6+1, 0 23,7+1, 4 24,4Фl, 4

-23, 1+1 4 1 9 9+1 ь 6"" 1 7ю 9+1 1""

23„4+1,5 20,1 1,3"" 17,5+0,7""

24,6+1,1 22,55fl,l 19,0+1,5+"

17,1М4,35

20,0+2,6 17,7+3,1 15,4 5,5

18,3+3)l 13,8+1,8 13,817,6

23, 314, 7" 38, 5й28, 9 65, 2+31, 5""!

570649

2З

Формула

Соединение

Известное

80

МПД

40

98

МПД

10

80

40

80

95

40

88

56

26

71

МПД

Предлагаемое по примеру !

Та блица 7

Доза, мг/кг ОИР, j

1570649

Продолжение табл.7

3 4

40

ОН м i c р

Ng 1 01

ОН .

80

Составитель 0-. Смирнова

Техред Л. Сердюкова Корректор М. Кучерявая

Редактор Н. Рогулич

Тирак 305

Заказ 1461

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.у кгород, ул. Гагарина,101