Среда для предотвращения ишемического повреждения тканей при трансплантации органов

 

Изобретение относится к медицине и касается сред для предотвращения ишемического повреждения, тканей при трансплантации органов. Цель - повышение жизнеспособности тканей. Среда содержит глутаминовую кислоту, пируеат натрия, изоцитрат натрия, состав Хенкса при определенном соотношении компонентов .Зтабл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (si>s А 61 К 9/08

ГОСУДАР СТВЕ ННЫ Й КОМИТЕТ

llO ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4443960/14 (22) 20.06.88 (46) 07.03.91. Бюл. йв9 (71) Харьковский государственный университет им.А.М.Горького (72)Ю.В.Никитченко, В.Н.Троянова и

В.В.Лемешко (53) 615.412. (088.8) (56)Неагзе 0.J., Humphny S.M, Ensyme

Release During Myocardial Anoxia: А Study of

Metabolik Protection. -J. Mol. and CelI.

Cardiol, 1975„М7, р.463 — 482.

Изобретение относится к медицине и касается среддля уменьшения ишемическаго повреждения тканей.

Цель изобретения — повышение жизнеспособности тканей.

Пример 1. В сбалансированную солевую смесь Хенкса без глюкозы, содержащую, мас. : феноловый красный 0,002;

NaCI 0,8; KCI 0,04; СаС!2 2H20 0,019;

MgSO4 7Н20 0,02; йа2НРО4 Н20

0.006; КН2РО4 О, 006; йаНСОз О, 035, добавляют 0,200 мас.% глюкозы и перемешивают на магнитной мешалке. Затем добавляют 0,037 мас.% глутаминовой кислоты, 0,028 мас,% пирувата натрия, 0,089 мас.% изоцитрата натрия, тщательно перемешивая среду после добавления каждого компонента. При этом доводят рН среды до

7,4 (1-2 каплями 0,1 н. КОН). Готовую среду фильтруют через стеклянный фильтр и насыщают кислородом воздуха.

Пример 2, Готовят состав как указано в примере 1, но добавляют 0,015 мас.% глутаминовой кислоты, 0,011 мас. пирувата натрия, 0,036 мас.% изоцитрата натрия.

„„5U„„1632427 А1 (54) СРЕДА ДЛЯ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ

ИШЕМИЧЕСКОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ ТКАНЕЙ ПРИ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ОРГАНОВ (57) Изобретение относится к медицине и касается сред для предотвращения ишемического повреждения. тканей при трансплантации органов. Цель — повышение жизнеспособности тканей, Среда содержит глутаминовую кислоту, пируват натрия, изоцитрат натрия, состав Хенкса при определенном соотношении компонентов . Зтабл.

Пример 3. После декапитации крыс линии Вистар 12-месячного возраста сердце быстро извлекают и помещают в холодную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, канюлируют аорту и помещают в установку для перфузии, термостатируемую при 37 С. В течение первых 3 мин сердце перфузируют средой Хенкса без глюкозы (контроль) или средой, включающей указанные метаболиты, Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфуэии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин на 1 r ткани сердца.

После укаэанной 3-минутной перфузии сердце,периодически подвергают ишемии по схеме: 19 мин тотальной ишемии — 1 мин реперфузии аэрированной средой, С целью испытания предлагаемой среды на каждой 20-й мин в течение 3 ч ишемии отбирают минутный перфузат и определяют в нем лактатдегидрогеназную активность.

Результаты отражены в табл.1, при этом глутаминовую кислоту, пируват, изоцитрат в вариантах 1 — 3 добавляют в концентрации

0,074, 0,055, 0,179 мас.% соответственно в

1632427 вариантах 4 — 6 — 0,037, 0,028, 0.089 мас. ф соответственно. Глюкозу во всех случаях добавляют в концентрации 0,200 мас. (, в соответствии с известной средой, Число опытов 5 — 22.

Пример 4. Известно, что при ишемии увеличивается интенсивность перекисного окисления липидов и накопление его конечных продуктов. При этом степень уменьшения накопления продуктов перекисного окисления липидов, обусловливаемая действием испытываемых веществ, может быть показателем их противоишемических свойств, С этой целью измеряют содержание одного из конечных продуктов перекисного окисления липидов (малонового диальдегида) в гомогенатах миокарда крыс после 3 ч ишемии, В течение 3 ч ишемии ткань миокарда снабжают сбалансированной солевой средой Хенкса без глюкозы (контроль), средой Хенкса, содержащей 0,200 мас. глюкозы (известная среда). и предлагаемой средой. Содержание малонового диальдегида определяют с 2-тиобарбитуровой кислотой, Как видно из данного примера (табл.2), известная среда снижает накопление малонового диальдегида при ишемии только на

26 по сравнению с контролем, а предлагаемая на 47%, Пример 5. Влияние на сохранение сократительной активности сердца после

20, 40, 60 и 80 мин прерывистой ишемии.

С этой целью крыс линии Вистар 12-месячного возраста декапитируют, сердце быстро извлекают и помещают в охлажденную среду Хенкса на 3 мин. Остановленное и охлажденное сердце взвешивают, канюли0,015 -0,074

0,011 — 0,055

0,036 — 0,179

Остальное руют аорту и помещают в установку для перфуэии, термостатируемую при 37 С. В течение первых 5 мин сердце перфузируют средой Хенкса, включающей указанные ме5 таболиты, или средой, включающей только глюкозу (известная среда). Среду перфузии насыщают кислородом воздуха, а скорость перфузии с помощью перистальтического насоса устанавливают равной 5 мл в 1 мин

10 на 1 r ткани сердца, После 5-минутной перфузии сердце периодически подвергают ишемии по схеме: 19 мин тотальной ишемии — 1 мин реперфузии аэрированной средой;

После 20, 40,.60 или 80 мин прерыви15 стой ишемии начинают реперфузию с целью регистрации возобновления сократительной активности сердца, Для выравнивания условий испытания сердец. подвергнутых прерывистой ишемии с предлагаемой сре20 дой и известной, постишемическую перфузию проводят одной средой — известной.

Результаты отражены в табл,3.

Предлагаемая среда позволяет увеличить степень защитного противоишемиче25 ского действия.

Формула изобретения

Среда для предотвращения ишемического повреждения тканей при трансплантации органов. содержащая состав Хенкса, 30 отличающаяся тем, что, с целью повышения жизнеспособности тканей, она дополнительно содержит глутаминовую кислоту, пируват натрия, изоцитрат натрия при следующем соотношении компонентов, 35 мас. $:

Глутаминовая кислота

Пируват натрия

Изоцитрат натрия

Состав Хенкса

Н г

Н

Н г

Н

3 р

Ql

CCI

OI

СЧ

СЧ

-Н

Н г

Н Н

Н г г

ЯЪ

С0

0I

CCI

CO о>

С Ъ г

% о) Cl

СЧ

CO

СЧ

1! о.Н

-Н аО

Z и з

Ф

Н

Н

Н

С )

СЧ

CO

Сб о

СЧ о»

Н

Н Н

N сг

Н

Н

СО

СЧ

С >

CO

Ф

Ф

Ф о о

СЧ

СЧ СЧ

Н Н

Н

Н

< а

О

М

lO с ь

D

Н

D о

Н

Ф! со

Н

С Э

СЧ г

СЧ г о

CO

Н +!

Ф!

Н

Ю

СЧ

СЧ

СЧ

СЧ

Ф

Ф

3 2

Ф с а о Ю

E й"

Ф

"о

О. О

X с

+ а

CO

В- Я

О. О и л, а

К

f o о

g m с Ф

ICO

Ф са

О о о с о щ К

3С с

l» са

О.

K

=г о

Ф ь

CO о

М

I»

Щ л

О.

С:

С

Ф (CD

CO

CL

lO

СО

lA

Z

lO

CL

CO а и

Ф ссс

Ф

О.

cZ

Ф

О. и

Ф а

lO

l о

Ф

lO

Ф ()

Ф

K а

Ф со

Z

Ol

CL

Ф

СЧ

l х

Щ

X о.

СО

Cf гZ

X а со о с о

О.

l»

Z о ъС

1632427

+ е

+ Щ о

+i- а о m

ca ImZZO л=гу с .CLO m >

3 la I»

X с

CCI, I о

О. с6

C (» о о s м о о

О IО О

Ф о

Z л.С с о с Ф

Ф о о З

О K o о о

О ? Е G.Q

Ф Ф у

1632427

Таблица 2

Со е жание малонового иаль еги а на 1 мг белка, нмоль

Конт оль

Известный способ

П е лагаемый способ

0,097 + 0,005

0072 й0,007

0,051 + 0,055

Таблица 3

Составитель Н, Докшина

Техред Э. Цаплюк Корректор Е. Дормидонтова

Редактор И. Горная

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 568/91 Тираж 445 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5