Способ определения индивидуальной чувствительности к альфа- 1-адреноблокатору

 

Изобретение относится к кардиологии и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности больного к лекарственным средствам - блокаторам альфа-1-адре норецепторов. Целью изобретения является предупреждение ортостатических и аллергических реакций. Способ осуществляется путем определения концентрации ионов кальция в цитоплазме тромбоцитов крови in vitro. Стимулируют тромбоциты кальций-повышающими гармонами и при повышении содержания ионов кальция в пределах 50-400 нМ на пике стимуляции клеток насыщающими концентрациями гормонов больного считают чувствительности к альфа-1-адреноблокатору. с «

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАУ!ИСТИЧЕСНИХ

РЕСГ!УБЛИН ()) G 0l N 33/15

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И OTHPbfTHRM

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4441657I 14 (22) 30„06,88 (46) 15.04 ° 91 ° Бюл, М - 14 (71) Всесоюзный кардиологический научный центр AMH СССР и 2-.й Московский государ ственный медицинский институт им.. Н. И Пиро го ва (72) Ш 3 Атаханов, Г ° Þ.Ãðèãîðÿí, . К,Г Рябова, ЗБ,Тхостова, А,Г Чучалин и A ПЮренев (53) 615 ° 475 (088. 8) . (56) Голочевская В.С. и др. Применение пратсиола при гипертонической болезни, В кн Роль вазодилататоров в лечении артериальной гипертонии и сердечной недостаточности, М., 1983, св 34 ° (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬ»

НОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К АХ!ЬФА-1 АДРЕ»

НОБЛО КАТОР У

Изобретение относится к медицине, в частности к кардиологии, и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительно сти больного к лекарственным средствам блокаторам альфа 1 адренорецепторов, Цель изобретения предупреждение орто статических и аллергических реакций °

При ме р, БольнаяИ,, 15 лет, Диагноз; бронхиапьная астма, инфекционно»аплергическая форма I средней тяжести, эмфизема легких, хронический . обструктивный бронхит

Больная страдала бронхиальной аст» мой. в течение 14 лет, отмечала непе.,SU„„1642385 А 1

2 (57) Изобретение относится к кардио» логии и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности больного к лекарственным средствам - блокаторам альфа-1-адре» норецепторов, Целью изобретения является предупреждение ортостатических и аплергических реакцчй, Способ осуществляется путем определения кон центрации ионов кальция в цитоплазме тромбоцитов крови in vitro. Стимулируют тромбоциты кальций-повышающими гармонами и при повышении содержания ионов кальция в пределах 50-400 нМ на пике стимуляции клеток насыщающими концентрациями гормонов больного считают чувствительности к альфа-1 адре нобла катору, реносимость гормональных препаратов, анальгина, наблюдались приступы бронхоспазма в ответ на физическую нагрузку, На спиро грамме явления генерализованной бронхиальной обструк-, ции, особенно выраженные на уровне мелких бронхов, У больной осуществлен забор 18 мл крови из локтевой вены в пробирку, содержащую 3 мл АСД - антикоагулянта (состав антикоагулянта следующий: двуводный цитрат Na 6,25 г; лимонная кислота 3,5 г; декстроза 5 г; Н О

250 мл). Центрифугированием (центрифуга Бекман ТС6, комнатная температура, 1100 об/мин) было получено

1642385

7 мп плазмы, обогащенной тромбоцита ми, Вторым центрифугированием (те же условия, 160 об/мин) получен осадок тромбоцитов, ресуспендированный в

5 мл буфера А (состав буфера Л следующий: NaC1 150 мМ; КС1 2,2 мИ;

БаНгР04 0,37 мМ; СаС1 1 мМ; MgCI. ! мМ; Д-глюкоза 5 мМ; НЕРЕЯ 10 мМ; бычий сывороточный альбумин О, 35 ; гепарин 1,55 мг; 4 ед, апираэы; рН=6, 55) „K э той су спензии клето к до б а вля ют з онд фур а-2 AM из р а счет а

4 мкИ в конечной концентрации; проводят инкубацию клеток с зондом !5

30 мин при 30 С» Затем центрифуги» рованием (те же условия 1100 об/мин) получают конечный осадок тромбоци тов, который ресуспенозируют в буфе» ре В (состав буфера В: КаС1 150 мИ; 20

КС1 2,7 мМ; ИаНгР04 0,37 мМ; СаС1г

2 мМ; MgClg 1 ММ; Д-глюкоза 5 И; .-!EPES 10 мМ; рН 7, 4 и бычий сыворо точный апьбумин О, 35X) ° Определение фпуоресценции проводят на спектро- 25

4яуориметре "Hitachi-850" в 1-см термостатируемой кювете при 30 С

Для изучения каждого отдельного об разца в кювету помещают 100 мкл суспензии и 900 мкл буфера В».Длины воли возбуждающего света 340 нм, эмиссии 500 нм, ширина щелей 5 нм, прибор работает в режиме скакирова ния по времени» Определение концентРации Са в КпеТК проводят анал< гично вышеизложенному, Определяют концентрацию базального Са в нестимулированных клетках и концентрацию Са + в тромбоцитах на пике стимуляции, по разнице определяют вели- 40 чину (Са i), представляюшую величину кальциевого ответа jCa

Яф (Са ) стим - (Са )баэ, Объемы добавок не превьппают З . объема среды, Базальное содержание Са в не 45 йФ стимулированных клетках составляет

110 нМ, а на пике стимуляции клеток

1 мкМ везопрессина - 398 нМ Са +i) г+ составляет соответственно 398-110 =

= 298 нМ Сап+, Одновременная стимуля-,-0 ция адренорецепторов (О, мкМ пропранолола и 1 мкМ адреналина) и рецепто ров к вазопрессину (Са ) состав ляет 336 нМ» Следовательно, эффект лечения празозином будет удовлетворительным, Больной было проведено лечение празозином в дозе 3 мг/сут ° В течение 2 мес» В течение этого периода состояние больной прогрессивно улучшилось, что выражалось уменьшением частоты приступов удушья в покое и в ответ на физическую нагрузку, уре» жением приема бронходилятаторов, уменьшением количества отделяемой мокроты» Клиническое улучшение под» тверждалось данными функционального обследования дыхательной системы: отмечался значительный прирост бронхиальной проходимости, составивший по данным спирографии 72Х на уровне мелких бронхов, Это показывает, что у больной с умеренной степенью повышения содержания кальция в ответ на насыщающие концентрации кальцийповышающих гормонов клинический эффект хронической терапии празозином был достаточно выраженным

В данном примере имело место совпадение прогноза эффективности лечения празазином, поставленного по определению индивидуальной чувстви» тельности предлагаемым способом, с эмпирически выявленным эффектом ле чення этим препаратом, Формул а из обре т ения

Способ определения индивидуальной чувствительности к апьфа 1 адреноблокатору, отличающийся тем, что, с целью предупреждения ортостатических и аллергических реак ций, определяют концентрацию ионов кальция в цитоплазме тромбоцитов кро ви in . vitro, стимулируют тромбоциты кальций-по вышающими гормонами и при повьппении содержания ионов кальция в пределах 5&400 нИ на пике стимуля» ции клеток насыщающими концентра циями гормонов больного считают чув ствительным к альфа 1 адреноблокато ру»